專利名稱：茯苓皮提取物及其在治療慢性腎衰竭藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種茯苓皮提取物及其在治療慢性腎衰竭藥物中的應(yīng)用，所述提取物為茯苓皮乙酸乙酯提取物，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
慢性腎衰竭疾病的治療一直是困擾醫(yī)學(xué)界的難題。據(jù)國(guó)際腎臟病協(xié)會(huì)統(tǒng)計(jì)慢性腎衰竭在自然人群中的年發(fā)病率為98-198/100萬(wàn)，經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)國(guó)家發(fā)病率更高，美國(guó)和日本的發(fā)病率分別達(dá)802/100萬(wàn)和996/100萬(wàn)。在西方國(guó)家中，腎衰竭以繼發(fā)性為主，已經(jīng)公認(rèn)糖尿病和高血壓是兩大首位因素，糖尿病人中至少40%有腎臟疾病，高血壓病人中約50%有腎臟病。我國(guó)腎衰竭患者在逐年遞增。
慢性腎衰竭是指發(fā)生在各種慢性腎臟疾病基礎(chǔ)上，由于腎單位和腎功能不可逆地喪失，導(dǎo)致以代謝產(chǎn)物和毒素潴溜，水、電解質(zhì)和酸堿平衡紊亂以及內(nèi)分泌失調(diào)為特征的臨床綜合征，常常進(jìn)展為終末期腎衰竭。在慢性腎衰竭的治療上，目前主要采取內(nèi)科療法(如控制原發(fā)病、調(diào)節(jié)酸堿平衡及水、電解質(zhì)紊亂等)、透析療法及腎臟移植等。這些療法可以改善臨床癥狀，減輕患者的痛苦，提高其生活質(zhì)量，但同時(shí)還存在著許多難以克服的問(wèn)題如內(nèi)科療法尚難以徹底阻斷病理進(jìn)展，且副作用大；透析只能解決腎臟的部分代謝問(wèn)題，尚不能較好改善腎臟的內(nèi)分泌功能；腎移植的腎源有限，且免疫排斥現(xiàn)象一時(shí)還難以解決。加之透析療法和腎臟移植費(fèi)用昂貴，使眾多患者望而卻步。隨著各種疾病發(fā)病率的上升，藥物的使用越來(lái)越多，因藥物引起的腎損傷發(fā)生率很高(大部分藥物及其代謝產(chǎn)物經(jīng)腎臟排出體外)。研究顯示藥物導(dǎo)致急性腎小管壞死或急性腎間質(zhì)腎炎的發(fā)生率高達(dá)18. 3%，目前臨床常見的對(duì)腎損傷的藥物有抗感染類(氨基糖苷類、萬(wàn)古霉素、內(nèi)酰胺類抗生素、兩性霉素B、抗病毒制劑)；免疫制劑(環(huán)孢素、它克莫司)；抗腫瘤藥物(順鉬、異環(huán)磷酰胺、甲氨蝶呤、多柔比星、二炭磷酸鹽化合物)、留體類抗炎藥(乙酰水楊酸、對(duì)乙酰氨基酚、雙氯芬酸);天然產(chǎn)物化學(xué)成分(馬兜鈴酸、雷公藤甲素)及利尿藥(甘露醇)等，其中抗生素腎損害的發(fā)生率達(dá)36%。藥物性腎損傷位居與腎臟有關(guān)的疾病的首位，特別引起醫(yī)學(xué)界的廣泛關(guān)注。藥物性腎損傷也是新藥開發(fā)過(guò)程中的常見問(wèn)題，它是導(dǎo)致藥物撤市的重要原因之一，消耗了大量的人力和財(cái)力。因此，如何有效防治慢性腎衰竭一直是全球關(guān)注的難點(diǎn)和熱點(diǎn)之一，繼續(xù)堅(jiān)持不懈地研究和探尋治療慢性腎衰竭新藥物仍是當(dāng)前醫(yī)學(xué)研究的一項(xiàng)艱巨任務(wù)。目前，對(duì)慢性腎衰竭的治療，西藥有愛西特(藥用活性炭)；中藥有尿毒清顆粒、腎衰寧、血肌酐片等。