包含迷迭香提取物和乙酸視黃醇酯的透明質(zhì)酸分解抑制劑的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及提供具有優(yōu)異的透明質(zhì)酸酶抑制作用的透明質(zhì)酸酶抑制劑。更具體而言，提供包含具有透明質(zhì)酸酶抑制作用的迷迭香提取物、和增強(qiáng)迷迭香提取物的透明質(zhì)酸酶抑制作用的乙酸視黃醇酯的透明質(zhì)酸酶抑制劑。
【專利說(shuō)明】包含迷迭香提取物和乙酸視黃醇酯的透明質(zhì)酸分解抑制劑
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及具有優(yōu)異的透明質(zhì)酸酶抑制作用的透明質(zhì)酸酶抑制劑。
【背景技術(shù)】
[0002]近年來(lái)，與老化有關(guān)的研究進(jìn)展。關(guān)于皮膚老化的原因，宏觀上看年齡增長(zhǎng)為重要的因素，但除此以外，也可舉出由干燥、氧化、太陽(yáng)光(紫外線)等帶來(lái)的影響作為與皮膚老化有關(guān)的直接因素。作為皮膚老化的具體現(xiàn)象，已知以透明質(zhì)酸為代表的粘多糖類的減少、膠原的交聯(lián)反應(yīng)、由紫外線帶來(lái)的細(xì)胞損傷等。
[0003]其中，在β -D- N —乙酰葡糖胺與β — D —葡糖醛酸交替地結(jié)合的直鏈狀的高分子多糖中，作為與硫酸軟骨素等一起廣泛存在于哺乳動(dòng)物的結(jié)締組織中的糖胺聚糖之一的透明質(zhì)酸具有細(xì)胞間隙中的水分的保持、基于在組織內(nèi)形成膠狀基質(zhì)的細(xì)胞的保持、組織的潤(rùn)滑性與柔軟性的保持、對(duì)于機(jī)械阻礙等外力的抵抗、和細(xì)菌感染的防止等多種功能(參照非專利文獻(xiàn)I)。此外，可以認(rèn)為皮膚的透明質(zhì)酸量隨著年齡增長(zhǎng)而減少，與此相伴，小皺紋、粗澀等皮膚老化出現(xiàn)。因此，作為這樣的老化了的皮膚的改善劑，提出了多種配合有透明質(zhì)酸的化妝品。然而這些以往的化妝品僅發(fā)揮皮膚表面的保濕效果，不能本質(zhì)上改善老化肌膚。此外，最近還提出了多種配合有使皮膚中的透明質(zhì)酸量上升的藥劑的化妝品(參照專利文獻(xiàn)I)，但現(xiàn)狀是它們也沒(méi)有達(dá)到明確地改善老化肌膚，進(jìn)行治療的效果。通過(guò)透明質(zhì)酸的外用或透明質(zhì)酸的產(chǎn)生促進(jìn)劑的外用，不一定可以明確地改善老化肌膚，可以認(rèn)為是因?yàn)?，皮膚中的透明質(zhì)酸的分解速度快。皮膚中的透明質(zhì)酸，在生物體內(nèi)合成的同時(shí)受到由作為其分解酶的透明質(zhì)酸酶引起的酶解，因此有報(bào)告酶解速度快，皮膚中的透明質(zhì)酸的半衰期為大約I天(參照非專利文獻(xiàn)2)。透明質(zhì)酸酶是廣泛地分布于生物體中，連皮膚中也存在的酶，顧名思義 分解透明質(zhì)酸。因此，可以認(rèn)為抑制促進(jìn)透明質(zhì)酸分解的透明質(zhì)酸酶的活性，有助于制劑中使用的透明質(zhì)酸的穩(wěn)定性、涂敷于皮膚后的制劑的透明質(zhì)酸和皮膚中存在的透明質(zhì)酸的穩(wěn)定性。此外，透明質(zhì)酸酶作為炎癥酶也是已知的，已知抑制其活性可抑制炎癥，此外，在變態(tài)反應(yīng)中也起抑制性作用。從以上那樣的理由出發(fā)，為了維持皮膚的彈性和保濕性，防止皺紋、小皺紋、粗澀，維持具有濕潤(rùn)的年輕肌膚的狀態(tài)，要求開(kāi)發(fā)作為透明質(zhì)酸分解酶的透明質(zhì)酸酶的有效抑制劑。
