專利名稱：一種甘草地上部分綜合開(kāi)發(fā)利用的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及從甘草的地上部分中提取甘草酸、甘草黃酮和甘草多糖的方法。
背景技術(shù)：
甘草，又名美草、蜜甘、甜根子，多生長(zhǎng)在我國(guó)西北、華北、東北地區(qū)，為多年生草本植物，甘草為豆科植物甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch)、脹果甘草(Glycyrrhizainflata Bat)或光果甘草(Glycyrrhiza glabra L)的干燥根及根莖。甘草在中藥方劑中有大量的應(yīng)用，素有“十藥九草”之說(shuō)。此外，甘草還大量用來(lái)提取甘草浸膏，以及用來(lái)生產(chǎn)復(fù)方甘草片、甘草酸鋅、甘草酸單銨鹽、甘草甜味劑等。近年來(lái)，由于甘草用量的急劇增加，甘草資源日趨貧乏，而人工栽培尚處于實(shí)驗(yàn)室階段，不能大面積推廣。在甘草的傳統(tǒng)使用中，取用的是其地下部分，而地上部分未加利用，文獻(xiàn)報(bào)道甘草地上部分也含有數(shù)量可觀的 甘草酸等成分，因此，也有很好的利用價(jià)值。如果能將甘草地上部分綜合開(kāi)發(fā)利用，能節(jié)省大批甘草資源，増加甘草資源的綜合利用率。文獻(xiàn)(邱春等，從甘草地上部分中提取甘草酸和合成甘草酸鋅，吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1994，16 :132-133)中采用HPLC測(cè)得甘草地上部分中甘草酸的平均含量為2. 11%，《中華人民共和國(guó)藥典》中規(guī)定甘草根中甘酸酸的含量為不低于2.0%。文獻(xiàn)(郭忠軍等，甘草地上部分黃酮研究概況，航空航天醫(yī)藥，2005，16 :62-64)綜述了甘草地上部分中黃酮的研究情況，井指出甘草地上部分的黃酮具有很好的開(kāi)發(fā)利用價(jià)值。因此，有必要對(duì)甘草的地上部分綜合開(kāi)發(fā)利用。對(duì)甘草地上部分的開(kāi)發(fā)利エ藝，文獻(xiàn)大多是對(duì)其中某ー類成分的研究報(bào)道，文獻(xiàn)(邱春等，從甘草地上部分中提取甘草酸和合成甘草酸鋅，吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1994,16 132-133)測(cè)定了甘草地上部分的甘草酸的含量，并對(duì)其提取方法進(jìn)行了研究，但未報(bào)道甘草黃酮類成分。王微(東北林業(yè)大學(xué)，2004年碩士論文)研究了烏拉爾甘草地上部分的化學(xué)成分，并測(cè)得甘草葉中黃酮的含量達(dá)2. 78%。為開(kāi)發(fā)利用地上部分中的甘草黃酮提供了依據(jù)。專利CN1544448A(苑可武，一種提取甘草地上部分總黃酮的方法)只公開(kāi)了甘草地上部分總黃酮的開(kāi)發(fā)利用方法，未報(bào)道甘草酸的利用。文獻(xiàn)(白虹等，栽培甘草地上部分化學(xué)成分研究，西北藥學(xué)雜志，2005，20 59-61)僅研究了甘草地上部分的化學(xué)成分，未對(duì)生產(chǎn)エ藝進(jìn)行研究。