重新定向的免疫治療的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種用于預(yù)防或治療特征在于存在不需要的細胞的病癥的藥劑，該藥劑包含:(i)能夠靶向不需要的細胞的靶向半體;和(ii)T細胞抗原，其中T細胞抗原可以通過藥劑中的分裂位點的選擇性分裂在不需要的細胞附近從靶向半體中釋放出來。
【專利說明】重新定向的免疫治療
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及免疫治療劑。特別地，涉及可以用于預(yù)防或治療病癥的藥劑，所述病癥的特征在于存在不需要的細胞，如引起癌癥或其他疾病的細胞。
【背景技術(shù)】
[0002]用于祀向惡性疾病的免疫治療策略是翻譯(translational)臨床研究的活躍領(lǐng)域，并且已經(jīng)進行了數(shù)十年。目前的模型要求癌癥代表可以用宿主的免疫治療操作治療的功能性或體質(zhì)免疫缺陷。這些努力可以寬泛地分為兩組。第一組通過如接種疫苗、細胞因子支持(IL-2、IFN Y )或降低免疫抑制環(huán)境(伊匹單抗(ipilimumab))這樣的方法,來增強或支持內(nèi)源性抗腫瘤免疫力，而第二組設(shè)法用功能性免疫應(yīng)答成分來修復(fù)絕對缺陷(使用抗體的被動免疫治療、TCR轉(zhuǎn)移、干細胞移植和過繼性免疫治療)。通過高效的功能性抗腫瘤免疫應(yīng)答確實是可能的論點將這些方法進行了統(tǒng)一。盡管在一些情況中對于有效的抗腫瘤免疫應(yīng)答存在勿庸置疑的 證據(jù)，但這個腫瘤免疫學(xué)的重要支柱受到目前臨床現(xiàn)實壓倒性的反對，所述臨床現(xiàn)實為盡管進行了很多努力，但對于大部分的癌癥病人沒有可用的有效免疫治療方法。幾乎所有癌癥疫苗接種試驗都提供了否定結(jié)果，而提供肯定數(shù)據(jù)的那些最常見的是證明了小的作用?，F(xiàn)實是，治療抗體，除了少數(shù)例外，在腫瘤學(xué)領(lǐng)域中提供了非常少的臨床益處。
[0003]如果可以研發(fā)出能有效地在分子上重新定向內(nèi)源性細胞毒性抗病毒免疫應(yīng)答到目標惡性組織的治療策略，這將提供一種新的有力且安全的治療惡性疾病的方法。
[0004]大部分細胞毒性治療抗體依賴于免疫效應(yīng)物機制，來傳送它們的抗癌作用，如補體依賴性細胞毒性(⑶C)和抗體依賴性細胞毒性(ADCC)。重要地，所有細胞(健康的和惡性的)都具有各種機制來限制免疫應(yīng)答的攻擊，以避免自身免疫性。這在自體免疫疾病的環(huán)境中是明顯的，其中高水平的組織反應(yīng)性抗體盡管常常引起器官發(fā)炎，但很少誘發(fā)完全的器官破壞。實際上，已知其中觀察到完全的組織破壞的自體免疫疾病，如糖尿病，是依賴于CTL應(yīng)答，而不是抗體定向的機制。
[0005]為了提高治療抗體差的功效，已經(jīng)使用了免疫偶聯(lián)物(放射性核素/毒素)和工程化抗體，其能更好地保證細胞毒性效應(yīng)物機制(例如，糖基化工程)。然而，這些藥劑的臨床試驗仍然是很令人失望的，并且受到毒性的困擾。一個實例是已經(jīng)研發(fā)來選擇性地將抗腫瘤劑靶向腫瘤的抗體-藥物偶聯(lián)物(ADC)(參見US5，773,001 ；US5, 767，285 ；US5, 739，116 ；US5,693，762 ；US5, 585，089 ；US2006/0088522 ；US2011/0008840 ；US7,659，241 ；Hughes(2010)Nat Drug Discov9:665，Lash (2010) ； In vivo: The Business&MedicineReport32-38 ；Mahato 等(2011)Adv Drug Deliv Rev63:659 ;Jeffrey 等(2006)BMCL16:358 ；Drugs R Dll (I):85_95)。ADC通常含有對抗存在于腫瘤細胞上的目標的單克隆抗體、細胞毒性藥物以及連接抗體和藥物的連接物。然而，目前只有少數(shù)ADC處于臨床研發(fā)的后期，而且已經(jīng)證明了這些的臨床成功是難以捉摸的。
