專(zhuān)利名稱(chēng)：調(diào)節(jié)肽gm21在制備調(diào)節(jié)山羊免疫功能藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及調(diào)節(jié)肽GM21在制備調(diào)節(jié)山羊免疫功能藥物中的應(yīng)用，屬于多肽技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
抗生素的廣泛應(yīng)用，耐藥菌株和多重耐藥菌株日益增加，臨床抗感染治療已面臨嚴(yán)峻挑戰(zhàn)，尋找廣譜高效的抗細(xì)菌、抗病毒藥物，仍然是一個(gè)十分艱巨的任務(wù)?？咕氖莿?dòng)物體內(nèi)極為重要的先天免疫物質(zhì)，是一種具有高效抗菌、抗病毒、免疫功能的生物活性因子?？咕氖撬拗鞣翘禺愋悦庖叻烙到y(tǒng)產(chǎn)生的一類(lèi)對(duì)抗外源性病原體的肽類(lèi)活性物質(zhì)， 是天然免疫的效應(yīng)分子。研究表明，抗菌肽有著與傳統(tǒng)抗生素完全不同的作用機(jī)制，不易誘導(dǎo)耐藥菌株的產(chǎn)生；抗菌譜廣，對(duì)細(xì)菌、真菌、病毒、原蟲(chóng)及癌細(xì)胞均有作用。在家禽上，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了 3 個(gè)家族的抗菌妝包括 cathelicidin, liver-expressed antimicrobial peptide(LEAP), and β-defensin。這些抗菌肽對(duì)于家禽抵抗細(xì)菌性、病毒性疾病具有至關(guān)重要的作用。相關(guān)這些基因的突變或者缺失對(duì)于家禽抗微生物感染的能力將有顯著的影響。這些些抗菌肽除了具有廣譜抗菌活性，同時(shí)還有高效的抗真菌、抗病毒、抗原蟲(chóng)和(或)抗腫瘤活性，如Bat5和Mc7能殺滅鉤端螺旋體，對(duì)白色念珠菌、隱球菌和包膜病毒和寄生蟲(chóng)都有較好的殺滅作用；一些抗菌肽對(duì)皰疹病毒、流感病毒、艾滋病病毒等有囊膜病毒有明顯的殺傷力。此外，有些抗菌肽同時(shí)還具有多種其他的調(diào)控功能，如Cathelicidin還具有促進(jìn)傷口愈合、組織損傷修復(fù)、化學(xué)趨化作用、促血管生成和抗寄生蟲(chóng)等功能，在調(diào)節(jié)動(dòng)物機(jī)體免疫上有著重要生物學(xué)活性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供調(diào)節(jié)肽GM21在制備調(diào)節(jié)山羊免疫功能藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的所用的調(diào)節(jié)肽GM21采用常規(guī)的化學(xué)合成的方法獲得，調(diào)節(jié)肽GM21的分子量為2398. 66 Da,等電點(diǎn)為5. 45，氨基酸序列為AVLHAVDRINEQSSEANLYRL。該調(diào)節(jié)肽GM21在制備調(diào)節(jié)山羊免疫功能藥物中的應(yīng)用。調(diào)節(jié)肽GM21的抗菌試驗(yàn)，其試驗(yàn)方案為常規(guī)方法，具體如下將已制備好的高柱肉湯瓊脂培養(yǎng)基加熱熔化后，待冷卻至50°C左右時(shí)，加入肉湯培養(yǎng)基菌液ImL (經(jīng)過(guò)恒溫37°C培養(yǎng)18小時(shí)的菌液)，輕輕搖動(dòng)，使之均勻.然后倒入無(wú)菌的平皿內(nèi)，輕輕晃動(dòng)平皿，以使培養(yǎng)基均勻地平鋪在平皿上，待冷卻凝固后，用消毒過(guò)的鑷子將青霉素干紙片、鏈霉素干紙片、四環(huán)素干紙片、磺胺嘧啶干紙片整齊有順序的放入平血內(nèi)，蓋上陶瓦蓋，標(biāo)好記號(hào)置37°C恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24小時(shí).24小時(shí)后取出培養(yǎng)基，用卡尺量取抑菌圈大小并記錄之，并比較不同抗菌藥物對(duì)不同細(xì)菌的作用強(qiáng)度。本發(fā)明的效果在于用調(diào)節(jié)肽GM21制備的調(diào)節(jié)山羊免疫功能藥物，抑菌效果明顯。


圖I是山羊免疫調(diào)節(jié)肽GM21對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制效果。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明。實(shí)施例所用的山羊免疫調(diào)節(jié)肽GM21采用常規(guī)的化學(xué)合成的方法獲得，山羊免疫調(diào)節(jié)肽GM21的分子量為2398. 66 Da,等電點(diǎn)為5. 45，氨基酸序列為AVLHAVDRINEQSSEANLYRLο 調(diào)節(jié)肽GM21的抗菌試驗(yàn)具體步驟同發(fā)明內(nèi)容部分的描述。實(shí)施例I :免疫調(diào)節(jié)肽GM21對(duì)大腸桿菌的抑制作用。取6Pg/ml以及10 Pg/ml山羊免疫調(diào)節(jié)肽GM21進(jìn)行抑菌試驗(yàn)。結(jié)果為6ug/ml山羊免疫調(diào)節(jié)肽GM21僅有微弱的抑菌效果(圖l-B)，10ug/ml山羊免疫調(diào)節(jié)肽GM21抑菌效果很明顯(圖1-C)，圖I-A為山羊免疫調(diào)節(jié)肽GM21對(duì)照試驗(yàn)。實(shí)施例2 免疫調(diào)節(jié)肽GM21對(duì)不同微生物的最低抑菌濃度。取不同濃度的山羊免疫調(diào)節(jié)肽GM21分別抑制大腸桿菌、綠膿桿菌、金色葡萄球菌，枯草桿菌以及白色念珠菌。其中表I為該多肽對(duì)大腸桿菌、綠膿桿菌、金色葡萄球菌，枯草桿菌以及白色念珠菌的最低抑制濃度分別為13. 88Pg/ml,29. 35Pg/ml,5. 38Pg/ml,27. 5M-g/ml, 13. 79M-g/ml 表I
微生物最低抑菌濃度@g/ml)
大腸桿菌08A86613.88
綠膿桿菌0803101429^5
金黃色葡萄球菌ATCC25925
枯草桿菌27.5
白色念珠菌 08030809 (Cl，DR)I 7 J
權(quán)利要求
1.分子量2398. 66 Da，等電點(diǎn)為5. 43，其全序列一級(jí)結(jié)構(gòu)為AVLHAVDRIN EQSSEANLYRL的調(diào)節(jié)肽 GM21在制備調(diào)節(jié)山羊免疫功能藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及調(diào)節(jié)肽GM21在制備調(diào)節(jié)山羊免疫功能藥物中的應(yīng)用，屬于多肽技術(shù)領(lǐng)域。分子量2398.66Da，等電點(diǎn)為5.43，其全序列一級(jí)結(jié)構(gòu)為AVLHAVDRIN EQSSEANLYRL的調(diào)節(jié)肽GM21在制備調(diào)節(jié)山羊免疫功能藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的效果在于用調(diào)節(jié)肽GM21制備的調(diào)節(jié)山羊免疫功能藥物，抑菌效果明顯。
文檔編號(hào)A61K38/16GK102961735SQ201210533879
公開(kāi)日2013年3月13日 申請(qǐng)日期2012年12月12日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月12日
發(fā)明者賴(lài)仞, 容明強(qiáng) 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院昆明動(dòng)物研究所