可用于被動流感免疫的抗體的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明揭示與包括第1組和第2組代表在內(nèi)的多個流感病毒進(jìn)化枝具有交叉反應(yīng)性的特異性單克隆抗體和片段，包括其雙特異性抗體。這些抗體可用于控制流感流行和大范圍流行，以及用于提供對抗季節(jié)性流感的預(yù)防性或治療性保護(hù)。
【專利說明】可用于被動流感免疫的抗體
[0001] 相關(guān)申請案
[0002] 本申請案要求2011年12月5日提交的美國申請案第61/567, 046號的權(quán)益，該案 以全文引用的方式并入本文中。

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0003] 本發(fā)明涉及被動免疫以對抗流感的領(lǐng)域。更具體說來，描述結(jié)合于流感血球凝集 素A的HAtl成熟裂解位點(diǎn)共有序列附近的特異性抗體，包括由人類細(xì)胞分泌的抗體。

【背景技術(shù)】
[0004] 流感病毒的血球凝集素蛋白（HA)具有在流感病毒株之間高度異質(zhì)的球狀頭部結(jié) 構(gòu)域，和含有進(jìn)入細(xì)胞中所需的融合位點(diǎn)的莖區(qū)。HA以三聚體形式存在于病毒包膜上。血 球凝集素蛋白的未裂解形式（HAtl)通過由胰蛋白酶裂解成HA1和HA2部分以允許融合位點(diǎn) 影響毒性來活化。這兩個裂解的部分保持使用二硫鍵偶合，但在低PH環(huán)境中經(jīng)歷宿主細(xì)胞 內(nèi)體小室的構(gòu)象變化，導(dǎo)致病毒和宿主細(xì)胞膜的融合。
[0005] 裂解位點(diǎn)含有A型流感和B型流感以及A型和B型流感的各種病毒株所共有的共 有序列。未裂解的血球凝集素蛋白三聚體（HAtl)是稱為不活化形式，而當(dāng)裂解成HA1和HA2 部分時，血球凝集素蛋白是稱為呈活化形式。
[0006]比安奇（Bianchi，E.)等人，病毒學(xué)雜志（J.Virol.) (2005)79 :7380-7388 描述基 于這一裂解位點(diǎn)的共有序列的"通用"B型流感疫苗，其中包含這一位點(diǎn)的肽當(dāng)結(jié)合于腦膜 炎雙球菌（Neisseriameningitidis)的外膜蛋白復(fù)合物時能夠在小鼠中產(chǎn)生抗體。還描 述了看來結(jié)合于所述共有序列的單克隆抗體。此外，在小鼠中觀察到抗血清的成功被動轉(zhuǎn) 移。包含衍生自流感的M2和/或HA蛋白的肽的其它現(xiàn)有技術(shù)疫苗，諸如W02004/080403 中所述的那些，誘導(dǎo)具有微弱功效或在病毒株間無效的抗體。
[0007] 所屬領(lǐng)域中描述的結(jié)合HA莖區(qū)的抗體包括由庫賽爾（Crucell)開發(fā)的那些，即在 以下文獻(xiàn)中描述的CR6261和CR8020 :思羅斯比（Throsby，M.)等人，公共科學(xué)圖書館-綜 合（PLoSOne) (2008)3 :e3942 ;愛可爾特（Ekiert，D.C.)等人，科學(xué)（Science) (2011)333 : 843-850 ;和隋（Sui，J.)等人，自然結(jié)構(gòu)和分子生物學(xué)（Nat.Struct.Mol.Biol.) (2009) 16 : 265-273。也已經(jīng)針對保守M2E抗原開發(fā)MAB，如格蘭迪（Grandea，A.G.)等人，美國國家科 學(xué)院院刊（PNASUSA) (2010) 107 :12658-12663所述。M2E在受感染細(xì)胞的表面上且也是金 剛胺和金剛乙胺的靶標(biāo)。針對這些抗生素已產(chǎn)生抗藥性，暗示這一靶標(biāo)并未滿足基本功能。
[0008] 額外抗體已經(jīng)由蘭澤瓦西亞小組（LanzavecchiaGroup)描述：柯蒂（Corti，D.) 等人，科學(xué)（Science) (2011) 333 :850-856,其結(jié)合并中和A型流感的第1組和第2組病毒 株，但效力不如以下實(shí)例中所示的本文所述的那些抗體高。此外，如德萊弗斯（Dreyfus，C.) 等人，科學(xué)（Science) (2012)337 :1343-1348所述的針對A型和B型流感具有免疫反應(yīng)性的 MB具有比下文所述的那些抗體低的效力。
