一種用于預(yù)防和治療炎癥性疾病或哮喘的含有五瓣子楝樹提取物的藥物組合物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種用于預(yù)防和治療炎癥性疾病或哮喘的包含五瓣子楝樹提取物作為活性成分的藥物組合物。本發(fā)明的五瓣子楝樹提取物能夠抑制卵清蛋白誘導的哮喘動物模型的支氣管肺泡灌洗液中的嗜酸性粒細胞的增加，有抑制支氣管肺泡灌洗液和血液中免疫球蛋白和趨化因子（嗜酸性粒細胞趨化因子）分泌物的活性，并抑制巨噬細胞中的NO和TNF-α分泌物。因此，本發(fā)明的五瓣子楝樹提取物可以被有效地用作預(yù)防和治療炎癥性疾病或哮喘的藥物組合物的活性成分，以及預(yù)防和改善炎癥性疾病或哮喘的保健功能食品的活性成分。
【專利說明】一種用于預(yù)防和治療炎癥性疾病或哮喘的含有五瓣子楝樹提取物的藥物組合物
【背景技術(shù)】
[0001]1.【技術(shù)領(lǐng)域】
[0002]本發(fā)明涉及一種用于預(yù)防和治療炎癥性疾病或哮喘的含有五瓣子楝樹提取物作為活性組分的藥物組合物。
[0003]2.【背景技術(shù)】
[0004]炎癥被定義為由外來感染源入侵形成的膿腫的病理狀態(tài)，外來感染源例如細菌、真菌、病毒以及其他過敏原。尤其是，當外來細菌侵入特定組織并在其中繁殖時，白細胞識別它們并主動攻擊繁殖的細菌。在這個過程中，死亡的白細胞隨同被白細胞攻擊后死亡的細菌所產(chǎn)生的細胞溶解物一起在組織中累積，導致膿腫形成。對炎癥導致的膿腫的治療集中于抗炎作用。抗炎作用指的是使用抗菌劑抑制入侵細菌繁殖，或通過激活巨噬細胞或提高巨噬細胞吞噬膿腫中累積的外來物質(zhì)的功能從而幫助分解和消除這些入侵物質(zhì)。
[0005]通常，炎癥反應(yīng)是被入侵損壞的組織的恢復和再生的一種防御機制，導致了結(jié)構(gòu)變化，其中有局部血管、各種組織細胞和免疫細胞的參與。由外來物質(zhì)入侵誘發(fā)的炎癥反應(yīng)是保護生物的一種正常防御機制。然而，非正?；蜻^度誘發(fā)的炎癥反應(yīng)能引起各種疾病，被稱作炎癥性疾病。炎癥性疾病是通過用各種炎癥介質(zhì)放大或持續(xù)炎癥而將人類置于危險之中的疾病，各種炎癥介質(zhì)是在被外部刺激激活的目標細胞內(nèi)分泌的，炎癥疾病的例子如急性炎癥、風濕性關(guān)節(jié)炎等關(guān)節(jié)疾病、牛皮癬等皮膚疾病以及支氣管哮喘等過敏性疾病，等
坐寸ο
[0006]哮喘是以支氣管對各種刺激過度敏感反應(yīng)為特征的疾病，其臨床癥狀為氣喘、呼吸困難、以及由呼吸道內(nèi)廣泛狹窄引起的咳嗽。通常，這些癥狀可自然改善或通過治療改善。在大多數(shù)情況下，哮喘是過敏反應(yīng)，其特征為慢性氣道炎癥和支氣管過度反應(yīng)(Minoguchi K and Adachi M.Pathophysiology of asthma.1n:Cherniack NS, AltoseMD, Homma I,editors.Rehabilitation of the patient with respiratory disease.NewYork: McGraw-Hi 11, 1999, pp97-104o BP:Minoguchi K 和 Adachi M,哮喘的病理生理學。在:Cherniack NS, Altose MD, Homma I編輯,呼吸系統(tǒng)疾病患者的康復,紐約:麥格勞_希爾，1999，第 97-104 頁)。
[0007]哮喘主要分為兩類，分別為外源性哮喘和內(nèi)源性哮喘。外源性哮喘通過暴露于過敏原發(fā)展出癥狀。當皮膚測試或支氣管激發(fā)測試對一定的過敏原呈陽性時可被診斷為外源性哮喘，并且常見于年輕人群。外源性哮喘的主要原因是室內(nèi)灰塵和塵球，其他次要原因例如花粉、動物的上皮細胞和真菌。內(nèi)源性哮喘是由上呼吸道道感染、運動、焦慮、寒冷氣候和濕度變化誘發(fā)或加重的，常見于成年人中。還有其他哮喘的例子，如藥物誘發(fā)的哮喘、運動誘發(fā)的哮喘、以及職業(yè)性哮喘等等。
[0008]哮喘通常被理解為由已經(jīng)被TH2免疫細胞產(chǎn)生的白細胞介素_4、-5和-13增殖、分化并激活的炎癥細胞在呼吸道內(nèi)和呼吸道周圍組織內(nèi)遷移和浸潤引起的慢性炎癥疾病(Elias JA, et al.，J.Clin.1nvest.，111，pp291_297, 2003。即:Elias JA 等，臨床研究雜志，111，第291-297頁，2003年)。在那種情況下，被激活的炎癥細胞例如被激活的中性粒細胞、肥大細胞以及肺泡巨噬細胞，分泌多種炎癥介質(zhì)(半胱氨酸、白三烯和前列腺素)，在強烈的支氣管收縮反應(yīng)中發(fā)揮重要作用(Maggi E.，Immunotechnology, 3，pp233_244,1998;Pawankar R., Curr.0pin.Allergy Clin.Tmmunol., I, pp3-6, 2001;Barnes PJ,etal., Pharmacol Rev.，50，pp515_596, 1998。即 Maggi E.，免疫學技術(shù)，3，第 233-244 頁，1998年；Pawankar R.，免疫學新見，1，第3_6頁，2001年；Barnes PJ等,藥理學評論,50,第515-596 頁，1998 年)。
