治療和預(yù)防眼疾病的方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了可用于通過CCR3的抑制而治療和預(yù)防新血管AMD的組合物和方法。所述組合物和方法可用于治療和預(yù)防包括但不限于新血管AMD的疾病和障礙。
【專利說明】治療和預(yù)防眼疾病的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明大體上涉及將能夠抑制CCR3或VEGF的表達(dá)和/或活性的試劑和VEGF信 號抑制劑單獨(dú)地或組合地用于治療和/或預(yù)防眼疾病例如繼發(fā)于干（萎縮性）黃斑變性的 血管新生性老年性黃斑變性等眼疾病的方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 血管新生也被稱為血管生成，是形成新的血管的過程。血管新生在正常發(fā)育期間 發(fā)生，并且還在組織受傷之后的傷口愈合中起重要作用。然而，血管新生也被認(rèn)為是許多病 理學(xué)狀態(tài)包括例如癌癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、動脈硬化、銀屑病和眼的疾病包括糖尿病性視網(wǎng) 膜病、糖尿病性黃斑水腫、和血管新生AMD的重要原因。在發(fā)達(dá)國家中，與血管滲漏和/或 血管新生相關(guān)的眼疾病是絕大多數(shù)視覺發(fā)病率和失明的原因 （Campochiaro (2004)Expert Opin. Bioi. Ther. 4:1395-402)。與眼部血管新生和血管滲透性增加相關(guān)的眼疾是視力減弱 和失明的主要原因。
[0003] 在發(fā)達(dá)國家中，老年性黃斑變性（AMD)是失明的主要原因。AMD有兩種主要的臨 床表現(xiàn)：萎縮性（干性AMD)和濕性AMD。萎縮性AMD的特征在于視網(wǎng)膜色素上皮（RPE)和 視神經(jīng)視網(wǎng)膜的變性。萎縮性AMD的早期階段與RPE細(xì)胞層下的玻璃疣的形成有關(guān)。早期 萎縮性AMD可以發(fā)展成為末期疾病，其中RPE完全變性并且在黃斑區(qū)域中形成明顯分界的 RPE萎縮區(qū)域："地圖樣萎縮"。在此疾病形式中，RPE的變性導(dǎo)致黃斑的光感受器的繼發(fā)性 死亡，并且在這些情況中導(dǎo)致嚴(yán)重的視力減弱。
[0004] 患有干性或地圖樣萎縮AMD的AMD患者中的約10-20%發(fā)生繼發(fā)的脈絡(luò)膜血管新 生（CNV)。此疾病形式被稱為"濕AMD"且可以與一些最嚴(yán)重的視力減弱相聯(lián)系。在濕AMD 中，新的脈絡(luò)膜血管（新血管）在脈絡(luò)膜中增殖或可以貫穿Bruch膜并增殖進(jìn)入RPE和視 神經(jīng)視網(wǎng)膜并在其下增殖（參見例如Campochiaro et al. (1999)Mol. Vis. 5:34)。在典型 的情況中，萎縮性AMD在濕形式發(fā)生之前就在眼中發(fā)生，然而，在罕見的偶然情況中，新血 管或濕形式可以在沒有發(fā)生先前的萎縮性形式的情況下發(fā)生。在該疾病的兩種形式中，均 由于感光細(xì)胞的死亡而發(fā)生視力減弱，但在濕性AMD中，在CNV期間形成的AMD流體滲漏和 偶然發(fā)生的來自滲漏血管的內(nèi)部出血（血管滲透性增加）也導(dǎo)致視力減弱。
[0005] 對于AMD，已成功開發(fā)出新的治療以解決濕AMD的一些方面，特別是由抑制血管內(nèi) 皮生長因子（VEGF)或VEGF受體信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的各種分子導(dǎo)致的自CNV的滲漏血管出血減 少。
[0006] 趨化因子為涉及白細(xì)胞的運(yùn)輸和募集的一大類小蛋白質(zhì)（綜述參見Luster, New Eng. J. Med.，338, 436-445(1998))。它們由一大類細(xì)胞釋放并且起吸引和活化包括嗜酸性 粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、T和B淋巴細(xì)胞的各種細(xì)胞類型的作用。根 據(jù)與趨化因子蛋白的氨基末端鄰近的兩個保守的半胱氨酸殘基的間距分類，有兩類主要的 趨化因子，即CXC_(a )和(Χ_(β)趨化因子。
[0007] 趨化因子與屬于G-蛋白偶聯(lián)的七種跨膜-域蛋白家族的特異性細(xì)胞表面受體結(jié) 合（綜述參見Luster，1998)。除其他反應(yīng)以外，趨化因子受體的活化導(dǎo)致細(xì)胞間鈣增加、細(xì) 胞形狀變化、細(xì)胞粘附分子的表達(dá)增加、脫粒和促進(jìn)細(xì)胞遷移（趨化作用）。