[0006]因此，仍然存在對具有更高功效和更低毒性的更有效的免疫治療劑的需求。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0007]本發(fā)明的藥劑(agent)是重新定向的免疫治療的實例。這指的是將通常靶向帶有外源抗原的細胞的現(xiàn)有免疫應(yīng)答重新定向，以靶向病癥(如，癌癥)中不需要的細胞的概念。這個概念需要標記抗原(marker antigen)在不需要的細胞上遞呈,使得它們成為免疫細胞的目標。
[0008]W095/17212描述了由肽T細胞抗原和細胞結(jié)合配偶體組成的偶聯(lián)物及其在重新定向的免疫治療中的用途。偶聯(lián)物含有對靶細胞具有選擇性的結(jié)合配偶體和T細胞抗原，并且在癌癥、自體免疫疾病、糖尿病或過敏疾病的治療中誘導(dǎo)特異性的T細胞細胞毒性。偶聯(lián)物在結(jié)合了結(jié)合配偶體到表面受體后內(nèi)在化至靶細胞中，并且從偶聯(lián)物加工T細胞抗原，并且以與MHC分子的復(fù)合物的形式在細胞表面上表達。由此誘導(dǎo)T細胞對靶細胞的細胞毒性。
[0009]然而，從W095/17212難以預(yù)測哪個結(jié)合配偶體能夠內(nèi)在化并且因此隨后遞呈T細胞抗原，而哪個不能。此外，W095/17212中所述的偶聯(lián)物不能有效地靶向MHC I類抗原加工途徑。與MHC II類分子不同，MHC I類途徑的優(yōu)勢在于MHC I類分子在所有細胞類型上遞呈。
[0010]Smith等(J Immunoll69:99-107，2002)描述了蓖麻毒素將細胞毒T細胞表位傳遞至腫瘤細胞的MHC I類途徑的用途,使得腫瘤細胞隨后被溶解。然而，蓖麻毒素是非常毒的，并且因為其可以結(jié)合大部分的細胞類型，其對腫瘤細胞不是選擇性的。
[0011]本發(fā)明的藥劑旨在避開以上所有問題，同時提高特異性，并且利用T細胞抗原可以遞呈而沒有首先被內(nèi)在化至細胞中并參與經(jīng)典抗原加工途徑的事實。除了經(jīng)典的MHC I類加工途徑，其通過靶向的胞內(nèi)蛋白體的蛋白水解連續(xù)地流入來自胞內(nèi)隔間的肽，肽通過ER內(nèi)的TAP和MHC I類肽裝載來運輸，抗原也可以遞呈而沒有內(nèi)在化。這種不太定向的機制依賴于由于一些結(jié)合MHC的肽對MHC分子的低親和性而引起的一些MHC I類相關(guān)肽的短半衰期。肽分解提供了空的MHC I類分子，其能夠結(jié)合膜上的T細胞抗原(例如，肽)。以相同的方式，T細胞抗原可以結(jié)合MHC II類分子，并且本發(fā)明還避開了 II類抗原加工途徑，以在細胞膜上直接裝載抗原。此外，組I⑶I分子(⑶IaXDlb和⑶Ic)已經(jīng)顯示出將脂質(zhì)遞呈給細胞毒性α β T細胞以及細胞毒性Y δ T細胞(Porcelli等(1989)，Nature, 341,447-450)。
[0012]本發(fā)明人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了，通過在T細胞抗原的近端引入切割位點，該切割位點在不需要的細胞的附近選擇性地切割，可以從不需要的細胞的附近的靶向半體釋放出T細胞抗原，并且可以被例如空的MHC分子或組I⑶I分子結(jié)合，并引發(fā)T細胞應(yīng)答。這樣，不需要藥劑至細胞中的內(nèi)在化和抗原至經(jīng)典加工途徑的定向；與冊95/17212中只有表達MHC II類的細胞相比，藥劑可以靶向表達MHC I類分子的細胞；并且由于切割位點只在不需要的細胞的附近切割，特異性被提高了。例如，腫瘤細胞分泌腫瘤入侵局部組織和轉(zhuǎn)移需要的蛋白酶，因此通過在藥劑中包括腫瘤特異性蛋白酶切割位點，提高了藥劑對腫瘤的特異性。
