專利名稱：一種高包封率奧曲肽緩釋微球及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種高包封率生物活性藥物的生物可降解控釋微球及其制備方法，屬于生物醫(yī)用高分子材料與生物活性藥物控釋制劑的交叉研究領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
生長(zhǎng)激素釋放抑制激素(somotostatin, SS)在體內(nèi)分布非常廣泛，它是一種調(diào)節(jié)多肽，主要對(duì)神經(jīng)肽、細(xì)胞因子、營(yíng)養(yǎng)素、神經(jīng)遞質(zhì)、生長(zhǎng)因子、甲狀腺和類固醇激素的分泌起作用。然而血循環(huán)中天然的SS半衰期非常短，而且停藥后可能會(huì)出現(xiàn)一些激素高分泌的反跳現(xiàn)象，比如生長(zhǎng)激素、胰高血糖素和胰島素等。為了更好的發(fā)揮SS的作用，同時(shí)最低限度的減少其副作用，人們采用很多種方法合成了生長(zhǎng)抑素類似物(somotostatinanalogue, SSA)，這些類似物的半衰期比天然的SS更長(zhǎng)，而且其對(duì)組織和器官的作用也具有選擇性。奧曲肽是第一個(gè)用于臨床并且應(yīng)用最廣泛的SSA，它保留了天然SS的功能氨基·酸序列，去除并修飾了其它不重要的氨基酸。奧曲肽要比天然SS的生物活性高，因此其作效果更好。目前在臨床上奧曲肽的應(yīng)用非常廣泛，胃腸胰內(nèi)分泌腫瘤和肢端肥大癥是長(zhǎng)效制劑的主要適應(yīng)癥。目前國(guó)內(nèi)外奧曲肽微球研制中存在著系列問題，其中包封率較低是主要問題之一。大量研究及文獻(xiàn)報(bào)道了提高奧曲肽微球包封率的方法，如使用聚乙烯醇為連續(xù)相乳化劑，純水為連續(xù)相溶媒，鹿糖為分散相保護(hù)劑，但成效不盡理想。聚乙烯醇(polyvinylalCohol，PVA)是一種水溶性環(huán)保型高分子聚合物，無毒無污染，具有很好的成膜性能，乳化性能、粘結(jié)性能和紡絲性能。它形成的膜具有優(yōu)異的接著力，耐溶劑性，耐摩擦性，伸張強(qiáng)度與氧氣阻絕性。因?yàn)榫垡蚁┐纪瑫r(shí)擁有親水基及疏水基兩種官能基，因此具有界面活性的物質(zhì)，所以聚乙烯醇可以作為高分子乳化，懸浮聚合反應(yīng)時(shí)的保護(hù)膠體。PVA具有合成方便、安全低毒、產(chǎn)品質(zhì)量易于控制、價(jià)格便宜、使用方便等特點(diǎn)。因此，PVA是具有再次開發(fā)潛力的優(yōu)良藥用輔料。聚山梨酯80 (Polysorbate80)屬于親水型非離子表面活性劑，有增溶、乳化、潤(rùn)濕等作用，目前廣泛用做注射液及口服液的增溶劑或乳化劑、膠囊劑用分散齊U、軟膏劑用乳化劑和基質(zhì)、栓劑用基質(zhì)等。海藻糖(Trehalose)是由兩個(gè)葡萄糖分子以α, α, I, I-糖苷鍵構(gòu)成非還原性糖，自身性質(zhì)非常穩(wěn)定，因?yàn)楹Ｔ逄窃诟邷?、高寒、高滲透壓及干燥失水等惡劣環(huán)境條件下在細(xì)胞表面能形成獨(dú)特的保護(hù)膜，有效地保護(hù)蛋白質(zhì)分子不變性失活，從而維持生命體的生命過程和生物特征。海藻糖除了可以作為蛋白質(zhì)藥物、酶、疫苗和其他生物制品的優(yōu)良活性保護(hù)劑以外，還是保持細(xì)胞活性、保濕類化妝品的重要成分，更可作為防止食品劣化、保持食品新鮮風(fēng)味、提升食品品質(zhì)的獨(dú)特食品配料。