[0008] 迄今為止，CC趨化因子受體的9個成員已被識別（CCR-1至9)。對于本發(fā)明特別 重要的是CC-趨化因子受體-3 (CCR-3)，其主要在嗜酸性粒細(xì)胞上表達(dá)，并且也在嗜堿性粒 細(xì)胞、肥大細(xì)胞和Th2細(xì)胞上表達(dá)（Luster，1998)。已知在CCR-3處起作用的趨化因子例如 RANTES、MCP-3和MCP-4募集和活化嗜酸性粒細(xì)胞。
[0009] 先前已顯示人微血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)CCR3 (Salcedo等，2001)且在CCR3受體處活 性的激動劑能夠起血管內(nèi)皮的趨化劑的作用。通過在雞胚絨毛尿囊膜和主動脈環(huán)兩者中的 血管內(nèi)皮細(xì)胞上的此趨化作用，此過程能夠促進(jìn)血管的血管生成（Salcedo等，2001)。
[0010] 這些發(fā)現(xiàn)隨后被擴(kuò)展至AMD中的研究（Takeda等，2009)，其證明抗CCR3抗體、抗 CCR3激動劑抗體、或CCR3的藥理學(xué)抑制劑的玻璃體內(nèi)注射有效限制小鼠中激光誘導(dǎo)后的 CNV程度。在接受激光的在CCR3或特異性CCR3激動劑基因中具有純合基因缺陷的小鼠中 確認(rèn)了這些數(shù)據(jù)。其他數(shù)據(jù)還顯示在CNV的激光誘導(dǎo)之后CCR3激動劑CCL11和CCL24被 誘導(dǎo)（Takeda 等，2009)。
[0011] 將這些研究擴(kuò)展至在嗜酸性粒細(xì)胞或肥大細(xì)胞（與CCR3的表達(dá)關(guān)系最密切的細(xì) 胞）的產(chǎn)生方面有缺陷的小鼠中，證明這些小鼠保持響應(yīng)激光光凝固術(shù)產(chǎn)生CNV的能力并 且在阻斷此疾病中仍然對于玻璃體內(nèi)的CCR3拮抗敏感。
[0012] 所述研究強(qiáng)烈地暗示在限制激光誘導(dǎo)的CNV生成中CCR3的作用機(jī)制不是通過對 于體嗜酸性粒細(xì)胞或肥大細(xì)胞的作用。玻璃體內(nèi)的抗CCR3治療曾被用于控制這些模型中 的疾病這一事實(shí)也支持在眼中的更多局部的作用。研究還暗示抗CCR3治療不限制巨噬細(xì) 胞或中性粒細(xì)胞募集進(jìn)入激光誘導(dǎo)的CNV損傷（Takeda等，2009)。
[0013] 目前已有若干額外的獨(dú)立的研究確認(rèn)了 CNV AMD小鼠模型中的這些發(fā)現(xiàn)；特別 地，在激光有道德CNV AMD模型中口服給藥YM-344031是有效的（Mizutani等，2011)。然 而，盡管抗VEGF治療在此模型中是有效的，但當(dāng)將CCR3拮抗劑給藥至視網(wǎng)膜下的空間時， 這樣的試劑似乎不能限制由共同給藥基質(zhì)膠誘導(dǎo)的血管生成（Li等，2010)。
[0014] 在其他研究中，使用抗CCR3抗體的CCR3中合作用不改變響應(yīng)激光而在眼中生成 的VEGF的量，暗示CCR3和VEGF在控制CNV AMD中的作用可能是獨(dú)立的。相似地，中和抗 VEGF mAb的玻璃體內(nèi)注射對于內(nèi)皮細(xì)胞上存在的CCR3的表達(dá)沒有作用，進(jìn)一步支持在嚙 齒動物中在控制CNV中的此獨(dú)立作用的假設(shè)（Takeda等，2009)。
[0015] 檢查角膜病理性血管生成的研究也發(fā)現(xiàn)損傷/前列腺素 E2誘導(dǎo)的血管生成與 VEGF無關(guān)，但與嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子有關(guān)，再次暗示在控制血管生成中嗜酸性粒細(xì)胞趨 化因子/CCR3軸可以為與VEGF無關(guān)的機(jī)制（Liclican等，2010)。
[0016] 通常認(rèn)為抗VEGF治療在人類和動物模型中均通過降低已進(jìn)入視網(wǎng)膜的新形成的 脈絡(luò)膜血管的血管滲透性而控制CNV，而不是直接作用于血管新生。研究也已暗示在人冠狀 動脈內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)物中，體外培養(yǎng)物的滲透性可以通過CCR3(嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子） 的激動劑而增加（Jamaluddin等，2009)，顯示CCR3拮抗作用通常影響眼部血管的血管滲透 性的可能性。