[0004]迷迭香、百里香和蜜蜂花這樣的唇形科植物的抽提物顯示透明質(zhì)酸酶的抑制活性、血小板凝集抑制作用，以及己糖胺酶游離抑制作用，并顯示具有抗炎癥作用(專利文獻(xiàn)2)。在該文獻(xiàn)中，雖然關(guān)于由迷迭香、百里香或蜜蜂花的任一種抽提的透明質(zhì)酸酶抑制物質(zhì)、它們的混合物、以及與其它抗變態(tài)反應(yīng)劑的混合物有記載，但是對(duì)于發(fā)揮超過(guò)相加效果的協(xié)同效果那樣的混合物沒(méi)有任何記載。
[0005]現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)
[0006]專利文獻(xiàn)
[0007]專利文獻(xiàn)1:日本特開(kāi)平11 - 209261號(hào)公報(bào)
[0008]專利文獻(xiàn)2:日本特開(kāi)平8 - 333267號(hào)公報(bào)[0009]非專利文獻(xiàn)
[0010]非專利文獻(xiàn)1:“BioIndustry”，vol.8，p.346 (1991)
[0011]非專利文獻(xiàn)2:TammiR.etal,.J.1nvest.Dermatol., 97, 126 ~130 (1991)

【發(fā)明內(nèi)容】

[0012]發(fā)明所要解決的課題
[0013]本發(fā)明是鑒于上述情形而提出的，其目的在于提供安全并且可以簡(jiǎn)便使用的在人中具有透明質(zhì)酸酶抑制作用的透明質(zhì)酸酶抑制劑。
[0014]用于解決課題的方法
[0015]本發(fā)明人等為了解決上述課題，廣泛地對(duì)于各種物質(zhì)的透明質(zhì)酸酶抑制作用進(jìn)行了深入研究，結(jié)果令人驚訝地發(fā)現(xiàn)，在將已知透明質(zhì)酸酶抑制作用的迷迭香的提取物、與未知透明質(zhì)酸酶抑制作用的維生素A類并用的情況下，透明質(zhì)酸酶抑制作用被大幅度增強(qiáng)，基于此完成本發(fā)明。
[0016]因此，本發(fā)明涉及以下的發(fā)明:
[0017][I] 一種透明質(zhì)酸酶抑制劑，其包含迷迭香提取物和維生素A類。
[0018][2]根據(jù)[I ]所述的透明質(zhì)酸酶抑制劑，上述維生素A類選自視黃醇、乙酸視黃醇酯、棕櫚酸視黃醇酯。
[0019][3]根據(jù)[I]或[2]所述的透明質(zhì)酸酶抑制劑，上述維生素A類為乙酸視黃醇酯。
[0020][4] 一種皮膚問(wèn)題的改善或預(yù)防用的皮膚外用劑，其包含[I]~[3的任一項(xiàng)所述的透明質(zhì)酸酶抑制劑，所述皮膚問(wèn)題選自皮膚老化、皺紋、肌膚粗糙、干燥肌膚、粗澀、痤瘡和特應(yīng)性皮炎。
[0021][5]—種用于治療透明質(zhì)酸減少相關(guān)疾病的皮膚外用劑，其包含[I]~[3]的任一項(xiàng)所述的透明質(zhì)酸酶抑制劑，所述透明質(zhì)酸減少相關(guān)疾病選自特應(yīng)性皮炎、干燥肌膚、關(guān)節(jié)炎、牙齦炎、風(fēng)濕病、骨關(guān)節(jié)病和燙傷。
[0022][6]迷迭香提取物和維生素A類用于改善或預(yù)防透明質(zhì)酸減少的應(yīng)用。
