專利名稱：銀花泌炎靈在制備逆轉(zhuǎn)銅綠假單胞菌耐藥性藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，尤其是指銀花泌炎靈片的新的藥物用途。
背景技術(shù)：
銀花泌炎靈片，國家藥品標(biāo)準(zhǔn)WS3-526 (Z_107)-2003 (Z)0處方，金銀花，半枝蓮，扁蓄，瞿麥，石韋，川木通，車前子，淡竹葉，桑寄生，燈心草。本品為淡綠色糖衣片，除去糖衣后片芯呈深褐色，味微苦，澀。功能與主治，清熱解毒，利濕通淋，用于急性腎盂腎炎，急性膀胱炎，下焦?jié)駸嶙C，證見，發(fā)熱惡寒，尿頻急、尿道刺痛或尿血、腰痛等?？诜?，一次8片，一日4次，兩周為一個(gè)療程，可連服三個(gè)療程，或遵醫(yī)囑。銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa, PA)為臨床常見的醫(yī)院感染致病菌， 隨著抗生素大量應(yīng)用，導(dǎo)致了耐藥菌株的不斷增多，且耐藥菌株引起的感染感染近年來呈現(xiàn)明顯的上升趨勢(shì)。銀花泌炎靈片等抗菌中藥在控制細(xì)菌耐藥性方面有著獨(dú)特的優(yōu)越性，由于中草藥抑菌成分較多，可作用于細(xì)菌的不同靶點(diǎn)和代謝繁殖的不同階段，作用緩慢、持久，故不易產(chǎn)生耐藥性。目前，國內(nèi)外對(duì)抗菌中藥進(jìn)行了大量的抑菌機(jī)理的研究，證明中藥可抑制耐藥菌主動(dòng)外排，也可同時(shí)增強(qiáng)對(duì)耐藥菌質(zhì)粒的消除作用和作為抗菌增效劑。但抗菌中藥與抗生素的聯(lián)合應(yīng)用能否逆轉(zhuǎn)抗生素濫用所致的細(xì)菌耐藥性研究尚未見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種銀花泌炎靈在制備逆轉(zhuǎn)由于抗生素壓力作用下銅綠假單胞菌耐藥性藥物中的應(yīng)用，以解決抗生素誘導(dǎo)銅綠假單胞菌耐藥性的出現(xiàn)，使醫(yī)院感染愈來愈嚴(yán)重的問題。銀花泌炎靈片在制備逆轉(zhuǎn)抗生素壓力下誘導(dǎo)銅綠假單胞菌耐藥性的藥物中的應(yīng)用。銀花泌炎靈片在治療耐藥性細(xì)菌感染方面已得到研究，由于其化學(xué)成分復(fù)雜，雖然能夠控制細(xì)菌耐藥性的發(fā)生，但是否能夠逆轉(zhuǎn)細(xì)菌對(duì)廣譜抗生素的耐藥性卻很難研究。本發(fā)明分別在含有銀花泌炎靈片、左氧氟沙星和銀花泌炎靈片聯(lián)合左氧氟沙星的M-H肉湯培養(yǎng)基中對(duì)銅綠假單胞菌ATCC27853進(jìn)行連續(xù)傳代培養(yǎng)，比較壓力傳代前后各組細(xì)菌是否被誘導(dǎo)或逆轉(zhuǎn)耐藥性，結(jié)果表明銀花泌炎靈片可逆轉(zhuǎn)抗生素壓力下細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生。使用時(shí)，在正常使用左氧氟沙星治療時(shí)，同時(shí)根據(jù)患者的身體狀況，服用銀花泌炎靈片，一次2 8片，每日3 4次。
具體實(shí)施例方式下邊通過實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步說明本發(fā)明。I、材料與方法 I. I材料
I. I. I菌株來源銅綠假單胞菌ATCC27853保存于吉林大學(xué)病原生物學(xué)教研室。
I. I. 2 藥品:
銀花泌炎靈片(吉林華康藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)101215);左旋氧氟沙星(浙江杭康藥業(yè)有限公司，批號(hào)20110605)
I. I. 3器材
