專利名稱：用于治療骨質(zhì)疏松和血栓的msCT-AcAP5融合蛋白及編碼該融合蛋白的核酸的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及ー種融合蛋白及編碼該融合蛋白的核酸。
背景技術(shù)：
血栓形成是ー種涉及許多彼此相互作用的遺傳和環(huán)境因素的多因素變化的過程。而對(duì)于老年人其凝血系統(tǒng)又有其特殊性，老年人纖維蛋白原(FIB)含量、組織型纖溶酶原激活物増加以及纖溶酶原激活物抑制劑復(fù)合物的増加都導(dǎo)致老年人的高凝狀態(tài)，所以更容易形成血栓；其中研究發(fā)現(xiàn)絕經(jīng)期后的女性的血栓發(fā)生率遠(yuǎn)高于男性。
老年人骨質(zhì)疏松發(fā)病率較高，全球有2億骨質(zhì)疏松患者，并且女性多于男性。根據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)的標(biāo)準(zhǔn)，美國國家健康和營養(yǎng)調(diào)查(NHANES III，1988 1994年)結(jié)果表明，骨質(zhì)疏松嚴(yán)重影響老年人生活質(zhì)量，50歲以上人群中，1/2的女性、1/5的男性在他們的一生中都會(huì)出現(xiàn)骨質(zhì)疏松性骨折，一旦患者經(jīng)歷了第一次骨質(zhì)疏松性骨折，繼發(fā)性骨折的危險(xiǎn)明顯加大。中國老年人居于世界首位，現(xiàn)有骨質(zhì)疏松癥患者9000萬，占總?cè)丝诘?. 1%。隨著社會(huì)老齡化的進(jìn)程，骨質(zhì)疏松癥的發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，預(yù)計(jì)到2050年將增加到2. 21億，那時(shí)全世界一半以上的骨質(zhì)疏松性骨折將發(fā)生在亞洲，絕大部分在中國。有學(xué)者對(duì)1995 1996年美國骨質(zhì)疏松、心肌梗死、卒中和乳腺癌的年發(fā)生數(shù)進(jìn)行調(diào)查顯示，每年發(fā)生骨質(zhì)疏松性骨折150萬次，其中椎體骨折70萬次，腕部骨折20萬次，髖部骨折30萬次，其它骨折30萬次。對(duì)于老年人骨質(zhì)疏松和血栓已成為常見多發(fā)病，且往往同時(shí)存在，特別是絕經(jīng)期后的女性。如果患者服用多種藥物同時(shí)治療骨質(zhì)疏松和血栓，容易產(chǎn)生藥物拮抗反應(yīng)；若要錯(cuò)開服藥時(shí)間一方面要靠考慮藥物的半衰期，另ー方面還要考慮藥物有效濃度，而且給患者造成不便。目前缺乏ー種可以同時(shí)有效治療骨質(zhì)疏松和血栓的藥品。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決目前尚無同時(shí)有效治療骨質(zhì)疏松和血栓藥品的缺陷，而提供的ー種用于治療骨質(zhì)疏松和血栓的msCT-AcAP5融合蛋白及編碼該融合蛋白的核酸。本發(fā)明用于治療骨質(zhì)疏松和血栓的msCT-AcAP5融合蛋白的氨基酸序列如SEQ IDNO 2所示。本發(fā)明上述用于治療骨質(zhì)疏松和血栓的msCT-AcAP5融合蛋白的核酸序列如SEQID NO 1 所示。本發(fā)明用于治療骨質(zhì)疏松和血栓的msCT-AcAP5融合蛋白含有msCT和犬鉤蟲抗凝血肽(AcAP5)，共112個(gè)氨基酸。本發(fā)明用于治療骨質(zhì)疏松和血栓的msCT-AcAP5融合蛋白可同時(shí)治療骨質(zhì)疏松和血栓，適合同時(shí)患有這兩種疾病的患者使用。本發(fā)明用于治療骨質(zhì)疏松和血栓的msCT-AcAP5融合蛋白微生物制劑，不產(chǎn)生拮抗反應(yīng)，使用安全。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明技術(shù)方案不局限于以下所列舉具體實(shí)施方式
，還包括各具體實(shí)施方式
間的任意組合。
具體實(shí)施方式
一本實(shí)施方式用于治療骨質(zhì)疏松和血栓的msCT_AcAP5融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID N0:2所示。本實(shí)施方式用于治療骨質(zhì)疏松和血栓的msCT_AcAP5融合蛋白的核酸序列如SEQID NO 1所示，該核酸序列由生物工程公司合成，制成含有融合蛋白的核酸的質(zhì)粒載體pUC(msCT/AcAP5)。將pUC (msCT/AcAP5)載體用BamH I和EcoR I雙酶切出來(酶切反應(yīng)體系如表I所示，酶切反應(yīng)在37°C條件下反應(yīng)10h，然后1. 5%瓊脂糖凝膠電泳，目的片段用DNAGEL EXTRACTION KIT純化回收)，并用BamHI和EcoR I雙酶切pGEX_6P_l (酶切反應(yīng)體系 如表2所示，酶切反應(yīng)在37°C條件下反應(yīng)10h，然后0. 6%瓊脂糖凝膠電泳，目的片段用DNAGEL EXTRACTION KIT純化回收)；再將本實(shí)施方式用于治療骨質(zhì)疏松和血栓的msCT-AcAP5融合蛋白的DAN片段(msCT/AcAP5)與經(jīng)過雙酶切的載體pGEX-6P-l的連接(連接反應(yīng)體系如表3所示)。表I
pUC (msCT/AcAP5)20[i\
IOXM buffer6[^1KamHX3(il
EcoR I3[j,l
不含DNA酶的ddH2028^1表2
載體 pGEX-6P-l20[i\
IOXM buffer6|j,lBamHX3(il
EcoR I3(il
不含 DNA 酶的 ddH202%\i\表權(quán)利要求
1.用于治療骨質(zhì)疏松和血栓的msCT-AcAP5融合蛋白，其特征在于用于治療骨質(zhì)疏松和血栓的msCT-AcAP5融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO :2所示。
2.編碼權(quán)利要求1用于治療骨質(zhì)疏松和血栓的msCT-AcAP5融合蛋白的核酸，其特征在于該核酸的序列如SEQ ID NO 1所示。
全文摘要
用于治療骨質(zhì)疏松和血栓的msCT-AcAP5融合蛋白及編碼該融合蛋白的核酸，它涉及一種融合蛋白及編碼該融合蛋白的核酸。解決目前尚無同時(shí)有效治療骨質(zhì)疏松和血栓藥品的缺陷。用于治療骨質(zhì)疏松和血栓的msCT-AcAP5融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO2所示。該融合蛋白核酸的序列如SEQ ID NO1所示。本發(fā)明可用于醫(yī)藥領(lǐng)域。
文檔編號(hào)A61P19/10GK103013965SQ20121058561
公開日2013年4月3日 申請(qǐng)日期2012年12月31日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月31日
發(fā)明者余瓊 申請(qǐng)人:黑龍江大學(xué)