[0023][7]迷迭香提取物和維生素A類用于預(yù)防或改善皮膚問(wèn)題、或者用于治療透明質(zhì)酸減少相關(guān)疾病的應(yīng)用，所述皮膚問(wèn)題為皮膚老化、皺紋、肌膚粗糙、干燥肌膚、粗澀、痤瘡、特應(yīng)性皮炎等，所述透明質(zhì)酸減少相關(guān)疾病為干燥肌膚、關(guān)節(jié)炎、牙齦炎、風(fēng)濕病、骨關(guān)節(jié)病、燙傷等。
[0024][8]—種透明質(zhì)酸酶抑制方法，其包括對(duì)患有透明質(zhì)酸減少的對(duì)象施與迷迭香提取物和維生素A類。
[0025][9] 一種用于改善或預(yù)防透明質(zhì)酸減少的美容方法或治療方法，其包括對(duì)透明質(zhì)酸減少的對(duì)象施與迷迭香提取物和維生素A類。
[0026][10]根據(jù)[9]所述的美容方法或治療方法，上述美容方法或治療方法用于改善或預(yù)防皺紋、肌膚粗糙、干燥肌膚、粗澀、痤瘡、特應(yīng)性皮炎等皮膚問(wèn)題。
[0027][11] 一種透明質(zhì)酸減少相關(guān)疾病的治療方法，其包括對(duì)患有透明質(zhì)酸減少的對(duì)象施與迷迭香提取物和維生素A類，所述透明質(zhì)酸減少相關(guān)疾病為特應(yīng)性皮炎、干燥肌膚、關(guān)節(jié)炎、牙齦炎、風(fēng)濕病、骨關(guān)節(jié)病、燙傷等。
[0028][12]迷迭香提取物和維生素A類用于制造透明質(zhì)酸酶抑制劑的應(yīng)用。[0029][13]迷迭香提取物和維生素A類用于制造化妝品或藥品的應(yīng)用，所述化妝品或藥品用于改善或預(yù)防老化、皺紋、肌膚粗糙、干燥肌膚、粗澀、痤瘡、特應(yīng)性皮炎等皮膚問(wèn)題。
[0030][14]迷迭香提取物和維生素A類用于制造藥品的應(yīng)用，所述藥品用于治療特應(yīng)性皮炎、干燥肌膚、關(guān)節(jié)炎、牙齦炎、風(fēng)濕病、骨關(guān)節(jié)病、燙傷等透明質(zhì)酸減少相關(guān)疾病。
[0031]發(fā)明的效果
[0032]本發(fā)明的透明質(zhì)酸酶抑制劑所包含的維生素A類，在單獨(dú)使用的情況下，不發(fā)揮透明質(zhì)酸酶抑制作用，或基本上不發(fā)揮，但在與迷迭香提取物一并使用的情況下，能夠顯著地增強(qiáng)迷迭香提取物所具有的透明質(zhì)酸酶抑制作用，發(fā)揮改善或預(yù)防人皮膚的老化、皺紋、肌膚粗糙、干燥肌膚、粗澀、痤瘡、特應(yīng)性皮炎等皮膚問(wèn)題、或者改善或預(yù)防關(guān)節(jié)炎、牙齦炎、風(fēng)濕病和骨關(guān)節(jié)病、燙傷等透明質(zhì)酸減少相關(guān)疾病中的任一效果。
【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0033]圖1為顯示迷迭香提取物具有透明質(zhì)酸酶抑制作用，但乙酸視黃醇酯不具有透明質(zhì)酸酶抑制作用，另一方面通過(guò)迷迭香提取物與乙酸視黃醇酯的并用，迷迭香提取物的透明質(zhì)酸酶抑制作用顯著地增強(qiáng)了的圖。
【具體實(shí)施方式】