[0009]PCT申請公開案第W02011/160083號以引用的方式并入本文中，描述源自人類細(xì) 胞且適用于被動疫苗的單克隆抗體。所述抗體展示結(jié)合于流感病毒進(jìn)化枝Hl的高親和力，所述進(jìn)化枝在第1組中，且一些抗體還展示與也在第1組中的H9和/或與在第2組中的H7 和/或在第1組中的H2的高親和力。一些所揭示的抗體僅結(jié)合不活化三聚體形式，大概在 共有裂解區(qū)域處，而其他抗體能夠結(jié)合已經(jīng)裂解的活化的血球凝集素蛋白。
[0010] 仍需要結(jié)合額外進(jìn)化枝且展示增強(qiáng)的與所述進(jìn)化枝的親和力的抗體。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0011] 本發(fā)明提供以增強(qiáng)的親和力結(jié)合代表A型流感的第1組和第2組中任一者或兩者 的三聚體的抗體。所述抗體能夠在由例如先前未鑒別的流感病毒株或目前可獲得的季節(jié)性 疫苗無法賦予保護(hù)作用的病毒株引起的大范圍流行事件中賦予被動免疫性。因?yàn)橹辽僖恍?抗體結(jié)合多種病毒株，指示靶向基本位點(diǎn)，所以其可能結(jié)合先前甚至未遇到過的病毒株。所 述抗體還可用于改善或預(yù)防疫苗接種無法產(chǎn)生完全保護(hù)反應(yīng)或因弱免疫系統(tǒng)而處于高風(fēng) 險的個體（例如，非常年幼者、老年人、移植患者、經(jīng)癌癥或HIV化學(xué)療法治療的患者）的感 染。
[0012] 因此，在一個方面，本發(fā)明針對與作為模式標(biāo)本的第1組（包括H1、H2、H5、H6、H8、 H9、Hll、H13、H16)或第2組（包括H3和H7)的A型流感病毒具有廣泛交叉反應(yīng)性或展示 跨組反應(yīng)性的結(jié)合部分，特別是單克隆抗體或其免疫反應(yīng)性片段。一些下文說明的抗體特 異性結(jié)合于HAtl蛋白中所含的表位且識別HA的原生三聚體形式以及活化形式。
[0013] 特別重要的是雙特異性抗體和其片段，其能夠放大可特異性結(jié)合的病毒進(jìn)化枝的 范圍。
[0014] 所屬領(lǐng)域中應(yīng)充分了解，基于非免疫球蛋白的蛋白質(zhì)可具有與抗體類似的表位識 別特性且也可提供合適的實(shí)施例，包括基于纖維連接蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白或脂質(zhì)運(yùn)載蛋白的結(jié) 合劑。基于核酸的部分，諸如適體也具有這些結(jié)合特性。
[0015] 在其它方面，本發(fā)明針對使用本發(fā)明的結(jié)合部分來被動抑制已經(jīng)暴露于病毒或已 經(jīng)受感染的個體的病毒感染的方法。本發(fā)明還針對重組物質(zhì)和產(chǎn)生抗體或片段的方法。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0016] 圖1展示所屬領(lǐng)域中已知的流感病毒的分類，分為有效進(jìn)化枝的各組。
[0017] 圖2展示活體外MAB579結(jié)合于各種H7和H3病毒株的結(jié)果，這兩種病毒株都表示 第2組。
[0018] 圖3A和3B展示兩種核心mAb，MAB53 (第1組）和MAB579 (第2組），其對跨越各 別組的進(jìn)化枝具有亞nM未和力。
[0019] 圖4A和4B對比MAB486和MAB579的中和活性。如圖4A中所展示，MAB486以及 來自兔免疫的多克隆制劑在胰蛋白酶不存在下有效地僅中和H1N1。相比之下，圖4B展示 MAB579在胰蛋白酶存在和不存在下都有效。
[0020] 圖5為包含MAB579和MAB53的可變區(qū)的雙特異性抗體的圖解。