[0009]細胞因子例如IL-4、IL-5和IL-13的生成，以及炎癥細胞的激活和半胱氨酸白三烯的生物合成中涉及的在炎癥細胞內(nèi)分泌的免疫球蛋白E，包括由上述生成介導的嗜酸性粒細胞，是引發(fā)可導致哮喘的炎癥和過敏反應(yīng)的關(guān)鍵因素。因此，已經(jīng)嘗試開發(fā)新的藥物以抑制細胞因子和免疫球蛋白E的生成。
[0010]如今已經(jīng)采用了各種哮喘藥，但是其中許多具有副作用，需要慎重考慮。吸入型糖皮質(zhì)激素仍是最重要的具有優(yōu)良效果的哮喘治療藥物。但是，當糖皮質(zhì)激素被長期使用時，會產(chǎn)生嚴重的副反應(yīng)，如腎上腺功能抑制、骨礦物質(zhì)密度降低、影響生長發(fā)育、以及引發(fā)眼睛和皮膚的并發(fā)癥。在以前的報告中，糖皮質(zhì)激素據(jù)稱能夠增強膠原蛋白的合成(ffarshmana GS, et al., Am J Physiol274, 499-507，1998。SP:Warshmana GS 等，美國生理學雜志，274，第499-507頁，1998年)。即使使用糖皮質(zhì)激素治療多年后，使慢性哮喘患者的支氣管過度反應(yīng)性正?；臋C會也是非常小的。長期服用β-2激動劑也不能很有效地抑制氣道重塑((Jeffery PK, et al., Am Rev Respir Disl45:890_0，1992。即:Jeffery PK等，美國呼吸系疾病評論145:890-0，1992年)。連續(xù)服用β_2激動劑如沙美特羅(Salmeterol)和福莫特羅(Formoterol)可以防止哮喘加劇，但同時也可能引起哮喘患者的死亡。盡管這種副作用已經(jīng)被連續(xù)報道，但基于哮喘緩解作用大于副作用風險的信念，該藥仍然被開出。對副作用比較敏感的兒童哮喘患者的成長速度進行了測量。結(jié)果，口服白三烯拮抗劑(孟魯司特(montelukast))治療的兒童哮喘患者的成長速度比吸入型糖皮質(zhì)激素治療的兒童哮喘患者的成長速度快I cm /年(Garcia Garcia ml, etal.，Pediatricsll6 (2):360-9, 2005。即=Garcia Garcia ml 等，兒科學 116 (2): 360-9，2005年)。如果在成長期間哮喘治療`不當，可能抑制或損壞肺乃至整個身體的成長。因此，有必要以穩(wěn)定的治療維持正常健康的肺功能。已被確認的是，通過使用安全的藥物進行長期的治療以控制氣道內(nèi)的炎癥是更重要的。因此，在選擇哮喘治療藥物之前同時考慮哮喘的緩解效果和副作用也是很重要的。已知白三烯拮抗劑具有低的副作用風險，因此其一直被開出用于預(yù)防和長期治療哮喘。然而，其哮喘治療效果弱于其他藥物，表明只有三分之一的哮喘患者得到改善。因此，仍然需要開發(fā)一種新的安全無毒并且不會引起耐藥性的哮喘治療劑。
[0011]五瓣子楝樹是一種低矮灌木，葉片薄且彼此相對。它具有淡粉紅色的花和紫色的果實，果實結(jié)有大量種子。這種灌木廣泛分布于緬甸、澳大利亞和太平洋島嶼。其在火山土壤中生長茂盛。已經(jīng)有報道指出，含有草藥提取物和五瓣子楝樹提取物的化妝品組合物能夠改善干燥皮膚，使皮膚水潤油滑(Ohara, Mitsuharu&Hori, Michimasa,日本2001220312)。還有報道指出，這種灌木的嫩葉和花耳提取物在使頭發(fā)生長和變黑方面是有效的。但是，這種植物的抗炎作用和抗哮喘作用還沒有被公開過。[0012]本發(fā)明的發(fā)明人已經(jīng)嘗試開發(fā)一種使用天然物質(zhì)治療炎癥性疾病或哮喘的新型藥物。結(jié)果，本發(fā)明人證實，五瓣子楝樹的提取物減少了氣道致敏小鼠模型的支氣管肺泡灌洗液中的炎癥細胞、免疫球蛋白和趨化因子，并抑制了體外脂多糖誘導的炎癥反應(yīng)。因此，通過進一步證實，五瓣子楝樹的提取物可以被有效地用作炎癥性疾病或哮喘的預(yù)防和治療劑的有效成分，本發(fā)明人完成了本發(fā)明。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0013]本發(fā)明的目的是提供一種用于預(yù)防和治療炎癥性疾病或哮喘的組合物，以及含有五瓣子楝樹提取物作為活性成分的保健功能食品。
[0014]為達到上述目的，本發(fā)明提供了一種用于預(yù)防和治療炎癥性疾病的藥物組合物，含有五瓣子楝樹提取物作為活性成分。
[0015]本發(fā)明還提供了一種用于預(yù)防和治療哮喘的藥物組合物，含有五瓣子楝樹提取物作為活性成分。
[0016]本發(fā)明還提供了一種用于預(yù)防和改善炎癥性疾病的保健功能食品，含有五瓣子楝樹提取物作為活性成分。
[0017]本發(fā)明還提供了一種用于預(yù)防和改善哮喘的保健功能食品，含有五瓣子楝樹提取物作為活性成分。
[0018]本發(fā)明還提供了一種治療炎癥性疾病的方法，包括向具有炎癥性疾病的主體施用藥學有效劑量的五瓣子楝樹提取物的步驟。
[0019]本發(fā)明還提供了一 種預(yù)防炎癥性疾病的方法，包括向主體施用藥學有效劑量的五瓣子楝樹提取物的步驟。
[0020]本發(fā)明還提供了一種治療哮喘的方法，包括向具有哮喘的主體施用藥學有效劑量的五瓣子楝樹提取物的步驟。
[0021]本發(fā)明還提供了一種預(yù)防哮喘的方法，包括向主體施用藥學有效劑量的五瓣子楝樹提取物的步驟。
[0022]本發(fā)明還提供了用作預(yù)防和治療炎癥性疾病的組合物的五瓣子楝樹提取物。
