專利名稱：一種模擬移動床色譜分離提純藤梨根黃酮的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藤梨根黃酮的分離提純方法，特別是一種模擬移動床色譜分離提純藤梨根黃酮的方法。
背景技術(shù)：
藤梨根為稱猴桃科軟率稱猴桃Actinidia arguta (Sieb. et Zucc. ) Planch的根，曾收載于1987年版《中國藥典》。藤梨根味酸、澀，性涼，具有清熱解毒、清熱利濕、祛風(fēng)除濕、利尿止血、解毒消腫、止血等功效?，F(xiàn)代藥理研究表明藤梨根提取物具有增強(qiáng)免疫功能、抗氧化、降血脂、抗突變、抗畸變和抗腫瘤等多種藥理作用，廣泛應(yīng)用于消化系統(tǒng)癌癥、黃疸、消化不良、嘔吐、腹瀉等疾病的治療(中草藥學(xué)[M]，南京江蘇人民出版社， 1976:662-623，陳貫誠，獼猴桃[J]，中藥材科技，1981，4 (I) :30-31).研究表明藤梨根中提取的黃酮具有明顯的抗腫瘤活性(王嵐，康琢，楊偉鵬等，藤梨根正丁醇提取物和總黃酮苷抗腫瘤作用研究[J]，中國中藥雜志，2010，35 (16) :2184-2186)。關(guān)于藤梨根提取物中黃酮類化合物含量測定和提取工藝的研究已有文獻(xiàn)報道(白瑤，陳佳慶，申野等.軟棗獼猴桃根黃酮類化合物提取工藝條件優(yōu)化研究[J]，中國民族民間醫(yī)藥，2009，18 (21) :2-3 ;張?zhí)m杰，谷昊，隋曉慧，野生軟棗獼猴桃總黃酮含量的測定[J]，中國野生植物資源，2005，24 (4)49-51 ;王小平，白吉慶，成奉珍，不同來源藤梨根中總黃酮含量比較研究[J]，商洛學(xué)院學(xué)報，2007，21 (2) 51-53 ;王小平，白吉慶，藤梨根總黃酮提取方法及含量測定研究[J]，陜西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2008，31 (5) :65-66)，但黃酮的提取工藝繁瑣復(fù)雜且純度不高，從一定程度限制了其深入研究與制劑開發(fā)。在CN200410022919、 CN02114318、 CN03156252、 CN02129513、 CN01128730、CN1478495A、CN1093594A等中國專利中都涉及了制備具有抗癌作用的復(fù)方中成藥中使用了藤梨根或獼猴桃根，這些專利大多涉及復(fù)方中成藥的配方組成、制備和應(yīng)用，在CN1965872、CN1977869、CN101623309、CN101757056A、CN1679797等中國專利都涉及了單味中藥藤梨根的提取與制備，但沒有涉及到黃酮類成分的分離和制備。模擬移動床色譜，是規(guī)?；V分離技術(shù)的一種新發(fā)展，是模擬移動床技術(shù)與色譜技術(shù)的結(jié)合。該技術(shù)既保留了色譜精細(xì)分離的優(yōu)點(diǎn)，又將化工中的連續(xù)逆流、精餾、回流等因素集約進(jìn)去，使系統(tǒng)具有規(guī)?；?xì)分離的能力。該項(xiàng)技術(shù)已應(yīng)用于糖類制備、結(jié)構(gòu)異構(gòu)體分離制備、光學(xué)對映體的分離制備及同位素的分離等。