西藥雖然有一定的療效，但毒副作用大，復(fù)發(fā)率高等缺點(diǎn)，如愛西特在初期是有效的，但后期反而會(huì)使病情加重，血肌酐、尿素氮居高不下，出現(xiàn)難以控制的癥狀，最終會(huì)發(fā)展為尿毒癥。中醫(yī)藥在防病治病方面有著獨(dú)到之處。慢性腎衰竭屬于祖國(guó)醫(yī)學(xué)中水腫、癃閉、關(guān)格等范疇，病機(jī)為本虛標(biāo)實(shí)，治當(dāng)扶正祛邪、標(biāo)本兼顧。雖然透析或腎移植是慢性腎衰竭患者終末期生存的治療手段，但是在慢性腎衰竭的早、中期，在治療原發(fā)病的基礎(chǔ)上，采用行之有效的藥物治療措施以有效地阻止或延緩慢性腎衰竭進(jìn)展是一個(gè)較為理想的方法。研究表明中藥對(duì)慢性腎衰竭早、中期患者可有效地阻止或延緩腎功能的進(jìn)行性惡化，延緩慢性腎衰竭的發(fā)展。目前使用的單味中藥(大黃、冬蟲夏草等)或復(fù)方中藥(尿毒清顆粒、腎衰寧、百令膠囊等)在治療慢性腎衰竭方面顯示著獨(dú)特的療效，有著巨大的發(fā)展?jié)摿?。從中藥中尋找活性?qiáng)、作用持久、低毒的能減輕或延緩慢性腎衰竭進(jìn)展的新藥物，對(duì)治療慢性腎衰竭開發(fā)有著重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的之一是提供一種天然藥物茯苓皮提取物，特別是 一種乙酸乙酯提取物；
本發(fā)明的另一目的是提供上述茯苓皮提取物的制備方法；
本發(fā)明還有一個(gè)目的是克服現(xiàn)有治療慢性腎衰竭藥物的缺點(diǎn)，提供茯苓皮提取物在制備慢性腎衰竭藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明實(shí)現(xiàn)過(guò)程如下
一種茯苓皮提取物，其通過(guò)以下制備方法得到茯苓皮經(jīng)干燥、粉碎后，用5-10倍體積的70 96%的乙醇浸泡提取，回收乙醇，濃縮得棕色膏狀物；棕色膏狀物用蒸餾水溶解，用乙酸乙酯萃取，濃縮乙酸乙酯提取物得膏狀物。上述制備方法中，最好用8-10倍體積的90 96%乙醇浸泡超聲提取。優(yōu)選的實(shí)例如茯苓皮經(jīng)干燥、粉碎后，用8-10倍體積的95%乙醇浸泡24小時(shí)后，超聲提取3次，每次30分鐘，回收乙醇，濃縮得棕色膏狀物；棕色膏狀物用蒸餾水溶解，用乙酸乙酯萃取4次，濃縮乙酸乙酯提取物得膏狀物。將茯苓皮乙酸乙酯提取物作為活性成分，與適宜的賦形劑相結(jié)合，制成各種藥物制劑，包括顆粒劑、片劑、膠囊、口服液等口服劑型，以及注射劑型，上述的制劑可按照各種制劑常規(guī)的制備工藝制成。上述制劑中可含有輔助物質(zhì)、穩(wěn)定劑、潤(rùn)濕劑和其它常用的添加劑，如乳糖、檸檬酸、酒石酸、硬脂酸、硬脂酸鎂、石膏粉、蔗糖、玉米淀粉、滑石粉、明膠、瓊脂、果膠、花生油、橄欖油、可可脂、乙二醇、抗壞血酸、甘露醇等。本發(fā)明茯苓皮提取物可用于制備治療慢性腎衰竭藥物。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例I茯苓皮提取物及茯苓皮乙酸乙酯提取物的制備
目前提取藥材的方法有超聲提取法、加熱回流法、索式提取法、滲漉法等。發(fā)明人采用簡(jiǎn)單快速的超聲提取方法，考察茯苓皮經(jīng)干燥、粉碎后，用8-10倍體積的95%乙醇浸泡24小時(shí)左右，超聲時(shí)間(15分鐘、30分鐘、45分鐘)和超聲次數(shù)(2次和3次)對(duì)提取率(提取浸膏/生藥量)的影響。結(jié)果顯示在超聲提取2次的前提下，超聲時(shí)間為15分鐘、30分鐘、45分鐘時(shí)的提取率分別為3. 2%、4. 5%、5. 2% ;在超聲提取3次的前提下，超聲時(shí)間為15分鐘、30分鐘、45分鐘時(shí)的提取率分別為4. 8%、6. 2%、6. 3%。最終超聲提取的條件是超聲提取3次，每次30分鐘。超聲提取液回收乙醇，濃縮得棕色膏狀物即為茯苓皮提取物。膏狀物用蒸餾水溶解，用乙酸乙酯萃取4次，濃縮乙酸乙酯提取物得膏狀物即得茯苓皮乙酸乙酯提取物。