[0021] 圖6A-6E展示MAB53、MAB579、其混合物和圖5中展示的雙特異性抗體的活體內(nèi)功 效。

【具體實(shí)施方式】
[0022]本發(fā)明提供可用結(jié)合部分，包括抗體和其片段，以及提供鑒別分泌所述抗體的細(xì) 胞的有效方式，使得可獲取并存儲相關(guān)編碼序列用于后續(xù)容易地進(jìn)行所述抗體的重組產(chǎn) 生。
[0023]本發(fā)明的抗體或類似結(jié)合部分適用于預(yù)防和治療。因此，其可用于保護(hù)個體免受 病毒攻擊以及治療已經(jīng)暴露于流感或受到流感感染的個體。最密切關(guān)注的個體為人類個體 且對于在人類個體中的使用，是傳統(tǒng)天然抗體或其免疫反應(yīng)性片段的結(jié)合部分的人類形式 或人類化形式是優(yōu)選的。然而，含有如當(dāng)用于實(shí)驗(yàn)動物研究時由CDR區(qū)所指示的適當(dāng)結(jié)合 特征的抗體可保留非人類特征。用于以下實(shí)例的研究（盡管在小鼠中進(jìn)行）中的抗體仍然 含有人類可變區(qū)和恒定區(qū)二者。
[0024] 除人類以外，可使用包括本發(fā)明抗體的結(jié)合部分進(jìn)行治療和預(yù)防的個體還包括易 受流感感染的任何個體。因此，各種哺乳動物，諸如牛、豬、綿羊和其它哺乳動物個體（包括 馬和家庭寵物）將受益于這些結(jié)合部分的預(yù)防和治療用途。此外，已知流感會感染鳥類物 種，鳥類物種也將受益于含有本發(fā)明抗體的組合物。
[0025]用于預(yù)防和治療的方法為常規(guī)方法且一般眾所周知?？贵w或其它結(jié)合部分通常通 過注射提供，但口服疫苗也可認(rèn)為有效。劑量水平和投藥時間安排容易優(yōu)化且在所屬領(lǐng)域 的技能范圍內(nèi)。
[0026] 分泌適用抗體的人類細(xì)胞可尤其使用在美國專利7, 413, 868中描述的細(xì)胞斑點(diǎn) (CellSpot)?方法來鑒別，這一專利的內(nèi)容以引用的方式并入本文中。簡而言之，所述方法 能夠在利用以微粒標(biāo)記作標(biāo)記和顯微鏡觀察的高通量分析中篩選從人類（或其它）個體 獲得的個別細(xì)胞。在一個說明性實(shí)施例中，通過使所分泌的抗體吸附或偶合到表面上且接 著用各自偶合到獨(dú)特微粒標(biāo)記的所需抗原處理所述表面，甚至可分析單一細(xì)胞所分泌的抗 體。因此可借助于顯微鏡鑒別細(xì)胞印跡。使用這種技術(shù)，可針對所需抗體分泌篩選數(shù)百萬 個細(xì)胞，且甚至可回收罕見的抗體，諸如本文中在病毒株間進(jìn)行被動流感免疫所需的那些 抗體。由于人類個體具有針對至少一些流感病毒株的現(xiàn)有抗體，且由于通過本發(fā)明方法獲 得的抗體結(jié)合保守序列，因此這些抗體用于對新病毒株以及人類群體已經(jīng)歷的病毒株進(jìn)行 定址的目的。
[0027] 獲得合適抗體的方法不限于細(xì)胞斑點(diǎn)?技術(shù)，它們也不限于人類個體。產(chǎn)生合適 抗體的細(xì)胞可通過各種方式鑒別且所述細(xì)胞可為諸如小鼠或其它嚙齒動物的實(shí)驗(yàn)動物的 那些細(xì)胞。編碼這些抗體的核酸序列可為分離的且產(chǎn)生多種形式的抗體，包括由非人類細(xì) 胞產(chǎn)生的嵌合和人類化形式的抗體。此外，重組產(chǎn)生的抗體或片段包括單鏈抗體或其Fab 或Fab2區(qū)域。人類抗體也可使用諸如具有人類化免疫系統(tǒng)的XenoMcmse?的宿主獲得。用 于產(chǎn)生供針對合適結(jié)合特征進(jìn)行篩選的抗體的方法為所屬領(lǐng)域中眾所周知的。
[0028]類似地，以所需結(jié)合模式構(gòu)建適體的方法也為所屬領(lǐng)域中已知的。
[0029] 如上文所注，抗體或其它結(jié)合部分可結(jié)合血球凝集素蛋白的活化形式、不活化形 式或兩者。在一些情況下有利的是，表位處于這種蛋白質(zhì)的裂解位點(diǎn)處，因?yàn)槠湓诓《局曛?間相對保守，但優(yōu)選所述結(jié)合部分結(jié)合三聚體和活化形式兩者。