[0017] Takeda等，2009的初始研究顯示CCR3在人CNV視網(wǎng)膜中表達(dá)但不在僅有萎縮 性AMD的視網(wǎng)膜中表達(dá)，沒有發(fā)展成為CNV疾病的臨床證據(jù)。表達(dá)用脈絡(luò)膜脈管系統(tǒng)的 標(biāo)志物⑶31 (PECAM-1)共同定位，且對于CNV AMD中的血管的特異性通過在視網(wǎng)膜纖維 化和黑素瘤兩者中均不存在染色而確認(rèn)（Takeda等，2009)。在手術(shù)切除的人脈絡(luò)膜新血 管AMD組織中，天然CCR3激動劑嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子-1 (CCL11)、嗜酸性粒細(xì)胞趨化因 子-2 (CCL24)和嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子-3 (CCL26)也均被發(fā)現(xiàn)在間質(zhì)中表達(dá)并且與血管共 同定位（Takeda等，2009)。在與小鼠模型相似的模型中，迄今為止沒有嗜酸性粒細(xì)胞或肥 大細(xì)胞與人AMD相關(guān)的證據(jù)，且實(shí)際上在人CNV AMD損傷中定位這些細(xì)胞的嘗試仍未獲得 任何顯著的發(fā)現(xiàn)（Takeda等，2009)。此外，嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子被確認(rèn)為人AMD的可能 的血清生物標(biāo)志物（Mo等，2010)，其中發(fā)現(xiàn)其與I型和II型AREDS患者和萎縮性AMD顯著 地相關(guān)（P〈_〇. 02-p〈0. 005)，但有趣的是與CNV AMD無關(guān)，但相同研究中的尸體解剖人眼的 檢驗(yàn)暗示與早期AMD、萎縮性AMD和CNVAMD的關(guān)系，最強(qiáng)的染色與CNV AMD中的血管新生內(nèi) 皮相關(guān)。在獲自早產(chǎn)患者的視網(wǎng)膜病變的玻璃體樣品的比較中，相對于血管惰性的疾病，還 發(fā)現(xiàn)嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子與血管活性疾病顯著相關(guān)，暗示CCR3可能參與促進(jìn)視網(wǎng)膜循 環(huán)中的血管生成（Sato等，2009)。
[0018] 因此，先前已證明AMD機(jī)械地發(fā)展自兩個不同的且不相關(guān)的途徑：血管生成和血 管滲透性。已顯示AMD可以使用抗VEGF抑制劑治療（W02007/064752)。已顯示使用CCR3 拮抗劑的玻璃體內(nèi)治療可以影響CNV損傷的大小（Takeda等，2009)。
[0019] 出人意料地， 申請人:已發(fā)現(xiàn)，與由異位的視網(wǎng)膜VEGF生成誘導(dǎo)的或由高壓氧處理 誘導(dǎo)的新視網(wǎng)膜血管不同，CCR3拮抗作用對于特異性地降低脈絡(luò)膜新血管的血管滲透性和 血管生成具有作用，并因此可用于特異性地治療/預(yù)防（包括減慢疾病和/或其癥狀的發(fā) 展）與血管新生AMD相關(guān)的脈絡(luò)膜血管滲透性。
[0020] 申請人:還已發(fā)現(xiàn)，阻斷疾病的血管生成途徑和滲透性途徑兩者在體內(nèi)產(chǎn)生功能響 應(yīng)。因此，用抗VEGF抑制劑和CCR3抑制劑的組合治療對于新血管AMD是有效的組合治療 和/或預(yù)防，其中兩種試劑均能獨(dú)立地影響損傷生長和血管滲透性并產(chǎn)生額外的作用。
[0021] 仍需要治療眼部血管新生障礙特別是血管新生AMD的新方法。本發(fā)明涉及這樣的 方法。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0022] 本發(fā)明涉及通過CCR3的抑制例如CCR3蛋白的表達(dá)和/或活性的抑制治療和/或 預(yù)防眼疾病和障礙的方法。在具體的實(shí)施方案中，能夠通過本發(fā)明的方法治療和/或預(yù)防 的眼疾病與血管新生和血管滲透性增加有關(guān)。具體而言，這樣的疾病包括例如但不限于老 年性黃斑變性等。
[0023] 在一個實(shí)施方案中，此處中公開的方法包括：向需要治療和/或預(yù)防眼疾病的對 象給藥包含抑制CCR3的試劑例如抑制CCR3的表達(dá)和/或CCR3蛋白的活性的試劑的藥物 組合物。并非意圖將本發(fā)明限于疾病的任何具體的階段（例如早期或晚期）。
[0024] 在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了通過阻斷CCR3活化的相關(guān)的酶活性和所有的 下游效應(yīng)器而抑制CCR3的方法。