[0034]在本發(fā)明中，所謂透明質(zhì)酸酶，為通過(guò)切斷糖苷鍵來(lái)分解透明質(zhì)酸的酶的總稱。透明質(zhì)酸酶廣泛地分布于動(dòng)物組織，通過(guò)抑制其活性，可以期待在體內(nèi)，特別是在皮膚、關(guān)節(jié)液等中提高透明質(zhì)酸含量。被切斷的糖苷鍵有時(shí)為葡糖苷酸鍵或N —乙酰氨基葡糖苷鍵。
[0035]在本發(fā)明中所謂透明質(zhì)酸酶抑制劑，是指抑制透明質(zhì)酸酶的透明質(zhì)酸分解活性的藥劑，通過(guò)該藥劑，能夠增加體內(nèi)，特別是關(guān)節(jié)液、皮膚中的透明質(zhì)酸含量。本發(fā)明的優(yōu)選方式中，透明質(zhì)酸酶抑制劑特別地包含迷迭香提取物和維生素A類。
[0036]已知，透明質(zhì)酸在體內(nèi)與彈性、保濕性、潤(rùn)滑性有關(guān)，隨著老化而透明質(zhì)酸含量降低，而且由于皮膚中的透明質(zhì)酸的降低而產(chǎn)生皺紋、肌膚粗糙、干燥肌膚、粗澀等癥狀。此外，已知透明質(zhì)酸酶與炎癥有關(guān)，還已知透明質(zhì)酸酶的活化與特應(yīng)性皮炎、痤瘡相關(guān)。因此，通過(guò)本發(fā)明的透明質(zhì)酸酶抑制劑，能夠治療、改善或預(yù)防老化、皺紋、肌膚粗糙、干燥肌膚、粗澀、痤瘡、特應(yīng)性皮炎等皮膚問(wèn)題、以及透明質(zhì)酸減少相關(guān)疾病例如干燥肌膚、關(guān)節(jié)炎、牙齦炎、風(fēng)濕病和骨關(guān)節(jié)病、燙傷。
[0037]在本發(fā)明中，所謂迷迭香提取物，為來(lái)源于以地中海沿岸地區(qū)為原產(chǎn)地的唇形科迷迭香屬的迷迭香(Rosmarinus officinalis)的抽提物,該植物的植物整體,特別是全植株、葉和花作為原材料被使用。已知迷迭香提取物具有抗菌性、抗氧化效果、抗炎癥效果，報(bào)告了可以作為皮膚改善劑等防老劑、免疫刺激劑、抗糖尿病劑、抗骨質(zhì)疏松癥劑、抗肥胖劑、睡眠促進(jìn)劑、抗中樞神經(jīng)劑等藥品使用。
[0038]本發(fā)明的迷迭香提取物可以通過(guò)常規(guī)方法獲得，例如可以將植物與抽提溶劑一起浸潰或加熱回流后，過(guò)濾，濃縮來(lái)獲得。作為抽提溶劑，只要是通常抽提所用的溶劑，就可以任意使用，可以分別單獨(dú)或組合使用例如水、甲醇、乙醇、丙二醇、1，3 —丁二醇、甘油等醇類、含水醇類、氯仿、二氯乙烷、四氯化碳、丙酮、乙酸乙酯、己烷等有機(jī)溶劑等。還可以直接使用由上述溶劑抽提而得的抽提液，或者也可以使用將濃縮而成的提取物通過(guò)吸附法例如離子交換樹(shù)脂除去了雜質(zhì)的物質(zhì)，或利用多孔聚合物(例如7 >〃一9 ^卜XAD 一 2)的柱進(jìn)行吸附后，用甲醇或乙醇溶出，濃縮而得的物質(zhì)。此外，還可以使用干燥得到的物質(zhì)。此外，還可使用利用分配法，例如水/乙酸乙酯抽提得到的抽提物等。
[0039]這樣地獲得的上述植物或其抽提物都具有優(yōu)異的透明質(zhì)酸酶抑制作用。從用于直接適用于皮膚的化妝品或藥品例如皮膚外用劑等觀點(diǎn)出發(fā)，優(yōu)選使用低刺激性的溶劑例如水、1，3 一丁二醇、甘油等抽提得到的抽提物，優(yōu)選使用例如1，3 一丁二醇的50質(zhì)量％水溶液。
[0040]在將上述植物或其抽提物配合于化妝品或藥品中而使用的情況下，在化妝品或藥品總量中，作為干燥重量，優(yōu)選以0.00001~0.1質(zhì)量％來(lái)配合，更優(yōu)選以0.00005~0.01