[0013]因而，使用切割位點來繞開為了將T細胞抗原有效遞呈給T細胞而對內(nèi)在化和經(jīng)典加工的需求是本發(fā)明的重要優(yōu)勢。切割位點的存在意味著所有細胞服從重新定向的免疫治療，而不僅僅是相對少量的表達MHC II類分子的抗原遞呈細胞群體。這對于其中大部分腫瘤細胞沒有表達MHC II類分子的腫瘤尤為重要。切割位點還避開了涉及確保T細胞抗原不僅成功內(nèi)在化而且正確地進入合適的細胞加工途徑以在細胞表面上遞呈的挑戰(zhàn)。通過繞開對內(nèi)在化的需求，切割位點進一步提供了靶向相鄰腫瘤細胞和基質(zhì)非惡性組織(如，血管的腫瘤-成纖維細胞)的能力。其還避開了在經(jīng)典抗原加工中運行的腫瘤逃逸機制。因此，總而言之，切割位點提供了針對更多的細胞類型的更簡單且更有效的重新定向免疫治療方法。
[0014]重要的是注意到本發(fā)明與交叉遞呈之間的區(qū)別。在本發(fā)明中，藥劑的靶向半體用來將T細胞直接帶至不需要的細胞的附近。一旦與靶向半體分離，不需要的細胞然后在其表面上遞呈T細胞抗原，使得不需要的細胞變成現(xiàn)有T細胞應(yīng)答的目標。這使得現(xiàn)有的免疫應(yīng)答直接重新定向至不需要的細胞，并且因此不需要抗原遞呈細胞(APC)的共同刺激。另一方面，交叉遞呈指的是如下的機制:抗原通過其轉(zhuǎn)移至專業(yè)APC，其隨后在MHC I類分子上遞呈給天然T細胞，使得產(chǎn)生特異于該抗原的初級細胞毒T細胞應(yīng)答。該過程在天然T細胞的激活中是重要的，其必須首先識別I類相關(guān)的肽抗原，并且還需要APC上的共同刺激劑，或由輔助T細胞提供的信號。因此，使用交叉遞呈，與不需要的細胞相對，APC被靶向，使得APC可以共同刺激細胞毒T細胞，并且由此產(chǎn)生新的免疫應(yīng)答。
[0015]提高外源性抗原的交叉遞呈的效率是研發(fā)產(chǎn)生有效細胞免疫應(yīng)答的疫苗中的關(guān)鍵挑戰(zhàn)。W02008/019366、EP1948802、US2004/0001853、W02005/087813、EP1664270、Kawamura 等(J Tmmunol168:5709,2002)和 Howland 等(J Immunother31 (7):607,2008)描述了通過將抗原靶向APC來提高外源性抗原的交叉遞呈的方法，抗原在APC中內(nèi)在化并遞呈給天然T細胞。例如，W02008/019366討論了將抗原連接可以被APC吞噬的顆粒，使得抗原在APC的吞噬體中可以釋放 ，并且由此交叉遞呈至MHC I類分子上。相似地，EP1948802描述了將抗原連接抗體Fe片段，以促進抗原內(nèi)在化至APC中。然而，以上文獻沒有一篇提及將抗原靶向不需要的細胞；而是，將抗原靶向?qū)ｉT的APC亞類，其隨后激活細胞毒T細胞，來殺滅不需要的細胞。同樣，沒有一篇文獻描述使用和重新定向現(xiàn)有的免疫應(yīng)答，也沒有公開可以在細胞表面上遞呈T細胞抗原而不需要內(nèi)在化。
[0016]本發(fā)明的第一個方面提供了一種用于預(yù)防或治療特征在于存在不需要的細胞的病癥的藥劑，該藥劑含有(i)能夠靶向不需要的細胞的靶向半體jP(ii)T細胞抗原，其中可以在不需要的細胞的附近通過藥劑中的切割位點的選擇性切割從靶向半體中釋放出T細胞抗原。
[0017]靶向半體
