含有從酵母菌中提取出的多聚磷酸、多聚磷酸的鹽或多聚磷酸的溶劑化物的多聚磷酸組 ...的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明的目的在于，提供一種多聚磷酸組合物，其具有較高的細(xì)胞增殖促進(jìn)能力、對(duì)細(xì)胞的滲透性以及促進(jìn)細(xì)胞存活能力，還有，能促進(jìn)毛發(fā)增長(zhǎng)以及維持毛發(fā)的生長(zhǎng)期。另外，本發(fā)明的目的還在于，提供一種安全性高且包含天然合成的多聚磷酸的多聚磷酸組合物以及包含天然合成的多聚磷酸的多聚磷酸組合物的制作方法。根據(jù)本發(fā)明能夠制作出包含從酵母菌中提取出的多聚磷酸、多聚磷酸的鹽或多聚磷酸的溶劑化物的多聚磷酸組合物。包含從酵母菌中提取出的多聚磷酸、多聚磷酸的鹽或多聚磷酸的溶劑化物的多聚磷酸組合物對(duì)細(xì)胞具有較高的滲透性。還有，通過(guò)將多聚磷酸組合物涂抹在皮膚、牙齦及頭皮上，能夠使該多聚磷酸組合物有效地促進(jìn)細(xì)胞增殖、細(xì)胞存活、毛發(fā)增長(zhǎng)以及維持毛發(fā)的成長(zhǎng)期。
【專利說(shuō)明】含有從酵母菌中提取出的多聚磷酸、多聚磷酸的鹽或多聚磷酸的溶劑化物的多聚磷酸組合物及其制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種含有從酵母菌中提取出的多聚磷酸、多聚磷酸的鹽或多聚磷酸的溶劑化物的多聚磷酸組合物及其制作方法。
【背景技術(shù)】[0002]人們公知通過(guò)使磷酸發(fā)生聚合反應(yīng)，容易化學(xué)合成多聚磷酸。多聚磷酸例如用于化妝品、育發(fā)劑、口腔清洗劑、食品添加劑、醫(yī)療用品及醫(yī)療制劑。一般來(lái)講，多聚磷酸通過(guò)加熱磷酸的方法、在磷酸中添加五氧化二磷并使其溶解的方法這樣的化學(xué)合成的方法制作而成(專利文獻(xiàn)I)。
[0003]化學(xué)合成的多聚磷酸能夠使像細(xì)胞增殖因子這樣的細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)保持穩(wěn)定(非專利文獻(xiàn)I)。還有，多聚磷酸具有促進(jìn)組織修復(fù)能力，能夠用于促進(jìn)外傷、燒傷的治療、牙周疾病的治療、促進(jìn)術(shù)后治療等(專利文獻(xiàn)2)。另外，人們公知多聚磷酸具有促進(jìn)血管新生的作用(專利文獻(xiàn)3)。還有，人們公知多聚磷酸通過(guò)縮短腸的上皮細(xì)胞的間隙來(lái)防止有害物質(zhì)和病原菌進(jìn)入腸內(nèi)，調(diào)節(jié)腸道功能(非專利文獻(xiàn)2)。
[0004]但是，由于化學(xué)合成的多聚磷酸、多聚磷酸的鹽或多聚磷酸的溶劑化物的分子形狀較大，因而會(huì)出現(xiàn)如下問(wèn)題:對(duì)細(xì)胞的滲透能力低，通過(guò)少量涂抹或投藥的方式難以促進(jìn)細(xì)胞增殖。另外，由于化妝品、育發(fā)劑、口腔清洗劑及食品、食品添加劑長(zhǎng)時(shí)間通過(guò)涂抹于皮膚以及口腔內(nèi)或經(jīng)口腔攝取的方式來(lái)使用，因而使含有成分傾向于使用天然材料。因此，人們希望化妝品、育發(fā)劑、口腔清洗劑、食品、食品添加劑及營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑使用由微生物天然合成的多聚磷酸，而不是使用化學(xué)合成的多聚磷酸。
[0005]【專利文獻(xiàn)I】日本發(fā)明專利公開(kāi)公報(bào)特表2004-537490號(hào)
[0006]【專利文獻(xiàn)2】日本發(fā)明專利公開(kāi)公報(bào)特開(kāi)2007-54080號(hào)
[0007]【專利文獻(xiàn)3】日本發(fā)明專利公開(kāi)公報(bào)特開(kāi)2007-169171號(hào)
[0008]【非專利文獻(xiàn)I】 Shiba et al,，J.Biol.Chem.278，26788-26792 (2003)
[0009]【非專利文獻(xiàn)2】Segawa et al, , PLos 0NE，6，e23278 (2011)

【發(fā)明內(nèi)容】

[0010]本發(fā)明的目的在于，提供一種多聚磷酸組合物，其具有較高的細(xì)胞增殖促進(jìn)能力、對(duì)細(xì)胞的滲透性以及促進(jìn)細(xì)胞存活能力，還有，能促進(jìn)毛發(fā)增長(zhǎng)以及維持毛發(fā)的生長(zhǎng)期。本發(fā)明的目的還在于，提供一種多聚磷酸組合物，其通過(guò)縮短腸的上皮細(xì)胞的間隙來(lái)防止有害物質(zhì)和病原菌進(jìn)入腸內(nèi)，調(diào)節(jié)腸道功能。另外，本發(fā)明的目的還在于，提供一種多聚磷酸組合物，其具有較高的安全性，含有天然合成的多聚磷酸。
[0011]本發(fā)明的目的在于，提供一種多聚磷酸組合物的制作方法，該多聚磷酸組合物具有較高的細(xì)胞增殖促進(jìn)能力、對(duì)細(xì)胞的滲透性以及促進(jìn)細(xì)胞存活能力，還有，能促進(jìn)毛發(fā)增長(zhǎng)以及維持毛發(fā)的生長(zhǎng)期。[0012]為了解決上述問(wèn)題，本發(fā)明的申請(qǐng)者經(jīng)反復(fù)努力研究的結(jié)果為，能夠制作出包含從酵母菌中提取出的多聚磷酸、多聚磷酸的鹽或多聚磷酸的溶劑化物的多聚磷酸組合物。
[0013]本發(fā)明的第I方面涉及一種包含從酵母菌中提取出的多聚磷酸、多聚磷酸的鹽或多聚磷酸的溶劑化物的多聚磷酸組合物。包含從酵母菌中提取出的多聚磷酸、多聚磷酸的鹽或多聚磷酸的溶劑化物的多聚磷酸組合物對(duì)細(xì)胞具有較高的滲透力。還有，通過(guò)將多聚磷酸組合物涂抹在皮膚、牙齦及頭皮上，能夠使該多聚磷酸組合物有效地促進(jìn)細(xì)胞增殖、細(xì)胞存活、毛發(fā)增長(zhǎng)以及維持毛發(fā)的成長(zhǎng)期。
[0014]本發(fā)明的第I方面的優(yōu)選方式為:酵母菌為芽殖酵母。芽殖酵母是自古以來(lái)作為食用而使用的酵母菌。使用芽殖酵母能夠有效地得到包含多聚磷酸、多聚磷酸的鹽或多聚磷酸的溶劑化物的多聚磷酸組合物。還有，使用芽殖酵母能夠得到對(duì)細(xì)胞具有較高的滲透力的多聚磷酸組合物。還有，通過(guò)將多聚磷酸組合物涂抹在皮膚、牙齦及頭皮上，能夠使該多聚磷酸組合物有效地促進(jìn)細(xì)胞增殖、細(xì)胞存活、毛發(fā)增長(zhǎng)以及維持毛發(fā)的成長(zhǎng)期。
[0015]本發(fā)明的第I方面的優(yōu)選方式為:提取液還包含酵母菌的細(xì)胞構(gòu)成物質(zhì)和蛋白質(zhì)水解物中的至少一種。由于多聚磷酸組合物中含有細(xì)胞構(gòu)成物質(zhì)和蛋白質(zhì)水解物，因而使該多聚磷酸組合物能夠含有來(lái)自酵母菌的營(yíng)養(yǎng)成分。從而使多聚磷酸組合物具有促進(jìn)細(xì)胞增殖的能力、對(duì)細(xì)胞的滲透性以及促進(jìn)細(xì)胞存活的能力，還有，能夠有效地促進(jìn)毛發(fā)的增長(zhǎng)，維持毛發(fā)的成長(zhǎng)期。