[0030]A型流感和B型流感的各種病毒株的裂解位點(diǎn)為已知的。舉例來說，上文所引用的 比安奇（Bianchi)等人的文章在表1中展示數(shù)種所述病毒株的裂解位點(diǎn)周圍的序列：
[0031] 復(fù)I A型和B型流感病毒成熟裂解位點(diǎn)的溶劑暴露區(qū)域的共有序列
[0032]

【權(quán)利要求】
1. 一種結(jié)合部分，其為單克隆抗體，包括雙特異性抗體或其免疫反應(yīng)性片段，或其為 抗體模擬物，所述結(jié)合部分與 MAB383、MAB486、MAB579、MAB699、MAB700、MAB708、MAB710、 MAB711或MAB723結(jié)合到A型流感病毒的相同表位。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合部分，其中和H3和H7感染。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合部分，其與MAB579結(jié)合到相同表位。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的結(jié)合部分，其進(jìn)一步與MAB53結(jié)合到相同表位。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的結(jié)合部分，其為雙特異性抗體或其片段，其為人類或人類化 或嵌合的。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合部分，其為抗體或其片段且包含包含以下序列的重鏈： QVQLVQSGAEVKRPGASVKVSCRASGYTFTSFGFSWVRQAPGQGLEWMGWISAYNGDTKSPQKLQGRVTMTTD TSTNTAYMELRSLISDDTAVYYCARAPPLYYSSWSSDYWGQGTLLTVSS(MAB383)或 QVQLVESGGGMVQPGGSRRLSCAASGFSFSTYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGEKQYYLDSVKGRFTISRD NSKDTLYLQMNSLTAEDTAVYYCVKESARRLLRYFEWLLSSPFDNWGQGALVTVSS(MAB486)或 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKTSGYTFTAYTIHWVRQAPGQRLEWMGWINAGNGHTKYSQRFKGRVTITRD TSARTTYMELRSLTSEDTALYFCARGPETYYYDKTNWLNSHPDEYFQHWGHGTQVTVSS(MAB579)或 QLQLVQSGAEVKKPGASVKLSCKASGYTFTSYTLHWVRQAPGQTLEWMGWINAGNGKTKYPPKFRGRVTITRD TSATTVDMHLSSLTSEDTAVYFCARGPESYYYDRSDWLNSHPDEYFQYWGQGTLVIVSS(MAB699)或 QVQLVESGADVKKPGASVTVSCKASGYTFRSFTMHWVRQVPGQRLEWMGWINAGNGKTKYSQKFQGRVIVTRD TSASTAYMELSSLTSEDTAVYYCARGPETYYYDSSNWLNSHPDEYLQYWGQGTPVTVSS(MAB700)或 QVQLVQSGADVKRPGASVTVSCKASGYTFRSFTMHWVRQVPGQRLEWMGWINAGNGKTKYSQKFQGRVIVTRD TSANTAYMELSSLTSEDTAVYYCARGPETYYYDSSNWLNSHPDEYFQHWGQGTPVTVSS(MAB708)或 QVQLQESGAEVKKPGASVQVSCKASGYTFTSYSVHWVRQAPGQRPEWMGWINAGNGKTKYPQKFKGRVTITRD TLARTVNIHLSSLTSEDTAVYFCARGPDSYYYDRNDWLNSHPDEYFQHWGQGTVVIVSS(MAB710)或 QVQLVESGAEVKKPGASVKITCEASGYTFNTYTIHWLRQAPGQRLEWMGWINAANGHTKYSRKLRSRVTIKRD TSARTSYMELSSLGSEDTAVYYCARGPETYYFDKTNWLNSHPDEYFQHWGQGTLVTVSS(MAB711)或 QVQLVQSGAAVNKPGASVKVSCKASGYSFTSYTLHWVRQAPGQRPEWIGWINAGNGKVKYPRKLQGRITITRD VSATTVHMELRSLTSEDTGLYYCARGPESYFFDTSNHLNSHPDEYFQFWGQGTLVTVSS(MAB723)。