質(zhì)量％，進(jìn)一步優(yōu)選以0.0001~0.001質(zhì)量％來(lái)配合。
[0041]已知如果維生素A類不足，則發(fā)生夜盲癥、佝僂病，并已知在皮膚中，發(fā)生皮膚、粘膜的角質(zhì)化，皮膚的異常干燥，色素沉積等，雖然為了對(duì)皮膚治療痤瘡、促進(jìn)皮膚更新而使用過(guò)，但對(duì)于可以增強(qiáng)透明質(zhì)酸酶抑制作用，沒(méi)有任何記載和暗示。作為維生素A類，包含視黃醇、視黃醛、視黃酸等維生素A群及其前體、衍生物例如乙酸視黃醇酯、棕櫚酸視黃醇酯、全反式視黃酸、視黃酸甲酯、視黃酸乙酯、視黃酸視黃醇酯等中的I種或2種以上成分。從適用于皮膚的觀點(diǎn)出發(fā)，優(yōu)選為視黃醇、乙酸視黃醇酯、棕櫚酸視黃醇酯，特別優(yōu)選為乙酸視黃醇酯。
[0042]本發(fā)明中使用的維生素A類的配合量只要可以增強(qiáng)迷迭香提取物的透明質(zhì)酸酶抑制效果，就沒(méi)有特別限制，例如作為化妝品或藥品整體，只要通常為0.000001~0.01質(zhì)量％，優(yōu)選為0.000005~0.001質(zhì)量％，特別優(yōu)選為0.00001~0.0001質(zhì)量%即可。
[0043]迷迭香提取物與維生素A類的配合比只要為可以增強(qiáng)迷迭香提取物的透明質(zhì)酸酶抑制效果的范圍即可 ，例如可以為相對(duì)于迷迭香提取物I質(zhì)量份，以維生素A類0.01質(zhì)量份~5質(zhì)量份使用，可以更優(yōu)選以0.05~I質(zhì)量份,進(jìn)一步優(yōu)選以0.1~0.5質(zhì)量份使用。
[0044]維生素A類通常不具有透明質(zhì)酸酶抑制作用，因此在與迷迭香提取物并用的情況下，如果使迷迭香提取物所具有的透明質(zhì)酸酶抑制作用增強(qiáng)，則可以說(shuō)發(fā)揮了超過(guò)相加的協(xié)同效果。例如，維生素A類即使具有透明質(zhì)酸酶抑制作用，其作用也弱，另一方面，在與迷迭香提取物并用的情況下，大幅度增強(qiáng)迷迭香提取物所具有的透明質(zhì)酸酶抑制作用，因此發(fā)揮了超過(guò)相加的協(xié)同效果。
[0045]本發(fā)明的透明質(zhì)酸酶抑制劑還可以配合在化妝品、藥品中。因此，除了迷迭香提取物和維生素A類以外，此外根據(jù)需要，在不損害本發(fā)明的效果的范圍內(nèi)，可以根據(jù)需要適宜配合通?；瘖y品、藥品等中使用的有效成分和/或賦形劑，例如保濕劑、抗氧化劑、油分、紫外線防御齊?、表面活性劑、增稠齊?、醇類、甘油、透明質(zhì)酸等基劑、pH調(diào)節(jié)劑粉末成分、紫外線吸收劑、穩(wěn)定劑、抗菌劑、香料、色料、水、各種皮膚營(yíng)養(yǎng)劑等。
[0046]此外，還可以適宜配合乙二胺四乙酸二鈉、乙二胺四乙酸三鈉、檸檬酸鈉、多磷酸鈉、偏磷酸鈉、葡糖酸等多價(jià)螯合劑、對(duì)羥基苯甲酸甲酯、對(duì)羥基苯甲酸乙酯、對(duì)羥基苯甲酸丁酯等防腐劑、咖啡因、丹寧、維拉帕米、凝血酸及其衍生物、甘草抽提物、光甘草定、木瓜的果實(shí)的熱水抽提物、各種生藥、生育酚乙酸酯、甘草酸及其衍生物或其鹽等藥劑、維生素C、抗壞血酸磷酸鎂、抗壞血酸葡糖苷、熊果苷、曲酸等美白劑、葡萄糖、果糖、甘露糖、蔗糖、海藻糖等糖類等。
[0047]此外，配合有本發(fā)明的透明質(zhì)酸酶抑制劑的化妝品或藥品可以為適用于外皮的化妝品、準(zhǔn)藥品等皮膚外用劑，可適用溶液系、增溶系、乳化系、粉末分散系、水一油二層系、水一油一粉末三層系、軟膏、化妝水、凝膠、氣溶膠等任意的劑型。
