一種紅花黃色素的提取方法及應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種紅花黃色素的提取方法及其應(yīng)用，紅花經(jīng)水粗提、分離、過(guò)濾、醇沉、上聚酰胺柱經(jīng)酸洗雜質(zhì)及堿液洗脫、濃縮干燥得到紅花黃色素。所得紅花黃色素與可接受的注射劑輔料混合，按常規(guī)的注射劑制劑工藝制得注射劑。其中在聚酰胺柱洗脫時(shí)采用酸性洗脫液洗脫雜質(zhì)；堿性洗脫液洗脫紅花黃色素，堿性洗脫液優(yōu)選pH值為9.50～10.50氨的乙醇溶液，由此方法制得的紅花黃色素含量高。
【專利說(shuō)明】一種紅花黃色素的提取方法及應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于醫(yī)藥產(chǎn)品研究開(kāi)發(fā)【技術(shù)領(lǐng)域】，特別涉及從紅花中提取紅花黃色素的方法及應(yīng)用。
技術(shù)背景
[0002]心血管疾病是危害人類健康的第一殺手，近年來(lái)，隨著我國(guó)人口老齡化以及人們工作、生活、飲食結(jié)構(gòu)及環(huán)境等的變化，冠心病等心腦血管疾病的發(fā)生頻率也逐年增加，嚴(yán)重威脅著人民的身體健康。天然產(chǎn)物中許多活性物質(zhì)具有抗心肌缺血、抗缺氧作用，其中一些已經(jīng)開(kāi)發(fā)成治療冠心病和心絞痛的新藥。因而從天然產(chǎn)物中尋找具有抗心肌缺血、抗缺氧生理活性的有效物質(zhì)，是獲得新藥的有效途徑之一。目前，我國(guó)從天然產(chǎn)物中提取活性提取物質(zhì)，用于開(kāi)發(fā)成治療冠心病。安全性好，毒性低的新藥還很少，從天然產(chǎn)物中提取活性物質(zhì)，開(kāi)發(fā)成具有抗心肌缺血，用于治療冠心病和心絞痛的新藥，具有重要應(yīng)用價(jià)值和廣闊發(fā)展前景。
[0003]中藥紅花為菊科植物Carthamus tinctorius L.的干燥花,是傳統(tǒng)的活血化瘀藥，具有活血化瘀、通經(jīng)止痛的功效，臨床上利用紅花或含紅花的方劑治療冠心病、心絞痛等諸多血液循環(huán)障礙疾病有很好療效，同時(shí)，總紅花黃色素因具有很好的著色能力很強(qiáng)的穩(wěn)定性，也作為食用色素而廣泛應(yīng)用。
[0004]早期從紅花中提取紅花黃色素的主要方法是水提醇沉法，所得產(chǎn)品純度較低。近年來(lái)，利用大孔吸附樹(shù)脂或膜技術(shù)進(jìn)行純化所得產(chǎn)品在純度上有了很大的提高，但是收率較低，有效成分在純化過(guò)程損失嚴(yán)重。例如CN1284794C中采用“提取-分離-醇沉-多次純化-制劑”的工藝流程，采用此方法得到的提取物純度較高，但需要純化兩次以上，且收率低于2%，難以創(chuàng)造經(jīng)濟(jì)效益。CN1935176`B中也在用“提取-分離-純化-制劑”的工藝流程，采用此方法得到的紅花提取物含量較高，但純化時(shí)所用陶瓷膜成本較高且所得提取物紅花黃色素含量不高。CN101007828A中采用非極性大孔樹(shù)脂層析和反滲透濃縮技術(shù)提取紅花紅色素，并在上柱前將提取液調(diào)為酸性，有利于雜質(zhì)的洗脫。CN102382151A中采用酸性洗脫液洗脫雜質(zhì)?！吨袊?guó)野生植物資源》第23卷第I期，吳冬青、林敏、許瑩堂等，其中報(bào)道了用酸性乙醇溶液提取紅花黃色素的方法。
[0005]在充分研究了現(xiàn)有技術(shù)的前提下，本發(fā)明人提出了一種新的紅花黃色素提取方法，此方法提取工藝簡(jiǎn)單，洗脫效率高，成本低廉，所得紅花黃色素含量達(dá)到在藥品注射劑上應(yīng)用的要求。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的是提供了一種紅花黃色素提取物方法及應(yīng)用，紅花經(jīng)過(guò)水粗提、大孔吸附樹(shù)脂分離、過(guò)濾純化、醇沉以及聚酰胺再純化，得到紅花黃色素，然后將其用于注射劑的生產(chǎn)。
