專利名稱：一種蟾酥脂溶性提取物干粉吸入劑及其制備方法、應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及干粉吸入劑，具體的說(shuō)是蟾酥脂溶性提取物制成的干粉吸入劑、所述干粉吸入劑的制備方法和在制備治療肺部腫瘤藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
蟾酥為蟾餘科(Bufonidae)動(dòng)物中華大蟾餘Bufobufo gargarizans Cantor的表皮腺體的分泌物，具有解毒、鎮(zhèn)痛、開(kāi)竅、抗腫瘤等多種功效，用于中、晚期腫瘤、慢性乙型肝炎等癥。蟾酥中具有抗腫瘤作用的主要是蟾蜍毒素類(bufotoxins)及其水解產(chǎn)物蟾毒配基類(bufageins)、蟾毒色胺類(bufoteinines)等。目前含蟾酥提取物的口服液、片劑已應(yīng)用于臨床，對(duì)肝癌、肺癌、胃癌等具有較好的療效，且對(duì)化療和放療具有協(xié)同作用。雖然蟾酥脂溶性提取物的抗腫瘤效果較好，但毒性較大，口服后可能會(huì)引起較大的全身性毒副反應(yīng)。將蟾酥脂溶性提取物制成吸入劑后，藥物將直接作用于病患部位，會(huì)極大地降低因口服而產(chǎn)生的全身性毒副作用。

肺具有極大的表面積，藥物分子極易進(jìn)入血液，肺吸入給藥具有起效快、局部藥物濃度高及不良反應(yīng)小等諸多優(yōu)點(diǎn)。肺吸入給藥中干粉吸入劑(drypowder inhalers,DPIs)不使用拋射劑和溶劑，靠患者自主呼吸產(chǎn)生的氣流使藥物粉末霧化，進(jìn)而使藥物粉末傳遞到肺部，具有靶向、高效、速效、毒副作用小及應(yīng)用方便等特點(diǎn)，是一種新型的給藥系統(tǒng)。采用定位給藥將抗腫瘤藥物運(yùn)送到人體的腫瘤病患部位，可提高藥物在病患部位的濃度，對(duì)降低藥物的毒副作用、提高藥物的治療效果，具有重大的臨床應(yīng)用價(jià)值。采用經(jīng)肺給藥方式的吸入劑可將蟾酥脂溶性提取物直接傳遞至肺癌的病灶，有利于提高蟾酥脂溶性提取物對(duì)肺癌的療效并降低其對(duì)正常組織的毒副作用。肺癌的發(fā)病率在全世界范圍內(nèi)正在迅速上升，已經(jīng)成為癌癥死因的第一位。急需將干粉吸入劑這種可以直接將藥物送達(dá)至肺癌病灶的劑型用于肺癌的治療。目前具有抗肺部腫瘤作用的蟾酥脂溶性提取物干粉吸入劑的研究未見(jiàn)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
發(fā)明目的:本發(fā)明的一個(gè)目的是提供蟾酥脂溶性提取物的肺部干粉吸入制劑及其制備方法。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供本發(fā)明所述干粉吸入劑在制備治療肺部腫瘤藥物中的應(yīng)用。針對(duì)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案:
一種蟾酥脂溶性提取物干粉吸入劑，其特征在于它是由蟾酥脂溶性提取物與醫(yī)學(xué)上可接受的輔料組成，蟾酥脂溶性提取物(按照干燥后所得固體物質(zhì)量)與所述的輔料的質(zhì)量比為 1:0-1:100。所述的一種蟾酥脂溶性提取物干粉吸入劑，是由蟾酥脂溶性提取物加入輔料制成的粉末，粉末團(tuán)聚形成可再分散顆粒；或者是蟾酥脂溶性提取物負(fù)載在輔料顆粒表面形成顆粒；上述兩種顆粒的粒徑以D5tl計(jì)在0.5-1000微米之間。所述的蟾酥脂溶性提取物，為蟾蜍科動(dòng)物中華大蟾蜍或黑眶蟾蜍等的蟾酥經(jīng)提取純化制得的提取物。蟾酥脂溶性提取物的制備方法為:
取蟾酥I份，加2-100倍量乙醇(60%-100%，W/W)，回流或者超聲或者微波或者浸提或者滲漉提取1-10次，每次0.1-48小時(shí)，合并提取液，濾過(guò)，回收乙醇，減壓濃縮，經(jīng)噴霧干燥、冷凍干燥、或真空干燥后得到蟾酥脂溶性提取物。所述的輔料選用糖、醇、氨基酸、磷脂、表面活性物質(zhì)、環(huán)糊精、高分子物質(zhì)、硬脂酸鎂、硬脂酸、硬酯富馬酸鈉、微粉硅膠、滑石粉中的一種或幾種混合物。所述的糖，可選用半乳糖、乳糖、葡萄糖、果糖、蔗糖、海藻糖、棉子糖中的一種或幾種混合物；所述的醇，可選用甘露醇、木糖醇、麥芽糖醇、山梨醇中的一種或幾種混合物；所述的氨基酸，可選用甘氨酸、門冬氨酸、丙氨酸、色氨酸、異亮氨酸、蘇氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、胱氨酸、賴氨酸、脯氨酸、精氨酸中的一種或幾種；所述的磷脂，可選用大豆磷月旨、卵磷脂、磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、合成磷脂中的一種或幾種；所述的表面活性物質(zhì)，可選用肺源性表面活性物質(zhì)如二棕櫚酰磷脂酰膽堿、二月桂酰磷脂酰膽堿、膽固醇中的一種或幾種混合物；所述的高分子物質(zhì)，可選用符合安全要求的高分子，優(yōu)選可生物降解的高分子物質(zhì)例如白蛋白、淀粉、聚乳酸、聚乳酸-羥基乙酸、聚乙二醇、泊洛沙姆、透明質(zhì)酸、透明質(zhì)酸鈉、海藻酸鈉中的一種或幾種混合物。優(yōu)選的方式為所述輔料為吸入用乳糖顆粒平均粒徑為50-225微米，微粉化乳糖平均粒徑為1-10微米或其混合物，其中乳糖顆粒與微粉化乳糖的質(zhì)量比為1100:1-1:1。最優(yōu)選的方式為乳糖顆粒與 微粉化乳糖的質(zhì)量比為105:1-10:1。一種制備蟾酥脂溶性提取物干粉吸入劑的方法，其制備步驟如下:
將蟾酥脂溶性提取物通過(guò)粉碎或噴霧干燥制成粉末，包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)；將蟾酥脂溶性提取物通過(guò)粉碎或噴霧干燥制成粉末，粉末與輔料混合均勻制成吸入用粉末，包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)；或者將蟾酥脂溶性提取物與輔料混合均勻，通過(guò)粉碎或噴霧干燥制成吸入用粉末，包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)；或者將蟾酥脂溶性提取物和處方中部分輔料混合均勻，通過(guò)粉碎或噴霧干燥制成粉末，粉末與處方中剩余輔料混合均勻制成吸入用粉末，包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)。一種制備蟾酥脂溶性提取物干粉吸入劑的方法，其制備步驟如下:
將蟾酥脂溶性提取物通過(guò)粉碎或噴霧干燥制成粉末，粉末與輔料混合均勻，團(tuán)聚形成可再分散顆粒，包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)；或者將蟾酥脂溶性提取物與輔料混合均勻，通過(guò)粉碎或噴霧干燥制成粉末，團(tuán)聚形成可再分散顆粒，包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)；或者將蟾酥脂溶性提取物和處方中部分輔料混合均勻，通過(guò)粉碎或噴霧干燥制成粉末，粉末與處方中剩余輔料混合均勻，團(tuán)聚形成可再分散顆粒，包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)；或者將蟾酥脂溶性提取物通過(guò)粉碎或噴霧干燥制成粉末，粉末負(fù)載在輔料顆粒表面形成顆粒，包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)。一種蟾酥脂溶性提取物干粉吸入劑在制備肺部腫瘤藥物中的應(yīng)用。