上述文獻(xiàn)雖然報(bào)道了較為詳細(xì)的方法，但僅是針對(duì)甘草地上部分的単一種類成分的開(kāi)發(fā)利用，缺少甘草地上部分的甘草酸、甘草黃酮和多糖的綜合開(kāi)發(fā)利用方案；未檢索到關(guān)于三種活性成分的綜合開(kāi)發(fā)利用方案的相關(guān)報(bào)道。此外，文獻(xiàn)中關(guān)于甘草開(kāi)發(fā)利用方法的報(bào)道，均是采用傳統(tǒng)的提取方法，如煎煮法、浸潰法、滲漉法、回流法等。這些方法存在提取溫度高、提高時(shí)間長(zhǎng)、效率低以及成本高等問(wèn)題。未檢索到采用超聲波提取法在甘草的綜合開(kāi)發(fā)利用中的應(yīng)用文獻(xiàn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供ー種甘草地上部分的綜合開(kāi)發(fā)利用方法，提供了一種用于分離甘草中甘草酸、甘草黃酮和總多糖的エ藝，該エ藝簡(jiǎn)單、成本低、回收率高，所得產(chǎn)品質(zhì)量高。本發(fā)明所用原料為甘草地上部分(包括莖、葉和花)，可以高效合理的利用甘草資源，具有很好的應(yīng)用價(jià)值。本發(fā)明所采用的提取方法為超聲波提取法，該方法是依據(jù)“空化作用”等原理，可使有效成分在提取介質(zhì)中快速達(dá)到濃度平衡，可同時(shí)將甘草酸、甘草黃酮和多糖類成分提取出來(lái)，并且大大縮短了提取時(shí)間，提高了產(chǎn)品質(zhì)量。本發(fā)明所采用的三種活性成分的分離方法為離子交換樹(shù)脂和大孔樹(shù)脂。本發(fā)明是通過(guò)以下步驟實(shí)現(xiàn)的
粉碎將甘草地上部分用粉碎機(jī)打成粗粉；
超聲提取將甘草粗粉加入超聲提取罐中，加入5-10倍量有機(jī)溶劑，在25-80°C超聲提取1-3次，每次30-60分鐘；
過(guò)濾將上述提取液過(guò)濾，合并多次提取液； 離子交換將濾液脫醇后通過(guò)陰離子交換樹(shù)脂，黃酮類物質(zhì)留在樹(shù)脂上，甘草酸隨尾液流出；
離子交換樹(shù)脂洗脫先用2-6倍量柱體積的去離子水洗脫，然后用80%的こ醇洗脫2-6倍量柱體積，醇洗脫液濃縮至干，得到甘草黃酮；
大孔樹(shù)脂吸附將離子交換樹(shù)脂的尾液上樣通過(guò)大孔樹(shù)脂，甘草酸吸附在樹(shù)脂上；大孔樹(shù)脂解吸附先用2-6倍量柱體積的去離子水洗脫，然后用80%的こ醇洗脫2-6倍量柱體積，醇洗脫液濃縮至干，得甘草酸；
多糖提取將醇提后的甘草濾渣再用5-10倍量去離子水超聲提取1-3次，毎次30-60分鐘；
將提取液過(guò)濾后進(jìn)行濃縮，至原體積的1/3-1/2，然后加入95%こ醇沉淀多糖，得粗多
糖；
將粗多糖經(jīng)過(guò)脫色、脫蛋白，得到高純度甘草多糖。由上述本發(fā)明提供的技術(shù)方案可以看出，本發(fā)明提供的甘草地上部分綜合開(kāi)發(fā)利用的方法，首先將甘草的地上部分粗粉，然后用醇溶液進(jìn)行超聲提取，醇提液經(jīng)脫醇后通過(guò)離子交換樹(shù)脂柱或聚酰胺樹(shù)脂柱吸附、醇洗，醇洗液濃縮得到甘草黃酮；尾液經(jīng)大孔吸附樹(shù)脂柱吸附，甲醇或こ醇解吸附，濃縮得到甘草酸。醇超聲提取后的甘草濾渣再次經(jīng)過(guò)水超聲提取，水提液經(jīng)過(guò)絮凝和濃縮，得到甘草多糖。整個(gè)過(guò)程エ藝簡(jiǎn)單、成本低、損失小、原料綜合利用率高，產(chǎn)品質(zhì)量高，無(wú)環(huán)境污染