[0018]“靶向半體”包括能夠靶向不需要的細胞的任何部分。優(yōu)選地，靶向半體能夠選擇性地靶向不需要的細胞。例如，如果靶向半體以高于正常細胞的程度靶向不需要的細胞，則是優(yōu)選的，并且最優(yōu)選只靶向不需要的細胞。
[0019]將認識到，如果在功能上可以被其他治療方式替代或如果對生命不是重要的，可以容忍靶向半體與正常細胞的結(jié)合。因此，不排除靶向癌細胞以及例如內(nèi)分泌組織或器官的靶向半體。在這種情況中，靶向半體用來將免疫應(yīng)答重新定向至不要的細胞和功能上可以被治療方式替代的其他細胞。在挽救生命的情況中，例如，可以犧牲組織或器官，只要其功能對生命不是至關(guān)重要的，例如，在睪丸、前列腺或胰腺的情況中，或其功能可以通過激素替代治療來提供。這樣的考慮將適用于例如甲狀腺、甲狀旁腺、腎上腺皮質(zhì)和卵巢。[0020]認識到，靶向半體可以是能夠相對于需要的細胞選擇性地靶向不需要的細胞的部分，其中不需要的細胞可以包括其在宿主中的存在是不合需要的細胞，和任選其在宿主的存在是合乎需要的但其存在在功能上可以被治療方式替代的細胞。
[0021]還認識到，由于藥劑中的切割位點給予了 T細胞抗原在哪釋放的特異性，因此靶向半體與在其附近切割位點不會切割的正常細胞的結(jié)合也是可以忍受的。
[0022]然而，最優(yōu)選地，與任何其他細胞相對，靶向半體選擇性地靶向不需要的細胞。
[0023]在一個實施方案中，靶向半體是不需要的細胞表達的或與不需要的細胞相關(guān)的實體的特異性結(jié)合配偶體，通常，表達的實體是在不需要的細胞上選擇性表達的。例如，不需要的細胞上表達的實體的豐度通常比待治療軀體內(nèi)的其他細胞上的高10或100或500或1000或5000或10000。然而，如上所述，切割位點提供了另外的特異性，T細胞抗原在那釋放，并且因此結(jié)合配偶體可以結(jié)合相對于體內(nèi)的其他細胞在不需要的細胞上相似地或甚至低表達的實體。
[0024]“結(jié)合配偶體”意思包括結(jié)合特定細胞表達的實體的分子。優(yōu)選地，結(jié)合配偶體選擇性地結(jié)合該實體。例如，如果結(jié)合配偶體具有比對另一種細胞(例如，正常細胞類型)表達的至少一種其他實體低至少五倍或十倍的Kd值(解離常數(shù))(即，較高親和性)，則是優(yōu)選的，并且優(yōu)選地，低超過100或500倍。更優(yōu)選地，該實體的結(jié)合配偶體具有比對另一種細胞(例如，正常細胞類型)表達的至少一種其他實體低超過1000或5000倍的Kd值?？梢允褂帽绢I(lǐng)域公知的方法來容易地測定Kd值。然而，如以上所討論的，認識到結(jié)合配偶體可以選擇性地結(jié)合由不需要的細胞和由正常細胞表達的實體，只要正常細胞在功能上可以被替代或?qū)ι皇侵陵P(guān)重要的。例如，在淋巴瘤中，抗-CD20抗體(其靶向所有B細胞)是非常有效的，并且殺滅所有B細胞，不管是健康的還是惡性的。然而，因為B細胞對健康不是至關(guān)重要的，所以這種情況可以忍受。此外，在黑素瘤、淋巴瘤、前列腺癌、甲狀腺、睪丸或卵巢癌的情況中，靶向健康的相應(yīng)組織也是可以忍受的。
[0025]通常，結(jié)合配偶體是以顯著高于宿主任何正常細胞中的濃度結(jié)合不需要的細胞之內(nèi)或之上存在的實體或易接近結(jié)合配偶體的實體的結(jié)合配偶體。因此，結(jié)合配偶體可以結(jié)合以顯著高于正常細胞的含量表達的不需要的細胞上的表面分子或抗原。相似地，結(jié)合配偶體可以結(jié)合已經(jīng)由不需要的細胞以高于正常細胞的程度分泌至胞外流體中的實體。例如，結(jié)合配偶體可以結(jié)合在細胞膜上表達的或已經(jīng)分泌至腫瘤胞外流體中的腫瘤相關(guān)抗原。
[0026]祀向半體可以是任意的多肽、肽、小分子或擬肽(口6口1^(10111；[11161:;[(3)。