[0023]本發(fā)明還提供了用作預(yù)防和治療哮喘的組合物的五瓣子楝樹提取物。
[0024]本發(fā)明還提供了用作預(yù)防和改善炎癥性疾病的保健功能食品組合物的五瓣子楝樹提取物。
[0025]此外，本發(fā)明提供了用作預(yù)防和改善哮喘的保健功能食品組合物的五瓣子楝樹提取物。
[0026]有益效果
[0027]如在上文中所闡明的，本發(fā)明的五瓣子楝樹提取物不僅減少了氣道被卵清蛋白敏化的小鼠的支氣管肺泡灌洗液中的炎癥細胞、免疫球蛋白和嗜酸性粒細胞趨化因子，還抑制了由這種炎癥細胞的浸潤誘發(fā)的哮喘，并減少了由這種炎癥因子如脂多糖(LPS)誘發(fā)的NO和TNF-α分泌物。因此，本發(fā)明的五瓣子楝樹提取物可以被有效地用作預(yù)防和治療炎癥性疾病或哮喘的藥物組合物的活性成分，以及預(yù)防和改善炎癥性疾病或哮喘的保健功能食品的活性成分?！緦＠綀D】

【附圖說明】
[0028]參照附圖，可以最好地理解本發(fā)明的優(yōu)選實施例的應(yīng)用，其中:
[0029]圖1是一個曲線圖，示出了五瓣子楝樹提取物對氣道用卵清蛋白敏化的小鼠的支氣管肺泡灌洗液中的嗜酸性粒細胞、嗜中性粒細胞、淋巴細胞和巨噬細胞的作用效果:
[0030]NC:氣道未被敏化的組；
[0031]OVA:氣道用卵清蛋白敏化的組；
[0032]Dex:用濃度為30mg/kg的地塞米松(dexamethason)處理的組；
[0033]DF-20:用濃度為20mg/kg的五瓣子楝樹提取物處理的組；以及
[0034]DF-40:用濃度為40mg/kg的五瓣子楝樹提取物處理的組。
[0035]圖2是一組曲線圖，示出了五瓣子楝樹提取物對氣道用卵清蛋白敏化的小鼠的血液中免疫球蛋白水平的作用效果:
[0036]圖2a示出了五瓣子楝樹提取物對氣道用卵清蛋白敏化的小鼠的血液中免疫球蛋白E (IgE)水平的作用效果；
[0037]NC:氣道未被敏化的組；
[0038]OVA:氣道用卵清蛋白敏化的組；
[0039]Dex:用濃度為30mg/kg的地塞米松處理的組；
[0040]DF-20:用濃度為20mg/kg的五瓣子楝樹提取物處理的組；以及
[0041]DF-40:用濃度為40mg/kg的五瓣子楝樹提取物處理的組。
[0042]圖2b示出了五瓣子楝樹提取物對氣道用卵清蛋白敏化的小鼠的血液中免疫球蛋白Gl (IgGl)水平的作用效果；
[0043]NC:氣道未被敏化的組；
[0044]OVA:氣道用卵清蛋白敏化的組；
[0045]Dex:用濃度為30mg/kg的地塞米松處理的組；
[0046]DF-20:用濃度為20mg/kg的五瓣子楝樹提取物處理的組；以及
[0047]DF-40:用濃度為40mg/kg的五瓣子楝樹提取物處理的組。
[0048]圖3示出了五瓣子楝樹提取物對氣道用卵清蛋白敏化的小鼠的支氣管肺泡灌洗液中趨化因子水平的作用效果；
[0049]NC:氣道未被敏化的組；
[0050]OVA:氣道用卵清蛋白敏化的組；
[0051]Dex:用濃度為30mg/kg的地塞米松處理的組；
[0052]DF-20:用濃度為20mg/kg的五瓣子楝樹提取物處理的組；以及
[0053]DF-40:用濃度為40mg/kg的五瓣子楝樹提取物處理的組。
[0054]圖4示出了五瓣子楝樹提取物對氣道用卵清蛋白敏化的小鼠的氣道粘膜中炎癥細胞浸潤的作用效果，由HE (蘇木精-伊紅(hematoxylin-eosin))染色證實:
[0055]NC:氣道未被敏化的組；
[0056]OVA:氣道用卵清蛋白敏化的組；
[0057]Dex:用濃度為30mg/kg的地塞米松處理的組；
[0058]DF-20:用濃度為20mg/kg的五瓣子楝樹提取物處理的組；以及
[0059]DF-40:用濃度為40mg/kg的五瓣子楝樹提取物處理的組。[0060]圖5示出了五瓣子楝樹提取物對RAW264.7細胞中由脂多糖(LPS)誘發(fā)的NO生成的抑制效果:
[0061]*:ρ〈0.05;以及
[0062]#:ρ<0.005.[0063]圖6示出了五瓣子楝樹提取物對RAW264.7細胞中由脂多糖(LPS)誘發(fā)的TNF-α生成的抑制效果:
[0064]*:ρ〈0.05;以及
[0065]#:ρ<0.005.【具體實施方式】[0066]下文詳細描述本發(fā)明。
[0067]本發(fā)明提供一種用于預(yù)防和治療炎癥性疾病或哮喘的含有五瓣子楝樹提取物作為活性組分的藥物組合物。
[0068]該炎癥性疾病優(yōu)選選自但不限于皮炎、過敏癥、特應(yīng)癥、結(jié)膜炎、牙周炎、鼻炎、中耳炎、咽喉炎、扁桃體炎、肺炎、胃潰瘍、胃炎、克羅恩病、結(jié)腸炎、痔瘡、痛風、強直性脊柱炎、風濕熱、紅斑狼瘡、纖維肌痛癥、銀屑病關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、類風濕關(guān)節(jié)炎、肩周炎、肌腱炎、腱鞘炎、腱周圍炎、肌炎、肝炎、膀胱炎、腎炎、干燥綜合征、多發(fā)性硬化癥、以及急性和慢性炎癥性疾病。
[0069]該五瓣子楝樹提取物優(yōu)選通過以下步驟制備，但不限于以下步驟:
[0070]I)使用提取溶劑對五瓣子楝樹進行提取；
[0071]2)過濾步驟I)的提取物；
[0072]3)減壓濃縮步驟2)中濾過的提取物；以及
[0073]4)冷凍干燥步驟3)中得到的濃縮物。
[0074]這里的五瓣子楝樹可以從種植方式獲得，或從市場上購買。