[0007]本發(fā)明的目的是通過(guò)下述技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)，具體實(shí)施步驟如下:[0008]粗提:中藥材紅花用10倍水(重量體積比)提取得提取液，經(jīng)過(guò)濾得濾液I ;
[0009]分離:將濾液I上大孔吸附樹(shù)脂柱(柱的徑高比1: 9)分離，依次以一個(gè)柱體積水、七個(gè)柱體積的30%乙醇洗脫，收集30%乙醇洗脫液；
[0010]過(guò)濾:30%的乙醇洗脫液首先經(jīng)過(guò)濾，再進(jìn)行濃縮；
[0011]醇沉:將濃縮液加入95%乙醇調(diào)成70%~90%乙醇溶液，靜置；
[0012]純化:將醇沉液過(guò)濾，濾液濃縮至無(wú)醇得到濾液11 ；
[0013]再純化:將濾液II用酸調(diào)PH為2.00~5.00，上聚酰胺柱(柱的徑高比1: 6~1: 10),先用酸的醇溶液洗脫,再用酸或酸水洗脫,然后用水洗脫,然后再用氨的醇溶液洗脫紅花黃色素，洗脫下來(lái)的氨的醇溶液用酸調(diào)成中性，干燥得紅花黃色素。
[0014]上述方法所得紅花黃色素與藥用輔料按常規(guī)的注射劑制劑工藝制成注射劑。
[0015]本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選方案，其中過(guò)濾30%的乙醇洗脫液時(shí)，優(yōu)選超濾膜。本發(fā)明的又一個(gè)優(yōu)選方案，其中對(duì)過(guò)濾后的30 %乙醇洗脫液進(jìn)行濃縮時(shí)，優(yōu)選采用納濾膜進(jìn)行濃縮。
[0016]本發(fā)明的又一個(gè)優(yōu)選方案，其中醇沉的乙醇濃度為70%~80%，優(yōu)選乙醇濃度為80%時(shí)進(jìn)行醇沉。
[0017]本發(fā)明的又一個(gè)優(yōu)選方案，其中采用聚酰胺柱的徑高比優(yōu)選1: 8。
[0018]本發(fā)明的又一個(gè)優(yōu)選方案，其中采用1%~10%的酸的醇溶液，酸為鹽酸、檸檬酸、乙酸、酒石酸、草酸、蘋(píng)果酸、水楊酸中的一種或幾種的混合，醇為甲醇、乙醇中的一種或兩種的混合；`
[0019]其中采用酸洗脫聚酰胺柱時(shí)，酸是PH值為2.00~5.00的鹽酸、硫酸、硝酸、檸檬酸、乙酸、酒石酸、草酸、蘋(píng)果酸、水楊酸中的一種或幾種的混合物或其中一種的水溶液或其中幾種的組合的水溶液，優(yōu)選乙酸或乙酸的水溶液；
[0020]氨的醇溶液是PH值為8.50~12.50的氨的甲醇溶液、氨的乙醇溶液、氨的丙醇溶液、氨的異丙醇溶液中的一種或幾種混合液，優(yōu)選氨的乙醇溶液。
[0021]本發(fā)明的又一優(yōu)選方案，提取得到的紅花黃色素可以制成粉針劑、大輸液、小水針，優(yōu)選粉針劑。
[0022]本發(fā)明采用聚酰胺純化過(guò)程中，上柱藥液用酸調(diào)其PH值為2.00~5.00，然后用酸的醇溶液洗脫，再用酸洗脫，這樣在洗掉了雜質(zhì)的同時(shí)，僅損失較少的紅花黃色素。發(fā)明人經(jīng)過(guò)多次試驗(yàn)，選擇用I~4個(gè)柱體積I %~10%的酸的醇溶液和3~5個(gè)柱體積的PH值為2.00~5.00的酸或酸的水溶液洗脫可以得到較好的結(jié)果，再用I~3個(gè)柱體積的水沖洗柱，用3~5個(gè)柱體積的PH值為8.50~12.50的氨的醇溶液洗脫，可以將紅花黃色素很好的洗脫下來(lái)。采用上述方法可以很好的達(dá)到分離純化的目的，且得到的提取物中紅花黃色素含量較高。
[0023]具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
[0024]表1為采用聚酰胺柱純化時(shí)，不同濃度的酸的醇的洗脫液，相同PH值的酸或酸的水洗脫液，相同PH值的氨的醇洗脫液洗脫，所得紅花黃色素含量的變化，具體實(shí)施方法如下:取四份相同的濾液II，分別用濃度為的鹽酸的乙醇溶液洗脫雜質(zhì)。