[0027]在優(yōu)選的實施方案中，靶向半體是結(jié)合不需要的細胞表達的抗原的抗體。優(yōu)選的抗體目標(括號中為不需要的細胞類型的實例)包括:Her2/Neu (上皮惡性腫瘤);⑶22 (B細胞，自體免疫或惡性的)；EpCAM (⑶326)(上皮惡性腫瘤)；EGFR (上皮惡性腫瘤)；PMSA (前列腺癌)AD30 (B細胞惡性腫瘤)KD20 (B細胞，自體免疫、過敏或惡性的)KD33 (骨髓惡性腫瘤)；膜IgE (過敏性B細胞)；IgE受體(⑶23)(過敏性疾病中的肥大細胞或B細胞)，⑶80 (B細胞，自體免疫、過敏或惡性的)；⑶86 (B細胞，自體免疫、過敏或惡性的)<D2 (T細胞或NK細胞淋巴瘤);CA125 (多種癌癥，包括卵巢癌);碳酸酐酶IX (多種癌癥，包括腎細胞癌)KD70 (B細胞，自體免疫、過敏或惡性)KD74 (B細胞、自體免疫、過敏或惡性)KD56(T細胞或NK細胞淋巴瘤)；⑶40 (B細胞，自體免疫、過敏或惡性)；⑶19 (B細胞，自體免疫、過敏或惡性)；c-met/HGFR (胃腸道和肝惡性腫瘤)；TRAIL-R1 (多種惡性腫瘤，包括卵巢和結(jié)直腸癌)；DR5 (多種惡性腫瘤，包括卵巢和結(jié)直腸癌)；Η)-1 (B細胞，自體免疫、過敏或惡性的)；PD1L (多種惡性腫瘤，包括上皮腺癌)；IGF-1R (大部分惡性腫瘤，包括上皮腺癌)；VEGF-R2 (與大部分惡性腫瘤相關(guān)的脈管系統(tǒng)，包括上皮腺癌)；前列腺干細胞抗原(PSCA)(前列腺腺癌);MUC1 (上皮惡性腫瘤)；CanAg (腫瘤，如結(jié)腸和胰腺的癌癥)；間皮素(許多腫瘤，包括間皮瘤以及卵巢和胰腺腺癌)；p-鈣粘蛋白(上皮惡性腫瘤，包括乳腺癌)；肌肉生長抑制素(⑶F8)(許多腫瘤，包括肉瘤以及卵巢和胰腺腺癌)；Cripto (TDGFl)(上皮惡性腫瘤，包括結(jié)腸、乳房、肺、卵巢和胰腺癌)；ACVRL1/ALK1 (多種惡性腫瘤，包括白血病和淋巴瘤);MUC5AC (上皮惡性腫瘤，包括乳腺癌)；CEACAM (上皮惡性腫瘤，包括乳腺癌)；⑶137 (B細胞或T細胞，自體免疫、過敏或惡性的)；CXCR4 (B細胞或T細胞，自體免疫、過敏或惡性的);神經(jīng)菌毛素I (上皮惡性腫瘤，包括肺癌);磷脂酰肌醇聚糖(Glypicans)(多種癌癥，包括肝、腦和乳腺癌)；HER3/EGFR (上皮惡性腫瘤)；PDGFRa (上皮惡性腫瘤)；EphA2 (多種癌癥，包括神經(jīng)母細胞瘤、黑素瘤、乳腺癌和小細胞肺癌)和⑶138 (骨髓瘤)。[0028]特別優(yōu)選的抗體包括抗表皮生長因子受體抗體(如，Cetuximab (西妥昔單抗))、抗-Her2抗體、抗-0)20抗體(如,Rituximab(利妥昔單抗))、抗-0)22抗體(如，Inotuzumab(奧英妥珠單抗))、抗-⑶70抗體、抗-⑶33抗體(如hp67.6或Gemtuzumab (吉妥珠單抗))、抗-MUCl抗體(如，GPl.4和SM3)、抗-⑶40抗體、抗-⑶74抗體、抗P-鈣粘蛋白抗體、抗-EpCAM抗體、抗-CD138抗體、抗E-鈣粘蛋白抗體、抗-CEA抗體和抗-FGFR3抗體。
[0029]表1中給出了可以被靶向半體靶向的腫瘤相關(guān)、免疫細胞相關(guān)和傳染劑相關(guān)的抗原的實例。
[0030]表1:用于祀向的細胞表面抗原
[0031]a)腫瘤相關(guān)抗原
【權(quán)利要求】
