專利名稱：小牛血去蛋白提取物及制備工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及小牛血去蛋白提取物及制備工藝，完善小牛血去蛋白提取物的生產(chǎn)工藝，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
小牛血去蛋白提取物(protein-free calf blood extract)是小牛血去蛋白提取物注射液的主要原料。小牛血去蛋白提取物是1-6個月的幼牛血經(jīng)過除蛋白后得到的小分子生物活性物質(zhì)，其主要成分為氨基酸、小肽、核酸及其它含氮化合物。小牛血去蛋白提取物可顯著提高網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)活力，提高酶活性，加速細(xì)胞的氧化磷酸化反應(yīng)和ATP的合成，激活細(xì)胞呼吸，促進(jìn)新陳代謝，加快組織再生。該藥物對腦神經(jīng)損傷、腦卒中及腦梗塞等疾病有積極的治療效果，同時還具有眼角膜修復(fù)、增強(qiáng)記憶力 等作用，在臨床上應(yīng)用廣泛。目前，國內(nèi)生產(chǎn)小牛血去蛋白提取物的制備方法是有機(jī)溶劑提取法。如中國發(fā)明專利(CN200710194950. 2)所公開的方法(I)將小牛血攪拌、離心得到血清；(2)將離心得到的血清加熱去除蛋白，過濾后濃縮濾液；(3)向濃縮后的濾液中加入乙醇進(jìn)行醇沉，過濾去除沉淀出的蛋白，濾液濃縮回收乙醇，得到醇沉后的濾液；(4)向醇沉后的濾液中加入酸調(diào)節(jié)PH值為酸性,加入活性炭并加熱進(jìn)行脫色和水解,過濾收集濾液；(5)將收集的濾液用堿調(diào)節(jié)PH至6. 8 8，冷凍除蛋白，過濾得到濾液，再冷凍、過濾，反復(fù)2 5次，所述冷凍溫度為-50 0°C，時間為12 72小時；(6)將冷凍除蛋白后得到的濾液用纖維膜超濾除高分子物質(zhì)，得到小牛血去蛋白提取物。但采用上述方法進(jìn)行提取不僅造成環(huán)境污染、生產(chǎn)成本高，更重要的是有機(jī)溶劑導(dǎo)致了具有生物活性化合物的變性失活，使藥效學(xué)活性下降。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種小牛血去蛋白提取物，其呼吸活力提聞了 80%,提聞了藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。本發(fā)明提供一種小牛血去蛋白提取物的制備工藝，完善小牛血去蛋白提取物生產(chǎn)工藝，降低成本、減少污染、縮短生產(chǎn)周期、提高產(chǎn)品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)目標(biāo)。本發(fā)明公開的小牛血去蛋白提取物注射液的制備工藝，解決方案如下采1-6個月幼牛靜脈血，用物理方法將血液凝固，采用壓榨法將血液中的蛋白去除，得到的液體進(jìn)行酸堿處理，將其中的酸及堿性蛋白質(zhì)雜質(zhì)除凈，將所得血清進(jìn)行超濾滅菌，最后進(jìn)行灌裝。本發(fā)明小牛血去蛋白提取物注射液的具體工藝，包括以下步驟
在無菌條件下，采取1-6個月幼牛靜脈血，攪拌，加熱滅菌，經(jīng)壓榨后，上清液經(jīng)無機(jī)膜(陶瓷膜7 μ )過濾，濾液中加入鹽酸調(diào)節(jié)PH值:Γ4為酸性，不斷攪拌，超濾后，收集濾液，向收集的濾液中加入氫氧化鈉調(diào)節(jié)為堿性8 10，再超濾(20000)，收集濾液并調(diào)節(jié)至中性；反滲透膜濃縮；5000分子量超濾除蛋白，然后滅菌，灌裝。根據(jù)國家食品藥品監(jiān)督管理局頒布暫行的小牛血去蛋白注射液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，采用“呼吸活力測定法”測定該藥物活力，并以刺激指數(shù)(SI)作為質(zhì)量控制參數(shù)。本發(fā)明工藝生產(chǎn)的小牛血去蛋白提取物注射液SI (活力指標(biāo))為4. 3^4. 8，而規(guī)定的SI為2. 5，其呼吸活力提聞了 80%,提聞了藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。發(fā)明的積極效果在于采用物理方法代替了有機(jī)溶劑沉淀蛋白質(zhì)的方法，降低成本、減少污染、縮短生產(chǎn)周期；保持了制劑的藥理學(xué)活性在實(shí)驗(yàn)室研究階段，產(chǎn)物的呼吸活力活性比有機(jī)溶劑法提聞了 80% ;大大提聞了藥品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例I