有益效果:
1、肺具有極大的表面積及豐富的血管，使得藥物分子極易進(jìn)入血液，因此肺吸入給藥具有起效快、局部藥物濃度高及不良反應(yīng)小等諸多優(yōu)點(diǎn)。肺吸入給藥中干粉吸入劑(drypowder inhalers, DPIs)不使用拋射劑和溶劑,靠患者自主呼吸產(chǎn)生的氣流使藥物粉末霧化，進(jìn)而使藥物粉末傳遞到肺部，具有靶向、高效、速效、毒副作用小及應(yīng)用方便等特點(diǎn)，是一種新型的給藥系統(tǒng)。目前有關(guān)于干粉吸入劑多用于治療呼吸道和肺部的感染，但未見(jiàn)用于肺部腫瘤的治療。同時(shí)，具有抗肺部腫瘤作用的同類制劑的研究也未見(jiàn)報(bào)道。目前含蟾酥提取物的口服液、片劑已應(yīng)用于臨床，對(duì)肝癌、肺癌、胃癌等具有較好的療效，且對(duì)化療和放療具有協(xié)同作用。雖然蟾酥脂溶性提取物的抗腫瘤效果較好，但毒性較大，口服后可能會(huì)引起較大的毒副反應(yīng)。使用蟾酥脂溶性提取物的干粉吸入劑主要是針對(duì)肺部腫瘤，直接作用于肺部病灶，提高病灶部位的藥物濃度，不存在肝臟首過(guò)效應(yīng)，并且能夠降低藥物的毒副作用，對(duì)新藥開(kāi)發(fā)具有極大的前景。2、蟾酥脂溶性提取物是混合物，為了使其達(dá)到干粉吸入劑的粒度要求，需要進(jìn)行粉碎。實(shí)際操作中發(fā)現(xiàn)，加入一定配比的特定輔料可以克服提取物因粉碎到一定粒度時(shí)而產(chǎn)生的靜電作用、內(nèi)聚力等引起的團(tuán)聚，減小吸濕性。申請(qǐng)人經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)獲知，特別是輔料選用乳糖顆粒與微粉化乳糖的混合物或者采用粉末團(tuán)聚技術(shù)可以做成吸入性能優(yōu)良的干粉吸入劑。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明，但本發(fā)明的范圍并不受這些實(shí)例的任何限制。實(shí)施例1
1、蟾酥脂溶性提取物的制備:取蟾酥洗凈，加10倍量95% (W/W)乙醇，回流2次，每次1.5小時(shí)，過(guò)濾后合并濾液 ，回收乙醇，濃縮至稠膏，60°C干燥，得到蟾酥脂溶性提取物。2、吸入劑的制備:將蟾酥脂溶性提取物采用氣流粉碎至D5tl在6微米以下，與粒徑50-80微米的乳糖按質(zhì)量比1:12進(jìn)行混合，將藥物粉末包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)，獲得吸入劑。
實(shí)施例2
1、蟾酥脂溶性提取物的制備:取蟾酥洗凈，加12倍量95%(W/W)乙醇，回流2次，每次2小時(shí)，合并提取液并濾過(guò)，濃縮濾液后進(jìn)行噴霧干燥，得到蟾酥脂溶性提取物粉末，粉末Dki在5微米以下。2、吸入劑的制備:將蟾酥脂溶性提取物粉末、粒徑在80-125微米的乳糖、粒徑在30-50微米的亮氨酸按質(zhì)量比9:100:1的比例進(jìn)行混合，包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)，獲得吸入劑。
實(shí)施例3
