專利名稱：蜂膠殼聚糖牙周緩釋溫敏原位凝膠及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于牙周病治療局部緩釋藥物的制備方法，特別是以溫敏原位凝膠制備牙周緩釋藥物的方法。
背景技術(shù)：
在口腔治療領(lǐng)域，國內(nèi)外均有蜂膠(propolis)的相關(guān)研究及臨床報道。1997年Yong等通過研究發(fā)現(xiàn)，蜂膠對口腔致病菌以及酶的活性具有較明顯抑制作用，2007年Bruschi等報道了采用蜂膠緩釋劑治療牙周炎，初步研究表明，該系統(tǒng)具有潛在治療牙周炎的作用，值得進(jìn)行臨床評價，2008年蔣琳等研究了蜂膠及蜂膠奧硝唑合劑對牙齦卟啉單胞菌生長的影響，發(fā)現(xiàn)蜂膠對牙齦卟啉單胞菌的生長有較好的抑制作用，并能夠增強(qiáng)奧硝唑的體外抗菌活性，同時，還能減少抗生素的使用，從而降低藥物副作用及細(xì)菌耐藥性的產(chǎn) 生。然而，蜂膠難溶于水，局部給藥方式不理想，影響了蜂膠在臨床的應(yīng)用。 原位凝膠(in situ gel)是指能以溶液狀態(tài)給藥后，在用藥部位對環(huán)境變化響應(yīng)，立即發(fā)生相轉(zhuǎn)變形成非化學(xué)交聯(lián)的半固體制劑。目前，可用于人體的原位凝膠系統(tǒng)主要有泊洛沙姆凝膠系統(tǒng)，殼聚糖凝膠系統(tǒng)，藻酸鹽凝膠系統(tǒng)等。隨著高分子材料的發(fā)展，為原位凝膠牙周局部緩釋給藥提供了良好的藥物載體，使局部給藥體系作為牙周病臨床藥物逐漸凸顯其優(yōu)越性。殼聚糖為甲殼素脫乙酰衍生物，是一種天然的生物高分子線形多糖。在自然界中，殼聚糖廣泛存在，每年生物合成的資源量高達(dá)100億噸，是地球上僅次于植物纖維的第二大生物資源。殼聚糖原位溫敏凝膠(chitosan Thermosensitive in situ gel)可以溶液狀態(tài)給藥并在用藥部位發(fā)生相轉(zhuǎn)變，形成半固體制劑。Jothi (2009)等采用殼聚糖溫敏凝膠緩釋系統(tǒng)包裹氯應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)動物牙周炎，獲得了較好治療效果。殼聚糖分子結(jié)構(gòu)圖如下
權(quán)利要求
1.蜂膠殼聚糖牙周緩釋溫敏原位凝膠，其特征是該凝膠 (1)以濃度為2g/100mL的殼聚糖乙酸溶液與濃度為125g/100mLi3-甘油磷酸鈉水溶液按體積比5 2混合，作為空白基質(zhì)溫敏原位凝膠； 其中，殼聚糖的脫乙酰度為70% 95%、分子量為10萬 90萬； (2)以濃度為10g/100mL的羥丙基β-環(huán)糊精水溶液包合蜂膠，羥丙基β-環(huán)糊精水溶液與蜂膠之間的質(zhì)量比為I :2，作為蜂膠/羥丙基環(huán)糊精蜂膠的緩釋微膠囊； 所述蜂膠的最低抑菌濃度為I. 25g/100mL ； (3)蜂膠殼聚糖牙周緩釋溫敏原位凝膠由步驟(I)空白基質(zhì)的溫敏原位凝膠與步驟(2)蜂膠/羥丙基β -環(huán)糊精蜂膠的緩釋微膠囊混合組成。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的蜂膠殼聚糖牙周緩釋溫敏原位凝膠，其特征是步驟(I)進(jìn)一步選擇脫乙酰度為90%，分子量為90萬的殼聚糖。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的蜂膠殼聚糖牙周緩釋溫敏原位凝膠，其特征是步驟(3)蜂膠殼聚糖牙周緩釋溫敏原位凝膠的成膠溫度為36°C，成膠時間為65秒，該溫敏凝膠中蜂膠/羥丙基β -環(huán)糊精的緩釋微膠囊溶出緩慢平穩(wěn)，蜂膠在37 ± O. 5°C、24h內(nèi)釋放度達(dá)99%以上。