本發(fā)明采用界面活性劑聚乙烯醇和聚山梨酯80為連續(xù)相乳化劑，并且兩者比例為50:1，連續(xù)相具有一定pH值，首次采用海藻糖作為分散相穩(wěn)定劑，有效地提高了奧曲肽微球藥物的包封率，并研制出安全有效、質(zhì)量可控的奧曲肽微球，無論是對(duì)疾病治療還是在學(xué)術(shù)研究方面，都有著重大及深遠(yuǎn)的意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一種高包封率奧曲肽緩釋微球及其制備方法，采用海藻糖為分散相穩(wěn)定齊U，結(jié)合至奧曲肽表面以保護(hù)奧曲肽避免受到水油界面及攪拌剪切力的影響乃至降解進(jìn)而提高包封率；采用聚乙烯醇和聚山梨酯80為連續(xù)相乳化劑，較傳統(tǒng)連續(xù)相乳化劑聚乙烯醇提高制備微球的包封率；連續(xù)相具有一定PH值可以保護(hù)奧曲肽活性，從而運(yùn)用此方法制得微球藥物穩(wěn)定性好，包封率 高。本發(fā)明提供了一種奧曲肽緩釋微球，主要包括奧曲肽、聚乳酸-羥基乙酸共聚物和海藻糖，其中奧曲肽與聚乳酸-羥基乙酸共聚物的重量比為1:10-1: 5，海藻糖與奧曲肽的重量比為1:10-1:1，所述微球制劑是在pH值為7. 0-9.0的含聚乙烯醇和聚山梨酯80的溶液中形成的微球。其中，聚乳酸-羥基乙酸共聚物的分子量為38000 79300，乳酸和羥基乙酸的比例為75:25 50:50，特性粘度O. 35 O. 61dL/g。其中，奧曲肽與聚乳酸-羥基乙酸共聚物的重量比為1:10-1:5，優(yōu)選的重量比為1:8-1:5，更為優(yōu)選的重量比為1:5.6。所述海藻糖與奧曲肽的重量比為1:10-1:1，優(yōu)選的重量比為更為優(yōu)選的重量比為1:5-1: I。所述含聚乙烯醇、聚山梨酯80的溶液的pH值為7. 0-9. O，優(yōu)選的pH值為7. 8-8. 0，更為優(yōu)選的pH值為7. 92。所述微球的粒徑為10-120 μ m。本發(fā)明還提供了一種高包封率奧曲肽緩釋微球的制備方法，包括如下步驟
將含有海藻糖的奧曲肽水溶液分散至含聚乳酸-羥基乙酸共聚物的二氯甲烷溶液中，形成初乳；初乳分散至含聚乙烯醇、聚山梨酯80的磷酸鹽緩沖液中形成復(fù)乳，磁力攪拌至二氯甲烷揮發(fā)完全，過濾并收集微球，真空干燥后制得白色粉末即得奧曲肽緩釋微球。其中，所述磷酸鹽緩沖液中聚乙烯醇的濃度為5-30mg/ml，優(yōu)選的濃度為8_20mg/ml，更為優(yōu)選的濃度為10mg/ml ;磷酸鹽緩沖液中聚山梨酯80的濃度為O. 1-0. 6mg/ml，優(yōu)選的濃度為O. 16-0. 4mg/ml,更為優(yōu)選的濃度為O. 2mg/ml。所述聚乙烯醇與聚山梨酯80的重量比為50:1。所述含有海藻糖的奧曲肽水溶液的濃度為39. 2-78. 4mg/ml。所述含聚乳酸-羥基乙酸共聚物的二氯甲烷溶液的濃度為10mg/ml。本發(fā)明的積極效果是本發(fā)明采用海藻糖為分散相穩(wěn)定劑，聚乙烯醇和聚山梨酯80為連續(xù)相乳化劑，兩者比例為50:1，連續(xù)相具有一定pH值，微球制備工藝穩(wěn)定、可行，微球的形態(tài)圓整，表面光滑，包封率高，其體外釋藥性能符合長(zhǎng)效制劑特征，24 h內(nèi)藥物釋放百分率小于20%，30d累積釋放達(dá)到80%以上。


圖I為實(shí)施例I所制奧曲肽緩釋微球樣品的光學(xué)顯微鏡照片；
圖2為實(shí)施例I所制奧曲肽緩釋微球樣品的掃描電子顯微鏡照片；
圖3為奧曲肽載藥微球體外溶出曲線圖。