具體實(shí)施方案實(shí)施例
下面將結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)ー步地詳細(xì)描述。
本發(fā)明的甘草地上部分綜合開(kāi)發(fā)利用的方法，其較佳的具體實(shí)施方式
包括以下步驟 粉碎將甘草的地上部分用粉碎機(jī)打成10-60目粗粉；
超聲提取將甘草粗粉加入超聲提取罐中，加入甘草粗粉質(zhì)量5-10倍的甲醇或こ醇溶液，在20-80°C下超聲提取1-3次，每次10-60分鐘；
過(guò)濾將上述超聲提取1-3次的提取液合并過(guò)濾，獲得濾液；
離子交換樹(shù)脂或聚酰胺樹(shù)脂柱吸附將上述濾液脫醇后通過(guò)離子交換樹(shù)脂柱或聚酰胺樹(shù)脂柱，黃酮類物質(zhì)留在樹(shù)脂柱上，甘草酸隨尾液流出；
離子交換樹(shù)脂柱或聚酰胺樹(shù)脂柱洗脫先用2-10倍樹(shù)脂柱體積量的去離子水洗脫，然后用2-10倍樹(shù)脂柱體積量的甲醇或こ醇溶液洗脫，將醇洗脫液濃縮至干，得到甘草總黃酮；
大孔吸附樹(shù)脂柱吸附將上述離子交換樹(shù)脂柱或聚酰胺樹(shù)脂柱吸附后的尾液及其水洗脫液通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂柱，甘草酸吸附在大孔吸附樹(shù)脂柱上；
大孔吸附樹(shù)脂柱解吸附先用2-10倍樹(shù)脂柱體積量的去離子水洗脫，然后用2-10倍樹(shù)脂柱體積量的甲醇或こ醇洗脫，將醇洗脫液濃縮至干，得到甘草酸；
多糖提取將上述超聲提取和過(guò)濾步驟中醇提后的甘草濾渣，加入甘草濾渣質(zhì)量5-10倍的去離子水，在20-80°C下超聲提取1-3次，毎次10-60分鐘，將提取液過(guò)濾后濃縮至原體 積的1/3-1/2，然后加入甲醇或こ醇溶液沉淀多糖，得甘草總多糖。
所述多糖提取步驟中，具體可以將提取液過(guò)濾后濃縮為原體積的1/2，然后加入5倍量95 %的甲醇或こ醇溶液，4°C下放置過(guò)夜，然后過(guò)濾得甘草總多糖沉淀。
所述甲醇或こ醇溶液可以為40-95 %的甲醇或こ醇溶液。
所述離子交換樹(shù)脂可以為弱堿或強(qiáng)堿性陰離子樹(shù)脂；
所述大孔吸附樹(shù)脂可以為AB-8、D101或HP20。
所述超聲提取可以為超聲波逆流循環(huán)提取。
所述甘草地上部分可以包括甘草的莖、葉、花。本發(fā)明所用原料為甘草地上部分(包括莖、葉和花)，可以高效合理的利用甘草資源，具有很好的應(yīng)用價(jià)值。本發(fā)明所采用的提取方法為超聲波提取法，該方法是依據(jù)“空化作用”等原理，可使有效成分在提取介質(zhì)中快速達(dá)到濃度平衡，可同時(shí)將甘草酸、黃酮類和多糖類成分提取出來(lái)，并且大大縮短了提取時(shí)間，提高了產(chǎn)品質(zhì)量。本發(fā)明所采用的三種活性成分的分離方法為離子交換樹(shù)脂或聚酰胺樹(shù)脂和大孔吸附樹(shù)脂。本發(fā)明對(duì)甘草的地上部分綜合開(kāi)發(fā)利用，用于分離甘草中酸、總黃酮和總多糖，該エ藝簡(jiǎn)單、成本低、回收率高，所得廣品質(zhì)量尚。具體實(shí)施例一
將甘草地上部分用粉碎機(jī)粗粉至40目，然后稱取500g，加入3L 60%的こ醇，20°C超聲提取I小時(shí)，重復(fù)提取一次，合并兩次濾液。將濾液在60°C縮濃至無(wú)醇味。