4.如權(quán)利要求f3所述的蜂膠殼聚糖牙周緩釋溫敏原位凝膠之一的制備方法，其特征是 (1)配制空白基質(zhì)溫敏原位凝膠以濃度2g/100mL取脫乙酰度70% 95%、分子量10萬 90萬的殼聚糖溶于O. lmol/L的乙酸溶液中，攪拌至溶解，4°C靜置Ih ；以濃度125g/100mL取β -甘油磷酸鈉溶于蒸餾水中，攪拌至溶解，4°C靜置Ih^f β -甘油磷酸鈉溶液逐滴加入殼聚糖溶液，持續(xù)攪拌15min充分混合，靜置至氣泡消失； (2)配制蜂膠/羥丙基β-環(huán)糊精蜂膠的緩釋微膠囊置95%乙醇SmL在燒杯中，加入20g蜂膠后于60°C水浴45min，溶解為蜂膠溶液；取羥丙基β -環(huán)糊精加入蒸餾水溶解得濃度為10g/100mL的環(huán)糊精溶液；將蜂膠溶液滴入環(huán)糊精溶液，在溫度50°C下攪拌120分鐘得混合物，再將混合物通過0. 45 μ m微孔濾膜濾除乙醇，得到澄清溶液，靜置、冷凍干燥4h，得淡黃、疏松的蜂膠/羥丙基β-環(huán)糊精蜂膠的緩釋微膠囊。
所述蜂膠的最低抑菌濃度為I. 25g/100mL ； (3)在攪拌下，將步驟(I)空白基質(zhì)的溫敏原位凝膠溶液加入步驟(2)蜂膠/羥丙基β -環(huán)糊精緩釋微膠囊，至兩者均勻混合至無明顯團(tuán)塊時測溶液PH值，滴加0. lmol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至7. O 7. 3，3000r/min離心5min，消除氣泡及沉淀，澄清液為蜂膠殼聚糖牙周緩釋溫敏原位凝膠。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的蜂膠殼聚糖牙周緩釋溫敏原位凝膠的制備方法，其特征是步驟(I)進(jìn)一步選擇脫乙酰度為90%、分子量為90萬的殼聚糖。
全文摘要
蜂膠殼聚糖牙周緩釋溫敏原位凝膠及制備方法，屬于牙周病治療局部緩釋藥物的制備方法。本發(fā)明凝膠包括按體積比組成的殼聚糖乙酸溶液與β-甘油磷酸鈉水溶液的空白基質(zhì)溫敏原位凝膠；按質(zhì)量比包合蜂膠的羥丙基β-環(huán)糊精水溶液，作為蜂膠/羥丙基β-環(huán)糊精蜂膠的緩釋微膠囊；以及由上述二者組成的蜂膠殼聚糖牙周緩釋溫敏原位凝膠，并提供了以上凝膠的制備方法。本發(fā)明優(yōu)選脫乙酰度為90%及分子量50萬道爾的殼聚糖作為攜載藥物的緩釋凝膠制劑。本發(fā)明溫敏凝膠成膠溫度36℃，成膠時間65秒，釋放緩慢平穩(wěn)，37±0.5℃下24h內(nèi)釋放度達(dá)99%以上，不會產(chǎn)生突釋效應(yīng)。
文檔編號A61K47/36GK102920652SQ20121048566
公開日2013年2月13日 申請日期2012年11月26日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月26日
發(fā)明者丁仲鵑, 稅艷青, 李寶才, 孫劍 申請人:昆明醫(yī)科大學(xué)