實(shí)施例2
為了驗(yàn)證茯苓皮乙酸乙酯提取物對(duì)慢性腎衰竭治療的效果，申請(qǐng)人采用腺嘌呤誘導(dǎo)的慢性腎衰竭大鼠模型進(jìn)行了藥效學(xué)試驗(yàn)，各種試驗(yàn)情況如下
I.實(shí)驗(yàn)藥物
實(shí)施例I制備得到的茯苓皮乙酸乙酯提取物懸濁液，含2%的阿拉伯樹膠粉的自來(lái)水配制。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
雄性SD大鼠，體重230-250g，由第四軍醫(yī)大學(xué)動(dòng)物中心提供。實(shí)驗(yàn)儀器和試劑
ZH-B6型大鼠代謝籠(安徽淮北正華生物儀器有限公司)；美特列-托利多十萬(wàn)分之一分析天平；腺嘌呤購(gòu)于sigma公司(批號(hào)A8626-5g，純度彡99%)。實(shí)驗(yàn)方法
(I)模型建立及藥物治療試驗(yàn)
雄性SD大鼠購(gòu)置后適應(yīng)環(huán)境一周，根據(jù)其體重、隨機(jī)分為正常組、腺嘌呤模型組、腺嘌呤加茯苓皮乙酸乙酯提取物治療組，每組均為8只。實(shí)驗(yàn)期間動(dòng)物自由飲水、攝食。實(shí)驗(yàn)開始后，正常組以自來(lái)水10 ml/kg/d灌胃；腺嘌呤模型組僅以腺嘌呤200 mg/kg/d灌胃；腺嘌呤加茯苓皮乙酸乙酯提取物給藥組，每天先以腺嘌呤200 mg/kg/d灌胃，3個(gè)小時(shí)后，再以茯苓皮乙酸乙酯提取物相當(dāng)于10 g/kg/d生藥灌胃。所有動(dòng)物于實(shí)驗(yàn)第14天置于代謝籠中，留取尿液，之后取血及心、肝、腎等組織。分析茯苓皮乙酸乙酯提取物對(duì)腺嘌呤誘導(dǎo)大鼠慢性腎衰竭的臟器指數(shù)、血清生化指標(biāo)及血液學(xué)指標(biāo)，并作統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果見表1、2、3、4。(2)檢測(cè)方法
各種臟器用美特列-托利多十萬(wàn)分之一分析天平稱量并記錄。生化指標(biāo)和血液學(xué)指標(biāo)的測(cè)定委托西安醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院完成。(3)藥效計(jì)算
結(jié)果均以平均值土SD表示，采用 檢驗(yàn)，計(jì)算 ，P值，將模型組與空白組、茯苓皮乙酸乙酯提取物組與模型進(jìn)行組間差異性比較，t檢驗(yàn)，P < O. 05為有顯著性差異，P〈O. 01為有非常顯著性差異，判斷藥物對(duì)腺嘌呤誘導(dǎo)慢性腎衰竭的治療效果。(4)實(shí)驗(yàn)結(jié)果 A.病理學(xué)分析
