一種三七總皂苷及其制備方法、制劑和應用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種三七總皂苷及其制備方法、制劑和應用，三七總皂苷包括人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1，人參皂苷Rg1與人參皂苷Rb1的重量比為1:0.9~1.1。制備方法包括將原料三七粉碎成粗粉；加入重量比8~12倍量60~80%的乙醇，回流提取2~4次，每次1~2h；每次提取后粗濾，合并粗濾液，然后進行精濾；精濾液濃縮至相對比密度1.3～1.5，即得到所述的三七總皂苷。將三七總皂苷制備成散劑或顆粒劑、膠囊劑、片劑、丸劑、口服液、注射劑。三七總皂苷在制備預防和/或治療缺血性腦血管病藥物中的應用。本發(fā)明控制三七總皂苷的人參皂苷Rg1與人參皂苷Rb1的重量比在1:0.9~1.1的范圍內。該三七總皂苷能夠減小腦缺血/再灌注引起的腦梗死面積，以及改善腦缺血再灌注引起的神經行為障礙。
【專利說明】—種三七總皂苷及其制備方法、制劑和應用
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于中藥提取物【技術領域】，具體涉及一種三七總皂苷及其制備方法、制劑和應用。
【背景技術】
[0002]缺血性腦血管病，是指由于各種原因導致的腦血管痙攣、腦供血不足、腦血栓、腦栓塞等疾病，致使腦血管功能障礙，尤其以腦血管堵塞最多。腦缺血能夠引起離子平衡喪失、興奮性氨基酸的過度釋放、氧化應激增加、細胞凋亡并最終導致腦組織壞死。該病在現實生活中的發(fā)病率、致殘率和致死率都很高，已經成為嚴重危害人類健康的疾病之一。[0003]三七為五加科植物，別名田七、山漆、金不換、血參、參三七等。性溫，味甘、微苦；歸肝經、胃經、心經、肺經、大腸經。具有止血、散血、定痛功效。一般用于治療跌撲瘀腫、胸痹絞痛、癥瘕、血瘀經閉、痛經、產后瘀陰腹痛、瘡癰腫痛等癥?，F代研究表明:三七的主要活性成分是三七總皂苷(PNS)，三七總皂苷包括人參皂苷Rgl、人參皂苷Rbl、三七皂苷Rl等多種活性成分，其中人參皂苷Rbl的含量最高，人參皂苷Rgl次之。三七具有促進血液細胞新陳代謝，平衡調節(jié)血液細胞；雙向調節(jié)中樞神經，提高腦力，增強學習和記憶能力；增強機體免疫功能，抗腫瘤；止血、活血化瘀；保肝、抗炎；延緩衰老等。三七總皂苷在心血管疾病、免疫、內分泌和中樞神經系統(tǒng)中的藥理學活性有報道(Ng，TB.Pharmacologicalactivity of sanchi ginseng (Panax notoginseng).J Pharm Pharmacol, 2006, 58 (8):1007-1019.)。但迄今為止，用三七總皂苷在預防和/或治療腦缺血方面的作用未見報道。

【發(fā)明內容】

[0004]本發(fā)明的第一目的在于提供一種三七總皂苷，第二目的在于提供該三七總皂苷的制備方法，第三目的在于提供該三七總皂苷的制劑，第四目的在于提供該三七總皂苷的應用。
[0005]本發(fā)明的第一目的是這樣實現的，所述的三七總皂苷包括人參皂苷Rgl、人參皂苷Rbl，所述的人參皂苷Rgl與人參皂苷Rbl的重量比為1:0.9^1.1。
[0006]作為優(yōu)選技術方案，所述的人參皂苷Rgl與人參皂苷Rbl的重量比為1:1。
[0007]本發(fā)明的第二目的是這樣實現的，包括原料處理、回流提取、過濾濃縮步驟，具體為:
A、原料處理:將原料三七粉碎成粗粉；
B、回流提取:加入重量比8~12倍量60-80%的乙醇，回流提取2~4次，每次f2h ；
C、過濾濃縮干燥:每次提取后粗濾，合并粗濾液，然后進行精濾；精濾液濃縮至相對比密度1.3~1.5，即得到所述的三七總皂苷。
[0008]本發(fā)明的第三目的是這樣實現的，將所述的三七總皂苷制備成散劑，或者在所述的三七總皂苷中加入藥學上接受的輔料制備成顆粒劑、膠囊劑、片劑、丸劑、口服液或注射劑。[0009]本發(fā)明的第四目的是這樣實現的，所述的三七總皂苷在制備預防和/或治療缺血性腦血管病藥物中的應用。