與傳統(tǒng)的制備色譜技術(shù)相比，模擬移動床技術(shù)采用連續(xù)操作手段，這一點(diǎn)有利于實(shí)現(xiàn)自動化操作，制備效率高，每克填料每天制備量可達(dá)I克以上，制備量大，大型模擬移動床制備儀器每年制備量可達(dá)百萬噸級水平，同時試劑的消耗量很少，可以節(jié)約試劑高達(dá)90%以上。該技術(shù)在石油、精細(xì)化工、食品、藥物(特別是手性藥物)等諸多領(lǐng)域已經(jīng)發(fā)揮很大作用，應(yīng)用前景廣闊。目前，在天然產(chǎn)物分離方面應(yīng)用較多，但是應(yīng)用模擬移動床吸附分離提純藤梨根黃酮的方法仍未見公開報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供了一種使用模擬移動床色譜技術(shù)分離提純藤梨根黃酮的方法，解決目前藤梨根黃酮分離純度低，制備成本高，不易于規(guī)?；a(chǎn)的問題。本發(fā)明通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)一種模擬移動床色譜分離提純藤梨根黃酮的方法，其特征在于該方法包括以下步驟
a、將藤梨根凈選，粉碎，備用；
b、將藤梨根粉于80-90°C恒溫下，加入藤梨根細(xì)粉總質(zhì)量6-10倍的75%乙醇回流提取 3次，時間依次為2、2、lh，濾過，3次提取濾液合并；乙醇提取液在40-50°C，-0. IMPa條件下減壓濃縮，得到藤梨根黃酮粗提物；
C、將藤梨根黃酮粗提物制備成進(jìn)樣液進(jìn)入模擬移動床分離純化得藤梨根黃酮液體，其中吸附劑為大孔吸附樹脂，吸附區(qū)原料流量為4-16BV/h (BV為吸附劑的柱床體積，下同)；解析劑為40%-90%的乙醇溶液，解析劑流量為5-25BV/h ;沖洗劑為去離子水，沖洗劑流量為5-25BV/h ;樹脂吸附再生劑是2%-4%的NaOH溶液，再生劑流量為5_10BV/h ;切換時間為600-800S ;溫度控制在25-70°C ;全程壓力控制范圍為0. 2-1. OMPa ；
d、將藤梨根黃酮液體在蠕動泵進(jìn)料量50-150ML/h、進(jìn)風(fēng)口溫度160-240°C、出風(fēng)口溫度50-90°C、氣流式霧化條件下進(jìn)行噴霧干燥，即制成藤梨根黃酮粉。進(jìn)一步地，所述的大孔吸附樹脂選自AB-8弱極性大孔吸附樹脂、ADS-8弱極性大孔吸附樹脂、NKA-9極性大孔吸附樹脂、X-5非極性大孔吸附樹脂、DM301中極性大孔吸附樹脂或ADS-7強(qiáng)極性大孔吸附樹脂中的任何一種。步驟c中制備的藤梨根黃酮液體的質(zhì)量百分比濃度為5-20%，純度為60-90%。采用上述技術(shù)方案的積極效果本發(fā)明的模擬移動床連續(xù)式的生產(chǎn)方式可用于提取藤梨根黃酮，其生產(chǎn)自動化程度高、工作效率高，生產(chǎn)環(huán)境安全環(huán)保，適合工業(yè)化生產(chǎn)，制備所得的藤梨根黃酮粉純度較現(xiàn)有技術(shù)有了較大幅度的提高，可達(dá)90%以上，可以大規(guī)模的用于藥品制備與生產(chǎn)。
具體實(shí)施例方式下面通過實(shí)施例對本發(fā)明做進(jìn)一步的說明，但不應(yīng)理解為對本發(fā)明的限制 實(shí)施例I
一種模擬移動床色譜分離提純藤梨根黃酮的方法，該方法包括以下步驟
a、將藤梨根凈選，粉碎，備用；