[0016]本發(fā)明的第I方面的優(yōu)選方式為:提取液還包含維生素和礦物質(zhì)中的至少一種。由于多聚磷酸組合物中含有維生素和礦物質(zhì)，因而使多聚磷酸具有促進(jìn)細(xì)胞增殖的能力、對(duì)細(xì)胞的滲透性以及促進(jìn)細(xì)胞存活的能力，還有，能夠更有效地促進(jìn)毛發(fā)的增長(zhǎng)，維持毛發(fā)的成長(zhǎng)期。
[0017]本發(fā)明的第I方面的優(yōu)選方式為:多聚磷酸、多聚磷酸的鹽或多聚磷酸的溶劑化物以多聚磷酸組合物的總質(zhì)量的0.01%以上70%以下的比例包含在該多聚磷酸組合物中。由于多聚磷酸組合物中含有有效量的多聚磷酸、多聚磷酸的鹽或多聚磷酸的溶劑化物，因而使多聚磷酸具有促進(jìn)細(xì)胞增殖的能力、對(duì)細(xì)胞的滲透性以及促進(jìn)細(xì)胞存活的能力，還有，能夠更有效地促進(jìn)毛發(fā)的增長(zhǎng)，維持毛發(fā)的成長(zhǎng)期。
[0018]本發(fā)明的第I方面的優(yōu)選方式為:多聚磷酸的聚合度為20以上300以下。聚合度為20以上300以下的多聚磷酸具有水溶性的特性，且具有使細(xì)胞成長(zhǎng)因子保持穩(wěn)定以及活化該細(xì)胞成長(zhǎng)因子的能力。由于多聚磷酸的聚合度為20以上300以下，因而使其具有水溶性的性質(zhì)。從而使多聚磷酸組合物能夠促進(jìn)皮膚和頭皮細(xì)胞的增殖，活化細(xì)胞。
[0019]本發(fā)明的第I方面的優(yōu)選方式為:多聚磷酸呈最大直徑為IOnm以上1000nm以下的形狀。由于多聚磷酸具有納米粒子水平的大小，因而使多聚磷酸組合物容易滲透到皮膚和頭皮的細(xì)胞中。
[0020] 本發(fā)明的第I方面的優(yōu)選方式為:酵母菌通過(guò)與乳酸菌共同培養(yǎng)而得到。如實(shí)施例所示，在酵母菌與乳酸菌共同培養(yǎng)的情況下，多聚磷酸的累積能力得到提高。因此，在酵母菌通過(guò)與乳酸菌共同培養(yǎng)而得到的情況下，多聚磷酸的濃度得到提高，從而能夠得到優(yōu)良的多聚磷酸組合物。
[0021]本發(fā)明的第2方面涉及一種化妝品。該化妝品中含有有效量的作為有效成分的從酵母菌中提取出的多聚磷酸組合物。將有效量的多聚磷酸組合物混合到化妝品中，能夠使化妝品促進(jìn)細(xì)胞增殖和細(xì)胞存活。
[0022]本發(fā)明的第3方面涉及一種育發(fā)劑。該育發(fā)劑中含有有效量的作為有效成分的從酵母菌中提取出的多聚磷酸組合物。將有效量的多聚磷酸組合物混合到育發(fā)劑中，能夠使育發(fā)劑促進(jìn)毛發(fā)增長(zhǎng)，維持毛發(fā)的生長(zhǎng)期。
[0023]本發(fā)明的第4方面涉及一種口腔清潔劑。該口腔清潔劑中含有有效量的作為有效成分的從酵母菌中提取出的多聚磷酸組合物。將有效量的多聚磷酸組合物混合到口腔清潔劑中，能夠使口腔清潔劑有效地通過(guò)抑制炎癥，預(yù)防牙周病，以及通過(guò)再生促進(jìn)效果使牙槽骨再生。與本發(fā)明的上述內(nèi)容不同的其他方面涉及一種食品、食品添加劑、營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑及整腸劑。人們公知多聚磷酸通過(guò)縮短腸的上皮細(xì)胞的間隙來(lái)防止有害物質(zhì)和病原菌進(jìn)入到腸內(nèi)，調(diào)節(jié)腸道功能。因此，通過(guò)將由酵母而生成的多聚磷酸組合物作為食品、食品添加劑或營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑來(lái)使用，能夠提供具有調(diào)節(jié)腸道功能的產(chǎn)品。
[0024]本發(fā)明的第5方面涉及一種多聚磷酸、多聚磷酸的鹽或多聚磷酸的溶劑化物含有物的制作方法。該方法包括獲得酵母菌塊的工序、獲得酵母菌培養(yǎng)液的工序、獲得酵母菌沉淀物的工序、獲得酵母菌懸浮(懸濁)液的工序、獲得酵母菌提取液的工序、獲得多聚磷酸組合物的工序。獲得酵母菌塊的工序?yàn)?在1°C以上10°c以下的溫度條件下靜置酵母菌，獲得酵母菌塊。獲得酵母菌培養(yǎng)液的工序?yàn)?用含有磷酸鹽的培養(yǎng)液來(lái)培養(yǎng)酵母菌塊，獲得含有多聚磷酸的酵母菌培養(yǎng)液。獲得酵母菌沉淀物的工序?yàn)?離心分離酵母菌培養(yǎng)液，獲得沉淀物，獲得酵母菌懸浮液的工序?yàn)?使作為沉淀物而得到的酵母菌懸濁在液體中，獲得酵母菌被懸濁后的酵母菌懸浮液。獲得酵母菌提取液的工序?yàn)?通過(guò)對(duì)酵母菌懸浮液進(jìn)行加熱處理，從酵母菌體內(nèi)提取出多聚磷酸，獲得酵母菌提取液。獲得多聚磷酸組合物的工序?yàn)?將酵母菌提取液離心分離為含有多聚磷酸的上清液和含有酵母菌體組分的沉淀物，獲得上清液的多聚磷酸組合物。按照上述工序能夠制作出所期望的多聚磷酸組合物。本發(fā)明所涉及的制作方法中的培養(yǎng)方法由I個(gè)工序構(gòu)成，這使得培養(yǎng)時(shí)間大幅縮短。所得到的多聚磷酸組合物具有促進(jìn)細(xì)胞增殖的能力、對(duì)細(xì)胞的滲透性以及促進(jìn)細(xì)胞存活的能力，還有，能夠更有效地促進(jìn)毛發(fā)的增長(zhǎng)，維持毛發(fā)的成長(zhǎng)期。
[0025]本發(fā)明的第5方面的優(yōu)選方式為:獲得酵母菌提取液的工序?yàn)?在60°C以上80°C以下、20分鐘以上40分鐘以下的范圍內(nèi)進(jìn)行加熱處理，獲得所述多聚磷酸和蛋白質(zhì)水解物。在60°C以上80°C以下的條件下進(jìn)行一定時(shí)間以上的加熱處理，能夠獲得蛋白質(zhì)水解物。除含有多聚磷酸外，還含有蛋白質(zhì)水解物的多聚磷酸組合物具有促進(jìn)細(xì)胞增殖的能力、對(duì)細(xì)胞的滲透性以及促進(jìn)細(xì)胞存活的能力，還有，能夠更有效地促進(jìn)毛發(fā)的增長(zhǎng)，維持毛發(fā)的成長(zhǎng)期。
[0026]本發(fā)明的與上述內(nèi)容不同的其他方面涉及一種含多聚磷酸酵母和含有像這樣的含多聚磷酸酵母的營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑(食品、食品添加劑、整腸劑)。該含多聚磷酸酵母如下制作而成。具體的條件可以在適當(dāng)?shù)馗淖兿惹八f(shuō)明的方法后進(jìn)行使用。利用含有乳酸菌和磷酸鹽的培養(yǎng)液來(lái)培養(yǎng)酵母菌塊，得到含有多聚磷酸的酵母菌培養(yǎng)液。接著，對(duì)酵母菌培養(yǎng)液進(jìn)行離心分離，得到酵母菌沉淀物。然后，使用該酵母菌沉淀物來(lái)得到包含多聚磷酸、多聚磷酸的鹽或多聚磷酸的溶劑化物的任何一種的含多聚磷酸酵母。
[0027]發(fā)明效果
[0028]根據(jù)本發(fā)明，能夠提供一種多聚磷酸組合物，其具有較高的細(xì)胞增殖促進(jìn)能力、對(duì)細(xì)胞的滲透性以及促進(jìn)細(xì)胞存活能力，還有，能促進(jìn)毛發(fā)增長(zhǎng)以及維持毛發(fā)的生長(zhǎng)期。另外，本發(fā)明能夠提供一種包含在酵母菌體內(nèi)天然合成的多聚磷酸且具有良好安全性的多聚磷酸組合物。