將濃縮液過(guò)D241離子交換樹(shù)脂柱，甘草黃酮類化合物吸附在樹(shù)脂柱上，甘草酸在水洗液當(dāng)中。先用3倍量柱體積的去離子水洗脫樹(shù)脂柱，然后用6倍量80%的こ醇洗脫。こ醇洗脫液濃縮至干，得到甘草總黃酮。
將離子交換樹(shù)脂柱的尾液過(guò)AB-8大孔吸附樹(shù)脂柱，甘草酸吸附在樹(shù)脂柱上。待樹(shù)脂柱達(dá)到吸附飽合后，先用4倍量柱體積的去離子水洗脫，接著用80%的こ醇洗脫。將こ醇洗脫液濃縮至干，得到甘草酸。
甘草地上部分醇提后的殘?jiān)儆?倍量的水在20°C下超聲提取兩次，毎次I小吋。將提取液過(guò)濾后濃縮為原體積的1/2,然后加入5倍量95%的こ醇溶液,4°C下放置過(guò)夜,然后過(guò)濾得甘草總多糖沉淀。具體實(shí)施例ニ
將甘草地上部分用粉碎機(jī)粗粉至10目，然后稱取500g，加入3L 40%的こ醇，80°C超聲提取30分鐘，重復(fù)提取一次，合并兩次濾液。將濾液在60°C濃縮至無(wú)醇味。
將濃縮液加入到經(jīng)過(guò)處理的聚酰胺柱上，先用4倍量柱體積的去離子水洗脫，再用6倍量75%的こ醇洗脫。こ醇洗脫液濃縮至干，得到甘草總黃酮。
將水洗部分過(guò)AB-8大孔吸附樹(shù)脂柱，甘草酸吸附在樹(shù)脂柱上。待樹(shù)脂柱達(dá)到吸附飽合后，先用4倍量柱體積的去離子水洗脫，接著用75%的こ醇洗脫。將こ醇洗脫液濃縮至干，得到甘草酸。
甘草地上部分醇提后的殘?jiān)儆?倍量的水在80°C下超聲提取兩次，毎次30分鐘。將提取液過(guò)濾后濃縮為原體積的1/2,然后加入5倍量95%的こ醇溶液,4°C下放置過(guò)夜,然后過(guò)濾得甘草總多糖沉淀。具體實(shí)施例三
將甘草地上部分用粉碎機(jī)進(jìn)行粗粉至60目，然后稱取400g，加入2L 70%的甲醇，30°C 超聲循環(huán)提取I小時(shí)，重復(fù)提取一次，合并兩次濾液。將濾液在60°C縮濃至無(wú)醇味。
將濃縮液過(guò)D241離子交換樹(shù)脂柱，甘草黃酮類化合物吸附在樹(shù)脂柱上，酸在水洗液當(dāng)中。先用3倍量柱體積的去離子水洗脫樹(shù)脂柱，然后用6倍量80%的甲醇洗脫。甲醇洗脫液濃縮至干，得到甘草總黃酮。
將離子交換樹(shù)脂柱的尾液過(guò)AB-8大孔吸附樹(shù)脂柱，甘草酸吸附在樹(shù)脂柱上。待樹(shù)脂柱達(dá)到吸附飽合后，先用4倍量柱體積的去離子水洗脫，接著用80%的甲醇洗脫。將甲醇洗脫液濃縮至干，得到甘草酸。
甘草地上部分醇提后的殘?jiān)儆?倍量的水在30°C下超聲提取兩次，毎次I小吋。將提取液過(guò)濾后濃縮為原體積的1/2,然后加入5倍量95%的こ醇溶液,4°C下放置過(guò)夜,然后過(guò)濾得甘草總多糖沉淀。具體實(shí)施例四
將甘草地上部分用粉碎機(jī)進(jìn)行粗粉至20目，然后稱取500g，加入3L 40%的甲醇，45°C超聲循環(huán)提取50分鐘，重復(fù)提取一次，合并兩次濾液。將濾液在60°C濃縮至無(wú)醇味。
將濃縮液加入到經(jīng)過(guò)處理的聚酰胺柱上，先用4倍量柱體積的去離子水洗脫，再用6倍量75%的甲醇洗脫。こ醇洗脫液濃縮至干，得到甘草總黃酮。
將水洗部分過(guò)AB-8大孔吸附樹(shù)脂柱，甘草酸吸附在樹(shù)脂柱上。待樹(shù)脂柱達(dá)到吸附飽合后，先用4倍量柱體積的去離子水洗脫，接著用75%的甲醇洗脫。將甲醇洗脫液濃縮至干，得到甘草酸。