b、將藤梨根粉于85°C恒溫下，加入藤梨根細(xì)粉總質(zhì)量6倍的75%乙醇回流提取3次，時間依次為2、2、lh，濾過，3次提取濾液合并；乙醇提取液在45°C，-0. IMPa條件下減壓濃縮，得到藤梨根黃酮粗提物；
C、將藤梨根黃酮粗提物制備成進(jìn)樣液進(jìn)入模擬移動床分離純化得藤梨根黃酮液體，其中吸附劑為AB-8弱極性大孔吸附樹脂，吸附區(qū)原料流量為6BV/h ;解析劑為40%的乙醇溶液，解析劑流量為12BV/h ;沖洗劑為去離子水，沖洗劑流量為8BV/h ;樹脂吸附再生劑是2%的NaOH溶液，再生劑流量為5BV/h ;切換時間為660S ;溫度控制在29°C左右；全程壓力控制在0. 7MPa左右。制得的藤梨根黃酮液體質(zhì)量百分比濃度為5%、純度為60% ；
d、將藤梨根黃酮液體在蠕動泵進(jìn)料量50ML/h、進(jìn)風(fēng)口溫度190°C、出風(fēng)口溫度66°C、氣流式霧化條件下進(jìn)行噴霧干燥，即制成藤梨根黃酮粉。經(jīng)過鑒定，藤梨根黃酮粉的純度可達(dá)92%。實(shí)施例2
一種模擬移動床色譜分離提純藤梨根黃酮的方法，該方法包括以下步驟
a、將藤梨根凈選，粉碎，備用；
b、將藤梨根粉于85°C恒溫下，加入藤梨根細(xì)粉總質(zhì)量8倍的75%乙醇回流提取3次，時間依次為2、2、lh，濾過，3次提取濾液合并；乙醇提取液在45°C，-0. IMPa條件下減壓濃縮，得到藤梨根黃酮粗提物；
C、將藤梨根黃酮粗提物制備成進(jìn)樣液進(jìn)入模擬移動床分離純化得藤梨根黃酮液體，其中吸附劑為ADS-8弱極性大孔吸附樹脂，吸附區(qū)原料流量為5BV/h ;解析劑為80%的乙醇溶 液，解析劑流量為15BV/h ;沖洗劑為去離子水，沖洗劑流量為10BV/h ;樹脂吸附再生劑是3%的NaOH溶液，再生劑流量為8BV/h ;切換時間為625S ;溫度控制在32°C左右；全程壓力控制在IMPa左右。制得的藤梨根黃酮液體質(zhì)量百分比濃度為20%、純度為65% ；
d、將藤梨根黃酮液體在蠕動泵進(jìn)料量90ML/h、進(jìn)風(fēng)口溫度195°C、出風(fēng)口溫度72°C、氣流式霧化條件下進(jìn)行噴霧干燥，即制成藤梨根黃酮粉。經(jīng)過鑒定，藤梨根黃酮粉的純度可達(dá)90%。實(shí)施例3
一種模擬移動床色譜分離提純藤梨根黃酮的方法，該方法包括以下步驟
a、將藤梨根凈選，粉碎，備用；
b、將藤梨根粉于90°C恒溫下，加入藤梨根細(xì)粉總質(zhì)量10倍的75%乙醇回流提取3次，時間依次為2、2、lh，濾過，3次提取濾液合并；乙醇提取液在50°C，-0. IMPa條件下減壓濃縮，得到藤梨根黃酮粗提物；
C、將藤梨根黃酮粗提物制備成進(jìn)樣液進(jìn)入模擬移動床分離純化得藤梨根黃酮液體，其中吸附劑為NKA-9極性大孔吸附樹脂，吸附區(qū)原料流量為15BV/h ;解析劑為70%的乙醇溶液，解析劑流量為23BV/h ;沖洗劑為去離子水，沖洗劑流量為20BV/h ;樹脂吸附再生劑是4%的NaOH溶液，再生劑流量為6BV/h ;切換時間為800S ;溫度控制在62°C左右；全程壓力控制在0. 8MPa左右。制得的藤梨根黃酮液體質(zhì)量百分比濃度為10%、純度為80% ；
d、將藤梨根黃酮液體在蠕動泵進(jìn)料量120ML/h、進(jìn)風(fēng)口溫度240°C、出風(fēng)口溫度85°C、氣流式霧化條件下進(jìn)行噴霧干燥，即制成藤梨根黃酮粉。經(jīng)過鑒定，藤梨根黃酮粉的純度可達(dá) 92%。實(shí)施例4