[0029]還有，根據(jù)本發(fā)明，能夠提供一種多聚磷酸組合物，其具有較高的細(xì)胞增殖促進(jìn)能力、對(duì)細(xì)胞的滲透性以及促進(jìn)細(xì)胞存活能力，還有，能促進(jìn)毛發(fā)增長(zhǎng)以及維持毛發(fā)的生長(zhǎng)期。另外，本發(fā)明能夠提供一種包含有效量的作為有效成分的多聚磷酸、酵母或酵母提取物的食品、食品添加劑、營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑及整腸劑，該多聚磷酸、酵母或酵母提取物能使腸管細(xì)胞保持健康，并能調(diào)節(jié)腸道功能。本發(fā)明的制作方法能夠有效地得到多聚磷酸組合物。
【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0030]圖1表示從酵母菌中加熱提取出的多聚磷酸的分子量的分布。
[0031]圖2表示從酵母菌中提取出的多聚磷酸例子的電子顯微鏡照片。
[0032]圖3表示含有從酵母菌中提取出的多聚磷酸的多聚磷酸組合物對(duì)成纖維細(xì)胞的增殖促進(jìn)能力。
[0033]圖4為表示利用從酵母菌中提取出的多聚磷酸進(jìn)行處理的人工皮膚的甲臜(Formazan)的生成的照片。
[0034]圖5表示從酵母菌中提取出的多聚磷酸對(duì)毛發(fā)的增長(zhǎng)促進(jìn)效果。
[0035]圖6表示毛發(fā)的增長(zhǎng)期、退化期、無(wú)變化的毛囊的例子。
[0036]圖7表示從酵母菌中提取出的多聚磷酸對(duì)毛發(fā)的生成期的維持效果。
【具體實(shí)施方式】
[0037]本發(fā)明的第I方面涉及一種含有從酵母菌中提取出的多聚磷酸、多聚磷酸的鹽或多聚磷酸的溶劑化物的多聚磷酸組合物。含有從酵母菌中提取出的多聚磷酸、多聚磷酸的鹽或多聚磷酸的溶劑化物的多聚磷酸組合物對(duì)細(xì)胞的滲透力較高。還有，將多聚磷酸組合物涂抹在皮膚、牙齦及頭皮上，從而使該多聚磷酸組合物有效地促進(jìn)細(xì)胞增殖、細(xì)胞存活、毛發(fā)生成以及維持毛發(fā)的成長(zhǎng)期。
[0038]多聚磷酸組合物為含有多聚磷酸、多聚磷酸的鹽或多聚磷酸溶劑化物的組合物。多聚磷酸組合物可以采用液體、濃縮液、粉體、固體物這樣的各種形狀。由于多聚磷酸組合物要與化妝品、育發(fā)劑、口腔清洗劑等藥劑混合，因而優(yōu)選具有水溶性的多聚磷酸組合物。另外，多聚磷酸組合物中出含有多聚磷酸、多聚磷酸的鹽或多聚磷酸溶劑化物外，還可以含有細(xì)胞構(gòu)成物質(zhì)、蛋白質(zhì)水解物、維生素及礦物質(zhì)中的至少一個(gè)。另外，多聚磷酸組合物中所含有的物質(zhì)并不局限于上述物質(zhì)，還可以包含其他有效成分。
[0039]酵母菌為真核單細(xì)胞微生物。酵母菌在最外層具有細(xì)胞壁，該細(xì)胞壁以多糖類的葡聚糖、甘露聚糖為主要成分。在細(xì)胞壁的正下方有細(xì)胞膜，且存在各種接受體、運(yùn)輸泵。芽殖酵母為真核生物，具有核膜和核。除此之外，芽殖酵母具有細(xì)胞質(zhì)、線粒體及微管這樣的細(xì)胞器官。酵母菌一般可以大致區(qū)分為芽殖酵母和裂殖酵母。本發(fā)明所使用的酵母菌一般只要是被稱為酵母菌的物質(zhì)，便沒(méi)有特別限定，可以適當(dāng)?shù)厥褂醚恐辰湍浮⒘阎辰湍浮?br> [0040]本發(fā)明的優(yōu)選方式為:酵母菌為芽殖酵母。芽殖酵母自古以來(lái)便被用于加工食品。芽殖酵母可以使食品發(fā)酵，將食品中的糖分解為酒精。酵母菌自古以來(lái)被用于制作啤酒和面包、醬這樣的食品，作為食用而使用時(shí)的安全性自古以來(lái)便已被確定。芽殖酵母為通過(guò)出芽而增殖的酵母菌。芽殖酵母例如優(yōu)選酵母屬(Saccharomyces)、有孢圓酵母屬(Torulasupora)、球擬酵母屬(Torulopsis)、假絲酵母屬(mycotorula)、念珠菌屬(Candida)、紅酵母屬(Rhodotorula)、比赤酵母屬(Pichia)。在本發(fā)明中，使用芽殖酵母能夠有效地得到含有多聚磷酸、多聚磷酸的鹽或多聚磷酸溶劑化物的多聚磷酸組合物。還有，使用芽殖酵母能夠得到通 過(guò)皮膚和頭皮細(xì)胞有效地發(fā)揮作用的多聚磷酸組合物。
[0041]還有，作為優(yōu)選方式，共同培養(yǎng)酵母菌和乳酸菌。通過(guò)共同培養(yǎng)使酵母菌受到乳酸菌或其生成的代謝物質(zhì)的影響，從而使多聚磷酸的累積劑量增加。
[0042]微生物具有將磷酸攝入到微生物內(nèi)，合成多聚磷酸的能力。微生物由于具有利用三磷酸腺苷(ATP)合成多聚磷酸的酶，因而能夠從攝入的酸中合成多聚磷酸。由于酵母菌為微生物，因而如上所述，該酵母菌具有將磷酸攝入到微生物內(nèi)，合成多聚磷酸的能力。
[0043]通過(guò)使用含有磷酸的培養(yǎng)液來(lái)培養(yǎng)酵母菌，使酵母菌將磷酸攝入到該酵母菌體內(nèi)。優(yōu)選培養(yǎng)液為PH3~6，根據(jù)目的在于產(chǎn)生酵母菌的蛋白質(zhì)的特性，pH也可以為3~8。優(yōu)選培養(yǎng)溫度20°C以上~35°C以下。培養(yǎng)液可以以高濃度包含鎂、鈣、鋅這樣的礦物質(zhì)成分以及維生素B2、維生素B6、維生素C、泛酸(維生素B5)、葉酸這樣的維生素類。維生素和礦物質(zhì)相對(duì)于培養(yǎng)液中的總質(zhì)量，各可以為0.1%~3%。酵母菌可以將礦物質(zhì)成分和維生素類攝入到培養(yǎng)液中存在的維生素和礦物質(zhì)酵母菌體內(nèi)。
[0044]攝入到酵母菌體內(nèi)的磷酸通過(guò)酵母菌所具有的合成酶被合成為多聚磷酸。這樣使酵母菌體內(nèi)含有多聚磷酸。合成后的多聚磷酸的聚合度根據(jù)酵母菌的種類和多聚磷酸的合成酶的種類的不同而不同。如果為同一種酵母菌的話，酵母菌所具有的合成酶也為同一種，因而能使所得到的多聚磷酸的聚合度處于一定的范圍內(nèi)。還有，通過(guò)調(diào)節(jié)酵母菌的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間來(lái)控制酶的活性，從而可以得到具有所期望的聚合度的多聚磷酸。
[0045]在酵母菌體內(nèi)合成的多聚磷酸可以通過(guò)對(duì)酵母菌進(jìn)行熱休克，破壞酵母菌體的方式來(lái)提取。優(yōu)選加熱條件為溫度在60°C以上80°C以下，時(shí)間在20分以上40分以下。通過(guò)加熱處理，可以破壞酵母菌的細(xì)胞壁和細(xì)胞膜，得到含有由酵母菌合成的多聚磷酸、多聚磷酸的鹽或多聚磷酸的溶劑化物的酵母菌提取液。在提取液中，當(dāng)細(xì)胞壁和細(xì)胞膜被破壞時(shí)，可以提取出一部分酵母菌的細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、線粒體、核膜、核內(nèi)物質(zhì)及微管這樣的細(xì)胞構(gòu)成物質(zhì)。