[0025] 在一些實(shí)施方案中，脈絡(luò)膜新血管滲透性的預(yù)防和/或降低導(dǎo)致對與新血管AMD 相關(guān)的癥狀的預(yù)防和/或降低（即防止疾病的進(jìn)展）。
[0026] 在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了治療和/或預(yù)防患有AMD或具有患AMD的風(fēng) 險(xiǎn)的對象中的AMD的方法，包括向?qū)ο蠼o藥包含能夠抑制CCR3蛋白的活性和/或表達(dá)的試 劑的藥物組合物，其中CCR3蛋白的抑制降低AMD的進(jìn)展或使AMD的癥狀停止。
[0027] 在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了治療和/或預(yù)防患有AMD或具有患AMD的風(fēng) 險(xiǎn)的對象的方法，包括向?qū)ο蠼o藥包含能夠抑制CCR3蛋白的活性和/或表達(dá)的試劑的藥物 組合物，且另外與所述試劑組合給藥抗VEGF抑制劑或VEGF信號抑制劑，其中CCR3蛋白的 抑制降低AMD的進(jìn)展或使AMD的癥狀停止。
[0028] 在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了預(yù)防患有干AMD或地圖樣萎縮AMD的對象中 的萎縮視網(wǎng)膜背景上的CNV損傷的發(fā)展的方法，包括向?qū)ο蠼o藥包含能夠抑制CCR3蛋白的 活性和/或表達(dá)的試劑的藥物組合物，其中CCR3蛋白的抑制預(yù)防這樣的損傷的發(fā)展，所述 試劑可以單獨(dú)給藥或與抗VEGF抑制劑組合給藥。
[0029] 在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了預(yù)防萎縮性和非血管性AMD轉(zhuǎn)化/進(jìn)展為新 血管AMD的方法，包括向?qū)ο蠼o藥包含能夠抑制CCR3蛋白的活性和/或表達(dá)的試劑的藥物 組合物，其中對CCR3蛋白的抑制阻止了這樣的向新血管AMD的轉(zhuǎn)化，所述試劑可以單獨(dú)給 藥或與抗VEGF抑制劑組合給藥。
[0030] 在一些實(shí)施方案中，抑制CCR3的試劑能夠抑制CCR3的表達(dá)，例如抑制CCR3RNA的 翻譯以產(chǎn)生CCR3蛋白。在可選的實(shí)施方案中，抑制CCR3的試劑能夠抑制CCR3蛋白活性。 對于此處所公開的方法中的應(yīng)用，涵蓋任何試劑。在一些實(shí)施方案中，實(shí)際可以為小分子、 核酸、核酸類似物、蛋白、抗體、肽、適配體或其變體或片段。在一些實(shí)施方案中，試劑為核酸 試劑例如RNAi試劑，例如siRNA、shRNA、miRNA、dsRNA或核酶或其變體。
[0031] 在一些實(shí)施方案中，抑制CCR3蛋白活性的試劑為小分子，例如但不限于CCR3 蛋白的小分子可逆抑制劑或不可逆抑制劑。在一些實(shí)施方案中，這樣的小分子為基于 嗎啉-乙酰胺的化合物。在一些實(shí)施方案中，CCR3的小分子抑制劑為例如但不限于 4-[[[[[[(2s)-4-[(3,4-二氯苯基）甲基]-2-嗎啉基]甲基]-氨基]羰基]-氨基]甲 基]苯甲酰胺或其藥學(xué)上可接受的鹽（CCR3抑制劑'994)。參見美國專利第7, 157, 457號 和第 7, 531，651 號。
[0032] 在另一個實(shí)施方案中，這樣的小分子為基于嗎啉脲的化合物。在一些實(shí)施方案 中，（〇3的小分子抑制劑為例如但不限于^[[(25)-4-[(3,4-二氟苯基）甲基]-2-嗎啉 基]-甲基]-3_[(甲基磺?；┌被鵠-苯乙酰胺或其藥學(xué)上可接受的鹽（CCR3抑制劑 '575)。參見美國專利第7, 101，882號。
[0033] 在一些實(shí)施方案中，當(dāng)對象被給藥包含CCR3的抑制劑的藥物組合物時，所述方法 還可以包括向?qū)ο蠼o藥額外的治療劑，例如但不限于包括AMD的眼疾病的治療中使用的治 療劑等。應(yīng)理解，用于治療眼部疾病的治療劑的給藥可以涉及某些手術(shù)的施用，例如但不 限于視網(wǎng)膜聚焦激光光凝固術(shù)、全視網(wǎng)膜光凝固術(shù)、玻璃體內(nèi)給藥的留類例如去炎松、玻璃 體內(nèi)給藥的包含氟輕松的甾類植入物、和玻璃體內(nèi)給藥的抗VEGF治療劑例如帕唑帕尼、 Lucentis?、Avastin?、和 Afiibercept?。