一種模擬移動床色譜分離提純藤梨根黃酮的方法，該方法包括以下步驟
a、將藤梨根凈選，粉碎，備用；
b、將藤梨根粉于87°C恒溫下，加入藤梨根細(xì)粉總質(zhì)量7倍的75%乙醇回流提取3次，時間依次為2、2、lh，濾過，3次提取濾液合并；乙醇提取液在47°C，-0. IMPa條件下減壓濃縮，得到藤梨根黃酮粗提物；
C、將藤梨根黃酮粗提物制備成進(jìn)樣液進(jìn)入模擬移動床分離純化得藤梨根黃酮液體，其中吸附劑為X-5非極性大孔吸附樹脂，吸附區(qū)原料流量為9BV/h ;解析劑為90%的乙醇溶液，解析劑流量為21BV/h ;沖洗劑為去離子水，沖洗劑流量為15BV/h ;樹脂吸附再生劑是2%的NaOH溶液，再生劑流量為5BV/h ;切換時間為720S ;溫度控制在50°C左右；全程壓力控制在0. 9MPa左右。制得的藤梨根黃酮液體質(zhì)量百分比濃度為18%、純度為70% ；
d、將藤梨根黃酮液體在蠕動泵進(jìn)料量125ML/h、進(jìn)風(fēng)口溫度230°C、出風(fēng)口溫度78V、氣流式霧化條件下進(jìn)行噴霧干燥，即制成藤梨根黃酮粉。經(jīng)過鑒定，藤梨根黃酮粉的純度可達(dá) 94%。實(shí)施例5
一種模擬移動床色譜分離提純藤梨根黃酮的方法，該方法包括以下步驟
a、將藤梨根凈選，粉碎，備用；
b、將藤梨根粉于90°C恒溫下，加入藤梨根細(xì)粉總質(zhì)量9倍的75%乙醇回流提取3次，時間依次為2、2、lh，濾過，3次提取濾液合并；乙醇提取液在48°C，-0. IMPa條件下減壓濃縮， 得到藤梨根黃酮粗提物；
C、將藤梨根黃酮粗提物制備成進(jìn)樣液進(jìn)入模擬移動床分離純化得藤梨根黃酮液體，其中吸附劑為DM301中極性大孔吸附樹脂，吸附區(qū)原料流量為16BV/h ;解析劑為50%的乙醇溶液，解析劑流量為14BV/h ;沖洗劑為去離子水，沖洗劑流量為18BV/h ;樹脂吸附再生劑是4%的NaOH溶液，再生劑流量為7BV/h ;切換時間為650S ;溫度控制在65°C左右；全程壓力控制在0. 5MPa左右。制得的藤梨根黃酮液體質(zhì)量百分比濃度為12%、純度為90% ；
d、將藤梨根黃酮液體在蠕動泵進(jìn)料量110ML/h、進(jìn)風(fēng)口溫度200°C、出風(fēng)口溫度90 V、氣流式霧化條件下進(jìn)行噴霧干燥，即制成藤梨根黃酮粉。經(jīng)過鑒定，藤梨根黃酮粉的純度可達(dá) 90%。實(shí)施例6
一種模擬移動床色譜分離提純藤梨根黃酮的方法，該方法包括以下步驟
a、將藤梨根凈選，粉碎，備用；
b、將藤梨根粉于89°C恒溫下，加入藤梨根細(xì)粉總質(zhì)量8倍的75%乙醇回流提取3次，時間依次為2、2、lh，濾過，3次提取濾液合并；乙醇提取液在48°C，-0. IMPa條件下減壓濃縮，得到藤梨根黃酮粗提物；
C、將藤梨根黃酮粗提物制備成進(jìn)樣液進(jìn)入模擬移動床分離純化得藤梨根黃酮液體，其中吸附劑為ADS-7強(qiáng)極性大孔吸附樹脂，吸附區(qū)原料流量為14BV/h ;解析劑為40%的乙醇溶液，解析劑流量為25BV/h ;沖洗劑為去離子水，沖洗劑流量為16BV/h ;樹脂吸附再生劑是3%的NaOH溶液，再生劑流量為7BV/h ;切換時間為800S ;溫度控制在30°C左右；全程壓力控制在0. 5MPa左右。制得的藤梨根黃酮液體質(zhì)量百分比濃度為20%、純度為85% ；