[0046]所得到的酵母菌提取液被離心分離為含有多聚磷酸的上清液和含有酵母菌體組分的沉淀物，得到多聚磷酸組合物。當(dāng)細(xì)胞片段的大小為一定以上的大小時(shí)，細(xì)胞片段在離心分離酵母菌提取液的工序中沉淀，去除。但是，微小的細(xì)胞構(gòu)成物質(zhì)卻完好的殘留在提取液的上清液上。因此，多聚磷酸組合物除含有多聚磷酸外，還含有一部分酵母菌的細(xì)胞構(gòu)成物質(zhì)。還有，在酵母菌的細(xì)胞構(gòu)成物質(zhì)、酵母菌所生成的蛋白質(zhì)被酶分解后，酵母菌提取液中含有蛋白質(zhì)水解物。在這種情況下，多聚磷酸組合物除含有多聚磷酸和一部分細(xì)胞構(gòu)成物質(zhì)外，還含有蛋白質(zhì)水解物。由于多聚磷酸組合物中含有細(xì)胞構(gòu)成物質(zhì)和蛋白質(zhì)水解物，因而使多聚磷酸組合物可以含有來(lái)自酵母菌的營(yíng)養(yǎng)成分。
[0047]如上所述，當(dāng)培養(yǎng)液以高濃度包含鎂、鈣、鋅這樣的礦物質(zhì)成分以及維生素B2、維生素B6、維生素C、泛酸(維生素B5)、葉酸這樣的維生素類時(shí)，酵母菌體內(nèi)除含有多聚磷酸外，還含有礦物質(zhì)成分和維生素類。因此，通過(guò)加熱處理使從酵母菌提取出的提取液除包含多聚磷酸外，還包含酵母菌體內(nèi)含有的維生素類和礦物質(zhì)成分。
[0048]酵母菌的細(xì)胞構(gòu)成物質(zhì)、蛋白質(zhì)水解物、維生素及礦物質(zhì)成為皮膚和頭皮細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)源，有利于細(xì)胞的維持或成長(zhǎng)。因此，在將這些物質(zhì)添加到化妝品、育發(fā)劑、口腔清洗劑中時(shí)，這些物質(zhì)作為有效成分發(fā)揮作用。還有，通過(guò)酵母菌的細(xì)胞構(gòu)成物質(zhì)、蛋白質(zhì)水解物、維生素及礦物質(zhì)與多聚磷酸的相互作用，能夠提高多聚磷酸的細(xì)胞增殖促進(jìn)能力和對(duì)皮膚的滲透性。
[0049]多聚磷酸可以為直鏈多聚磷酸、側(cè)鏈多聚磷酸、環(huán)狀多聚磷酸、作為高級(jí)支鏈(網(wǎng)孔狀)的磷酸聚合物(超磷酸),也可以為這些物質(zhì)的混合物和這些物質(zhì)的衍生物。直鏈多聚磷酸具有如下結(jié)構(gòu):通過(guò)正磷酸的脫水縮合使2個(gè)以上的PO4四面體共有頂點(diǎn)的氧原子，而連接成直鏈狀。側(cè)鏈多聚磷酸具有直側(cè)鏈導(dǎo)入有有機(jī)基團(tuán)的結(jié)構(gòu)。 [0050]多聚磷酸以H2O和P2O5為構(gòu)成分子，由Hn+2 (Pn03n+1)或(HpO3)n表示成直鏈狀或環(huán)狀。這里，聚合后的磷酸的個(gè)數(shù)由η表示。多聚磷酸中主要有20~100聚合度的多聚磷酸(中鏈多聚磷酸)、100~1000聚合度的多聚磷酸(長(zhǎng)鏈多聚磷酸)。在本發(fā)明中，多聚磷酸的聚合度為20~100，優(yōu)選50~250，更優(yōu)選80~200。聚合度在20以上300以下的多聚磷酸為水溶性，其通過(guò)使成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子這樣的細(xì)胞成長(zhǎng)因子保持穩(wěn)定來(lái)促進(jìn)細(xì)胞的增殖。
[0051]本發(fā)明的多聚磷酸組合物中含有多聚磷酸、多聚磷酸的鹽或多聚磷酸的溶劑化物。
[0052]多聚磷酸的鹽是指多聚磷酸的鹽、尤其是藥學(xué)上所容許的多聚磷酸的鹽。作為多聚磷酸的鹽，優(yōu)選堿金屬鹽，更優(yōu)選鈉鹽。在本說(shuō)明書(shū)中，多聚磷酸的鹽中不僅可以含有無(wú)水鹽還可以含有含水鹽。這些鹽例如在溶液內(nèi)產(chǎn)生電離，發(fā)揮與多聚磷酸相同的功能。
[0053]多聚磷酸的溶劑化物是指多聚磷酸的溶劑化物的溶劑化物。溶劑化物例如為水合物。另外，本發(fā)明的多聚磷酸組合物有時(shí)在酵母菌體內(nèi)或提取液中吸收水分，與其所吸收的水分形成水合物。形成像這樣的水合物的情況也包含在多聚磷酸的溶劑化物的形成情況中。這些溶劑化物能在溶液內(nèi)產(chǎn)生電離，發(fā)揮與多聚磷酸相同的功能。
[0054]本發(fā)明中使用的多聚磷酸、多聚磷酸的鹽或多聚磷酸的溶劑化物可以為I種，但也可以為多種混合物。多種多聚磷酸、多聚磷酸的鹽或多聚磷酸的溶劑化物中包含聚合度或分子結(jié)構(gòu)不同的多聚磷酸、多聚磷酸的鹽或多聚磷酸的溶劑化物以及金屬離子不同的多聚磷酸鹽。
[0055]在本發(fā)明中，多聚磷酸以多聚磷酸組合物的總質(zhì)量的的0.01%以上70%以下，優(yōu)選0.02%以上50%以下，還優(yōu)選0.1%以上50%以下的比例包含在該多聚磷酸組合物中。多聚磷酸可以為多聚磷酸的鹽或者多聚磷酸的溶劑化物，相對(duì)于多聚磷酸組合物的多聚磷酸的含有率為這3種多聚磷酸的總質(zhì)量的含有率。通過(guò)多聚磷酸組合物中包含有效量的多聚磷酸、多聚磷酸的鹽或多聚磷酸的溶劑化物，能夠有效地促進(jìn)細(xì)胞的增殖、皮膚細(xì)胞的存活、毛發(fā)的增長(zhǎng)，維持毛發(fā)的生長(zhǎng)期，調(diào)節(jié)腸道功能。
[0056]本發(fā)明中所得到的多聚磷酸在酵母菌體內(nèi)合成，包含在該酵母菌體內(nèi)。多聚磷酸為了在酵母菌體內(nèi)保持穩(wěn)定，而以折疊的結(jié)構(gòu)存在。處于折疊狀態(tài)的多聚磷酸呈最大直徑在IOnm以上1000nm以下，優(yōu)選30nm以上800nm以下，還優(yōu)選50nm以上500nm以下的形狀。由于本發(fā)明中所得到的多聚磷酸為納米級(jí)水平的粒子的大小，因而其具有良好的對(duì)皮膚表面的滲透性。另外，由于多聚磷酸呈上述形狀，因而使其容易滲透到頭皮和皮膚上的油脂成分層中，具有較高的滲透性。另外，折疊結(jié)構(gòu)是指多聚磷酸凝集的粒子形狀，該形狀包含球形、橢圓形、圓柱形、四邊形、凹凸的塊狀這樣的各種形狀。
[0057]本發(fā)明的第2方面涉及一種化妝品。該化妝品中包含有效量的作為有效成分的從酵母菌中提取出的多聚磷酸組合物。
[0058]本發(fā)明所涉及的化妝品包含作為有效成分的多聚磷酸組合物。多聚磷酸組合物以液體、濃縮液、粉體、固體物的狀態(tài)被添加到化妝品中。多聚磷酸以化妝品的總質(zhì)量的0.01%以上70%以下，優(yōu)選0.02%以上50%以下，還優(yōu)選0.1%以上50%以下的比例包含在該化妝品中。
[0059]在本發(fā)明所涉及的化妝品中還可以添加其他已知的有效成分。例如，在化妝水中添加離子交換水等用于向角質(zhì)層提供水分的純凈水；乙醇、丙醇這樣的用于溶解油溶性水分，帶來(lái)清涼感覺(jué)的酒精；甘油、PEG及玻尿酸這樣的用于角質(zhì)層保濕的保濕劑；酯油、植物油這樣的用于提高保濕性和使用感的潤(rùn)膚劑(防止水分蒸發(fā)的油成分)；聚氧乙烯油醇醚這樣的用于可溶化原料成分的增溶劑；檸檬酸、乳酸及氨基酸這樣的用于調(diào)整產(chǎn)品的PH值的緩沖劑；香蘭素，橙香精，檸檬香精，牛奶味，香葉醇，芳樟醇這樣的用于添加香味的香料；對(duì)羥基苯甲酸甲酯、苯氧乙醇這樣的用于抑制微生物，防止腐敗的防腐劑；用于著色的著色劑；金屬離子螯合劑及紫外線吸收劑這樣的用于防止褪色和變色的防褪色劑；收斂劑、殺菌劑、活化劑、消炎劑及美白劑這樣的藥劑?？梢詮倪@些化妝水的有效成分中選擇出I種或2種以上進(jìn)行添加。