[0048]作為配合有本發(fā)明的透明質(zhì)酸酶抑制劑的化妝品，可舉出例如化妝水、乳液、霜(cream)、美容液、面膜等面部化妝品、粉底、口紅、眼影等彩妝化妝品、防曬劑、芳香化妝品、毛發(fā)用化妝品、浴用劑等，但不限于此。
[0049]此外，本發(fā)明的透明質(zhì)酸酶抑制劑除了經(jīng)皮施與以外，還可以通過(guò)經(jīng)口施與、其它非經(jīng)口施與(例如，經(jīng)粘膜、舌下、肌肉內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)或皮下施與)來(lái)施與。因此，本發(fā)明的透明質(zhì)酸酶抑制劑，除了配合在防止由透明質(zhì)酸量降低引起的皺紋、肌膚粗糙、干燥肌膚、粗澀、痤瘡、特應(yīng)性皮炎等皮膚問(wèn)題的皮膚外用所用的化妝品或藥品中以外，還可以配合在防止由老化引起的人體的透明質(zhì)酸量降低的食品、針對(duì)透明質(zhì)酸分解異常增強(qiáng)的癥狀特別是牙齦炎、風(fēng)濕病和骨關(guān)節(jié)病、關(guān)節(jié)炎的預(yù)防治療、燙傷的初期治療等的透明質(zhì)酸異常分解疾病治療劑等藥物組合物中。在使用本發(fā)明的透明質(zhì)酸酶抑制劑作為藥物組合物的情況下，其劑型沒(méi)有特別限制，可以根據(jù)施與途徑等進(jìn)行適宜選擇。例如，作為適于經(jīng)口施與的制劑，可舉出片劑、膠囊劑、散劑、細(xì)粒劑、顆粒劑、可溶液體制劑、糖漿劑等，作為適于非經(jīng)口施與的制劑，可舉出注射劑、點(diǎn)滴劑、栓劑、吸入劑、經(jīng)皮吸收劑、經(jīng)粘膜吸收劑、貼劑等。注射劑可以用于關(guān)節(jié)內(nèi)注射、靜脈注射、肌肉注射、皮下注射、點(diǎn)滴等的任一種。
[0050]本發(fā)明還涉及用于改善或預(yù)防透明質(zhì)酸減少的美容方法或治療方法，其包括對(duì)透明質(zhì)酸減少的對(duì)象涂敷迷迭香提取物和維生素A類。本發(fā)明的美容方法或治療方法中，迷迭香提取物與維生素A類可以同時(shí)涂敷，也可以空開(kāi)時(shí)間分別涂敷。所謂美容方法，不僅為個(gè)人進(jìn)行的方法，而且在提供與美容有關(guān)的商品時(shí)，作為與顧客對(duì)應(yīng)的化妝品的處方被提供，由醫(yī)師以外的化妝品銷售員、美容師來(lái)提供。
[0051]所謂透明質(zhì)酸減少的對(duì)象，是指除了隨著年齡增長(zhǎng)而透明質(zhì)酸減少的對(duì)象以外，患有特應(yīng)性皮炎、干燥肌膚、關(guān)節(jié)炎、牙齦炎、風(fēng)濕病、骨關(guān)節(jié)病、燙傷等透明質(zhì)酸減少相關(guān)疾病的對(duì)象。
[0052]實(shí)施例
[0053]接下來(lái)，舉出實(shí)施例進(jìn)一步詳細(xì)地說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明的技術(shù)范圍不受其任何限定。另外，配合量都為質(zhì)量％。
[0054]制造例:迷迭香抽提液的制造
