專利名稱：一種卡佩他濱藥物載體及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于化學(xué)合成技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種卡佩他濱藥物載體及其制備方法。
背景技術(shù)：
卡佩他濱(商品名希羅達(dá))是一種對(duì)腫瘤細(xì)胞具有選擇性作用的口服細(xì)胞毒性制齊U，是由瑞士羅氏公司研制的一種新型5-氟尿嘧啶(5-FU)的前體藥物。作為前體藥物，卡佩他濱本身無(wú)活性，對(duì)腫瘤組織有靶向性，且代謝生成活性物質(zhì)較其他組織及血漿濃度高，可口服給藥，是一種安全、有效、經(jīng)濟(jì)、適應(yīng)性強(qiáng)的抗腫瘤藥。由于卡佩他濱的藥物用途廣以及較好的療效，其臨床用途及研究近年來(lái)成為熱點(diǎn)。其中研究最廣泛的是以卡佩他濱作為單一藥物或者協(xié)同其他藥物如紫杉醇、阿霉素等用于治療原發(fā)性或轉(zhuǎn)移性乳腺癌或者轉(zhuǎn)移性結(jié)腸直腸癌。單一的抗腫瘤藥物是通過(guò)從患者血液濃度分布于全身而產(chǎn)生治療作用。這種體內(nèi)藥物行為缺乏選擇性，而且因?yàn)榭鼓[瘤藥物多數(shù)為疏水性小分子化合物，藥物在體內(nèi)的溶解度較低、分散性高，因此臨床中抗腫瘤化學(xué)藥物的有效利用率低于30%，不僅造成藥物浪費(fèi)，而且大劑量的化療藥物對(duì)患者正常體細(xì)胞的傷害較大。5-FU作為卡佩他濱三步代謝的產(chǎn)物之一，其對(duì)腫瘤細(xì)胞的作用更為直接，是抗腫瘤藥物的重要選擇。但是由于激活5-FU的酶不具選擇性，故對(duì)正常細(xì)胞有較大損害。盧寧寧等人對(duì)卡佩他濱單獨(dú)或聯(lián)合其他藥物對(duì)腫瘤患者進(jìn)行了治療，癌癥治療效果雖然得到穩(wěn)定和客觀緩解，但用藥頻繁，過(guò)程持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，而且不可避免的出現(xiàn)一些腹瀉、中性粒細(xì)胞減少及惡心嘔吐等不良反應(yīng)。因此，要發(fā)揮卡佩他濱在腫瘤治療上的作用，需要對(duì)卡佩他濱進(jìn)行一些靶向功能的改性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的首要目的在于克服 現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)與不足，提供一種卡佩他濱藥物載體的制備方法。本發(fā)明的再一目的在于提供由上述制備方法得到的卡佩他濱藥物載體。本發(fā)明的目的通過(guò)下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)一種卡佩他濱藥物載體的制備方法，包括如下步驟(I)將聚乙二醇(PEG)與丁二酸酐(Succinic anhydride)按摩爾量1:2 3于室溫下反應(yīng)8 12小時(shí)，得到混合反應(yīng)液，將混合反應(yīng)液進(jìn)行純化處理，得到端羧基聚乙二醇(H0-PEG-C00H)；(2)將步驟(I)得到的端羧基聚乙二醇活化后加入等物質(zhì)的量的帶有羥基末端的聚合物進(jìn)行酯化反應(yīng)，反應(yīng)在室溫下進(jìn)行12 24小時(shí)，將得到的混合液純化處理，得到兩嵌段化合物；(3)將步驟(2)得到的兩嵌段化合物活化后，按摩爾比1:1. 2 1. 5加入卡佩他濱，于室溫反應(yīng)48 72小時(shí)，得到反應(yīng)液，將反應(yīng)液純化處理，得到卡佩他濱藥物載體。步驟(I)中