1、蟾酥脂溶性提取物的制備:取蟾酥洗凈，加30倍量70% (W/W)乙醇，微波輔助提取3次，每次I小時(shí)，合并提取液并濾過(guò)，濃縮濾液后進(jìn)行噴霧干燥，得到蟾酥脂溶性提取物粉末，粉末D5tl在5微米以下。2、吸入劑的制備:將蟾酥脂溶性提取物粉末包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)，獲得吸入劑。
實(shí)施例4
1、蟾酥脂溶性提取物的制備:取蟾酥洗凈，加12倍量85%(W/W)的乙醇，回流提取2次，每次2小時(shí)，合并提取液，低溫冷藏48小時(shí)，濾過(guò)，濃縮濾液后進(jìn)行噴霧干燥，得到蟾酥脂溶性提取物粉末。2、吸入劑的制備:將蟾酥脂溶性提取物粉末、乳糖、甘露醇、甘氨酸、二月桂酰磷脂酰膽堿、卵磷脂、硬脂酸鎂按質(zhì)量比1:5:4:2:0.5:0.5:0.1的比例進(jìn)行混合，氣流粉碎至粉末D5tl在8微米以下，將藥物粉末包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)，獲得吸入劑。
實(shí)施例5
1、蟾酥脂溶性提取物的制備:取蟾酥洗凈，加20倍量60%(W/W)的乙醇，回流提取2次，每次I小時(shí)，合并提取液，濾過(guò)，濾液回收乙醇，濃縮至稠膏，冷凍干燥得到蟾酥脂溶性提取物。2、吸入劑的制備:將蟾酥脂溶性提取物、乳糖、膽固醇按1:7:1的比例進(jìn)行混合，氣流粉碎至粉末D5tl在5微米以下，將藥物粉末包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)，獲得吸入劑。
實(shí)施例6
1、蟾酥脂溶性提取物的制備:取蟾酥洗凈，加10倍量的無(wú)水乙醇，回流提取3次，每次I小時(shí)，合并提取液并濾過(guò)，回收乙醇，回收液進(jìn)行噴霧干燥，得到蟾酥脂溶性提取物。2、吸入劑的制備:分別將上`述蟾酥脂溶性提取物中所含固形物質(zhì)量5倍、I倍、2倍的乳糖、聚乙二醇6000、白蛋白加入蟾酥脂溶性提取物中，噴霧干燥，粉末D5tl在6微米以下，將藥物粉末包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)，獲得吸入劑。
實(shí)施例7
1、蟾酥脂溶性提取物的制備:取蟾酥洗凈，加15倍量的95% (W/W)的乙醇，滲漉提取2次，每次10小時(shí)，合并提取液，回收乙醇，噴霧干燥，得到蟾酥脂溶性提取物，粉末D5tl在6微米以下。2、吸入劑的制備:將蟾酥脂溶性提取物藥物粉末、粒徑在30-95微米的甘露醇、微粉化硅膠按質(zhì)量比10:88:2的比例進(jìn)行混合，混合均勻后包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)，獲得吸入劑。
實(shí)施例8
1、蟾酥脂溶性提取物的制備:取蟾酥洗凈，加8倍量的95% (W/W)的乙醇，超聲提取2次，每次I小時(shí)，合并提取液，回收乙醇至無(wú)醇味，冷凍干燥，得到蟾酥脂溶性提取物粉末。2、吸入劑的制備:將蟾酥脂溶性提取物藥物粉末、甘露醇、亮氨酸按質(zhì)量比10:100:4的比例進(jìn)行混合，混合后加水適量，噴霧干燥得到D5tl為4.9微米的粉末，用有聚合物內(nèi)襯的旋轉(zhuǎn)混合機(jī)混合，制成疏松的團(tuán)聚物，團(tuán)聚物的D5tl為312微米，包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)，獲得吸入劑。
實(shí)施例9
1、蟾酥脂溶性提取物的制備:取蟾酥洗凈，加10倍量的85% (W/W)的乙醇，回流提取3次，每次0.5小時(shí)，合并提取液，濾過(guò)并濃縮，濃縮液進(jìn)行噴霧干燥，粉末D5tl在5微米以下。2、吸入劑的制備:將蟾酥脂溶性提取物粉末、甘露醇、亮氨酸按質(zhì)量比9:80:2的比例進(jìn)行混合，用有聚合物內(nèi)襯的旋轉(zhuǎn)混合機(jī)混合，制成疏松的團(tuán)聚物，團(tuán)聚物的D5tl為122微米，包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)，獲得吸入劑。