甘草地上部分醇提后的殘?jiān)儆?倍量的水在45°C下超聲提取兩次，毎次I小吋。將提取液過(guò)濾后濃縮為原體積的1/2,然后加入5倍量95%的甲醇溶液,4°C下放置過(guò)夜,然后過(guò)濾得甘草總多糖沉淀。具體實(shí)施例五
將甘草地上部分用粉碎機(jī)進(jìn)行粗粉至30目，然后稱取500g，加入4L 90%的こ醇，60°C超聲循環(huán)提取45分鐘，重復(fù)提取一次，合并兩次濾液。將濾液在60°C縮濃至無(wú)醇味。
將濃縮液過(guò)D301離子交換樹(shù)脂柱，甘草黃酮類化合物吸附在樹(shù)脂柱上，酸在水洗液當(dāng)中。先用3倍量柱體積的去離子水洗脫樹(shù)脂柱，然后用6倍量80%的こ醇洗脫。こ醇洗脫液濃縮至干，得到甘草總黃酮。
將離子交換樹(shù)脂柱的尾液過(guò)HP20大孔吸附樹(shù)脂柱，甘草酸吸附在樹(shù)脂柱上。待樹(shù)脂柱達(dá)到吸附飽合后，先用4倍量柱體積的去離子水洗脫，接著用80%的こ醇洗脫。將こ醇洗脫液濃縮至干，得到甘草酸。
甘草地上部分醇提后的殘?jiān)儆?倍量的水在80°C下超聲提取兩次，毎次20分鐘。將提取液過(guò)濾后濃縮為原體積的1/3,然后加入5倍量95%的こ醇溶液,4°C下放置過(guò)夜,然后過(guò)濾得甘草總多糖沉淀。具體實(shí)施例六
將甘草地上部分用粉碎機(jī)進(jìn)行粗粉至10目，然后稱取500g，加入5L 50%的こ醇，70°C超聲循環(huán)提取40分鐘，重復(fù)提取一次，合并兩次濾液。將濾液在60°C濃縮至無(wú)醇味。
將濃縮液加入到經(jīng)過(guò)處理的聚酰胺柱上，先用4倍量柱體積的去離子水洗脫，再用6倍量78%的こ醇洗脫。こ醇洗脫液濃縮至干，得到甘草總黃酮。
將水洗部分過(guò)DlOl大孔吸附樹(shù)脂柱，甘草酸吸附在樹(shù)脂柱上。待樹(shù)脂柱達(dá)到吸附飽合后，先用4倍量柱體積的去離子水洗脫，接著用78%的こ醇洗脫。將こ醇洗脫液濃縮至干，得到甘草酸。
甘草地上部分醇提后的殘?jiān)儆?倍量的水在80°C下超聲提取兩次，毎次10分鐘。將提取液過(guò)濾后濃縮為原體積的1/3,然后加入5倍量95%的こ醇溶液,4°C下放置過(guò)夜,然后過(guò)濾得甘草總多糖沉淀。以上所述，僅為本發(fā)明較佳的具體實(shí)施方式
，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此，任何熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明披露的技術(shù)范圍內(nèi)，可輕易想到的變化或替換，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。因此，本發(fā)明的保護(hù)范圍應(yīng)該以權(quán)利要求書(shū)的保護(hù)范圍為準(zhǔn)。
權(quán)利要求
1.一種甘草地上部分綜合開(kāi)發(fā)利用的方法，其特征在于它包括以下步驟 (1)甘草莖或葉用粉碎機(jī)打?yàn)榇址酆螅尤胍掖既芤?，采用超聲波逆流循環(huán)提取。提取溫度為30-80°C，提取時(shí)間為I小時(shí)，物料比為I : 5-1 10; (2)將上述提取液濃縮脫醇，然后采用板框過(guò)濾； (3)將濾液首先通過(guò)離子交換樹(shù)脂，黃酮類化合物留在樹(shù)脂上，其他化合物則留在尾液中。