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的抗體或片段，其包含包含以下序列的輕鏈： DIQMTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSNYLAWYQQKHGQAPRPLIYGASRRATDVPDRFSGSGSGTDFT LTISRLEPEDFAVYYCQQYGSSPRTFGQGTKLEIK(MAB383)或 DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQTVLYTSNKKNYLAWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFSGSGS GTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYYTSPYTFGQGTKLEIK(MAB486)或 DIQMTQSPSTLSASVGDRVTITCRASQTINNYLAWYQQKPGKAPKLLIYKASSLESGVPSRFSGSGSGTEFTL TISSLQPDDFATYYCQEYNNDSPLTFGGGTKVEIK(MAB579)或 DIQMTQSPSTLSASVGDRVTIACRASQSISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYKASQLESGVPSRFSGSGSGTEFTL TINSLQPDDFATYYCQLYNVYSPLTFGGGTRVDIK(MAB699)或 DIVLTQSPSTLSASVGDRVTITCRASQSISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYKASTLESGVPSRFSGSGSGTEFTL TISSLQPDDFATYYCQEYNNNSPLTFGGGTKVEIK(MAB700)或 DIQMTQSPSTLPASVGDRVTITCRASQSISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYKASSLESGVPSRFSGSGSGTEFTL TISSLQPDDFATYYCQEYNNNSPLTFGGGTKVEIK(MAB708)或 DIVMTQSPSTLSASV⑶RVTISCRASQSIDSWLAWYQQKPGKAPKLLIYKASNLESGVPSRFSGSGSGTEFTL TISSLQPDDFATYYCQLYNVHLITFGGGTRVDIK(MAB710)或 DIVMTQSPSTLSASVGDRVTITCRASQSISTWLAWYQQKPGKAPKLLIYKASNLESGVPARFSGSGSGTEFTL TISSLQPDDFATYYCQEYNNDSPLILGGGTTVEIK(MAB711)或 DIQMTQSPSTLSASVGDRVTITCRASQSISSYLAWYQQKPGKAPKLLIYKASNLESGVPSRFSGSGSGTEFTL TISSLQPDDFATYYCQEYNNNSPLTFGAGTKVEIK(MAB723)。
8. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的抗體或片段，其進(jìn)一步包含包含以下序列的重鏈： EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSTYTMSWVRQAPGQGLEWVSSITRTSSNIYYADSVEGRFTISRD NAKNSLYLQMHSLRVEDTAVYYCARISGVVGPVPFDYWGQGTLITVSS(MAB8)或 QVQLVQSGAEVRKPGSSVKVSCKVSGGIIRKYAINWVRQAPGQGLEWMGGIIAIFNTANYAQKFQGRVTITAD ESTSTVYMELSSLRSEDTALYYCARGMNYYSDYFDYWGQGSLVTVSP(MAB53)〇