[0010]本發(fā)明采用新的方法控制三七總皂苷的核心成份，使人參皂苷Rgl與人參皂苷Rbl的重量比控制在1:0.9^1.1的范圍內。以該三七總皂苷進行試驗，發(fā)現三七總皂苷能夠減小腦缺血/再灌注引起的腦梗死面積，以及改善腦缺血再灌注引起的神經行為障礙，即，對于預防和/或治療缺血性腦血管病起作用。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0011]圖1為三七總皂苷改善腦缺血再灌注小鼠的神經行為障礙(與Sham組相比，#< 0.001，與 MCAO 組相比，* < 0.01)；
圖2為三七總皂苷減小缺血再灌注引起的腦梗死面積。
【具體實施方式】
[0012]下面結合實施例和附圖對本發(fā)明作進一步的說明，但不以任何方式對本發(fā)明加以限制，基于本發(fā)明教導所作的任何變換或改進，均落入本發(fā)明的保護范圍。
[0013]本發(fā)明所述的三七總皂苷，包括人參皂苷Rgl、人參皂苷Rbl，所述的人參皂苷Rgl與人參皂苷Rbl的重量比為1:0.9~1.1。
[0014]作為優(yōu)選實施方式，所述的人參皂苷Rgl與人參皂苷Rbl的重量比為1:1。
[0015]本發(fā)明所述三七總皂苷的制備方法，包括原料處理、回流提取、過濾濃縮步驟，具體為:
A、原料處理:將原料三七粉碎成粗粉；
B、回流提取:加入重量比8~12倍量60-80%的乙醇，回流提取2~4次，每次f2h ；
C、過濾濃縮干燥:每次提取后粗濾，合并粗濾液，然后進行精濾；精濾液濃縮至相對比密度1.3~1.5，即得到所述的三七總皂苷。
[0016]作為優(yōu)選實施方式:
A步驟所述的粗粉為20-80目。
[0017]B步驟中加入乙醇的量為重量比10倍量的70%乙醇。
[0018]B步驟所述的回流提取3次,每次1.5h。
[0019]C步驟所述的精濾為膜法過濾，濾膜的孔徑為0.1~IOMffl ;所述的濃縮為常壓濃縮或減壓濃縮，采取冷凍干燥、薄膜濃縮或噴霧干燥等方法進行濃縮。
[0020]本發(fā)明所述的三七總皂苷制備成散劑，或者所述的三七總皂苷加入藥學上接受的輔料制備成顆粒劑、膠囊劑、片劑、丸劑、口服液或注射劑。
[0021]所述的輔料包括藥學領域常規(guī)的填充劑、稀釋劑、粘合劑、賦形劑、吸收促進劑、填充劑、表面活性劑和穩(wěn)定劑等，必要時還可加入香味劑、色素和甜味劑等。可以加入一種或多種藥物上可接受的輔料。
[0022]本發(fā)明所述的三七總皂苷在制備預防和/或治療缺血性腦血管病中的應用。
[0023]實施例1
將原料三七粉碎成20目的粗粉，取粗粉10kg，其中加入60%的乙醇80kg ;回流提取2次，每次Ih ;每次提取后用濾網粗濾，合并粗濾液；以0.1Mffl的膜精濾，得到的精濾液在常壓條件下采用常壓干燥法濃縮至，濃縮至相對比密度1.3，即得到所述的三七總皂苷。
[0024]經測定，制備的三七總皂苷中人參皂苷Rgl與人參皂苷Rbl的重量比為1:0.9。
[0025]實施例2
將原料三七粉碎成80目的粗粉，取粗粉15kg，其中加入80%的乙醇180kg ;回流提取4次，每次2h ;每次提取后用濾袋粗濾，合并粗濾液；以IOMffl的膜精濾，得到的精濾液在減壓條件下采用減壓干燥法濃縮至，濃縮至相對比密度1.5，即得到所述的三七總皂苷。
[0026]經測定，制備的三七總皂苷中人參皂苷Rgl與人參皂苷Rbl的重量比為1:1.1。
[0027]實施例3
將原料三七粉碎成50目的粗粉，取粗粉10kg，其中加入70%的乙醇IOOkg ;回流提取3次，每次1.5h ;每次提取后用濾袋粗濾，合并粗濾液；以IOMffl的膜精濾，得到的精
濾液在減壓條件下采用冷凍干燥法濃縮至，濃縮至相對比密度1.5，即得到所述的三七總皂苷。
[0028]經測定，制備的三七總皂苷中人參皂苷Rgl與人參皂苷Rbl的重量比為1:1。
[0029]實施例4
取實施例1制備的三七總皂苷進行包裝，制備成散劑。
[0030]實施例5 取實施例2制備的三七總皂苷加入藥學上接受的輔料制備成顆粒劑。
[0031]實施例6
取實施例3制備的三七總皂苷加入藥學上接受的輔料制備成膠囊劑。
[0032]實施例7
取實施例1制備的三七總皂苷加入藥學上接受的輔料制備成片劑。
[0033]實施例8
取實施例2制備的三七總皂苷加入藥學上接受的輔料制備成丸劑。
[0034]實施例9
取實施例3制備的三七總皂苷加入藥學上接受的輔料制備成口服液。
[0035]實施例10
取實施例1制備的三七總皂苷加入藥學上接受的輔料制備成注射劑。
[0036]實施例11