[0075]在上述方法中，步驟I)中的提取溶劑優(yōu)選選自水、醇及它們的混合物，或更優(yōu)選地選自Ci_C2的低級醇及它們的混合物，但并不限于此。此時，此處的低級醇優(yōu)選是甲醇或乙醇，但并不限于此。提取溶劑的量優(yōu)選為五瓣子楝樹干重的5 —15倍，更優(yōu)選為干重的7…10倍,但不限于此。
[0076]在上述方法中，提取方法選自熱水提取法、脂吸法、回流提取、以及超聲提取法，但不限于此。在上述方法中，優(yōu)選的提取溫度為10℃~100℃，更優(yōu)選室溫。提取時間優(yōu)選為30分鐘~3小時,更優(yōu)選為1-2小時,但不限于此。該提取優(yōu)選重復I~5ft,更優(yōu)選為重復3次，但不限于此。
[0077]在上述方法中，步驟3)的減壓濃縮優(yōu)選使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器進行，但并不局限于此。為了干燥提取物(步驟4 )，優(yōu)選進行冷凍干燥，但并不局限于此。
[0078]在本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方式中，用卵清蛋白敏化小鼠的支氣管，用本發(fā)明的五瓣子楝樹提取物對該小鼠進行治療。其結(jié)果是，支氣管肺泡灌洗液中的炎癥細胞如嗜酸性粒細胞、中性粒細胞、淋巴細胞和巨噬細胞減少了(參見圖1)。此外，通過劑量依賴性地施用五瓣子楝樹提取物降低了血液中的免疫球蛋白水平(參見圖2)。還證實，通過施用五瓣子楝樹提取物，下調(diào)了氣道用卵清蛋白敏化的小鼠的支氣管肺泡灌洗液中的嗜酸性粒細胞趨化因子，嗜酸性粒細胞趨化因子是已知的導致過敏性疾病的趨化因子中的一種(見圖3)。還觀察了氣道用卵清蛋白敏化的小鼠的肺組織。其結(jié)果是，在用卵清蛋白敏化的小鼠的肺組織中觀察到了包括嗜酸性粒細胞的炎癥細胞的浸潤。然而，用本發(fā)明的五瓣子楝樹提取物治療的實驗組中，肺組織中嗜酸性粒細胞數(shù)減少了(參見圖4)。[0079]在本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方式中，觀察到，通過使用本發(fā)明的五瓣子楝樹提取物治療，減少了 NO和TNF-α的生成，已知NO和TNF-α參與通過脂多糖(LPS)處理誘發(fā)的炎癥，已知脂多糖在體外誘發(fā)炎癥(參見圖5和圖6)。
[0080]因此，本發(fā)明的五瓣子楝樹提取物可以被有效地用作預(yù)防和治療炎癥性疾病或哮喘的藥物組合物的活性成分。
[0081 ] 本發(fā)明的組合物可以口服或腸道外給藥(例如，敷用，靜脈注射，皮下注射，或腹腔注射)，但優(yōu)選口服給藥。
[0082]對于腸道外給藥的劑型，可以通過常規(guī)方法制備粉劑、顆粒劑、片劑、膠囊劑、滅菌懸浮液劑、液體劑、不溶于水的賦形劑、混懸劑、乳劑、糖漿劑、栓劑、外用如氣霧劑和滅菌注射劑，并且優(yōu)選地可制備皮膚外用藥物組合物，例如霜劑、凝膠劑、貼片、噴霧劑、軟膏劑、硬膏劑、洗劑、搽劑、糊劑或泥敷劑，但不限于此。局部給藥的組合物根據(jù)臨床的處方可以是無水的或含水的。不溶于水的賦形劑和混懸劑除了含有活性化合物或混合物外，可以含有丙二醇、聚乙二醇、植物油如橄欖油、可注射酯如油酸乙酯等。栓劑除了含有活性化合物或混合物外，可以含有飽和脂肪酸混合物的甘油酯(wit印sol)、聚乙二醇、吐溫61、可可脂、三月桂酸甘油脂，甘油明膠等。
[0083]用于口服給藥的固體制劑是粉劑、顆粒劑、片劑、膠囊劑、軟膠囊劑和丸劑。用于口服給藥的液體制劑為混懸劑、溶液劑、乳劑、糖漿劑和氣霧劑，上述制劑除了含有常用的簡單稀釋劑例如水和液體石蠟外，可以含有各種賦形劑，如潤濕劑、甜味劑、芳香劑和防腐劑。
[0084]本發(fā)明的組合物除了包含上述有效成分外，還可以包含一種或多種藥學上可接受的載體用于給藥。該藥學上可接受的載體可以通過混合一個以上的成分來選擇或制備，該成分選自生理鹽水、無菌水、林格氏溶液(Ringer’ s solution)、緩沖鹽水、葡萄糖溶液、右旋麥芽糖(maltodextrose)溶液、甘油和乙醇。可以添加其他普通的添加劑，如抗氧化劑、緩沖液、抑菌劑等等。為了制備如水溶液、懸浮液和乳狀液等可注射溶液，可以添加稀釋劑、分散劑、表面活性劑、粘合劑和潤滑劑。
[0085]本發(fā)明的藥物組合物中優(yōu)選含有藥學上可接受的添加劑，以該組合物的總重量計，該添加劑的含量為1 重量份，但并不局限于此。
[0086]本發(fā)明的藥物組合物的有效劑量可由本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)活性成分的吸收率，以及患者的年齡、性別和肥胖情況來確定。在口服給藥的情況下，對于成年人該藥物組合物每天可以施用0.0001~100毫克/千克，更優(yōu)選每天0.001~100毫克/千克。給藥頻率為一天一次或一天幾次。該劑量不能以任何方式限制本發(fā)明的范圍。
[0087]本發(fā)明的預(yù)防和治療炎癥性疾病的藥物組合物除了包含五瓣子楝樹提取物外，可以包含一種或多種與該五瓣子楝樹提取物具有相同或類似功能的有效成分。
[0088]本發(fā)明的預(yù)防和治療哮喘的藥物組合物除了包含五瓣子楝樹提取物外，可以包含一種或多種與該五瓣子楝樹提取物具有相同或類似功能的有效成分。[0089]本發(fā)明還提供了一種用于預(yù)防和改善炎癥性疾病或哮喘的包含五瓣子楝樹提取物作為活性成分的保健功能食品。