(4)用醇溶液洗脫離子交換樹(shù)脂，洗脫液濃縮至干，即為甘草總黃酮； (5)將離子交換樹(shù)脂的尾液通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂，水洗后用乙醇解吸附，解吸液真空濃縮至干，得甘草酸粗品； (6)經(jīng)過(guò)乙醇提取后的濾渣再用水超聲提取，提取溫度為30-80°C，提取時(shí)間為I小時(shí)，物料比為I : 5-1 : 10 ; (7)水提液濃縮為原體積的1/2，然后加入4倍量95%的乙醇，4°C放置過(guò)夜，然后過(guò)濾得甘草多糖沉淀。
2.按權(quán)利要求I所述，一種甘草地上部分綜合開(kāi)發(fā)利用的方法，其特征在于用40-95%的乙醇溶液進(jìn)行超聲波逆流循環(huán)提取。
3.按權(quán)利要求I所述，一種甘草地上部分綜合開(kāi)發(fā)利用的方法，其特征在于采用離子交換樹(shù)脂首先將甘草酸和甘草黃酮分離開(kāi)，洗脫液為40-95%的乙醇。
4.按權(quán)利要求I所述，一種甘草地上部分綜合開(kāi)發(fā)利用的方法，其特征在于大孔樹(shù)脂的解析液為40-95%的乙醇。
5.按權(quán)利要求I所述，一種甘草地上部分綜合開(kāi)發(fā)利用的方法，其特征在于從提取完甘草酸和甘草黃酮的濾渣中用水提取甘草多糖。
6.按權(quán)利要求I所述，一種甘草地上部分綜合開(kāi)發(fā)利用的方法，其特征在于所用的離子交換樹(shù)脂為弱堿或強(qiáng)堿性陰離子樹(shù)脂。
7.按權(quán)利要求I所述，一種甘草地上部分綜合開(kāi)發(fā)利用的方法，其特征在于所用的大孔吸附樹(shù)脂為AB-8、DlOl或HP20。
8.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種甘草地上部分綜合開(kāi)發(fā)利用的方法，其特征在于，所述超聲提取為超聲逆流波循環(huán)提取。
9.根據(jù)權(quán)利要求I至6任一項(xiàng)所述的一種甘草地上部分綜合開(kāi)發(fā)利用的方法，其特征在于，所述甘草地上部分包括甘草的莖、葉、花。
全文摘要
一種甘草地上部分綜合開(kāi)發(fā)利用的方法。本發(fā)明涉及中草藥有效成分的提取分離，特別是從甘草地上部分中提取分離甘草酸、甘草黃酮和甘草多糖的方法。首先將甘草的地上部分粗粉，然后分別用醇溶液和水采用超聲循環(huán)提取，醇提液經(jīng)脫醇后過(guò)通過(guò)離子交換樹(shù)脂和大孔樹(shù)脂將酸和總黃酮吸附和分離開(kāi)，水提液經(jīng)過(guò)絮凝、脫蛋白和脫色等步驟，得到甘草多糖。整個(gè)過(guò)程工藝簡(jiǎn)單、成本低、損失小、原料綜合利用率高，產(chǎn)品質(zhì)量高，無(wú)環(huán)境污染。
文檔編號(hào)A61K36/484GK102836202SQ20121034568
公開(kāi)日2012年12月26日 申請(qǐng)日期2012年9月18日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月18日
發(fā)明者波拉提·馬卡比力, 黎虎 申請(qǐng)人:波拉提·馬卡比力, 黎虎, 新疆鵬弘生物科技有限公司