所述的聚乙二醇的分子量?jī)?yōu)選為2000 IOOOODa ；所述的反應(yīng)優(yōu)選采用1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(EDOHCl)作為縮合劑劑、4-二甲氨基吡啶(DMAP)作為催化劑以及三乙胺(TEA)作為pH調(diào)節(jié)劑；所述的1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽與聚乙二醇的物質(zhì)的量的比為1. 2 1. 5 :1，4-二甲氨基吡啶與聚乙二醇的物質(zhì)的量的比為I 1. 2 :1，4_二甲氨基吡啶與三乙胺物質(zhì)的量的比為1:0.1 0. 5 ;所述的反應(yīng)優(yōu)選在三氯甲烷溶劑中進(jìn)行；所述的聚乙二醇在三氯甲烷中的濃度為0. 25 0. 5g/mL ；所述的純化處理優(yōu)選采用以下方法進(jìn)行將混合反應(yīng)液于50 55°C蒸干溶劑，冷卻至室溫，取殘留固體用30 50mL飽和NaHC03溶解后抽濾，取濾液，用氯仿萃取2 3次，取水相用0.1 0. 2mol/L鹽酸調(diào)節(jié)pH至2 4后用氯仿萃取2 3次,合并有機(jī)相,加無(wú)水Na2S04干燥后過(guò)濾，取濾液于50 55°C濃縮至3 5mL，冷卻至室溫，加20 30倍濃縮液體積的無(wú)水乙醚結(jié)晶，放入_4°C冰箱冷藏24h后過(guò)濾，取濾渣于25 30°C真空干燥8 12小時(shí)，得到端羧基聚乙二醇；步驟(2)中

所述的活化優(yōu)選采用以下方法進(jìn)行將端羧基聚乙二醇溶于二氯甲烷，使端羧基聚乙二醇在二氯甲烷的濃度為0.1 0. 5g/mL，加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽室溫活化8 24小時(shí)，1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽的物質(zhì)的量為端羧基聚乙二醇的1. 2 1. 5倍；所述的羥基聚合物優(yōu)選為聚(乳酸-羥基乙酸)、聚乳酸、殼聚糖或聚己內(nèi)酯；所述的酯化反應(yīng)優(yōu)選在4- 二甲氨基吡啶和三乙胺中進(jìn)行，4- 二甲氨基吡啶與端羧基聚乙二醇的物質(zhì)的量的比為I 1. 2 :1，三乙胺與4-二甲氨基吡啶的物質(zhì)的量的比為
0.1 0. 5 :1 ;所述的純化處理優(yōu)選采用以下方法進(jìn)行將混合液于冰無(wú)水乙醚中結(jié)晶，冰無(wú)水乙醚體積為混合液體積的2 5倍，過(guò)濾，再次溶解于二氯乙烷，然后于冰無(wú)水乙醚中沉淀，過(guò)濾，取結(jié)晶固體，于25 30°C真空干燥8 12小時(shí)，得到兩嵌段化合物；步驟(3)中所述的活化優(yōu)選采用以下方法進(jìn)行將兩嵌段化合物溶于二氯甲烷，使端羧基聚乙二醇在二氯甲烷的濃度為0.1 0. 5g/mL,加入1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽室溫活化8 24小時(shí)，1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽與兩嵌段化合物的物質(zhì)的量的比為1. 2 1. 5 :1 ;所述的反應(yīng)優(yōu)選在4-二甲氨基吡啶和三乙胺中進(jìn)行，4-二甲氨基吡啶與端羧基聚乙二醇的物質(zhì)的量的比為I 1. 2 :1，三乙胺與4-二甲氨基吡啶的物質(zhì)的量的比為
0.1 0. 5 :1 ;所述的純化處理優(yōu)選采用以下方法進(jìn)行將反應(yīng)液用2 5倍體積的冰無(wú)水乙醚沉淀，過(guò)濾，取濾出物，再次溶解于二氯乙烷，然后于冰無(wú)水乙醚中沉淀，過(guò)濾，最后所得濾出物于25 30°C真空干燥8 12小時(shí)，得到高分子鍵合卡佩他濱藥物載體；所述的步驟(I)、步驟(2)和步驟(3)均在氮?dú)夥諊羞M(jìn)行；所述的卡佩他濱藥物載體，由上述方法制備得到；