[0034] 在一些實(shí)施方案中，如此處公開的用于新血管眼疾病或障礙的治療和/或預(yù)防的 方法可施用于對象例如哺乳動物對象。在一些實(shí)施方案中，給藥抑制CCR3蛋白的活性或表 達(dá)的試劑的對象為人類。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0035] 圖1顯示用GW766994進(jìn)行系統(tǒng)地治療后通過熒光血管造影獲得的C57B16小 鼠中的CNV組定量。上方的圖顯示每眼的平均CNV損傷大小及相應(yīng)的95%置信限。下 方的圖顯示眼底檢查圖像的實(shí)例，在CNV的激光誘導(dǎo)后1周和2周時用CCR3拮抗劑 4-[[[[[[(2s)-4-[(3,4-二氯苯基）甲基]-2-嗎啉基]甲基]-氨基]羰基]-氨基]甲 基]苯甲酰胺（CCR3抑制劑'994) (2-30mg/kg QD 口服）和譜選擇性激酶抑制劑帕唑帕尼 (5-[[4-[ (2, 3-二甲基-2h-吲唑-6-基）甲基氨基]-2-嘧啶基]氨基]-2-甲基苯磺酰 胺）（20mg/kg QD 口服）治療小鼠后通過小鼠視網(wǎng)膜的直接熒光血管造影測定。
[0036] 圖2顯示057816小鼠中平均0爪^組定量及相應(yīng)的95%置信限，是在0爪^的激光誘 導(dǎo)后1周和2周時用CCR3抑制劑'994(8-30mg/kg QD和8mg/kg BID 口服）和譜選擇性激 酶抑制劑帕唑帕尼（pazopanib，20mg/kg QD 口服）治療小鼠后通過突光血管造影測定。
[0037] 圖3顯示JR5558小鼠中平均CNV組定量，是在用CCR3抑制劑'994進(jìn)行系統(tǒng)地治 療后通過熒光血管造影測定。上方的圖顯示每眼的平均總CNV損傷面積及相應(yīng)的95%置信 限。中間的圖顯示每眼的CNV損傷總數(shù)及相應(yīng)的95%置信限，下方的圖顯示用CCR3抑制 劑'994(2-30mg/kg QD)治療小鼠后小鼠視網(wǎng)膜的直接熒光血管造影。在P14和P26之間 給藥化合物12天。
[0038] 圖4顯示用8mg/kg CCR3抑制劑'994BID系統(tǒng)性治療后通過熒光血管造影測定的 在JR5558mice小鼠中的CNV的組定量。上方的圖顯示每眼的平均CNV損傷總面積及相應(yīng) 的95%置信限。中間的圖顯示每眼的CNV損傷總數(shù)及相應(yīng)的95%置信限，下方的圖顯示用 CCR3抑制劑'994(8mg/kg BID)治療小鼠后小鼠視網(wǎng)膜的直接熒光血管造影。在P14和P26 之間將化合物給藥12天。
[0039] 圖5顯示用CCR3抑制劑'994 (8-30mg/kg QD)治療小鼠之后JR5558的脈絡(luò)膜（移 除視網(wǎng)膜）中血管CNV的組織化學(xué)檢測，使用同工凝集素 Μ染色。在P14和P26之間給藥 化合物12天。
[0040] 圖6顯示用CCR3抑制劑'994 (8-30mg/kg QD)治療小鼠之后JR5558的脈絡(luò)膜（移 除視網(wǎng)膜）中血管CNV的組織化學(xué)檢測，使用同工凝集素 Μ染色。在P14和P26之間將化 合物給藥12天。
[0041] 圖7顯示使用5ul l-10mg/ml CCR3抑制劑'994BID給藥至雙眼進(jìn)行局部治療，通 過熒光血管造影測定的JR5558小鼠中的CNV的組定量，并與系統(tǒng)性給藥8mg/kg CCR3抑制 劑'994腹腔注射BID相比較。上方的圖顯示每眼的平均CNV損傷總面積及相應(yīng)的95%置 信限。下方的圖顯示用CCR3抑制劑'994局部施用或系統(tǒng)性施用（8mg/kg腹腔注射BID) 治療小鼠之后每視網(wǎng)膜的CNV損傷總數(shù)及相應(yīng)的95%置信限。在P14和P26之間將化合物 給藥12天。
[0042] 圖8顯示在用運(yùn)載體、100ug抗-VEGFR2腹腔注射QD、30mg/kg CCR3抑制劑'994 腹腔注射QD、lOOug抗-VEGFR2腹腔注射QD加30mg/kg CCR3抑制劑'994腹腔注射QD和 50ug抗-VEGFR2腹腔注射QD加30mg/kg CCR3抑制劑'994腹腔注射QD的任一種系統(tǒng)性 給藥之后通過熒光血管造影測定的JR5558小鼠中的CNV的組定量。上方的圖顯示每視網(wǎng) 膜的CNV損傷總面積及相應(yīng)的95%置信限。下方的圖顯示每視網(wǎng)膜的CNV損傷總數(shù)及相 應(yīng)的95%置信限。在P14和P26之間給藥CCR3抑制劑'994,持續(xù)12天。自P14起給藥 抗-VEGFR2,持續(xù)6天，且自P19起再給藥5天。
[0043] 圖9顯示在用運(yùn)載體、100ug抗-VEGFR2腹腔注射QD、30mg/kg CCR3抑制劑'994 腹腔注射QD、或lOOug抗-VEGFR2腹腔注射QD加30mg/kg GW766994腹腔注射QD任一種系 統(tǒng)性給藥之后通過熒光血管造影測定的JR5558小鼠中單個CNV損傷的血管滲透性的組定 量。在P24和P26之間將CCR3抑制劑'994和抗-VEGR2以及各種組合給藥2天。