實(shí)施例10
1、蟾酥脂溶性提取物的制備:取蟾酥洗凈，加20倍量95% (W/W)乙醇，回流提取2次，每次2小時(shí)，合并濾液，冷卻至40°C，濾過(guò)，回收乙醇并濃縮，濃縮液進(jìn)行噴霧干燥，粉末Dki在5微米以下。2、吸入劑的制備:將蟾酥脂溶性提取物粉末、德國(guó)美劑樂(lè)InhaLac 70乳糖、微粉化乳糖(D5Q=5.2微米)按質(zhì)量比4:90:6的比例進(jìn)行混合，混合均勻后包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)，獲得吸入劑。3、吸入劑肺部沉積率考察
按照中華人民共和國(guó)2010年版藥典規(guī)定方法考察，以制劑中華蟾酥毒基的含量計(jì)，其肺部沉積率達(dá)到22.3%，室溫條件下放置18個(gè)月后，制劑中華蟾酥毒基的肺部沉積率沒(méi)有顯著變化。實(shí)施例11
1、蟾酥脂溶性提取物的制備:取蟾酥洗凈，加20倍量90% (W/W)乙醇，回流提取2次，每次2小時(shí)，合并濾液，冷卻至40°C，濾過(guò)，回收乙醇并濃縮，濃縮液進(jìn)行噴霧干燥，粉末Dki在5微米以下。2、吸入劑的制備:將蟾酥脂溶性提取物粉末、德國(guó)美劑樂(lè)InhaLac 70乳糖、微粉化乳糖(D5CI=4.6微米)按質(zhì)量比6:95:1的比例進(jìn)行混合，混合均勻后包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)，獲得吸入劑。3、吸入劑肺部沉積率考察
按照中華人民共和國(guó)2010年版藥典規(guī)定方法考察，以制劑中華蟾酥毒基的含量計(jì)，其肺部沉積率達(dá)到20.1%，室溫條件下放置18個(gè)月后，制劑中華蟾酥毒基的肺部沉積率沒(méi)有顯著變化。實(shí)施例12
1、蟾酥脂溶性提取物的制備:取蟾酥洗凈，加20倍量85% (W/W)乙醇，回流提取2次，每次2小時(shí)，合并濾液，冷卻至40°C，濾過(guò)，回收乙醇并濃縮，濃縮液進(jìn)行噴霧干燥，粉末Dki在5微米以下。2、吸入劑的制備:將蟾酥脂溶性提取物粉末、德國(guó)美劑樂(lè)InhaLac 70乳糖、微粉化乳糖(D5CI=5.5微米)按質(zhì)量比3:92:2的比例進(jìn)行混合，混合均勻后包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)，獲得吸入劑。3、吸入劑肺部沉積率考察
按照中華人民共和國(guó)2010年版藥典規(guī)定方法考察，以制劑中華蟾酥毒基的含量計(jì)，其肺部沉積率達(dá)到19.6%，室溫條件下放置18個(gè)月后，制劑中華蟾酥毒基的肺部沉積率沒(méi)有顯著變化。實(shí)施例13
1、蟾酥脂溶性提取物的制備:取蟾酥洗凈， 加10倍量90% (W/W)乙醇，回流提取2次，每次I小時(shí)，合并濾液，濾過(guò)，回收乙醇并濃縮，濃縮液進(jìn)行噴霧干燥，粉末D5tl在5微米以下。
2、吸入劑的制備:將蟾酥脂溶性提取物粉末、亮氨酸按1:5的比例進(jìn)行混合，混合后顆粒的D5tl為205微米，包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)，獲得吸入劑。
實(shí)施例14