[0060]化妝品一般在清潔皮膚后涂抹在皮膚表面上，以使皮膚保持健康?；瘖y品例如為化妝水、乳液、霜、發(fā) 膠、精華露(精華液)及面膜。含有作為有效成分的多聚磷酸組合物的化妝品可以按照通常的方法制作而成。
[0061]化妝水的基本功能為對(duì)皮膚的角質(zhì)層提供水分和保濕成分，化妝水還具有使皮膚變水嫩的功能。化妝水的有效成分最好能滲透到角質(zhì)層中，因而優(yōu)選對(duì)皮膚具有較高的滲透能力的有效成分。如上所述，在酵母菌體內(nèi)合成的多聚磷酸具有納米級(jí)水平的大小。因此，在酵母菌體內(nèi)合成的多聚磷酸對(duì)皮膚具有較高的滲透能力，能促進(jìn)細(xì)胞增殖，提高皮膚細(xì)胞的存活效果。從而能夠保證皮膚細(xì)胞處于健康狀態(tài)。
[0062]本發(fā)明的第3方面涉及一種育發(fā)劑。在該育發(fā)劑中包含作為有效成分的從酵母菌中提取出的多聚磷酸組合物。
[0063]本發(fā)明涉及的育發(fā)劑包含作為有效成分的多聚磷酸組合物。多聚磷酸組合物以液體、濃縮液、粉體、固體物的狀態(tài)被添加到育發(fā)劑中。多聚磷酸以育發(fā)劑的總質(zhì)量的0.01%以上70%以下，優(yōu)選0.02%以上50%以下，還優(yōu)選0.1%以上50%以下的比例包含在該育發(fā)劑中。育發(fā)劑在I天I次到10次的范圍內(nèi)被施用時(shí)，其換算成多聚磷酸組合物的重量時(shí)為0.01g以上IOg以下(優(yōu)選0.1g以上5g以下)的量即可。
[0064]本發(fā)明所涉及的育發(fā)劑還可以添加其他已知的有效成分。例如，月桂提取物及葉綠素這樣的生物細(xì)胞的活化劑；人參提取物、日本獐牙菜提取物、千金藤素、維生素E及其衍生物、Y-谷維素這樣的用于促進(jìn)末梢血管的血液流動(dòng)的血液循環(huán)促進(jìn)劑；辣椒酊、姜酊、斑蝥酊及煙酸芐酯這樣的局部刺激劑；維生素A、B1、B2、B6、E及其衍生物、泛酸及其衍生物、生物素等維生素類；胱氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、色氨酸及氨基酸提取物這樣的氨基酸類的用于對(duì)毛母細(xì)胞周圍補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)的營(yíng)養(yǎng)劑；雌二醇及炔雌醇這樣的對(duì)雄性激素具有拮抗作用的雌性激素；泛酸及其衍生物、胎盤(pán)素、尿囊素及光敏性物質(zhì)301號(hào)這樣的用于改善毛母細(xì)胞功能低下的發(fā)根活化劑；甘草酸二甲、甘草次酸、尿囊素及檜木醇這樣的抗炎劑、甘油及吡咯烷酮羧酸這樣的用于防止頭皮干燥的保濕劑?？梢詮倪@些育發(fā)成分中選擇出I種或2種進(jìn)行添加。
[0065]育發(fā)劑一般具有促進(jìn)毛發(fā)出現(xiàn)、促進(jìn)毛發(fā)生長(zhǎng)、育發(fā)、養(yǎng)發(fā)以及防止脫發(fā)的效果。育發(fā)劑一般被直接涂抹在頭皮上。育發(fā)劑例如為液體劑、乳劑、霜、洗劑、發(fā)膠、泡沫及噴霧。另外，洗發(fā)水、護(hù)發(fā)素及護(hù)發(fā)膏中可以包含作為有效成分的多聚磷酸組合物。另外，還可以為將有效成分滲透到無(wú)紡布和棉布中的敷布。含有作為有效成分的多聚磷酸組合物的育發(fā)劑可以按照通常的方法制作而成。
[0066]育發(fā)劑的基本功能為持續(xù)活化頭皮的毛囊細(xì)胞，促進(jìn)毛發(fā)增長(zhǎng)。為了使有效成分滲透到頭皮的毛囊細(xì)胞中，優(yōu)選對(duì)毛囊細(xì)胞具有較高的滲透能力的育發(fā)劑。如上所述，在酵母菌體內(nèi)合成的多聚磷酸具有納米級(jí)水平的大小。因此，在酵母菌體內(nèi)合成的多聚磷酸對(duì)毛囊細(xì)胞的滲透能力較高，能夠持續(xù)活化毛囊細(xì)胞。從而能夠促進(jìn)毛發(fā)的增長(zhǎng)，將毛囊細(xì)胞維持在成長(zhǎng)期的狀態(tài)。
[0067]本發(fā)明的第4方面涉及一種口腔清洗劑。該口腔清洗劑中包含有效量的作為有效成分的從酵母菌中提取出的多聚磷酸組合物。
[0068]本發(fā)明所涉及的口腔清洗劑包含作為有效成分的多聚磷酸組合物。多聚磷酸組合物以液體、凝膠、膏、濃縮液、粉體、固體物的狀態(tài)被添加到口腔清洗劑中。多聚磷酸相對(duì)于口腔清洗劑的總質(zhì)量的0.01%以上70%以下，優(yōu)選0.02%以上50%以下，還優(yōu)選0.1%以上50%以下的比例包含在該口腔清洗劑中?？谇磺逑磩┰贗天I次到10次的范圍內(nèi)被施用時(shí)，其換算成多聚磷酸組 合物的重量時(shí)為0.01g以上IOg以下(優(yōu)選0.1g以上5g以下)的量即可。
[0069]本發(fā)明所涉及的口腔清洗劑還可以添加其他已知的口腔清洗成分。例如，聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、植酸、磷酸氫二鈉、磷酸鈉及沸石這樣的清潔劑；過(guò)氧化氫、過(guò)氧化尿素、過(guò)氧化鈣及亞氯酸鈉這樣的漂白劑；尿囊素、ε -氨基己酸、甘草酸二甲、β -甘草次酸、抗壞血酸、維生素E及奧磺酸鈉這樣的抗炎劑；異丙基甲基苯酚、鹽酸洗必泰、三氯生、檜木醇、西吡氯銨、銅葉綠酸鈉、苯扎氯銨、地喹氯銨、芐索氯銨、鹽酸烷基二氨基乙基甘氨酸、鹽酸吡哆醇、氯化溶菌酶及兒茶素這樣的抗菌劑；聚氧乙烯月桂基醚及月桂酰肌氨酸鈉這樣的表面活性劑；薄荷醇、乳香提取物、玫瑰提取物、薄荷香精這樣的香味料；氟化鈉、單氟磷酸鈉及氟化錫這樣的氟化合物；尼泊金、苯氧乙醇及鹽酸烷基二氨基乙基甘氨酸這樣的防腐劑。可以從這些口腔清潔成分中選擇出I種或2種以上進(jìn)行添加。
[0070]口腔清洗劑一般會(huì)在口腔內(nèi)滯留一定時(shí)間，凈化口腔內(nèi)部，防止干燥，帶來(lái)清涼感覺(jué)等，或者具有口腔內(nèi)疾病的預(yù)防或治療效果?？谇磺逑磩├鐬檠栏唷⒀心?、漱口水、噴霧式口腔內(nèi)用清潔劑、含嗽劑及口腔清潔液。含有作為有效成分的口腔清洗劑可以按照通常的方法制作而成。
[0071]口腔清洗劑的基本功能為:促進(jìn)口腔內(nèi)的清潔以及包含牙槽骨的牙周組織和牙齒的健康。為了使有效成分滲透到牙周組織的細(xì)胞中，抑制牙齦炎癥，優(yōu)選對(duì)牙周袋具有較高滲透能力的口腔清洗劑。如上所述，在酵母菌內(nèi)合成的多聚磷酸具有納米級(jí)水平的粒子的大小。因此，在酵母菌內(nèi)合成的多聚磷酸組合物對(duì)牙周組織的牙齦細(xì)胞和牙槽骨具有較高的滲透能力，能在促進(jìn)牙齦細(xì)胞的增殖的同時(shí)抑制炎癥的產(chǎn)生，促進(jìn)牙槽骨的再生。