[0090]在本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方式中，觀察到，通過本發(fā)明的五瓣子楝樹提取物的治療，減少了 NO和TNF-α的生成，已知NO和TNF-α參與由脂多糖(LPS)處理誘發(fā)的炎癥，已知脂多糖在體外誘發(fā)炎癥。因此，本發(fā)明的五瓣子楝樹提取物可以被有效地用作預(yù)防和改善炎癥性疾病的保健功能食品的活性成分。
[0091]在本發(fā)明一個優(yōu)選的實施方式中，用卵清蛋白敏化小鼠的氣道，用本發(fā)明的五瓣子楝樹提取物對該小鼠進行治療。其結(jié)果是，與未用五瓣子楝樹提取物治療的對照組相比，支氣管肺泡灌洗液中的炎癥細胞水平、免疫球蛋白水平和嗜酸性粒細胞趨化因子的水平顯著降低。因此，本發(fā)明的五瓣子楝樹提取物可以被有效地用作預(yù)防和改善哮喘的保健功能食品的活性成分。
[0092]在此，五瓣子楝樹提取物優(yōu)選是用水、醇或它們的混合物為提取溶劑提取的。此時，醇優(yōu)選是C1-C2的低級醇，但并不限于此。所述炎癥性疾病優(yōu)選地選自皮炎、過敏癥、特應(yīng)癥、結(jié)膜炎、牙周炎、鼻炎、中耳炎、咽喉炎、扁桃體炎、肺炎、胃腸潰瘍、胃炎、克羅恩病、結(jié)腸炎、痔瘡、痛風、強直性脊柱炎、風濕熱、紅斑狼瘡、纖維肌痛(纖維肌痛)、銀屑病關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、類風濕關(guān)節(jié)炎、肩周炎、肌腱炎、腱鞘炎、腱周圍炎、肌炎、肝炎、膀胱炎、腎炎、干燥綜合征、多發(fā)性硬化癥、以及急性和慢性炎癥性疾病，但并不限于此。
[0093]本發(fā)明的五瓣子楝樹提取物，通過將該提取物與食品營養(yǎng)學上可接受的載體混合，可以作為食品組合物提供。
[0094]當本發(fā)明的五瓣子楝樹提取物被用于食品或飲料時，按照常規(guī)方法，該五瓣子楝樹提取物可以在與其它食品或成分混合時添加，或與其它食品或成分混合后添加。根據(jù)使用的目的(預(yù)防、保健增強或治療)可以對五瓣子楝樹提取物的混合比例進行調(diào)節(jié)。
[0095]如果出于健康衛(wèi)生 或調(diào)節(jié)健康狀況的目的需要長期給藥，可以長期施用該五瓣子楝樹提取物，因為本發(fā)明的提取物已被證明是非常安全的。
[0096]此處的食品沒有限制。例如，本發(fā)明的五瓣子楝樹提取物可以被添加到肉類、香腸、面包、巧克力、糖果、小吃、餅干、比薩餅、拉面、面粉制品、樹膠、包括冰淇淋的乳制品、湯、飲料、茶、酒水、酒精飲料和復合維生素等。
[0097]含有本發(fā)明的五瓣子楝樹提取物的保健飲料可以另外包含各種香料或天然碳水化合物等，類似其他飲料。上述天然碳水化合物可以是單糖(例如:葡萄糖、果糖等)、雙糖(例如:麥芽糖、蔗糖等)、多糖(例如:糊精、環(huán)糊精等)以及糖醇中的一種，糖醇例如木糖醇、山梨糖醇和赤蘚糖醇。天然碳水化合物的含量優(yōu)選為I — 20克每100克本發(fā)明的組合物，更優(yōu)選為5 — 12克每100克本發(fā)明的組合物。此外，還可以包含天然甜味劑(例如:索馬甜，甜葉菊提取物，例如萊鮑迪甙Α、甘草酸等)和合成甜味劑(例如:糖精、阿斯巴甜等)作為甜味劑。
[0098]除了上述成分外，本發(fā)明的食品組合物可以包含各種營養(yǎng)素、維生素、礦物質(zhì)(電解質(zhì))、包括天然香料和合成香料的香料、著色劑和填充劑(奶酪、巧克力等)、果膠酸及其鹽、海藻酸及其鹽、有機酸、保護性膠體增粘劑、PH調(diào)節(jié)劑、穩(wěn)定劑、防腐劑、甘油、醇類、以及過去被添加到蘇打中的碳酸化劑等。本發(fā)明的食品組合物還可以包含天然果汁、水果飲料和/或可添加到蔬菜飲料中的果肉。所有上述成分可以單獨加入或一起加入。這些成分的混合比例實際上并不重要，但在一般情況下，以本發(fā)明的組合物的總重量計每個成分可以添加0.001—5 O重量份ο
[0099]本發(fā)明還提供了一種治療炎癥性疾病的方法，包含向具有炎癥性疾病的主體施用藥學有效劑量的五瓣子楝樹提取物的步驟。
[0100]本發(fā)明還提供了一種預(yù)防炎癥性疾病的方法，包含向主體施用藥學有效劑量的五瓣子楝樹提取物的步驟。
[0101]本發(fā)明還提供了一種治療哮喘的方法，包含向具有哮喘病的主體施用藥學有效劑量的五瓣子楝樹提取物的步驟。
[0102]本發(fā)明還提供了一種預(yù)防哮喘病的方法，包含向主體施用藥學有效劑量的五瓣子楝樹提取物的步驟。
[0103]在本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方式中，用卵清蛋白敏化小鼠的支氣管，用本發(fā)明的五瓣子楝樹提取物對該小鼠進行治療。其結(jié)果是，支氣管肺泡灌洗液中的炎癥細胞如嗜酸性粒細胞、中性粒細胞、淋巴細胞和巨噬細胞減少了(參見圖1)。此外，通過劑量依賴性地施用五瓣子楝樹提取物降低了血液中的免疫球蛋白水平(參見圖2)。還證實，通過施用五瓣子楝樹提取物，下調(diào)了氣道用卵清蛋白敏化的小鼠的支氣管肺泡灌洗液中的嗜酸性粒細胞趨化因子，已知嗜酸性粒細胞趨化因子是導致過敏性疾病的趨化因子中的一種(見圖3)。還觀察了氣道用卵清蛋白敏化的小鼠的肺組織。其結(jié)果是，在用卵清蛋白敏化的小鼠的肺組織中觀察到包括嗜酸性粒細胞的的炎癥細胞浸潤。然而，在用本發(fā)明的五瓣子楝樹提取物治療的實驗組的肺組織中，嗜酸性粒細胞數(shù)減少了(參見圖4)。