1、蟾酥脂溶性提取物的制備:取蟾酥洗凈，加6倍量95% (W/W)乙醇，回流提取5次，每次I小時(shí)，合并濾液，濾過(guò)，回收乙醇至無(wú)醇味，減壓濃縮，真空干燥得到蟾酥脂溶性提取物。2、吸入劑的制備:將蟾酥脂溶性提取物與亮氨酸按1:1的比例進(jìn)行混合，氣流粉碎，粉末D5tl在5微米以下，將該粉末再與10倍量的甘露醇混合，混合后顆粒的D5tl為199微米，包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)，獲得吸入劑。
實(shí)施例15
1、蟾酥脂溶性提取物的制備:取蟾酥洗凈，加30倍量90% (W/W)乙醇，回流提取I小時(shí)，提取液濾過(guò)，回收乙醇至無(wú)醇味，減壓濃縮，真空干燥得到蟾酥脂溶性提取物。2、吸入劑的制備:將蟾酥脂溶性提取物與泊洛沙姆按質(zhì)量比10:1的比例進(jìn)行混合，氣流粉碎，粉末D5tl在5微米以下，將該粉末再與9倍量的乳糖顆粒、I倍量的硬脂酸鎂混合，混合后顆粒的D5tl為157微米，包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)，獲得吸入劑。
實(shí)施例16
1、蟾酥脂溶性提取物的制備:取蟾酥洗凈，加10倍量95% (W/W)乙醇，回流提取3次，每次I小時(shí)，提取液濾過(guò)，回收乙醇至無(wú)醇味，減壓濃縮，真空干燥得到蟾酥脂溶性提取物。2、吸入劑的制備:將蟾酥脂溶性提取物氣流粉碎，粉末D5tl在5微米以下，將該粉末再與22倍量的乳糖顆 粒混合，混合后顆粒的D5tl為236微米，包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)，獲得吸入劑。
實(shí)施例17
按照實(shí)施例1-16獲得吸入劑，進(jìn)行藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)。藥效實(shí)驗(yàn):
苯并芘經(jīng)皮穿刺肺內(nèi)注射的方法建立大鼠肺腫瘤動(dòng)物模型，取建模大鼠180只，隨機(jī)分為18組，每組10只。每天I次，用藥7天。給藥方式:第1-16組為實(shí)施例1-16獲得的吸入劑吸入給藥，給藥劑量為3mg生藥/kg ;第17組灌胃給予蟾酥脂溶性提取物，給藥劑量為3mg生藥/kg ;第18組為含有0.5%羧甲基纖維素鈉的生理鹽水對(duì)照組，腹腔注射IOmL/kg。停藥次日處死大鼠，解剖大鼠肺臟，觀察肺臟病變情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果:吸入劑給藥各組的大鼠的肺部出現(xiàn)腫塊或結(jié)節(jié)病變的發(fā)生率最低為20%，最高為39% ;蟾酥脂溶性提取物灌胃組為58%，生理鹽水組為100%，吸入劑給藥各組與蟾酥脂溶性提取物灌胃組、生理鹽水組在肺部病變發(fā)生率上有顯著性差異(P〈0.05 )。實(shí)施例18
按照實(shí)施例1-16獲得吸入劑，進(jìn)行藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)。1、家兔VX2原位肺癌模型的建立
I)荷瘤種兔的制作常規(guī)復(fù)蘇VX2腫瘤冰凍細(xì)胞懸液，制成106/mL的活細(xì)胞懸液，取ImL接種于I只兔右后腿外側(cè)肌肉內(nèi)，3周后于接種部位可捫及一直徑約30cm的腫塊，即制成荷瘤種兔。2)組織塊懸液的制備無(wú)菌條件下切取荷瘤種兔腿外側(cè)肌肉內(nèi)的腫瘤，取呈魚肉樣生長(zhǎng)旺盛的腫瘤組織，剪成泥狀。RPMI 1640培養(yǎng)液沖洗下過(guò)30目篩，去除單個(gè)細(xì)胞和過(guò)小的組織塊，篩上部分在RPMI 1640培養(yǎng)液沖洗下過(guò)20目篩，去除過(guò)大的組織塊。