d、將藤梨根黃酮液體在蠕動泵進(jìn)料量150ML/h、進(jìn)風(fēng)口溫度240°C、出風(fēng)口溫度90°C、氣流式霧化條件下進(jìn)行噴霧干燥，即制成藤梨根黃酮粉。經(jīng)過鑒定，藤梨根黃酮粉的純度可達(dá) 92%。實(shí)施例7
一種模擬移動床色譜分離提純藤梨根黃酮的方法，該方法包括以下步驟
a、將藤梨根凈選，粉碎，備用；
b、將藤梨根粉于80°C恒溫下，加入藤梨根細(xì)粉總質(zhì)量8倍的75%乙醇回流提取3次，時間依次為2、2、lh，濾過，3次提取濾液合并；乙醇提取液在40°C，-0. IMPa條件下減壓濃縮，得到藤梨根黃酮粗提物；C、將藤梨根黃酮粗提物制備成進(jìn)樣液進(jìn)入模擬移動床分離純化得藤梨根黃酮液體，其中吸附劑為AB-8弱極性大孔吸附樹脂，吸附區(qū)原料流量為4BV/h ;解析劑為80%的乙醇溶液，解析劑流量為5BV/h ;沖洗劑為去離子水，沖洗劑流量為5BV/h ;樹脂吸附再生劑是4%的NaOH溶液，再生劑流量為10BV/h ;切換時間為600S ;溫度控制在25°C左右；全程壓力控制在0. 2MPa左右。制得的藤梨根黃酮液體質(zhì)量百分比濃度為9%、純度為78% ；
d、將藤梨根黃酮液體在蠕動泵進(jìn)料量130ML/h、進(jìn)風(fēng)口溫度160°C、出風(fēng)口溫度50°C、氣流式霧化條件下進(jìn)行噴霧干燥，即制成藤梨根黃酮粉。經(jīng)過鑒定，藤梨根黃酮粉的純度可達(dá) 95%。實(shí)施例8
一種模擬移動床色譜分離提純藤梨根黃酮的方法，該方法包括以下步驟
a、將藤梨根凈選，粉碎，備用；
b、將藤梨根粉于85°C恒溫下，加入藤梨根細(xì)粉總質(zhì)量10倍的75%乙醇回流提取3次，時間依次為2、2、lh，濾過，3次提取濾液合并；乙醇提取液在50°C，-0. IMPa條件下減壓濃縮，得到藤梨根黃酮粗提物；
C、將藤梨根黃酮粗提物制備成進(jìn)樣液進(jìn)入模擬移動床分離純化得藤梨根黃酮液體，其中吸附劑為ADS-8弱極性大孔吸附樹脂，吸附區(qū)原料流量為16BV/h ;解析劑為75%的乙醇溶液，解析劑流量為25BV/h ;沖洗劑為去離子水，沖洗劑流量為25BV/h ;樹脂吸附再生劑是2%的NaOH溶液，再生劑流量為5BV/h ;切換時間為800S ;溫度控制在70 V左右;全程壓力控制在IMPa左右。制得的藤梨根黃酮液體質(zhì)量百分比濃度為12%、純度為60% ；
d、將藤梨根黃酮液體在蠕動泵進(jìn)料量80ML/h、進(jìn)風(fēng)口溫度200°C、出風(fēng)口溫度90°C、氣流式霧化條件下進(jìn)行噴霧干燥，即制成藤梨根黃酮粉。經(jīng)過鑒定，藤梨根黃酮粉的純度可達(dá)93%。對比例I
一種分離提純藤梨根黃酮的方法，該方法包括以下步驟
a、將藤梨根凈選，粉碎，備用；
b、將藤梨根粉于85°C恒溫下，加入藤梨根細(xì)粉總質(zhì)量6倍的75%乙醇回流提取3次，時間依次為2、2、lh，濾過，3次提取濾液合并；乙醇提取液在45°C，-0. IMPa條件下減壓濃縮，得到藤梨根黃酮粗提物；