1.一種用于預(yù)防或治療特征在于存在不需要的細胞的病癥的藥劑，該藥劑包含: (i)能夠靶向不需要的細胞的靶向半體；和 (ii)T細胞抗原， 其中T細胞抗原可以通過藥劑中的切割位點的選擇性切割在不需要的細胞附近從靶向半體中釋放出來。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的藥劑，其中T細胞抗原是能夠引發(fā)患者體內(nèi)現(xiàn)有T細胞應(yīng)答的抗原。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的藥劑，其中切割位點的選擇性切割能夠在不需要的細胞附近和不需要的細胞之外釋放T細胞抗原。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項的藥劑，其中切割位點的選擇性切割能夠在不需要的細胞表面上或接近不需要的細胞的細胞表面釋放T細胞抗原。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項的藥劑，其中靶向半體是不需要的細胞表達的實體的特異性結(jié)合配偶體，或給予患者后能夠在不需要的細胞附近累積的非特異性分子。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的藥劑，其中特異性結(jié)合配偶體是抗體、激素、生長因子、細胞因子或受體配體中的任何一種，或其中非特異性分子是聚乙二醇；葡聚糖；聚氨基酸；非腫瘤特異性蛋白，如免疫球蛋白；白蛋白；或羥丙基甲基丙烯酰胺中的任何一種。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的藥劑，其中抗體對以下任何一種是特異性的:Her2/Neu；CD22 ；EpCAM(CD326) ；EGFR ；PMSA ；CD30 ；CD20 ；CD33 ；膜 IgE ；IgE 受體(CD23)，CD80 ；CD86 ;CD2 ；CA125 ;碳酸酐酶 IX ；CD70 ；CD74 ；CD56 ；CD40 ；CD19 ；c-met/HGFR ；TRAIL-Rl ；DR5 ;PD_1 ；PDlL ；IGF-1R ；VEGF-R2 ;前列腺干細胞抗原(PSCA) ；MUC1 ;CanAg ;間皮素；P-鈣粘蛋白；肌肉生長抑制素(⑶F8) ；Cripto (TDGFl) ；ACVRL1/ALK1 ；MUC5AC ；CEACAM ；SLC44A4 ;CD2/CS1 ；CD137 ；CXCR4 ;神經(jīng)菌毛素I ;磷脂酰肌醇聚糖；HER3/EGFR ;PDGFRa和EphA2。
8.根據(jù)權(quán)利要求6的藥劑，其中抗體是抗上皮生長因子受體抗體(如，Cetuximab)、抗-Her2 抗體、抗-0)20 抗體(如,Rituximab)、抗-0)22 抗體(如，Inotuzumab)、抗-0)70 抗體、抗-CD33 抗體(如 hp67.6 或 Gemtuzumab)、抗-MUCl 抗體(如，GP1.4 和 SM3)、抗-CD40 抗體、抗-CD74抗體、抗P-1丐粘蛋白抗體、抗-EpCAM抗體、抗-CD138抗體、抗E-1丐粘蛋白抗體、抗-CEA抗體和抗-FGFR3抗體。
9.根據(jù)權(quán)利要求6的藥劑，其中靶向半體是IL-2、EGF、VEGF,Flt3L、HGF、IGF、IL-6,IL-4和Toll-樣受體或黑素瘤刺激激素(MSH)中的任何一種。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-9任一項的藥劑，其中T細胞抗原是肽、多肽、磷酸肽或脂質(zhì)(如，磷脂或鞘脂)中的任何一種。
11.根據(jù)權(quán)利要求10的藥劑，其中藥劑是病毒衍生的抗原。
12.根據(jù)權(quán)利要求10或11的藥劑，其中抗原源自水痘-帶狀皰疹病毒、單純皰疹病毒、細胞巨化病毒、EB病毒、腺病毒、鼻病毒、流感病毒中的任何一種，或源自疫苗，如破傷風(fēng)類毒素。
13.根據(jù)權(quán)利要求1-12任一項的藥劑，其中T細胞抗原是I類MHC限制抗原、II類MHC限制抗原，或能夠結(jié)合I組CDl分子的抗原。