在無菌條件下，采取5個月幼牛靜脈血100kg，攪拌，加熱滅菌，經(jīng)壓榨后，上清液經(jīng)無機(jī)膜(陶瓷膜7 μ )過濾；50kg濾液中加入鹽酸調(diào)節(jié)PH值:Γ4為酸性，不斷攪拌，超濾后，收集濾液，向收集的濾液中加入氫氧化鈉調(diào)節(jié)為堿性8 10，再超濾(20000道爾頓)，收集濾液并調(diào)節(jié)至中性；反滲透膜濃縮25kg ；5000分子量超濾除蛋白，然后滅菌，灌裝。檢測活性指標(biāo)SI為4. 5。實(shí)施例2
在無菌條件下，采取6個月幼牛靜脈血100kg，攪拌，加熱滅菌，經(jīng)壓榨后，上清液經(jīng)無機(jī)膜(陶瓷膜7 μ )過濾；55kg濾液中加入鹽酸調(diào)節(jié)PH值4為酸性，不斷攪拌，超濾后，收集·濾液，向收集的濾液中加入氫氧化鈉調(diào)節(jié)為堿性10，再超濾(20000道爾頓)，收集濾液并調(diào)節(jié)至中性；反滲透膜濃縮28kg ;5000分子量超濾除蛋白，然后滅菌，灌裝。檢測活性指標(biāo)SI為 4. 3。實(shí)施例3
在無菌條件下，采取2個月幼牛靜脈血100kg，攪拌，加熱滅菌，經(jīng)壓榨后，上清液經(jīng)無機(jī)膜(陶瓷膜7 μ )過濾；48kg濾液中加入鹽酸調(diào)節(jié)PH值3為酸性，不斷攪拌，超濾后，收集濾液，向收集的濾液中加入氫氧化鈉調(diào)節(jié)為堿性9，再超濾(20000道爾頓)，收集濾液并調(diào)節(jié)至中性；反滲透膜濃縮22kg ;5000分子量超濾除蛋白，然后滅菌，灌裝。檢測活性指標(biāo)SI為 4. 8。
權(quán)利要求
1.一種小牛血去蛋白提取物，是通過以下方法制成的在無菌條件下，采取1-6個月幼牛靜脈血，攪拌，加熱滅菌，經(jīng)壓榨后，上清液經(jīng)無機(jī)膜(陶瓷膜7 μ )過濾，濾液中加入鹽酸調(diào)節(jié)PH值:Γ4為酸性，不斷攪拌，超濾后，收集濾液，向收集的濾液中加入氫氧化鈉調(diào)節(jié)為堿性8 10，再超濾(20000)，收集濾液并調(diào)節(jié)至中性；反滲透膜濃縮；5000分子量超濾除蛋白，然后滅菌，灌裝。
2.一種小牛血去蛋白提取物的制備工藝，包括以下步驟 在無菌條件下，采取1-6個月幼牛靜脈血，攪拌，加熱滅菌，經(jīng)壓榨后，上清液經(jīng)無機(jī)膜(陶瓷膜7 μ )過濾，濾液中加入鹽酸調(diào)節(jié)PH值:Γ4為酸性，不斷攪拌，超濾后，收集濾液，向收集的濾液中加入氫氧化鈉調(diào)節(jié)為堿性8 10，再超濾(20000)，收集濾液并調(diào)節(jié)至中性；反滲透膜濃縮；5000分子量超濾除蛋白，然后滅菌，灌裝。
全文摘要
本發(fā)明提供一種小牛血去蛋白提取物及制備工藝，采1-6個月幼牛靜脈血，用物理方法將血液凝固，采用壓榨法將血液中的蛋白去除，得到的液體進(jìn)行酸堿處理，將其中的酸及堿性蛋白質(zhì)雜質(zhì)除凈，將所得血清進(jìn)行超濾滅菌，最后進(jìn)行灌裝。本發(fā)明完善小牛血去蛋白提取物生產(chǎn)工藝，其呼吸活力提高了80%，提高了藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)降低成本、減少污染、縮短生產(chǎn)周期、提高產(chǎn)品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)目標(biāo)。
文檔編號A61P27/02GK102908363SQ201210434370
公開日2013年2月6日 申請日期2012年11月5日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月5日
發(fā)明者安麗萍, 杜培革, 李紅宇, 苑廣信, 韓笑, 姜爽, 遲仁志, 徐廣宇, 邵曉彤, 周亭亭 申請人:北華大學(xué)