具體實(shí)施例方式為了更好說明本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)，下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步描述。實(shí)施例I 處方工藝組成
權(quán)利要求
1.一種高包封率奧曲肽緩釋微球，其特征在于，主要包括奧曲肽、聚乳酸-羥基乙酸共聚物和海藻糖，其中奧曲肽與聚乳酸-羥基乙酸共聚物的重量比為1:10-1: 5，海藻糖與奧曲肽的重量比為1:10-1:1，所述微球是在pH值為7. 0-9.0的含聚乙烯醇和聚山梨酯80的溶液中形成的微球。
2.如權(quán)利要求I所述的高包封率奧曲肽緩釋微球，其特征在于，所述聚乳酸-羥基乙酸共聚物的相對(duì)分子質(zhì)量為38000-79300，乳酸與羥基乙酸的比例為75:25-50:50，特性黏度為 O.35-0. 61dL/g。
3.如權(quán)利要求I所述的高包封率奧曲肽緩釋微球，其特征在于，所述奧曲肽與聚乳酸-羥基乙酸共聚物的重量比是1:8-1: 5。
4.如權(quán)利要求I所述的高包封率奧曲肽緩釋微球，其特征在于，所述奧曲肽與聚乳酸-羥基乙酸共聚物的重量比是1:5. 6。
5.如權(quán)利要求I所述的高包封率奧曲肽緩釋微球，其特征在于，所述海藻糖與奧曲肽的重量比為1:5-1: I。
6.如權(quán)利要求I所述的高包封率奧曲肽緩釋微球，其特征在于，所述海藻糖與奧曲肽的重量比為1:2。
7.如權(quán)利要求I所述的高包封率奧曲肽緩釋微球，其特征在于，所述含聚乙烯醇和聚山梨酯80的溶液的pH值為7. 92。
8.—種如權(quán)利要求I至7中任意一項(xiàng)所述的高包封率奧曲肽緩釋微球的制備方法，其特征在于，包括如下步驟 將含有海藻糖的奧曲肽水溶液分散至含聚乳酸-羥基乙酸共聚物的二氯甲烷溶液中，形成初乳；初乳分散至含聚乙烯醇、聚山梨酯80的磷酸鹽緩沖液中形成復(fù)乳，磁力攪拌至二氯甲烷揮發(fā)完全，過濾并收集微球，真空干燥后制得白色粉末即得奧曲肽緩釋微球。
9.如權(quán)利要求8所述的高包封率奧曲肽緩釋微球的制備方法，其特征在于，磷酸鹽緩沖液中聚乙烯醇與聚山梨酯80的濃度分別為5-30mg/ml和O. 1-0. 6mg/ml,所述聚乙烯醇與聚山梨酯80的重量比為50:1。
10.如權(quán)利要求8所述的高包封率奧曲肽緩釋微球的制備方法，其特征在于，磷酸鹽緩沖液中聚乙烯醇與聚山梨酯80的濃度分別為8-20mg/ml和O. 16-0. 4mg/ml,所述聚乙烯醇與聚山梨酯80的重量比為50:1。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種高包封率奧曲肽緩釋微球及其制備方法，其特征在于奧曲肽與PLGA的重量比為1:10-1:5；采用海藻糖為分散相穩(wěn)定劑，海藻糖與奧曲肽的重量比為1:10-1:1；聚乙烯醇和聚山梨酯80為連續(xù)相乳化劑，兩者濃度分別為5-30mg/ml和0.1-0.6mg/ml，比例為50:1；并且連續(xù)相pH值為7.0-9.0。所制得的奧曲肽微球形態(tài)圓整粒度分布均勻，包封率高，體外釋藥性能符合長(zhǎng)效制劑特征，24h內(nèi)藥物釋放百分率小于20%，30d累積釋放達(dá)到80%以上。
文檔編號(hào)A61K47/36GK102940609SQ20121053418
公開日2013年2月27日 申請(qǐng)日期2012年12月12日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月12日
發(fā)明者倪偉磊, 崔頎, 徐強(qiáng)強(qiáng), 董堃華, 劉哲鵬, 包璇, 周逸明 申請(qǐng)人:上海蘇豪逸明制藥有限公司, 周逸明