14.根據(jù)權(quán)利要求1-13任一項的藥劑，其中切割位點可以通過酶切割，所述酶如蛋白酶(例如，半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酰蛋白酶、絲氨酸蛋白酶、基質(zhì)金屬蛋白酶、前列腺特異性抗原或CD10)、核酶(例如，DNA酶)、脂酶、裂合酶、磷酸酶或糖酶中的任何一種；任選其中切割位點通過基質(zhì)金屬蛋白酶MMP2或MMP14可切割。
15.根據(jù)權(quán)利要求1-14任一項的藥劑，其中特征在于存在不需要的細胞的病癥是腫瘤(良性或惡性)、自體免疫病癥(例如，糖尿病)、心血管疾病、變性疾病、過敏性疾病(例如，哮喘)、神經(jīng)變性疾病(如，阿爾茨海默氏病)、移植病人或傳染病中的任何一種。
16.根據(jù)權(quán)利要求1-15任一項的藥劑，其中特征在于存在不需要的細胞的病癥是腫瘤，T細胞抗原是肽，并且通過蛋白酶切割位點的選擇性切割釋放T細胞抗原。
17.根據(jù)權(quán)利要求1-16任一項的藥劑，其用于醫(yī)學(xué)中。
18.—種藥物組合物，其包含根據(jù)權(quán)利要求1-16任一項的藥劑和藥物學(xué)上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。
19.一種用于預(yù)防或治療特征在于存在不需要的細胞的病癥的方法，該方法包括將權(quán)利要求1-16任一項的藥劑給予患者。
20.根據(jù)權(quán)利要求19的方法，其中在將藥劑給予患者的步驟之前，測定(i)患者的MHC等位基因，(ii)患者對T細胞抗原的細胞毒T細胞應(yīng)答，(iii)患者體內(nèi)不需要的細胞的表達特征中的任何一種。
21.根據(jù)權(quán)利要求19或20的方法，進一步包括給予適用于預(yù)防或治療該病癥的另一種治療劑。
22.根據(jù)權(quán)利要求1-16任一項的藥劑，其用于預(yù)防或治療特征在于存在不需要的細胞的病癥。
23.根據(jù)權(quán)利要求1-16任一項的藥劑在制備用于預(yù)防或治療特征在于存在不需要的細胞的病癥的藥物中的用途。`
24.一種組合物，其包含(i)根據(jù)權(quán)利要求1-16任一項的藥劑和(ii)適用于預(yù)防或治療該病癥的另一種治療劑，其用于預(yù)防或治療特征在于存在不需要的細胞的病癥。
25.組合物在制備用于預(yù)防或治療特征在于存在不需要的細胞的病癥的藥物中的用途，所述組合物包含(i )根據(jù)權(quán)利要求1-16任一項的藥劑和(ii )適用于預(yù)防或治療該病癥的另一種治療劑。
26.一種組合物，其包含(i)根據(jù)權(quán)利要求1-16任一項的藥劑和(ii)適用于預(yù)防或治療該病癥的另一種治療劑。
27.根據(jù)權(quán)利要求21的方法、根據(jù)權(quán)利要求22的藥劑、根據(jù)權(quán)利要求23或25的用途，或根據(jù)權(quán)利要求24或26的組合物，其中另一種治療劑是疫苗、免疫刺激藥物、抗癌劑、對抗本發(fā)明藥劑的抗體應(yīng)答的抑制劑和蛋白酶抑制劑中的任何一種或多種。
28.一種用于預(yù)防或治療特征在于存在不需要的細胞的病癥的試劑盒，該試劑盒包含:(i)能夠靶向不需要的細胞并且連接第一個結(jié)合配偶體的靶向半體，和(ii)連接能夠結(jié)合第一個結(jié)合配偶體的第二個結(jié)合配偶體的T細胞抗原，其中T細胞抗原可以通過T細胞抗原和第二個結(jié)合配偶體之間的切割位點的選擇性切割在不需要的細胞附近從第二個結(jié)合配偶體中釋放出來。
29.一種試劑盒，其包含(i)能夠靶向不需要的細胞的靶向半體，(ii) T細胞抗原，和(iii)一種或多種試劑，所述試劑用于評估患者的(a)MHC等位基因，(b)針對T細胞抗原的細胞毒T細胞應(yīng)答和(c)患者體內(nèi)不需要的細胞的表達特征中的一種或多種。