[0104]在本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方式中，觀察到，通過本發(fā)明的五瓣子楝樹提取物的治療，減少了 NO和TNF-α的生成，已知NO和TNF-α參與由脂多糖(LPS)處理誘發(fā)的炎癥，已知脂多糖在體外誘發(fā)炎癥(參見圖5 和圖6)。
[0105]因此，本發(fā)明的五瓣子楝樹提取物可以被有效地用于預(yù)防或治療炎癥性疾病或哮喘的方法。
[0106]本發(fā)明還提供了用作預(yù)防和治療炎癥性疾病的組合物的五瓣子楝樹提取物。
[0107]本發(fā)明還提供了用作預(yù)防和治療哮喘的組合物的五瓣子楝樹提取物。
[0108]本發(fā)明還提供了用作預(yù)防和改善炎癥性疾病的保健功能食品組合物的五瓣子楝樹提取物。
[0109]此外，本發(fā)明提供了用作預(yù)防和改善哮喘的保健功能食品組合物的五瓣子楝樹提取物。
[0110]本發(fā)明的五瓣子楝樹提取物不僅減少了氣道被卵清蛋白敏化的小鼠的支氣管肺泡灌洗液中的炎癥細胞、免疫球蛋白和嗜酸性粒細胞趨化因子，還抑制了由這種炎癥細胞的浸潤誘發(fā)的哮喘，并減少了由這種炎癥因子以及脂多糖(LPS)誘發(fā)的NO和TNF-α分泌物。因此，本發(fā)明的五瓣子楝樹提取物可以被有效地用作預(yù)防和治療炎癥性疾病或哮喘的藥物組合物的活性成分，或預(yù)防和改善炎癥性疾病或哮喘的保健功能食品的活性成分。
[0111]如下面的實施例、實驗例和制造例，本發(fā)明的實際實施方式和目前優(yōu)選的實施方式中進行了說明性的描述。
[0112]然而，應(yīng)該明白，本領(lǐng)域技術(shù)人員在參考本公開后，可以在本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)作出修改和改進。
[0113]實施例1:五瓣子楝樹提取物
[0114]本發(fā)明的發(fā)明人從韓國生物科學與技術(shù)研究所的國際生物材料研究中心購買了五瓣子楝樹。為了獲得五瓣子楝樹提取物，取五瓣子楝樹的地上部分(葉和莖)并干燥。然后取100克干燥的樣品進行粉碎，向粉碎的樣品中加入800ml95%的乙醇，隨后在室溫下回流提取24小時。收集濾過的上清液。該過程重復兩次，以收集上清液。將所得到的上清液在減壓條件下濃縮，得到2克五瓣子楝樹提取物。
[0115]實驗例1:五瓣子楝樹提取物的抗炎作用
[0116]8周齡無特定病原體的雌性Balb/c小鼠(體重:約20克)均購自韓國的東方有限公司。2mg氫氧化招(西格瑪公司Sigma A8222)和20 μ g卵清蛋白(西格瑪公司A5503)被懸浮于200 μ I的磷酸鹽緩沖液PBS (ρΗ7.4)中，通過腹腔注射將其施用給每只小鼠，間隔2周給藥兩次,用于敏化。在第28天、第29天和第30天,用超聲波噴霧器將含1%卵清蛋白的PBS緩沖液噴灑于小鼠所居住的密封籠，噴灑20分鐘。陰性對照組由6只氣道未被敏化的小鼠組成。陽性對照組由6只氣道用卵清蛋白敏化的小鼠組成。對比組由6只用濃度為30mg/kg的地塞米松治療的小鼠組成。實驗組由6只小鼠組成，該6只小鼠在給予抗原之前一小時口服含20mg/kg或40mg/kg五瓣子楝樹甲醇提取物的PBS緩沖液。
[0117]在最后給予抗原48小時后，施用過度劑量的戊巴比妥(西格瑪公司P3761)以殺死動物，然后切開其氣管。通過套管插入法從氣管中收集支氣管肺泡灌洗液(BALF)，一次
0.6ml，收集三次，然后通過下面的方法對炎性細胞和嗜酸性粒細胞進行計數(shù)。
[0118]將100 μ I從各組獲得的支氣管肺泡灌洗液擔載在載玻片上，然后使用細胞離心涂片器(哈尼爾有限公司Hanil C0.，韓國)進行離心，從而將細胞固定在載玻片上。用臺盼藍對細胞染色，用血細胞計數(shù)器對死細胞以外的細胞計數(shù)，重復三次(戴格爾艾等人，2001年)。
[0119]用Diff-Quick試劑(希森美康Sysmex,目錄號38721,瑞士)染色后計算嗜酸性粒細胞的數(shù)目，采用與上述總細胞計數(shù)方式相同的方式進行計數(shù)。采用學生t檢驗法(Student’s t-test)進行統(tǒng)計分析，以P值代表顯著性。
[0120]結(jié)果為，如圖1所示，與未被敏化的陰性對照組的正常小鼠相比，用卵清蛋白敏化的并被施用PBS緩沖液的陽性對照組小鼠顯示出炎癥細胞數(shù)目迅速增加。但是，在用五瓣子楝樹提取物處理的組中，通過用提取物進行劑量依賴性地治療，炎癥細胞如嗜酸性粒細胞、嗜中性粒細胞、淋巴細胞和巨噬細胞的增加數(shù)目均被減小了(圖1)。
[0121]實驗例2:五瓣子楝樹提取物對免疫球蛋白生成的影響
[0122]<2-1>五瓣子楝樹提取物對免疫球蛋白E (IrE)生成的抑制效果
[0123]為了測量動物血清中的免疫球蛋白E(IgE)的水平，將實驗例I中得到的各實驗組的血清在稀釋溶液中稀釋40倍。將100 μ I稀釋后的溶液加載到96-孔板內(nèi)，在該96-孔板內(nèi)附有20 μ g用于誘發(fā)哮喘的卵清蛋白，然后在室溫下誘發(fā)抗原-抗體反應(yīng)2小時。
[0124]結(jié)果為，如圖2a所示，其證實，在卵清蛋白致敏的小鼠組中免疫球蛋白E(IgE)的水平迅速增加。同時，在用五瓣子楝樹提取物處理的組中免疫球蛋白E的產(chǎn)生被顯著抑制。該結(jié)果與用已知具有抗炎作用的地塞米松處理的陽性對照組的結(jié)果一致。因此，可以確認，本發(fā)明的五瓣子楝樹提取物有效地抑制了卵清蛋白特異性免疫球蛋白E的產(chǎn)生，免疫球蛋白E的產(chǎn)生在引起過敏性癥狀的機制中起著一定作用(圖2a)。