[0072]本發(fā)明的優(yōu)選方面涉及一種包含有效量的上述任何一種作為有效成分的多聚磷酸組合物的食品。食品的種類并沒(méi)有特別限定。只要是能發(fā)揮上面說(shuō)明的任何一個(gè)功能的食品，包含能發(fā)揮其功能的量的多聚磷酸組合物即可。食品例如為飲料。飲料容易經(jīng)口攝取本發(fā)明的多聚磷酸組合物。飲料例如為清涼飲料、茶、咖啡、紅茶及乳酸飲料。食品在I天I次到10次的范圍內(nèi)被攝入時(shí)，其換算成多聚磷酸組合物的重量時(shí)為0.01g以上IOg以下(優(yōu)選0.1g以上5g以下)的量即可。
[0073]本發(fā)明優(yōu)選方面涉及一種包含有效量的上述任何一種作為有效成分的多聚磷酸組合物的食品添加劑。為發(fā)揮上述多聚磷酸組合物的功能，在食品中添加適當(dāng)?shù)氖称诽砑觿?br> [0074]本發(fā)明的優(yōu)選方面涉及一種包含有效量的上述任何一種作為有效成分的多聚磷酸組合物的營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑。營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑本身眾所周知。即，通過(guò)在眾所周知的載體(淀粉等)中混合本發(fā)明的多聚磷酸組合物，并使用壓片機(jī)使該混合物成型，能夠制作出營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑。本發(fā)明所涉及的食品、食品添加劑或營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑中包含多聚磷酸組合物。多聚磷酸以營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑的總質(zhì)量的0.01%以上50%以下，優(yōu)選0.02%以上30%以下，還優(yōu)選0.1%以上15%以下的比例包含在該營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑中。營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑可以適當(dāng)?shù)匕樘?、低聚糖等糖類；糊精、纖維素等賦形劑；各種無(wú)機(jī)鹽類、維生素類、膠原蛋白、玻尿酸、輔酵素Q10、α硫辛酸、各種植物提取物等各種有用成分；香料；糖精等。營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑在I天I次到10次的范圍內(nèi)被提供給使用對(duì)象時(shí)，其換算成多聚磷酸組合物的重量時(shí)為0.01g以上IOg以下(優(yōu)選0.1g以上5g以下)的量即可。
[0075]本發(fā)明的優(yōu)選方面涉及一種包含有效量的上述任何一種作為有效成分的多聚磷酸組合物的整腸劑?？梢酝ㄟ^(guò)與上述營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑相同的制作方法來(lái)制作整腸劑。整腸劑在I天I次到10次的范圍內(nèi)被提供給使用對(duì)象時(shí)，其換算成多聚磷酸組合物的重量時(shí)為0.01g以上IOg以下(優(yōu)選0.1g以上5g以下)的量即可`。
[0076]本發(fā)明的其他方面涉及一種多聚磷酸、多聚磷酸的鹽或多聚磷酸的溶劑化物含有物的制作方法。該方法包括獲得酵母菌塊的工序、獲得酵母菌培養(yǎng)液的工序、獲得酵母菌沉淀物的工序、獲得酵母菌懸浮(懸濁)液的工序、獲得酵母菌提取液的工序、獲得多聚磷酸組合物的工序。獲得酵母菌塊的工序?yàn)?將酵母菌靜置在1°C以上10°c以下的溫度條件下，獲得酵母菌塊。獲得酵母菌培養(yǎng)液的工序?yàn)?用含有磷酸鹽的培養(yǎng)液對(duì)酵母菌塊進(jìn)行培養(yǎng)，獲得包含含有多聚磷酸的酵母菌的培養(yǎng)液。獲得酵母菌沉淀物的工序?yàn)?對(duì)酵母菌培養(yǎng)液進(jìn)行離心分離，獲得沉淀物。獲得酵母菌懸浮液的工序?yàn)?使作為沉淀物而得到的酵母菌懸濁在液體中，獲得酵母菌被懸濁后的懸浮液。獲得酵母菌提取液的工序?yàn)?通過(guò)對(duì)酵母菌懸浮液進(jìn)行加熱處理，從酵母菌體內(nèi)提取出多聚磷酸，獲得酵母菌提取液。獲得多聚磷酸組合物的工序?yàn)?將酵母菌提取液離心分離為含有多聚磷酸的上清液和酵母菌體組分的沉淀物，獲得上清液的多聚磷酸組合物。
[0077]由酵母菌可以將磷酸攝入到酵母菌體內(nèi)，在該菌體內(nèi)合成多聚磷酸。在含有磷酸鹽的培養(yǎng)液中培養(yǎng)酵母菌，使酵母菌將磷酸攝入到菌體內(nèi)。作為將磷酸攝入到酵母菌體內(nèi)，合成多聚磷酸的方法，人們一般公知將培養(yǎng)工序分為2個(gè)工序的方法。第I工序?yàn)?為了使酵母菌容易攝入磷酸，使用完全不含有磷酸的培養(yǎng)液來(lái)培養(yǎng)磷酸，使該酵母菌處于磷酸饑餓狀態(tài)。第2工序?yàn)?使用豐富含有磷酸的培養(yǎng)液來(lái)培養(yǎng)酵母菌，使磷酸攝入到酵母菌體內(nèi)。通過(guò)將培養(yǎng)工序分為2個(gè)工序，可以使酵母菌有效地將磷酸攝入到菌體內(nèi)。但是，在上述方法中，由于培養(yǎng)液需要2種，因而需要對(duì)第I種的培養(yǎng)液中培養(yǎng)的菌體進(jìn)行集菌，再用新的培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng)。因此，現(xiàn)有的培養(yǎng)工序在操作方面和成本方面均存在問(wèn)題。
[0078]本發(fā)明所涉及的制作方法中首先有獲得酵母菌塊的工序。獲得酵母菌塊的工序?yàn)?將酵母菌靜置在1°C以上10°C以下的溫度條件下，獲得酵母菌塊。在獲得酵母菌塊的工序中，在水分含量相對(duì)于酵母菌塊的質(zhì)量百分比為30%以上50%以下的條件下靜置酵母菌。在獲得酵母菌塊的工序中，優(yōu)選在1°C以上10°C以下的溫度條件下，將酵母菌靜置72小時(shí)以上。在獲得酵母菌塊的工序中，不需要培養(yǎng)基或培養(yǎng)液，在獲得酵母菌塊之后，不需要更換培養(yǎng)液。因此可簡(jiǎn)化培養(yǎng)工序步驟。還有，經(jīng)過(guò)獲得酵母菌塊的工序，能夠大幅縮短獲得酵母菌培養(yǎng)液的工序中的培養(yǎng)時(shí)間。
[0079]獲得酵母菌培養(yǎng)液的工序?yàn)?在含有磷酸鹽的培養(yǎng)液中培養(yǎng)酵母菌塊。培養(yǎng)液中可以以高濃度包含鎂、鈣及鋅這樣的礦物質(zhì)成分；維生素B2、維生素B6、維生素C、泛酸及葉酸這樣的維生素類。在本發(fā)明所涉及的制作方法中，由于要經(jīng)過(guò)獲得酵母菌塊的工序，因而使獲得酵母菌培養(yǎng)液的工序僅由I個(gè)工序構(gòu)成。本發(fā)明所涉及的制作方法與現(xiàn)有的包括由2個(gè)工序構(gòu)成的培養(yǎng)工序的制作工序相比，能夠獲得大約1.5倍量的多聚磷酸。還有，培養(yǎng)時(shí)間為I小時(shí)以上3小時(shí)以下，與現(xiàn)有的由2個(gè)工序構(gòu)成的培養(yǎng)工序所花費(fèi)培養(yǎng)時(shí)間相比，大幅縮短。還有，在礦物質(zhì)成分和維生素類存在的培養(yǎng)液中培養(yǎng)酵母菌，不僅能夠獲得適用于化妝品、育發(fā)劑及口腔清洗劑的多聚磷酸組合物，還能夠縮短培養(yǎng)時(shí)間。