本發(fā)明的發(fā)明機(jī)理本發(fā)明基于酯化反應(yīng)的基礎(chǔ)上，將卡佩他濱與生物相容性好的高分子相連接。卡佩他濱分子中含有兩個(gè)活性羥基，其中一羧基的位阻較另一個(gè)小，為主要反應(yīng)位點(diǎn)。該羥基在催化作用下能與高分子化合物活化的的羧基進(jìn)行酯化反應(yīng)。反應(yīng)體系中采用的縮合劑1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽，其具有高效脫水縮合、促進(jìn)酯化反應(yīng)的效果，催化劑4-二甲氨基吡啶以及三乙胺都能加速酯化反應(yīng)的進(jìn)行。其副產(chǎn)物可以用水洗。本發(fā)明的第一步端羧基化聚乙二醇的反應(yīng)是基于聚乙二醇在與酸酐在催化劑作用下，會(huì)先生成一端羧基化產(chǎn)物，然后另一端羥基發(fā)生酯化反應(yīng)；而且溫度低，傾向于生成一端羧基化產(chǎn)物；而溫度高時(shí)則會(huì)生成兩端羧基化產(chǎn)物。本發(fā)明正是通過(guò)控制反應(yīng)條件和反應(yīng)時(shí)間，得到最高產(chǎn)率的一端羧基化聚乙二醇的產(chǎn)物。本發(fā)明的機(jī)理反應(yīng)方程式如下
權(quán)利要求
1.一種卡佩他濱藥物載體的制備方法，其特征在于包括如下步驟 (1)將聚乙二醇與丁二酸酐按摩爾比1:2 3于室溫下反應(yīng)8 12小時(shí)，得到混合反應(yīng)液，將混合反應(yīng)液進(jìn)行純化處理，得到端羧基聚乙二醇； (2)將步驟(I)得到的端羧基聚乙二醇活化后加入等物質(zhì)的量的帶有羥基末端的聚合物于室溫反應(yīng)12 24小時(shí)，得到混合液；將混合液純化處理，得到兩嵌段化合物； (3)將步驟(2)得到的兩嵌段化合物活化后，按摩爾比1:1. 2 1. 5加入卡佩他濱，于室溫反應(yīng)48 72小時(shí)，得到反應(yīng)液，將反應(yīng)液純化處理，得到卡佩他濱藥物載體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種卡佩他濱藥物載體的制備方法，其特征在于步驟(I)中所述的聚乙二醇的分子量為2000 lOOOODa。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種卡佩他濱藥物載體的制備方法，其特征在于步驟(I)中所述的反應(yīng)采用1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽作為縮合劑劑、4-二甲氨基吡啶作為催化劑以及三乙胺作為PH調(diào)節(jié)劑； 所述的1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽與聚乙二醇的物質(zhì)的量的比為1. 2 1. 5 :1，4-二甲氨基吡啶與聚乙二醇的物質(zhì)的量的比為I 1. 2 :1，4-二甲氨基吡啶與三乙胺物質(zhì)的量的比為1:0.1 0. 5。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種卡佩他濱藥物載體的制備方法，其特征在于步驟(I)中所述的反應(yīng)在三氯甲烷溶劑中進(jìn)行，所述的聚乙二醇在三氯甲烷中的濃度為0. 25 0. 5g/mLo
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種卡佩他濱藥物載體的制備方法，其特征在于步驟(I)中所述的純化處理采用以下方法進(jìn)行將混合反應(yīng)液于50 55°C蒸干溶劑，冷卻至室溫，取殘留固體用30 50mL飽和NaHCO3溶解后抽濾，取濾液，用氯仿萃取2 3次，取水相用0.1 0. 