30.一種預(yù)防或治療特征在于存在不需要的細胞的病癥的方法，該方法包括將以下物質(zhì)給予患者:(i)能夠靶向不需要的細胞并且連接第一個結(jié)合配偶體的靶向半體，和(ii)連接能夠結(jié)合第一個結(jié)合配偶體的第二個結(jié)合配偶體的T細胞抗原，其中T細胞抗原可以通過T細胞抗原和第二個結(jié)合配偶體之間的切割位點的選擇性切割在不需要的細胞附近從第二個結(jié)合配偶體中釋放出來。
31.能夠靶向不需要的細胞并且連接第一個結(jié)合配偶體的靶向半體，和連接能夠結(jié)合第一個結(jié)合配偶體的第二個結(jié)合配偶體的T細胞抗原，其中T細胞抗原可以通過T細胞抗原和第二個結(jié)合配偶體之間的切割位點的選擇性切割在不需要的細胞附近從第二個結(jié)合配偶體中釋放出來，其用于預(yù)防或治療患者中特征在于存在不需要的細胞的病癥。
32.根據(jù)權(quán)利要求19-21、27和30任一項的方法，根據(jù)權(quán)利要求22或27的藥劑，根據(jù)權(quán)利要求25或27的用途，根據(jù)權(quán)利要求26或27的組合物、根據(jù)權(quán)利要求28的試劑盒以及根據(jù)權(quán)利要求31的靶向半體和T細胞抗原，其中特征在于存在不需要的細胞的病癥是腫瘤(良性或惡性)、自體免疫病癥、心血管疾病、變性疾病、糖尿病、過敏反應(yīng)、神經(jīng)變性疾病(如，阿爾茨海默氏病)、移植病人和傳染病中的任何一種。
33.一種用于預(yù)防或治療特征在于存在不需要的細胞的病癥的藥劑，該藥劑包含(i)能夠靶向不需要的細胞的靶向半體；(ii)T細胞抗原；和(iii)在靶向半體和T細胞抗原之間的切割位點，其中切割位點在不需要的細胞附近選擇性地切割。
34.一種分子，其包含(i)T細胞抗原和(ii)切割位點；其中切割位點含有連接半體，以將分子連接靶向半體，該靶向半體能夠靶向不需要的細胞，并且其中切割位點在不需要的細胞附近選擇性地切割。
35.根據(jù)權(quán)利要求34的分子，其中分子包含以下肽中的任何一種:
36.根據(jù)權(quán)利要求28、29和32任一項的試劑盒，根據(jù)權(quán)利要求30或32的方法，根據(jù)權(quán)利要求31或32的靶向半體和T細胞抗原，根據(jù)權(quán)利要求32或33的藥劑和根據(jù)權(quán)利要求34或35的分子，其中靶向半體如權(quán)利要求2中所限定和/或T細胞抗原如權(quán)利要求3中所限定的。
37.根據(jù)權(quán)利要求28、29、32或36任一項的試劑盒，根據(jù)權(quán)利要求30、32和36任一項的方法、根據(jù)權(quán)利要求31、32或36任一項的靶向半體和T細胞抗原，根據(jù)權(quán)利要求32、33或36的藥劑和根據(jù)權(quán)利要求34-36任一項的分子，其中切割位點如權(quán)利要求4或5中限定的選擇性切割。
38.根據(jù)權(quán)利要求1_17、22、27、32、33、36和37任一項的藥劑，根據(jù)權(quán)利要求18、24、`26,27和32任一項的組合物，根據(jù)權(quán)利要求19-21、27和32任一項的方法以及根據(jù)權(quán)利要求23、25、27和32任一項的用途，其中靶向半體和T細胞抗原由單個多肽鏈編碼。
【文檔編號】A61K39/12GK103561771SQ201280024084
【公開日】2014年2月5日 申請日期:2012年3月15日 優(yōu)先權(quán)日:2011年3月17日
【發(fā)明者】馬克·科博爾德, 大衛(wèi)·米勒德 申請人:伯明翰大學(xué)