[0055]相對(duì)于將迷迭香的葉IOkg切細(xì)了的物質(zhì)，添加50質(zhì)量％的1，3 —丁二醇水溶液，在室溫浸潰7~10天。浸潰后，過(guò)濾以除去不需要物，將濾液進(jìn)一步在低溫處培育7~10天。培育后進(jìn)行過(guò)濾以除去不需要物，從而取得迷迭香提取物BG。
[0056]實(shí)施例:透明質(zhì)酸分解抑制試驗(yàn)
[0057]將50 μ L的透明質(zhì)酸酶溶液(lmg/mL)( '>夕'' ^ r )V y.; 'y千y' ^ η >株式會(huì)社)放入至微管中，添加評(píng)價(jià)藥劑50μ L，在37°C培育10分鐘。作為評(píng)價(jià)藥劑，使用迷迭香提取物BG(丸善制藥(株))、乙酸視黃醇酯(?'一工一工uy ^ y (株))、迷迭香提取物BG和乙酸視黃醇酯，對(duì)于對(duì)照而言，代替評(píng)價(jià)藥劑而添加水。迷迭香提取物BG以透明質(zhì)酸鈉水溶液添加后的終濃度以干燥重量計(jì)為0.000165質(zhì)量％的方式添加，乙酸視黃醇酯以透明質(zhì)酸鈉水溶液添加后的終濃度為0.0000516質(zhì)量％的方式添加。培育后，添加lmg/mL透明質(zhì)酸鈉溶液(株式會(huì)社資生堂，分子量110~160萬(wàn))400 μ L，進(jìn)一步在37°C培育10分鐘后，添加50 μ I的氫氧化鈉水溶液(0.2Μ)，停止反應(yīng)。將該溶液煮沸3分鐘后，用流水冷卻，添加10%p - DMAB ( 二甲基氨基苯甲醛)溶液(f力5 f ^ ^株式會(huì)社)300 μ L，在37°C培育20分鐘?；謴?fù)至室溫后，每次100 μ L分次轉(zhuǎn)移至96孔板中，使用POWERSCANHT(DS 7 r —/SM才J r ^力 >株式會(huì)社)測(cè)定OD585nm。將對(duì)照的吸光度設(shè)為100得到的結(jié)果示于圖1中。由圖1示出，迷迭香提取物單獨(dú)具有透明質(zhì)酸酶抑制作用，另一方面，乙酸視黃醇酯不發(fā)揮透明質(zhì)酸酶抑制作用，但是在將迷迭香提取物與乙酸視黃醇酯并用的情況下，可以增強(qiáng)迷迭香提取物所具有的透明質(zhì)酸酶抑制作用。
[0058]
【權(quán)利要求】
1.一種透明質(zhì)酸酶抑制劑，其包含迷迭香提取物和維生素A類。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的透明質(zhì)酸酶抑制劑，所述維生素A類選自視黃醇、乙酸視黃醇酯、棕櫚酸視黃醇酯。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的透明質(zhì)酸酶抑制劑，所述維生素A類為乙酸視黃醇酯。
4.一種皮膚問(wèn)題的改善或預(yù)防用的皮膚外用劑，其包含權(quán)利要求1~3的任一項(xiàng)所述的透明質(zhì)酸酶抑制劑，所述皮膚問(wèn)題選自皮膚老化、皺紋、肌膚粗糙、干燥肌膚、粗澀、痤瘡和特應(yīng)性皮炎。
5.一種美容方法 ，其包括對(duì)透明質(zhì)酸減少的對(duì)象涂敷迷迭香提取物和維生素A類。
【文檔編號(hào)】A61K36/00GK103635200SQ201280004017
【公開(kāi)日】2014年3月12日 申請(qǐng)日期:2012年6月28日 優(yōu)先權(quán)日:2012年6月28日
【發(fā)明者】飯野雅人, 落合信彥, 常長(zhǎng)誠(chéng) 申請(qǐng)人:株式會(huì)社資生堂