生物安全柜(BHC-1300 II A/B3, AIRTECH),紫外分光光度計(jì)(2800UV/VIS，UNIC),高速低溫離心機(jī)(D-37520，Kendro)。I. I. 4 試劑
營養(yǎng)瓊脂(北京雙旋微生物培養(yǎng)基制品廠批號(hào)20111202)，M-H肉湯培養(yǎng)基(北京雙旋微生物制品廠批號(hào)20111125)。I. 2實(shí)驗(yàn)方法
I. 2. I肉湯二倍稀釋法測(cè)定銀花泌炎靈片MIC
二倍肉湯稀釋法定量測(cè)定銅綠假單胞菌ATCC27853對(duì)銀花泌炎靈片的敏感性。M-H肉湯稀釋銀花泌炎靈片，將藥物稀釋為 400mg/ml、300mg/ml、200mg/ml、150mg/ml、100mg/ml、75mg/ml、50mg/ml，每毫升培養(yǎng)基中接入濃度為108CFU/ml銅綠假單胞菌500 μ I。放入細(xì)菌培養(yǎng)箱37°C培養(yǎng)18-24小時(shí)。因?yàn)橹兴帨啙?，難以測(cè)定其OD值，故取IOOul混合液涂布于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上，37°C培養(yǎng)18-24小時(shí)，第一個(gè)出現(xiàn)稀疏單菌落的平板即為MIC。I. 2. 2微量肉湯稀釋法測(cè)定左氧氟沙星MIC
微量肉湯稀釋法測(cè)定銅綠假單胞菌ATCC27853對(duì)左氧氟沙星的敏感性。在經(jīng)過滅菌處理的聚乙烯96孔板中稀釋左氧氟沙星，最高濃度為60ug/ml，倍比稀釋20個(gè)孔，每孔接入濃度為106cfu/ml菌液100 μ 1，放入孵箱培養(yǎng)18-24小時(shí)，最后一個(gè)肉眼可見澄清的孔即為MIC。I. 2. 2藥物連續(xù)傳代壓力誘導(dǎo)下的細(xì)菌耐藥性產(chǎn)生試驗(yàn)
分3組左氧氟沙星組、銀花泌炎靈片-左氧氟沙星聯(lián)合用藥組、空白對(duì)照組。左氧氟沙星組藥物濃度為O. 0075ug/ml ;聯(lián)合用藥組取兩種藥物MIC濃度；以不添加任何抗生素或中藥液的M-H肉湯培養(yǎng)基為空白對(duì)照。每12 h傳代I次，(首次細(xì)菌接入量為108cfu/ml)同時(shí)做菌落計(jì)數(shù)，公式參照Ν=3· 344X44/^0為傳代次數(shù)，N1為轉(zhuǎn)接細(xì)菌數(shù)，N2為培養(yǎng)12 h后的細(xì)菌數(shù))計(jì)算傳代倍數(shù)，培養(yǎng)至200代左右，傳代后接種在營養(yǎng)瓊脂上分離細(xì)菌。2 結(jié)果
銅綠假單胞菌ATCC27853經(jīng)藥物壓力下誘導(dǎo)耐藥實(shí)驗(yàn)結(jié)果
表I :左氧氟沙星對(duì)各組銅綠假單胞菌傳代前后的抑菌活性結(jié)果
權(quán)利要求
1.銀花泌炎靈片在制備逆轉(zhuǎn)抗生素壓カ下誘導(dǎo)銅綠假單胞菌耐藥性的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及銀花泌炎靈在制備逆轉(zhuǎn)銅綠假單胞菌耐藥性藥物中的應(yīng)用，屬于醫(yī)藥領(lǐng)域。銀花泌炎靈片在制備逆轉(zhuǎn)抗生素壓力下誘導(dǎo)銅綠假單胞菌耐藥性的藥物中的應(yīng)用。銀花泌炎靈片可逆轉(zhuǎn)抗生素壓力下細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生。
文檔編號(hào)A61K36/899GK102772690SQ20121027853
公開日2012年11月14日 申請(qǐng)日期2012年8月8日 優(yōu)先權(quán)日2012年8月8日
發(fā)明者劉傳貴, 張曉天, 張超, 王放, 王槐棟, 胡亞, 賽景影 申請(qǐng)人:吉林大學(xué)