[0025]聚酰胺濕法裝柱(柱的徑高比1: 8)，將濾液II的PH值用鹽酸調(diào)為3.00，然后依次用2個(gè)柱體積的乙酸的乙醇溶液，4個(gè)柱體積乙酸液洗脫雜質(zhì)，2個(gè)柱體積水洗脫，4個(gè)柱體積的PH值為9.50的氨的乙醇溶液洗脫，將洗脫下來(lái)的4個(gè)柱體積的氨的乙醇溶液合并，調(diào)為中性，濃縮干燥，得紅花黃色素。
[0026]表1不同PH值的酸的醇的洗脫液對(duì)提取物中紅花黃色素的含量的影響
[0027]
乙酸的乙醇溶液酸或酸的水溶液I氨的乙醇溶液PH j紅花黃色素含量
【權(quán)利要求】
1.一種紅花黃色素的提取方法，其特征在于該方法包括以下步驟: (1)紅花用10倍量(重量體積比)的水提取I~2小時(shí)，共提取兩次，合并兩次提取液，過(guò)濾，得濾液I ; (2)濾液I上大孔樹(shù)脂柱分離,依次以一個(gè)柱體積水、七個(gè)柱體積30%乙醇洗脫，合并七個(gè)柱體積30%乙醇洗脫液； (3)30%乙醇洗脫液經(jīng)過(guò)濾、濃縮后，加入95%乙醇調(diào)成含乙醇70~90%的溶液進(jìn)行醇沉，過(guò)濾得濾液II ； (4)將濾液II的PH值調(diào)為2.00~5.00，上聚酰胺柱(柱的徑高比1: 6~1: 10)進(jìn)行純化，按下列順序進(jìn)行洗脫: I~4個(gè)柱體積1%~10%的酸的醇溶液； 3~5個(gè)柱體積PH值為2.00~5.00的酸或酸的水溶液洗脫； I~3個(gè)柱體積的水洗脫； 3~5個(gè)柱體積PH值8.50~12.50的氨的醇溶液洗脫，收集氨的醇溶液的洗脫液，用酸調(diào)成中性并濃縮，噴霧干燥得紅花黃色素。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述步驟(3)，其特征在于用超濾膜進(jìn)行過(guò)濾。
3.根據(jù)權(quán)利要求 1所述步驟(3)，其特征還在于采用納濾膜進(jìn)行濃縮。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述步驟(4)，其特征在于酸的醇溶液優(yōu)選3%~8%酸的醇溶液。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述步驟(4)，其特征在于酸優(yōu)選PH值為3.10~3.30的酸或酸的水溶液。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述步驟(4)，其特征在于氨的醇溶液優(yōu)選PH值為9.50~10.50的氨的醇溶液。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述步驟(4)中的噴霧干燥得到的紅花黃色素與藥用輔料按常規(guī)的注射劑制劑工藝制成注射劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的酸的醇溶液，其中酸為鹽酸、檸檬酸、乙酸、酒石酸、草酸、蘋(píng)果酸、水楊酸中的一種或幾種的混合，優(yōu)選乙酸。
9.根據(jù)權(quán)利要求4所述的酸的醇溶液，其中醇為甲醇、乙醇中的一種或兩種的混合，優(yōu)選乙醇。
10.根據(jù)權(quán)利要求5所述的酸，其為鹽酸、硫酸、硝酸、檸檬酸、乙酸、酒石酸、草酸、蘋(píng)果酸、水楊酸中的一種或幾種的混合物或其中一種的水溶液或其中幾種的組合物的水溶液，優(yōu)選乙酸或乙酸的水溶液。
11.根據(jù)權(quán)利要求6所述的氨的醇溶液，其為氨的甲醇溶液、氨的乙醇溶液、氨的丙醇溶液、氨的異丙醇溶液中的一種或幾種混合溶液。
12.根據(jù)權(quán)利要求7所述的注射劑，優(yōu)選粉針劑。
13.根據(jù)權(quán)利要求11所述氨的醇溶液，優(yōu)選氨的乙醇溶液。
【文檔編號(hào)】A61K31/351GK103479702SQ201210194631
【公開(kāi)日】2014年1月1日 申請(qǐng)日期:2012年6月14日 優(yōu)先權(quán)日:2012年6月14日
【發(fā)明者】顏克序, 李厚全, 范輝, 王翀, 李冠業(yè), 馮書(shū)香, 郭順 申請(qǐng)人:北京星昊醫(yī)藥股份有限公司