2mol/L鹽酸調(diào)節(jié)pH至2 4后用氯仿萃取2 3次,合并有機(jī)相,加無(wú)水Na2SO4干燥后過(guò)濾，取濾液于50 55°C濃縮至3 5mL,冷卻至室溫,加20 30倍濃縮液體積的無(wú)水乙醚結(jié)晶，放入_4°C冰箱冷藏24h后過(guò)濾，取濾渣于25 30°C真空干燥8 12小時(shí)，得到端羧基聚乙二醇。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種卡佩他濱藥物載體的制備方法，其特征在于步驟(2)中所述的活化采用以下方法進(jìn)行將端羧基聚乙二醇溶于二氯甲烷，使端羧基聚乙二醇在二氯甲烷的濃度為0.1 0. 5g/mL,加入1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽室溫活化8 24小時(shí)，1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽與端羧基聚乙二醇的物質(zhì)的量的比為1. 2 1.5 :1。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種卡佩他濱藥物載體的制備方法，其特征在于步驟(2)中所述的羥基聚合物為聚(乳酸-羥基乙酸)、聚乳酸、殼聚糖或聚己內(nèi)酯；所述的酯化反應(yīng)在4- 二甲氨基吡啶和三乙胺中進(jìn)行，4- 二甲氨基吡啶與端羧基聚乙二醇的物質(zhì)的量的比為I 1.2 :1，三乙胺與4-二甲氨基吡啶的物質(zhì)的量的比為0.1 0.5 :1。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種卡佩他濱藥物載體的制備方法，其特征在于步驟(3)中所述的活化采用以下方法進(jìn)行將兩嵌段化合物溶于二氯甲烷，使端羧基聚乙二醇在二氯甲烷的濃度為0.1 0. 5g/mL,加入1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽室溫活化8 24小時(shí)，1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽與兩嵌段化合物的物質(zhì)的量的比為1. 2 1. 5 :1。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種卡佩他濱藥物載體的制備方法，其特征在于步驟(3)中所述的反應(yīng)在添加4-二甲氨基吡啶和三乙胺的體系中進(jìn)行，4-二甲氨基吡啶與端羧基聚乙二醇的物質(zhì)的量的比為I 1. 2 :1，三乙胺與4-二甲氨基吡啶的物質(zhì)的量的比為0.1 .0.5 :1o
10.一種卡佩他濱藥物載體，由權(quán)利要求1 9任一項(xiàng)所述的方法制備得到。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種卡佩他濱藥物載體及其制備方法。本發(fā)明將卡佩他濱與生物相容性好的高分子相連接，卡佩他濱分子中的胞苷結(jié)構(gòu)中存在兩個(gè)羥基官能團(tuán)，其中一個(gè)羥基官能團(tuán)因?yàn)槲蛔栎^小而顯示一定活性，在堿性條件下，通過(guò)催化劑催化其與活化了的羧基化合物發(fā)生酯化反應(yīng)，在與雙親性化合物化學(xué)鍵接后，形成一端疏水和一端親水的雙親性化合物；該化合物可用于制備載藥微球或者載藥納米粒。當(dāng)連接有藥物的高分子化合物另一端連接有腫瘤靶向功能的單抗、葉酸、轉(zhuǎn)鐵蛋白等，可引導(dǎo)藥物向腫瘤部位集中，減少藥物的突釋，也能在藥物釋放后期補(bǔ)充釋藥，使得藥物釋放能長(zhǎng)時(shí)間保持在適中的水平。
文檔編號(hào)A61K31/7068GK103055323SQ201210560598
公開(kāi)日2013年4月24日 申請(qǐng)日期2012年12月20日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月20日
發(fā)明者魏坤, 彭小敏 申請(qǐng)人:華南理工大學(xué)