1.材料和方法
1.1實驗動物
雄性C57BL/6小鼠，體重25-30g (購自重慶醫(yī)科大學)。
[0037]1.2 試劑
采用實施例3制備的三七總皂苷，用生理鹽水溶解，40mg/kg腹腔注射兩天。2，3，5_氯化三苯基四氮唑(TTC)購自Sigma。
[0038]1.3 方法
腦中動脈阻塞(MCAO)再灌注方法:腹腔注射戊巴比妥鈉(50mg/kg)將小鼠麻醉。仰臥位將小鼠四肢用膠帶固定，在頸部沿中線剪開皮膚，鈍性分離皮下組織，分離到氣管前肌后，沿右側胸鎖乳突肌向下分離肌肉和筋膜，分離出右側頸總動脈(CCA)、頸外動脈(ECA)和頸內動脈(ICA)。在CCA近心端和ECA遠心端各掛一根線，將血管結扎。再在CCA掛一根線，以備后面固定線栓用。用眼科剪在CCA剪一個傾斜的切口(眼科剪與血管約成45度角)，這樣在血液剛流出時仍能看到上翻的血管切口。用眼科鑷夾緊栓線從CCA插入，并插進ICA，至栓線標記到分叉處停止，固定栓線?？p合傷口，放在20-25°C的環(huán)境中飼養(yǎng)，兩小時后將線栓拔出，再灌注24小時。進行神經行為學評分后頸椎脫白處死，取腦進行TTC染色。
[0039]小鼠被隨機分成6組，即假手術Sham組，MCAO模型組，Rgl給藥組，Rbl給藥組，Rgl/Rbl給藥組和三七總皂苷(PNS)給藥組，每組6只。藥物腹腔注射兩天，每天兩次，手術前I小時再給藥一次，Sham組和MCAO模型組在同一時間腹腔注射生理鹽水。
[0040]1.4神經行為學評分
再灌注24小時后，按Longa評分法對腦缺血模型進行評分。該評分辦法分5個等級，如下述:
O分:正常，無神經功能缺損；
I分:對側(即左側)前爪不能完全伸展，輕度神經功能缺損；
2分:行走時，小鼠向對側轉圈，中度神經功能缺損；
3分:行走時，小鼠身體向對側傾倒，重度神經功能缺損； 4分:不能自發(fā)行走，有意識喪失。
[0041]1.5 TTC 染色
將小鼠頸椎脫臼處死，取腦，去除嗅球、小腦和腦干后，冠狀切成6片進行TTC染色，37°〇避光孵育30 min，梗死面積呈白色。
[0042]2.結果
2.1三七總皂苷改善了 MCAO引起的神經學行為障礙；
2.2三七總皂苷減小了 MCAO引起的腦梗死面積,但作用程度不一。
[0043]3.結論
三七總皂苷具有預防和/或治療缺血性腦血管病的作用。
【權利要求】
1.一種三七總皂苷，包括人參皂苷Rgl、人參皂苷Rbl，其特征在于所述的人參皂苷Rgl與人參皂苷Rbl的重量比為1:0.9~1.1。
2.根據權利要求1所述的三七總皂苷，其特征在于所述的人參皂苷Rgl與人參皂苷Rbl的重量比為1:1。
3.—種權利要求1或2所述三七總皂苷的制備方法，其特征在于包括原料處理、回流提取、過濾濃縮步驟，具體包括: A、原料處理:將原料三七粉碎成粗粉； B、回流提取:加入重量比8~12倍量60-80%的乙醇，回流提取2~4次，每次f2h ； C、過濾濃縮干燥:每次提取后粗濾，合并粗濾液，然后進行精濾；精濾液濃縮至相對密度1.3^1.5，即得到所述的三七總皂苷。
4.根據權利要求3所述的三七總皂苷制備方法，其特征在于A步驟所述的粗粉為20~80目。
5.根據權利要求3所述的三七總皂苷制備方法，其特征在于B步驟中加入乙醇的量為重量比10倍量的70%乙醇。
6.根據權利要求3所述的三七總皂苷制備方法，其特征在于B步驟所述的回流提取3次，每次1.5h。
7.根據權利要求3所述的三七總皂苷制備方法，其特征在于C步驟所述的過濾為膜法精濾，濾膜的孔徑為0.f IOMffl;所述的濃縮為常壓濃縮或減壓濃縮，采取冷凍干燥、薄膜濃縮或噴霧干燥等方法進行濃縮。`
8.—種權利要求1或2所述的三七總皂苷制劑，其特征在于將所述的三七總皂苷制備成散劑。
9.一種權利要求1或2所述的三七總皂苷制劑，其特征在于所述的三七總皂苷中加入藥學上接受的輔料制備成顆粒劑、膠囊劑、片劑、丸劑、口服液或注射劑。
10.一種權利要求1或2所述的三七總皂苷在制備預防和/或治療缺血性腦血管病中的應用。
【文檔編號】A61P25/00GK103877134SQ201210561300
【公開日】2014年6月25日 申請日期:2012年12月21日 優(yōu)先權日:2012年12月21日
【發(fā)明者】白潔, 楊兆祥, 曾憲思, 普俊學, 周小爽, 龔云麒, 羅富城 申請人:昆明制藥集團股份有限公司