正常組大鼠腎臟大小適中、顏色鮮紅、表面光滑。模型組大鼠腎臟明顯腫大，體積增大、顏色蒼白、表面凹凸不平，似人類的“大白腎”，個(gè)別腎體積較正常組可增大I倍以上。各腎均存在區(qū)域性纖維組織明顯增生及炎細(xì)胞浸潤(rùn)。部分腎小管上皮細(xì)胞壞死、消失或擴(kuò)張，甚至呈囊性?？梢姶笮〔灰?、數(shù)量不等的棕褐色結(jié)晶或異物肉芽腫形成及粉染勻質(zhì)的管型。上述病變與Yokozawa報(bào)道的類似。與正常組比較腎指數(shù)、腎長(zhǎng)度和寬度顯著增大，脾、胸腺及睪丸指數(shù)顯著升高，存在統(tǒng)計(jì)學(xué)上的非常顯著差異(P〈0. 01)。尿量與模型組比較也顯著增加。結(jié)果見表1，2。茯苓皮乙酸乙酯提取物組結(jié)果見表1，2。結(jié)果顯示茯苓皮乙酸乙酯提取物對(duì)此模型有對(duì)抗作用，表現(xiàn)為腎臟體積變小，顏色蒼白度減輕、腎指數(shù)、腎長(zhǎng)度和寬度降低。同時(shí)，脾及腎上腺指數(shù)也減小，而且脾指數(shù)與模型比較存在統(tǒng)計(jì)學(xué)上的非常顯著差異，結(jié)果接近正常組。另外，尿量與模型組比較明顯的降低且存在統(tǒng)計(jì)學(xué)上的非常顯著差異(P〈0. 01)，這些結(jié)果證明茯苓皮乙酸乙酯提取物對(duì)腺嘌呤誘導(dǎo)的慢性腎衰竭有較好的保護(hù)作用。
權(quán)利要求
1.一種茯苓皮提取物，其特征在于通過(guò)以下制備方法得到茯苓皮經(jīng)干燥、粉碎后，用5-10倍體積的70 96%的乙醇浸泡提取，回收乙醇，濃縮得棕色膏狀物；棕色膏狀物用蒸餾水溶解，用乙酸乙酯萃取，濃縮乙酸乙酯提取物得膏狀物。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的茯苓皮提取物，其特征在于用8-10倍體積的90 96%乙醇浸泡超聲提取。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的茯苓皮提取物，其特征在于茯苓皮經(jīng)干燥、粉碎后，用8-10倍體積的95%乙醇浸泡24小時(shí)后，超聲提取3次，每次30分鐘，回收乙醇，濃縮得棕色膏狀物；棕色膏狀物用蒸餾水溶解，用乙酸乙酯萃取4次，濃縮乙酸乙酯提取物得膏狀物。
4.權(quán)利要求I所述茯苓皮提取物的制備方法，包括以下步驟茯苓皮經(jīng)干燥、粉碎后，用5-10倍體積的70 96%的乙醇浸泡提取，回收乙醇，濃縮得棕色膏狀物；棕色膏狀物用蒸餾水溶解，用乙酸乙酯萃取，濃縮乙酸乙酯提取物得膏狀物。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法,其特征在于用8-10倍體積的90 96%乙醇浸泡超聲提取。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于茯苓皮經(jīng)干燥、粉碎后，用5-10倍體積的70 96%的乙醇浸泡提取，回收乙醇，濃縮得棕色膏狀物；棕色膏狀物用蒸餾水溶解，用乙酸乙酯萃取，濃縮乙酸乙酯提取物得膏狀物。
7.權(quán)利要求I至3任意之一所述茯苓皮提取物在制備治療慢性腎衰竭藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種茯苓皮提取物，其通過(guò)以下制備方法得到茯苓皮經(jīng)干燥、粉碎后，用5-10倍體積的70～96%的乙醇浸泡提取，回收乙醇，濃縮得棕色膏狀物；棕色膏狀物用蒸餾水溶解，用乙酸乙酯萃取，濃縮乙酸乙酯提取物得膏狀物即可。本發(fā)明茯苓皮提取物可用于制備治療慢性腎衰竭藥物。
文檔編號(hào)A61P13/12GK102772449SQ201210235819
公開日2012年11月14日 申請(qǐng)日期2012年7月10日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月10日
發(fā)明者林瑞超, 程顯隆, 趙英永, 魏鋒 申請(qǐng)人:西北大學(xué)