[0080]優(yōu)選培養(yǎng)液包含乳酸菌。優(yōu)選乳酸菌被添加酵母菌質(zhì)量的0.1%以上50%以下，也可以為0.5%以上20%以下，1%以上15%以下，2%以上10%以下。乳酸菌例如為干酪乳酸桿菌、嗜酸乳桿菌、短乳桿菌、德氏乳桿菌、發(fā)酵乳桿菌、瑞士乳桿菌、克菲爾乳桿菌、副干酪乳桿菌、植物乳桿菌、鼠李糖乳桿菌、唾液乳桿菌、嗜熱鏈球菌、乳酸乳球菌、乳酸乳桿菌、棉子糖乳球菌、明串珠球菌、腸膜`明串珠菌中的I種或2種以上。乳酸菌可以事先添加在培養(yǎng)基中，也可以在培養(yǎng)中途慢慢地添加,還可以在培養(yǎng)中途添加。
[0081]獲得酵母菌沉淀物的工序?yàn)?對(duì)培養(yǎng)酵母菌的液體進(jìn)行離心分離，獲得沉降后的酵母菌。離心分離在離心力為3000Xg到15000Xg，時(shí)間為3分鐘到30分鐘的條件下進(jìn)行。離心分離可以按照通常的方法進(jìn)行。
[0082]獲得酵母菌懸浮液的工序?yàn)?利用細(xì)胞懸浮液的溶劑對(duì)由離心分離獲得酵母菌的沉淀物進(jìn)行懸濁處理。細(xì)胞懸浮液的溶劑可以試用蒸餾水、生理鹽水、磷酸緩沖液、PH緩沖液這樣的通常用于細(xì)胞懸浮的溶液。
[0083]獲得酵母菌提取液的工序?yàn)?對(duì)酵母菌提取液加熱。通過(guò)對(duì)酵母菌進(jìn)行熱休克，破壞細(xì)胞膜，使多聚磷酸溶出菌體外。熱處理可以在溫度60°C以上80°C以下，20分鐘以上40分鐘以下的時(shí)間內(nèi)進(jìn)行。優(yōu)選進(jìn)行熱處理時(shí)，設(shè)定不會(huì)使合成的多聚磷酸分解的溫度，時(shí)間條件。
[0084]獲得多聚磷酸組合物的工序?yàn)?將酵母菌提取液離心分離為含有多聚磷酸的上清液和酵母菌體組分，獲得多聚磷酸組合物。從菌體內(nèi)溶出的多聚磷酸為水溶性，溶解于液體。因此，通過(guò)離心分離可以分離出酵母菌體的沉淀物和含有多聚磷酸的多聚磷酸組合物。離心分離后，可以回收上清液，獲得多聚磷酸組合物。離心分離在離心力為5000Xg到lOOOOXg，時(shí)間為3分鐘到30分鐘的條件下進(jìn)行。離心分離可以按照通常的方法進(jìn)行。酵母菌提取液中除含有多聚磷酸外，還含有酵母菌的細(xì)胞構(gòu)成物質(zhì)、蛋白質(zhì)的蛋白質(zhì)水解物、維生素類及礦物質(zhì)成分。酵母菌的細(xì)胞構(gòu)成物質(zhì)、蛋白質(zhì)水解物、維生素及礦物質(zhì)有利于皮膚和頭皮細(xì)胞的維持或成長(zhǎng)，且作為化妝品、育發(fā)劑及口腔內(nèi)清潔劑的有效成分發(fā)揮作用。因此，優(yōu)選在進(jìn)行獲得多聚磷酸組合物的工序中的離心分離時(shí)，除將多聚磷酸殘留在上清液中外，還將這些物質(zhì)殘留在上清液中。因此，優(yōu)選離心分離的條件為5000Xg到1000OXg這樣的、由通常的離心分離機(jī)以可能較小的離心力進(jìn)行分離。
[0085]本發(fā)明的優(yōu)選方式為:獲得酵母菌提取液的工序?yàn)?在60°C以上80°C以下，20分鐘以上40分鐘以下的范圍內(nèi)進(jìn)行加熱處理。上述多聚磷酸組合物的制作方法中的獲得酵母菌提取液的工序?yàn)?在60°C以上80°C以下，優(yōu)選65°C以上75°C以下，20分鐘以上40分鐘以下，優(yōu)選25分鐘以上35分鐘以下的范圍內(nèi)進(jìn)行加熱處理。按照加熱溫度和加熱時(shí)間的條件分解合成的多聚磷酸，優(yōu)選加熱處理時(shí)間為40分鐘以下。還有，在獲得酵母菌提取液的工序中，可以獲得蛋白質(zhì)水解物。通過(guò)對(duì)酵母菌體內(nèi)的蛋白質(zhì)進(jìn)行加水分解，可以獲得蛋白質(zhì)水解物。因此，優(yōu)選在80°C以下，進(jìn)行一定時(shí)間以上的加熱處理，以使酵母菌體內(nèi)的水解酶不會(huì)失去活性。
[0086]在本發(fā)明中，雖然制作工序中包含在60°C以上80°C以下，20分鐘以上40分鐘以下的范圍內(nèi)進(jìn)行加熱處理的工序，但是卻能夠抑制不耐熱的蛋白質(zhì)和維生素類的變性。這是由于在從酵母菌中和多聚磷酸一起提取出蛋白質(zhì)和維生素類時(shí)，多聚磷酸的納米粒子內(nèi)包含蛋白質(zhì)和維生素類，并對(duì)其進(jìn)行保護(hù)。從酵母菌中提取出的多聚磷酸具有使不耐熱的成分保持穩(wěn)定的功能。[0087]本發(fā)明的與上述不同的其他方面涉及一種含多聚磷酸酵母以及包含像這樣的含多聚磷酸酵母的營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑(食品、食品添加劑、整腸劑)。該含多聚磷酸酵母可以如下制作而成。具體的條件可以在適當(dāng)?shù)馗淖兿惹八f(shuō)明的方法后進(jìn)行使用。利用含有乳酸菌和磷酸鹽的培養(yǎng)液來(lái)培養(yǎng)酵母菌塊，得到含有多聚磷酸的酵母菌培養(yǎng)液。接著，對(duì)酵母菌培養(yǎng)液進(jìn)行離心分離，得到酵母菌沉淀物。然后，使用該酵母菌沉淀物來(lái)得到包含多聚磷酸、多聚磷酸的鹽或多聚磷酸的溶劑化物的任何一種的含多聚磷酸酵母。此時(shí)，可以進(jìn)行加熱等處理，殺滅酵母菌(及乳酸菌)。由于只要含多聚磷酸酵母包含酵母菌和乳酸菌的尸體，其便能成為腸內(nèi)細(xì)菌的食物，從而能夠發(fā)揮更好的效果，并能容易制作出營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑等。
[0088]實(shí)施例1
[0089](使用酵母菌的菌體內(nèi)的多聚磷酸的制作)
[0090]用于培養(yǎng)的酵母菌使用食品用鮮酵母(常規(guī)東方酵母，日本東方酵母工業(yè)株式會(huì)社制)。首先，在10°c以下將上述酵母菌保管3天，得到酵母菌塊。接著，僅用表1中所記載的組合培養(yǎng)液B來(lái)培養(yǎng)酵母菌。培養(yǎng)時(shí)間和酵母菌體量如表2中的記載所不。酵母菌體量以相對(duì)于培養(yǎng)液量的菌體量的比例來(lái)表不。準(zhǔn)備40mL培養(yǎng)液B,按照表2中所記載的比例將酵母菌放入該培養(yǎng)液B中。之后，對(duì)含有酵母菌的培養(yǎng)基在25°C下進(jìn)行2小時(shí)的振蕩培養(yǎng)。在振蕩培養(yǎng)后，在離心力為4000 Xg的條件下對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行I分鐘的離心分離，回收酵母菌體的沉淀物。用蒸餾水對(duì)回收后的菌體進(jìn)行I次清掃，并在_30°C的條件下進(jìn)行保存。