[0125]<2-2>五瓣子楝樹提取物對免疫球蛋白Gl (IrGI)生成的抑制效果
[0126]為了測量動物血清中的免疫球蛋白Gl的水平，將實驗例I中得到的各實驗組的血清在稀釋溶液中稀釋40倍。將100 μ I稀釋后的溶液加載到96-孔板內(nèi)，在該96-孔板內(nèi)附有20 μ g用于誘發(fā)哮喘的卵清蛋白，然后在室溫下誘發(fā)抗原-抗體反應(yīng)2小時。
[0127]結(jié)果為，如圖2b所示，其證實，在卵清蛋白致敏的小鼠組中卵清蛋白特異性免疫球蛋白Gl的水平迅速增加。同時，在用本發(fā)明的五瓣子楝樹提取物處理的組中卵清蛋白特異性免疫球蛋白Gl的生成被顯著抑制(圖2b)。
[0128]實驗例3:五瓣子楝樹提取物對趨化因子的影響
[0129]眾所周知，嗜酸性粒細胞趨化因子基因會補充和激活CCR3，CCR3含有在過敏性疾病中發(fā)揮重要作用的細胞，如嗜酸性粒細胞、肥大細胞、以及Th2淋巴細胞(Lilly，C.M.etal., J.Allergy Clin.1mmunol, 108，946-53，2001。即 Lilly’C.M.等人，過敏與臨床免疫學雜志，108，第946-53頁，2001年)。在本發(fā)明中，用五瓣子楝樹提取物處理卵清蛋白敏化的小鼠，然后測量支氣管肺泡灌洗液中嗜酸性粒細胞趨化因子(趨化因子中的一種)的含量。
[0130]為了測量嗜酸性粒細胞趨化因子的含量，進行了夾心式酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)0具體地，將100 μ I實驗例I中得到的各實驗組的支氣管肺泡灌洗液加載到附著有細胞因子抗體的96-孔板中，然后在室溫下誘導抗原-抗體反應(yīng)2小時。為了測量嗜酸性粒細胞趨化因子的含量，使用專門針對每個細胞因子反應(yīng)的酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)試劑盒(生物資源國際公司，卡馬里洛，加拿大)。根據(jù)生產(chǎn)商的方案測定趨化因子的含量。
[0131]結(jié)果是，如圖3所示，其證實，在卵清蛋白致敏的小鼠組中嗜酸性粒細胞趨化因子的含量增加。同時,與卵清蛋白 處理的組相比,在五瓣子楝樹提取物處理的組中嗜酸性粒細胞趨化因子的含量減少(圖3)。也就是說，本發(fā)明的五瓣子楝樹提取物可有效地用于過敏性疾病如哮喘(圖3)。
[0132]實驗例4:五瓣子楝樹提取物對炎癥細胞浸潤的影響
[0133]將實施例1中的各實驗組的肺組織固定在10%的中性福爾馬林緩沖液中24小時，然后進行石蠟包埋。包埋組織被切成4_的段，用蘇木精和伊紅Y (eosin Y)(珊頓公司，匹茲堡，賓夕法尼亞州)對其進行染色，然后用Dako-封片劑(丹科公司，丹麥)安裝在載玻片上。染色和安裝完成后，在光學顯微鏡下檢查載玻片。
[0134]結(jié)果是，如圖4所示，與氣道未被敏化的對照組小鼠相比，在氣道被卵清蛋白敏化的小鼠的肺泡和細支氣管中誘發(fā)了哮喘。另外，在敏化的小鼠中，上皮細胞受到傷害，炎癥細胞包括嗜酸性粒細胞滲入到細支氣管的周圍。與此同時，在五瓣子楝樹提取物治療的小鼠中，炎癥細胞包括嗜酸性粒細胞的數(shù)目顯著減少，幾乎沒有觀察到上皮細胞損傷。以上結(jié)果與實驗例I中所示的通過五瓣子楝樹提取物的治療減少了炎癥細胞和嗜酸性粒細胞的現(xiàn)象是一致的(圖4)。
[0135]因此，可以確認，本發(fā)明的五瓣子楝樹提取物通過減少包括嗜酸性粒細胞的炎癥細胞的浸潤抑制了哮喘，并防止上皮細胞被損壞，因此，它可以被有效地用于預(yù)防或治療由炎癥細胞浸潤引起的過敏性疾病。
[0136]實驗例5:五瓣子楝樹提取物對巨噬細胞中NO分泌的抑制作用
[0137]本發(fā)明的發(fā)明人通過脂多糖(LPS)處理在Raw264.7細胞中誘發(fā)炎癥，然后測量誘導型一氧化氮(NO)的生成以評估抗炎作用。具體地，將Raw264.7細胞懸浮在不含酚紅的細胞培養(yǎng)基(DMEM)中(達爾伯克改良伊格爾培養(yǎng)基(Dulbecco’s Modified Eagle Medium),Gibco)中，該培養(yǎng)基補充有密度為5XlOVml的FBS (10%)。將細胞懸浮液注射到96孔板內(nèi)。附著4小時后，用不同濃度的五瓣子楝樹提取物處理，然后培養(yǎng)I小時。用lyg/ml的脂多糖(LPS，西格瑪公司)處理，隨后進一步培養(yǎng)24小時。培養(yǎng)完成后，得到ΙΟΟμ I上清液，將該上清液放置在一個新的96-孔板中。向其中加入等體積的格里斯試劑(西格瑪公司)，隨后在室溫下反應(yīng)10分鐘。然后，用酶標儀(伯樂公司Bio-Rad)測定0D55Q。
[0138]用不同濃度的亞硝酸鈉溶解在相同的介質(zhì)中制備的亞硝酸鈉標準曲線測定培養(yǎng)液中NO的產(chǎn)生。將LPS處理的組中產(chǎn)生的NO的量視為100%，基于此按百分比計算各樣品的抑制率。采用學生t檢驗法進行統(tǒng)計分析，以P值(*;P〈0.05)代表顯著性。
[0139]其結(jié)果，如圖5所示，與用賦形劑處理的陰性對照組相比，用LPS處理的組中NO的生成顯著增加。但是，與用LPS處理的組相比，用五瓣子楝樹提取物處理的組中NO的生成顯著減少(圖5)。
[0140]實驗例6:五瓣子楝樹提取物對巨噬細胞中TNF-α生成的抑制作用