[0044] 圖10顯示在通過激光光凝固術(shù)誘導(dǎo)CNV之后獼猴個體的右眼和左眼中IV級損 傷的分析，在激光前1天順序地給藥運(yùn)載體，20mg/kg GW782415X ((S)-1-((4-(3, 4-二氯芐 基）嗎啉-2-基）甲基）-3-((2-甲基-2H-四唑-5-基）甲基）脲）（以下稱為"'415化 合物"）口服TID或3mg/kg TID 口服，持續(xù)16、24、或30天。
[0045] 圖11顯示獼猴全血中嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子-1對嗜酸性粒細(xì)胞形狀變化的濃 度響應(yīng)曲線，1〇ηΜ和ΙΟΟηΜ '415化合物的預(yù)溫育的作用示于附錄1中。Schild分析確定 '415化合物對于獼猴全血中嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子-1刺激的嗜酸性粒細(xì)胞形狀變化的平 均PA2值為7. 8。
[0046] 圖12顯示將C57B16小鼠暴露于高壓氧（氧誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜病變模型）之后，視網(wǎng) 膜血管生成（血管新生）的組定量的作用和8mg/kg腹腔注射BID的作用。
[0047] 圖13顯示將C57B16小鼠暴露于高壓氧（氧誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜病變模型）之后，視網(wǎng) 膜血管生成（血管新生）的組定量的作用，以及l(fā)〇mg/ml局部給藥和SU4312 (5ug每5天， 眼周）給藥至一只眼BID的作用。

【具體實(shí)施方式】
[0048] 發(fā)明人已發(fā)現(xiàn)CCR3抑制劑可以被用于眼部疾病特別是與新血管AMD相關(guān)的血管 滲透性的治療和/或預(yù)防，包括進(jìn)展。
[0049] 發(fā)明人已發(fā)現(xiàn)CCR3抑制劑可以與抗VEGF治療劑和VEGF信號抑制劑組合使用用 于眼部疾病特別是與AMD相關(guān)的血管滲透性的治療和/或預(yù)防，包括進(jìn)展。
[0050] 發(fā)明人還已發(fā)現(xiàn)CCR3抑制劑與抗VEGF抑制劑的組合可以特別地用于眼部疾病特 別是與AMD相關(guān)的脈絡(luò)膜血管新生的治療和/或預(yù)防，包括進(jìn)展。由于CCR3抑制劑的相似 的作用在經(jīng)歷暴露于高壓氧之后的血管新生（氧誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜病變）的視網(wǎng)膜血管上不能 被證明，因此這些作用看起來是對脈絡(luò)膜特異性的。
[0051] 發(fā)明人已發(fā)現(xiàn)CCR3抑制劑可以用于萎縮視網(wǎng)膜背景例如患有與干萎縮或地圖樣 萎縮相關(guān)的AMD的患者中的眼部疾病特別是脈絡(luò)膜血管新生的治療和/或預(yù)防，包括進(jìn)展。
[0052] 發(fā)明人已發(fā)現(xiàn)CCR3抑制劑可以與抗VEGF治療劑和VEGF信號抑制劑組合用于萎 縮視網(wǎng)膜背景例如患有與干萎縮或地圖樣萎縮相關(guān)的AMD的患者中的眼部疾病特別是脈 絡(luò)膜血管新生的治療和/或預(yù)防，包括進(jìn)展。
[0053] 定義
[0054] 為了方便起見，此處收集整個申請（包括說明書、實(shí)施例、和所附的權(quán)利要求）中 使用的某些術(shù)語。除非另有定義，否則此處使用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語都具有與本發(fā)明所 屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員通常理解的含義相同的含義。
[0055] 術(shù)語"疾病"或"障礙"此處可以互換地使用，指身體或一些器官的狀態(tài)的任何 變化，打斷或擾亂功能的執(zhí)行和/或?qū)е禄疾〉娜嘶蚺c之接觸者諸如不適、機(jī)能障礙、痛 苦或甚至死亡等癥狀。疾病或障礙也可以涉及犬癌熱（distemper)、生?。╝iling)、微 恙（ailment)、重疾（malady)、障礙（disorder)、疾恙（sickness)、病痛（illness)、病 (complaint)、或感染（affectation) 〇
[0056] 術(shù)語"脈絡(luò)膜血管滲透性"或"可滲透的血管"通常被本領(lǐng)域技術(shù)人員稱為"滲漏 血管"。所述術(shù)語在此處中互換地使用以指脈絡(luò)膜脈管系統(tǒng)受損和血管滲透性增加。