[0091]【比較例I】[0092]為使酵母菌處于磷酸饑餓狀態(tài)，在完全不含有磷酸的培養(yǎng)液A中對(duì)該酵母菌進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)時(shí)間和酵母菌體量如表2中的記載所不。酵母菌體量以相對(duì)于各培養(yǎng)液量的菌體量的比例來(lái)表示。準(zhǔn)備300mL的培養(yǎng)液A，將6g酵母菌放入該培養(yǎng)液A中。之后，在250C的條件下，按照表2所記載的各時(shí)間對(duì)含有酵母菌的培養(yǎng)液進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。在振蕩培養(yǎng)后，在離心力為4000Xg的條件下對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行I分鐘的離心分離，回收酵母菌體的沉淀物。接著，準(zhǔn)備40mL放入培養(yǎng)液B，按照表2所記載的比例將回收后的酵母菌體放入該培養(yǎng)液B中。之后，在25°C的條件下，對(duì)含有酵母菌的培養(yǎng)液進(jìn)行2小時(shí)的振蕩培養(yǎng)。在振蕩培養(yǎng)后，在離心力為4000Xg的條件下對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行I分鐘的離心分離，回收酵母菌體的沉淀物。用蒸餾水對(duì)回收后的菌體進(jìn)行I次清掃，并在_30°C的條件下進(jìn)行保存。另外，使用琥珀酸緩沖液或磷酸緩沖液將培養(yǎng)液A和B調(diào)整到pH5.2。
[0093]【表1】
[0094]Tablel
【權(quán)利要求】
1.一種多聚磷酸組合物，包含從酵母菌中提取出的提取液， 所述提取液包含多聚磷酸、多聚磷酸的鹽或多聚磷酸的溶劑化物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多聚磷酸組合物，其特征在于， 所述酵母菌為芽殖酵母。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多聚磷酸組合物，其特征在于， 所述提取液還包含酵母菌的細(xì)胞構(gòu)成物質(zhì)和蛋白質(zhì)水解物中的至少一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多聚磷酸組合物，其特征在于， 所述提取液還包含維生素和礦物質(zhì)中的至少一種。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多聚磷酸組合物，其特征在于， 所述多聚磷酸、多聚磷酸的鹽或多聚磷酸的溶劑化物以所述多聚磷酸組合物的總質(zhì)量的0.01%以上70%以下的比例包含在所述多聚磷酸組合物中。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多聚磷酸組合物，其特征在于， 所述多聚磷酸的聚合度為20以上300以下。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多聚磷酸組合物，其特征在于， 所述多聚磷酸呈最大直徑為IOnm以上1000nm以下的形狀。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的 多聚磷酸組合物，其特征在于， 所述酵母菌通過(guò)與乳酸菌共同培養(yǎng)而獲得。
9.一種化妝品，包含作為有效成分的權(quán)利要求1~8的任意一項(xiàng)所述的多聚磷酸組合物。
10.一種育發(fā)劑，包含作為有效成分的權(quán)利要求1~8的任意一項(xiàng)所述的多聚磷酸組合物。
11.一種口腔清潔劑，包含作為有效成分的權(quán)利要求1~8的任意一項(xiàng)所述的多聚磷酸組合物。
12.—種食品，包含作為有效成分的權(quán)利要求1~8的任意一項(xiàng)所述的多聚磷酸組合物。
13.一種食品添加劑，包含作為有效成分的權(quán)利要求1~8的任意一項(xiàng)所述的多聚磷酸組合物。
14.一種營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑，包含作為有效成分的權(quán)利要求1~8的任意一項(xiàng)所述的多聚磷酸組合物。
15.—種整腸劑,包含作為有效成分的權(quán)利要求1~8的任意一項(xiàng)所述的多聚磷酸組合物。
16.一種多聚磷酸組合物的制作方法，所述組合物為包含多聚磷酸、多聚磷酸的鹽或多聚磷酸的溶劑化物的任意一種的多聚磷酸組合物，其特征在于，包括獲得酵母菌塊的工序、獲得酵母菌培養(yǎng)液的工序、獲得酵母菌沉淀物的工序、獲得酵母菌懸浮液的工序、獲得酵母菌提取液的工序、獲得多聚磷酸組合物的工序，其中， 所述獲得酵母菌塊的工序?yàn)?在rc以上10°c以下的溫度條件下靜置酵母菌，獲得酵母菌塊， 所述獲得酵母菌培養(yǎng)液的工序?yàn)?用含有磷酸鹽的培養(yǎng)液來(lái)培養(yǎng)所述酵母菌塊，獲得含有多聚磷酸的酵母菌培養(yǎng)液，所述獲得酵母菌沉淀物的工序?yàn)?離心分離所述酵母菌培養(yǎng)液，獲得酵母菌沉淀物， 所述獲得酵母菌懸浮液的工序?yàn)?使所述酵母菌沉淀物懸濁在細(xì)胞懸浮液的溶劑中，獲得酵母菌懸浮液， 所述獲得酵母菌提取液的工序?yàn)?對(duì)所述酵母菌懸浮液進(jìn)行加熱處理，獲得酵母菌提取液， 所述獲得多聚磷酸組合物的工序?yàn)?將所述酵母菌提取液離心分離為含有多聚磷酸的多聚磷酸組合物和酵母菌體組分，獲得多聚磷酸組合物。
17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的制作方法，其特征在于， 含有所述磷酸鹽的培養(yǎng)液還包含乳酸菌。
18.根據(jù)權(quán)利要求16所述的制作方法，其特征在于， 獲得所述酵母菌提取液的工序?yàn)?在60°C以上80°C以下、20分鐘以上40分鐘以下的范圍內(nèi)進(jìn)行加熱處理，獲得所述多聚磷酸和蛋白質(zhì)水解物。
19.一種含多聚磷酸酵母，按照含多聚磷酸酵母的制作方法制作而成，所述制作方法包括獲得酵母菌培養(yǎng)液的 工序、獲得酵母菌沉淀物的工序、獲得含多聚磷酸酵母的工序，其中， 所述獲得酵母菌培養(yǎng)液的工序?yàn)?利用含有乳酸菌和磷酸鹽的培養(yǎng)液來(lái)培養(yǎng)酵母菌塊，獲得含有多聚磷酸的酵母菌培養(yǎng)液， 所述獲得酵母菌沉淀物的工序?yàn)?離心分離所述酵母菌培養(yǎng)液，獲得酵母菌沉淀物， 所述獲得含多聚磷酸酵母的工序?yàn)?利用所述酵母菌沉淀物來(lái)獲得包含多聚磷酸、多聚磷酸的鹽或多聚磷酸的溶劑化物的任意一種的含多聚磷酸酵母。
20.—種包含權(quán)利要求19所述的酵母的營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑。
【文檔編號(hào)】A61K36/06GK103687582SQ201280035382
【公開(kāi)日】2014年3月26日 申請(qǐng)日期:2012年7月18日 優(yōu)先權(quán)日:2011年7月19日
【發(fā)明者】柴肇一, 川添祐美, 加藤真一 申請(qǐng)人:露珍細(xì)胞再生株式會(huì)社