[0141]為了研究該提取物對炎癥的抑制作用，該炎癥是通過用LPS處理Raw264.7細胞有意增加的，本發(fā)明的發(fā)明人測量了 TNF-α的生成情況，TNF-α是炎癥因子之一。具體地，使用TNF-α特異性酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒ELISA kit(生物資源國際公司，卡馬里洛，加拿大)，按照生產(chǎn)商的方案測定〈實驗例5>中得到的上清液中的TNF-α水平。
[0142]其結(jié)果，如圖6所示，用LPS處理的組中TNF-α的水平有所增加，表明誘發(fā)了炎癥。然而，在用LPS和本發(fā)明的五瓣子楝樹提取物劑量依賴性處理的組中，TNF-α的生成減少了(圖6)。即，本發(fā)明的五瓣子楝樹提取物減少了炎癥因子的生成，證明其可以被有效地用于炎癥性疾病。
[0143]下文描述本發(fā)明的組合物的制造實施例。
[0144]制造實施例1:藥物制劑的制備
[0145]〈1-1>粉劑的制備
[0146]五瓣子楝樹提取物2g
[0147]乳糖Ig
[0148]按照常規(guī)制備粉劑的方法，通過混合以上所有組分，將其裝入氣密包裝中制備粉劑。
[0149]<1-2>片劑的制備
[0150]

IL鮮/-楝樹提取物 IOOmg
'K米淀粉l_mg
乳糖請Omg
硬脂酸鎂2mg
[0151]采用常規(guī)制備片劑的方法通過混合以上所有組分制備片劑。
[0152]〈1-3>膠囊劑的制備
[0153]
【權(quán)利要求】
1.一種預(yù)防和治療炎癥性疾病的藥物組合物，含有五瓣子楝樹提取物作為活性成分。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于預(yù)防和治療炎癥性疾病的藥物組合物，其中特征在于，所述提取物是用水、醇、或其混合物作為溶劑提取的。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用于預(yù)防和治療炎癥性疾病的藥物組合物，其中所述醇是C1~C2的低級醇。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于預(yù)防和治療炎癥性疾病的藥物組合物，其中所述低級醇是乙醇或甲醇。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于預(yù)防和治療炎癥性疾病的藥物組合物，其中所述炎癥性疾病選自皮炎、過敏癥、特應(yīng)癥、結(jié)膜炎、牙周炎、鼻炎、中耳炎、咽喉炎、扁桃體炎、肺炎、胃潰瘍、胃炎、克羅恩病、結(jié)腸炎、痔瘡、痛風、強直性脊柱炎、風濕熱、紅斑狼瘡、纖維肌痛癥、銀屑病性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、類風濕性關(guān)節(jié)炎、肩周炎、肌腱炎、腱鞘炎、腱周圍炎、肌炎、肝炎、膀胱炎、腎炎、干燥綜合征、多發(fā)性硬化癥、以及急性和慢性炎癥性疾病。
6.一種預(yù)防和治療哮喘的藥物組合物，含有五瓣子楝樹提取物作為活性成分。
7.一種用于預(yù)防和改善炎癥性疾病的保健功能食品，含有五瓣子楝樹提取物作為活性成分。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的用于預(yù)防和改善炎癥性疾病的保健功能食品，其中特征在于，所述提取物是用水、醇、或其混合物作為溶劑提取的。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的用于預(yù)防和改善炎癥性疾病的保健功能食品，其中所述炎癥性疾病選自皮炎、過敏癥、特應(yīng)癥、結(jié)膜炎、牙周炎、鼻炎、中耳炎、咽喉炎、扁桃體炎、肺炎、胃潰瘍、胃炎、克羅恩病、結(jié)腸炎、痔瘡、痛風、強直性脊柱炎、風濕熱、紅斑狼瘡、纖維肌痛癥、銀屑病性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、類風`濕性關(guān)節(jié)炎、肩周炎、肌腱炎、腱鞘炎、腱周圍炎、肌炎、肝炎、膀胱炎、腎炎、干燥綜合征、多發(fā)性硬化癥、以及急性和慢性炎癥性疾病。
10.一種用于預(yù)防和改善哮喘的保健功能食品，含有五瓣子楝樹提取物作為活性成分。
11.一種治療炎癥性疾病的方法，包括向具有炎癥性疾病的主體施用藥學有效劑量的五瓣子楝樹提取物的步驟。
12.一種預(yù)防炎癥性疾病的方法，包括向主體施用藥學有效劑量的五瓣子楝樹提取物的步驟。
13.一種治療哮喘的方法，包括向具有哮喘的主體施用藥學有效劑量的五瓣子楝樹提取物的步驟。
14.一種預(yù)防哮喘的方法，包括向主體施用藥學有效劑量的五瓣子楝樹提取物的步驟。
15.一種五瓣子楝樹提取物，用作預(yù)防和治療炎癥性疾病的組合物。
16.一種五瓣子楝樹提取物，用作預(yù)防和治療哮喘的組合物。
17.—種五瓣子楝樹提取物，用作預(yù)防和改善炎癥性疾病的保健功能食品的組合物。
18.—種五瓣子楝樹提取物，用作預(yù)防和改善哮喘的保健功能食品的組合物。
【文檔編號】A61P29/00GK103501797SQ201280018275
【公開日】2014年1月8日 申請日期:2012年2月7日 優(yōu)先權(quán)日:2011年2月16日
【發(fā)明者】吳世湸, 安境燮, 權(quán)玉京, 李炯圭, 李重求, 鄭革, 李美永, 孫和永, 李京烈, 李尙雨, 金航, 李晩宜 申請人:韓國生命工學研究院