[0057] 術(shù)語"試劑"指通常不存在于細(xì)胞中或不以給藥的水平存在于細(xì)胞中的任何實(shí)體。 試劑可以選自包含以下的組：化學(xué)品；小分子；核酸序列；核酸類似物；蛋白；肽；適配體； 抗體；或其片段。核酸序列可以為RNA或DNA，并且可以為單鏈的或雙鏈的，并且可以選地包 含以下的組：編碼感興趣的蛋白的核酸、寡核苷酸、核酸類似物例如肽-核酸（PNA)、假互補(bǔ) PNA(pc-PNA)、鎖核酸（LNA)等。這樣的核酸序列包括例如但不限于編碼蛋白的核酸序列例 如起轉(zhuǎn)錄抑制因子、反義分子、核酶、小抑制性核酸序列例如但不限于RNAi、shRNAi、siRNA、 微RNAi (mRNAi)、反義寡核苷酸等的那些。蛋白和/或肽或其片段可以為任何感興趣的蛋 白，例如但不限于：突變蛋白；治療性蛋白和截短蛋白，其中所述蛋白通常不存在于細(xì)胞中 或在細(xì)胞中以較低的水平表達(dá)。蛋白也可以選自包含以下的組：突變蛋白、基因工程蛋白、 肽、合成肽、重組體蛋白、嵌合蛋白、抗體、中型抗體、微型抗體、三鏈抗體、人源化蛋白、人源 化抗體、嵌合抗體、修飾蛋白及其片段。可選地，由于將核酸序列引入細(xì)胞中及其導(dǎo)致在細(xì) 胞中產(chǎn)生CCR3的核酸和/或蛋白抑制劑的轉(zhuǎn)錄，所述試劑在細(xì)胞中可以為細(xì)胞內(nèi)的。在一 些實(shí)施方案中，所述試劑為任何化學(xué)品、實(shí)體或部分，包括但不限于合成的和天然存在的非 蛋白質(zhì)的實(shí)體。在某些實(shí)施方案中，所述試劑為具有化學(xué)部分的小分子。例如，包括未取代 的或取代的烷基、芳香的、或雜環(huán)基部分的化學(xué)部分，包括大環(huán)內(nèi)酯、輕肌蛋白及其相關(guān)的 天然產(chǎn)物或類似物。可以已知試劑具有期望的活性和/或性質(zhì)，或可以選自一類不同的化 合物。
[0058] 此處使用的術(shù)語"抑制"指CCR3蛋白或其變體或同源物的表達(dá)或活性被降低至足 以產(chǎn)生期望的作用的一定程度和/或一段時間，例如其中CCR3蛋白的抑制降低或停止血管 滲透性和/或脈絡(luò)膜血管新生等的癥狀?；钚缘慕档涂梢允怯捎谟绊慍CR3的一個或多個 特征，包括降低其催化活性或通過抑制CCR3的輔因子或通過與CCR3結(jié)合，活性的程度使得 結(jié)果是治療或預(yù)防眼部障礙。具體而言，CCR3的抑制可以使用用于CCR3抑制的分析測定， 例如但不限于通過使用如此處所公開的用于CCR3蛋白的生物學(xué)分析。
[0059] 術(shù)語"患者"、"對象"和"個體"在此處可以互換地使用，并且指被提供治療（包括 預(yù)防性治療）的動物，特別是人。此處使用的術(shù)語"對象"指人和非人動物。術(shù)語"非人動 物"和"非人哺乳動物"在此處可以互換地使用，包括脊椎動物例如哺乳動物例如非人靈長 類（特別是高級靈長類）、綿羊、狗、嚙齒動物（例如小鼠或大鼠）、豚鼠、山羊、豬、貓、兔、奶 牛，和非哺乳動物例如雞、兩棲動物、爬行動物等。在一個實(shí)施方案中，對象為人。在另一個 實(shí)施方案中，對象為實(shí)驗(yàn)動物或作為疾病模型的動物替代物。
[0060] 此處使用的術(shù)語"治療"包括降低、緩解或預(yù)防（包括預(yù)防進(jìn)展）與AMD相關(guān)的病 癥、疾病或障礙的至少一種不利作用或癥狀。預(yù)防與AMD相關(guān)的病癥、疾病或障礙的至少一 種不利作用或癥狀的進(jìn)展包括但不限于預(yù)防具有發(fā)展脈絡(luò)膜血管新生和/或隨后的脈絡(luò) 膜血管滲透性增加的對象中的萎縮視網(wǎng)膜背景上的CNV損傷的發(fā)展；和/或預(yù)防萎縮性和 非血管AMD轉(zhuǎn)化成為新血管AMD。用于測量治療的幾集結(jié)果的方法包括但不限于通過光學(xué) 相干層析成像測量的視網(wǎng)膜下的水腫的減少或保持、視力減弱的減少或保持、或通過最佳 矯正視敏度評價的視力獲得。血管滲透性增加和脈絡(luò)膜血管新生也通過熒光眼底血管造影 測定。
[0061] 此處使用的術(shù)語"有效量"指降低、停止或預(yù)防至少一種疾病的癥狀或障礙例如 AMD的癥狀或障礙的藥物組合物的治療劑的量。例如，使用此處公開的方法的有效量應(yīng)被認(rèn) 為是足以降低或預(yù)防疾病或障礙的癥狀的量，例如AMD的完全或部分解決和/或保持（通 過0CT測量）或大于5個字母的最佳矯正視敏度的增加和/或保持（通過EDTRS視力表評 價）、或新血管的大小或血管滲透性降低（通過熒光眼底血管造影測定）。此處使用的有效 量還應(yīng)包括足以預(yù)防或延遲黃斑水腫的發(fā)展、滲透性增強(qiáng)、CNV損傷的大小和相關(guān)的視力減 弱的量。此處使用的有效量還應(yīng)包括足以預(yù)防或延遲疾病的癥狀的發(fā)展、改變疾病癥狀的 過程（例如但不限于減緩疾病的癥狀的進(jìn)展）、或逆轉(zhuǎn)疾病的癥狀的量。