9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的抗體或片段，其進(jìn)一步包含包含以下序列的輕鏈： DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQTISKYLNWYQQKPGRAPKLLIYSASSLQSGVPSRFTGSGSGTDFTL TITSLQPEDFATYYCQQSYRPSQITFGPGTKVDIK(MAB8)或 EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVRSNNLAWYQHKPGQAPRLLIFGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFT LTISRLEPEDFAVYYCQQYGSSPALTFGGGTKVEIK(MAB53)〇
10. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合部分，其中重鏈可變區(qū)包含 具有序列AYTIH的⑶R1，和 具有序列 WINAGNGHTKYSQRFKGR 的 CDR2,和 具有序列 GPETYYYDKTNWLNSHPDEYFQH 的 CDR3(MAB579);或 具有序列SYTLH的CDR1，和 具有序列 WINAGNGKTKYPPKFRGR 的 CDR2,和 具有序列 GPESYYYDRSDWLNSHPDEYFQY 的 CDR3(MAB699);或 具有序列SFTMH的⑶R1，和 具有序列 WINAGNGKTKYSQKFQGR 的 CDR2,和 具有序列 GPETYYYDSSNWLNSHPDEYLQY 的 CDR3(MAB700);或 具有序列SFTMH的⑶R1，和 具有序列 WINAGNGKTKYSQKFQGR 的 CDR2,和 具有序列 GPETYYYDSSNWLNSHPDEYFQH 的 CDR3(MAB708);或 具有序列SYSVH的CDR1，和 具有序列 WINAGNGKTKYPQKFKGR 的 CDR2,和 具有序列 GPDSYYYDRNDWLNSHPDEYFQH 的 CDR3(MAB710);或 具有序列TYTIH的⑶R1，和 具有序列 WINAANGHTKYSRKLRSR 的 CDR2,和 具有序列 GPETYYFDKTNWLNSHPDEYFQH 的 CDR3(MAB711);或 具有序列SYTLH的CDR1，和 具有序列 WINAGNGKVKYPRKLQGR 的 CDR2,和 具有序列 GPESYFFDTSNHLNSHPDEYFQF 的 CDR3 (MAB723)。
11. 根據(jù)權(quán)利要求10所述的結(jié)合部分，其中輕鏈可變區(qū)包含 具有序列RASQTINNYLA的CDR1和具有序列KASSLES的CDR2以及具有序列QEYNNDSPLT 的 CDR3(MAB579);或 具有序列RASQSISSWLA的CDR1和具有序列KASQLES的CDR2以及具有序列QLYNVYSPLT 的 CDR3(MAB699);或 具有序列RASQSISSWLA的CDR1和具有序列KASTLES的CDR2以及具有序列QEYNNNSPLT 的 CDR3(MAB700);或 具有序列RASQSISSWLA的CDR1和具有序列KASSLES的CDR2以及具有序列QEYNNNSPLT 的 CDR3(MAB708);或 具有序列RASQSIDSWLA的CDR1和具有序列KASNLES的CDR2以及具有序列QLYNVHLI 的 CDR3(MAB710);或 具有序列RASQSISTWLA的CDR1和具有序列KASNLES的CDR2以及具有序列QEYNNDSPLI 的 CDR3(MAB711);或 具有序列RASQSISSYLA的CDR1和具有序列KASNLES的CDR2以及具有序列QEYNNNSPLT 的 CDR3(MAB723)。