取篩下部分，離心沉淀后，取沉淀物2mL，加RPMI 1640培養(yǎng)液配制成組織塊懸液20mL。3)肺內(nèi)接種所有家兔右胸壁脫毛，肌內(nèi)注射速眠新合劑0.8mL/kg麻醉后固定，常規(guī)消毒，取無(wú)菌三通接頭，分別接12號(hào)注射針頭、吸有兔自身血凝塊的ImL注射器及吸有VX2腫瘤組織塊懸液或細(xì)胞懸液ImL的注射器。在X線透視下，將12號(hào)針頭刺入兔右肺下葉內(nèi)，回吸無(wú)血后，注入0.4mL組織塊懸液或細(xì)胞懸液，然后注入0.2mL兔自身血凝塊，拔出針頭，接種完畢。4)移植瘤生長(zhǎng)情況的觀測(cè)全部家兔自接種后第3天起，每日對(duì)胸部進(jìn)行層寬、層厚均為5mm的CT掃描，觀察腫瘤生長(zhǎng)、胸腔內(nèi)轉(zhuǎn)移情況。5)家兔VX2原位肺癌模型建立結(jié)果家兔全部有肺內(nèi)腫瘤生長(zhǎng)，接種成功率
100% 。
2、藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)
取成功建模家兔180只，隨機(jī)分為18組，每組10只。每天I次，用藥12天。給藥方式:第1-16組為實(shí)施例1-16獲得的吸入劑吸入給藥，給藥劑量為3mg生藥/kg ;第17組灌胃給予蟾酥脂溶性提取物，給藥劑量為3mg生藥/kg ;第18組為含有0.5%羧甲基纖維素鈉的生理鹽水對(duì)照組，腹腔注射10mL/kg。停藥次日處死家兔，解剖家兔肺臟，剝離腫瘤組織，稱重。實(shí)驗(yàn)結(jié)果:吸入劑給藥各組的抑瘤率最小為48.9%，最高為66.2% ;蟾酥脂溶性提取物灌胃組的抑瘤率為37.6%，生理鹽水組對(duì)腫瘤幾乎沒(méi)有抑制作用，吸入劑給藥各組與蟾酥脂溶性提取物灌胃組、生理鹽水組的抑瘤率有顯著性差異(P〈0.05)。
權(quán)利要求
1.一種蟾酥脂溶性提取物干粉吸入劑，其特征在于它是由蟾酥脂溶性提取物與醫(yī)學(xué)上可接受的輔料組成； 所述蟾酥脂溶性提取物的制備:取蟾酥洗凈，加12倍量95%乙醇，回流2次，每次2小時(shí)，合并提取液并濾過(guò)，濃縮濾液后進(jìn)行噴霧干燥，得到蟾酥脂溶性提取物粉末，粉末D5tl在5微米以下； 所述吸入劑的制備:將蟾酥脂溶性提取物粉末、粒徑在80-125微米的乳糖、粒徑在30-50微米的亮氨酸按質(zhì)量比9:100:1的比例進(jìn)行混合，包裝入膠囊或泡罩或干粉吸入器內(nèi)，獲得吸入劑 。
全文摘要
本發(fā)明涉及干粉吸入劑，具體的說(shuō)是一種蟾酥脂溶性提取物制成的干粉吸入劑、所述干粉吸入劑的制備方法和在制備治療肺部腫瘤藥物中的應(yīng)用。一種蟾酥脂溶性提取物干粉吸入劑，其特征在于它是由蟾酥脂溶性提取物與醫(yī)學(xué)上可接受的輔料組成，蟾酥脂溶性提取物與所述的輔料的質(zhì)量比為1:0-1:100。將一種蟾酥脂溶性提取物制成干粉吸入劑，可直接作用于肺部病灶，降低毒副反應(yīng)的發(fā)生，提高藥物的生物利用度，既可克服口服制劑起效慢，具有肝臟首過(guò)效應(yīng)及全身性毒副作用，制劑生物利用度較低等缺點(diǎn)，同時(shí)也可以解決針劑的使用不便，病人順應(yīng)性差等問(wèn)題。
文檔編號(hào)A61K9/14GK103142652SQ201210390728
公開(kāi)日2013年6月12日 申請(qǐng)日期2011年6月2日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月2日
發(fā)明者陳彥, 張振海, 賈曉斌, 吳青青, 周蕾 申請(qǐng)人:江蘇省中醫(yī)藥研究院