C、將藤梨根黃酮液體在蠕動泵進(jìn)料量50ML/h、進(jìn)風(fēng)口溫度190°C、出風(fēng)口溫度66°C、氣流式霧化條件下進(jìn)行噴霧干燥，即制成藤梨根黃酮粉。經(jīng)過鑒定，藤梨根黃酮粉的純度只有45%。對比例I是在實(shí)施例I的基礎(chǔ)上去掉了模擬移動床色譜的步驟。經(jīng)過對比可得，引入模擬移動床色譜法，可以大大提高制得的藤梨根黃酮粉的純度，較普通方法有了大幅度的提高，本發(fā)明的技術(shù)方案可以廣泛適用于制藥應(yīng)用。
權(quán)利要求
1.一種模擬移動床色譜分離提純藤梨根黃酮的方法，其特征在于該方法包括以下步驟 a、將藤梨根凈選，粉碎，備用； b、將藤梨根粉于80-90°C恒溫下，加入藤梨根細(xì)粉總質(zhì)量6-10倍的75%こ醇回流提取3次，時間依次為2、2、lh，濾過，3次提取濾液合并；こ醇提取液在40-50°C，-O. IMPa條件下減壓濃縮，得到藤梨根黃酮粗提物； C、將藤梨根黃酮粗提物制備成進(jìn)樣液進(jìn)入模擬移動床分離純化得藤梨根黃酮液體，其中吸附劑為大孔吸附樹脂，吸附區(qū)原料流量為4-16BV/h ;解析劑為40%-90%的こ醇溶液，解析劑流量為5-25BV/h ;沖洗劑為去離子水，沖洗劑流量為5-25BV/h ;樹脂吸附再生劑是 2%-4%的NaOH溶液，再生劑流量為5_10BV/h ;切換時間為600-800S ;溫度控制在25_70°C ；全程壓カ控制范圍為O. 2-1. OMPa ； d、將藤梨根黃酮液體在蠕動泵進(jìn)料量50-150ML/h、進(jìn)風(fēng)ロ溫度160-240°C、出風(fēng)ロ溫度50-90°C、氣流式霧化條件下進(jìn)行噴霧干燥，即制成藤梨根黃酮粉。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的模擬移動床色譜分離提純藤梨根黃酮的方法，其特征在于進(jìn)ー步地，所述的大孔吸附樹脂選自AB-8弱極性大孔吸附樹脂、ADS-8弱極性大孔吸附樹脂、NKA-9極性大孔吸附樹脂、X-5非極性大孔吸附樹脂、DM301中極性大孔吸附樹脂或ADS-7強(qiáng)極性大孔吸附樹脂中的任何ー種。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的模擬移動床色譜分離提純藤梨根黃酮的方法，其特征在于步驟c中制備的藤梨根黃酮液體的質(zhì)量百分比濃度為5-20%，純度為60-90%。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種模擬移動床色譜分離提純藤梨根黃酮的方法，該方法包括將藤梨根凈選，粉碎，乙醇回流提取，減壓濃縮，模擬移動床分離純化，噴霧干燥等步驟制備而成藤梨根黃酮粉。本發(fā)明的模擬移動床連續(xù)式的生產(chǎn)方式可用于提取藤梨根黃酮，其生產(chǎn)自動化程度高、工作效率高，生產(chǎn)環(huán)境安全環(huán)保，適合工業(yè)化生產(chǎn)，制備所得的藤梨根黃酮粉純度較現(xiàn)有技術(shù)有了較大幅度的提高，可達(dá)90%以上，可以大規(guī)模的用于藥品制備與生產(chǎn)。
文檔編號A61P35/00GK102688266SQ201210197170
公開日2012年9月26日 申請日期2012年6月15日 優(yōu)先權(quán)日2012年6月15日
發(fā)明者姜瑞平, 張立秋, 武子敬, 滕坤, 趙竹青, 趙蕊, 阮洪生 申請人:通化師范學(xué)院