12. 根據(jù)權(quán)利要求11所述的結(jié)合部分，其進(jìn)一步含有重鏈可變區(qū)，所述可變區(qū)包含 具有序列KYAIN的⑶R1，和 具有序列 GIIAIFNTANYAQKFQG 的 CDR2,和 具有序列 GMNYYSDYFDY 的 CDR3 (MAB53)。
13. 根據(jù)權(quán)利要求12所述的結(jié)合部分，其進(jìn)一步含有輕鏈可變區(qū)，所述可變區(qū)包含 具有序列RASQSVRSNNLA的CDR1，和 具有序列GASSRAT的CDR2,和 具有序列 QQYGSSPALT 的 CDR3 (MAB53)。
14. 根據(jù)權(quán)利要求13所述的結(jié)合部分，其為雙特異性抗體或片段，其為嵌合、人類或人 類化的。
15. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合部分，其為雙特異性抗體或片段，其包含 重鏈可變區(qū)，所述可變區(qū)含有 具有序列AYTIH的⑶R1，和 具有序列 WINAGNGHTKYSQRFKGR 的 CDR2,和 具有序列 GPETYYYDKTNWLNSHPDEYFQH 的 CDR3(MAB579);和 重鏈可變區(qū)，所述可變區(qū)含有 具有序列KYAIN的⑶R1，和 具有序列 GIIAIFNTANYAQKFQG 的 CDR2,和 具有序列 GMNYYSDYFDY 的 CDR3 (MAB53);以及 所述雙特異性抗體或片段包含輕鏈可變區(qū)，所述可變區(qū)含有 具有序列RASQTINNYLA的CDR1，和 具有序列KASSLES的CDR2,和 具有序列 QEYNNDSPLT 的 CDR3(MAB579);和 輕鏈可變區(qū)，所述可變區(qū)含有 具有序列RASQSVRSNNLA的CDR1，和 具有序列GASSRAT的CDR2,和 具有序列 QQYGSSPALT 的 CDR3 (MAB53)。
16. 根據(jù)權(quán)利要求15所述的結(jié)合部分，其為雙特異性抗體或片段，其為嵌合、人類或人 類化的。
17. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合部分，其包含MAB383、MAB486、MAB579、MAB699、MAB700、 MAB708、MAB710、MAB711 或 MAB723 的重鏈的 CDR3。
18. -種醫(yī)藥組合物，其包含根據(jù)權(quán)利要求1到17中任一權(quán)利要求所述的結(jié)合部分。
19. 一種治療或預(yù)防個體的流感感染的方法，所述方法包含向個體投與有效量的根據(jù) 權(quán)利要求18所述的組合物。
20. 根據(jù)權(quán)利要求19所述的方法，其中所述個體感染流感。
21. 根據(jù)權(quán)利要求19所述的方法，其中所述個體經(jīng)保護(hù)以免于流感感染。
22. -種重組表達(dá)系統(tǒng)，其包含一或多個編碼根據(jù)權(quán)利要求1到17中任一權(quán)利要求所 述的抗體或片段的重鏈和/或輕鏈可變區(qū)的核苷酸序列，所述序列可操作地連接到控制序 列以供表達(dá)。
23. -種重組宿主細(xì)胞，其經(jīng)修飾以含有根據(jù)權(quán)利要求22所述的表達(dá)系統(tǒng)。
24. -種產(chǎn)生與流感病毒具有免疫反應(yīng)性的單克隆抗體或片段的方法，所述方法包含 在其中表達(dá)所述核苷酸序列的條件下培養(yǎng)根據(jù)權(quán)利要求23所述的細(xì)胞。
【文檔編號】A61K38/04GK104302321SQ201280067362
【公開日】2015年1月21日 申請日期:2012年12月5日 優(yōu)先權(quán)日:2011年12月5日
【發(fā)明者】勞倫斯·M·卡烏瓦爾, 斯托特·埃爾斯沃思, 威廉·烏辛格, 克里斯塔·莫琳·麥卡琴, 明哈·帕克 申請人:特瑞利斯生物科學(xué)有限責(zé)任公司