[0062] 此處使用的術(shù)語預(yù)防或防止具有發(fā)展脈絡(luò)膜血管新生和/或隨后的脈絡(luò)膜血管 滲透性增加的"風(fēng)險(xiǎn)的對象"中的CNV損傷的發(fā)展指例如患有干或地圖樣萎縮AMD的患者。 [0063] 此處使用的術(shù)語"給藥"和"引入"互換地使用，指通過導(dǎo)致試劑在期望的位點(diǎn)至 少部分定位的方法或途經(jīng)將如此處公開的抑制CCR3的試劑置于對象中。本發(fā)明的化合物 可以通過在對象中導(dǎo)致有效治療的任何適合的途徑給藥。
[0064] 此處使用的冠詞"一"指一個或指多于一個（即至少一個）冠詞的語法上的主語。 以舉例的方式，"一元素"指一個元素或多于一個元素。
[0065] 抑制CCR3的試劑
[0066] 在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及CCR3的抑制。在一些實(shí)施方案中，抑制為對編碼 CCR3的核酸轉(zhuǎn)錄物的抑制，例如對信使RNA(mRNA)的抑制。在可選的實(shí)施方案中，CCR3的 抑制為對CCR3的基因產(chǎn)物例如CCR3的多肽或蛋白或其同工型的表達(dá)的抑制和/或活性的 抑制。此處使用的術(shù)語"基因產(chǎn)物"指由基因轉(zhuǎn)錄的RNA或由基因編碼或由RNA翻譯的多 肽。
[0067] 在一些實(shí)施方案中，通過試劑抑制CCR3。人們可以使用任何試劑，例如但不限于核 酸、核酸類似物、肽、噬菌體、噬粒、多肽、類肽物、核糖體、適配體、抗體、小的或大的有機(jī)或 無機(jī)分子，或其任意組合。在一些實(shí)施方案中，可用于本發(fā)明的方法中的試劑包括起CCR3 表達(dá)的抑制劑作用的試劑，例如編碼CCR3的mRNA的抑制劑。
[0068] 可用于此處公開的方法中作為CCR3抑制劑的其他試劑可以為化學(xué)品、小分子、大 分子、或?qū)嶓w或部分，包括但不限于合成的和天然存在的非蛋白實(shí)體。在某些實(shí)施方案中， 試劑為具有如此處公開的化學(xué)部分的小分子。
[0069] 小分子
[0070] 在一些實(shí)施方案中，抑制CCR3的試劑為小分子。在本發(fā)明的方法中可以使用CCR3 的不可逆抑制劑或可逆抑制劑。
[0071] 在人類中有效的CCR3抑制劑為本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的，并且包括經(jīng)歷評價的 那些，例如經(jīng)歷臨床前評價和臨床評價，包括第二階段臨床測試。SmithKline Beecham 及其繼任者GlaxoSmithKline已提交和公開了若干申請。CCR3的不可逆抑制劑已于TO 2002/26723A1、W003/082293、美國申請第 7, 101，882 號、第 7, 157, 457 號、第 7, 531，651 號 和第7, 560, 548號中公開，其全文具體地援引加入本文，并且其中公開了為CCR3抑制劑的 不同系列的嗎啉-乙酰胺和嗎啉脲化合物。
[0072] 在人類中有效的VEGF治療劑為本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的，并且包括經(jīng)歷評價的那 些，例如經(jīng)歷臨床前評價和臨床評價，包括第二階段臨床測試，和/或在售的那些，包括帕 唑帕尼、Lucentis?、Avastin?、和 Afiibercept?。
[0073] 化合物4-[[[[[[(28)-4-[(3,4-二氯苯基）甲基]-2-嗎啉基]甲基]-氨基]羰 基]-氨基]甲基]苯甲酰胺（CCR3抑制劑'994)或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物為特 別有效的CCR3抑制劑，且可特別地用于此發(fā)明。
[0074] 化合物^[[(25)-4-[(3,4-二氟苯基）甲基]-2-嗎啉基]-甲基]-3_[(甲基磺 ?；┌被鵠-苯乙酰胺（CCR3抑制劑'575)或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物為特別有 效的CCR3抑制劑，且可特別地用于此發(fā)明。
[0075] 可用于此處公開的方法中的其它CCR3抑制劑描述于已公開的專利和申請TO 2002/26723A1、W003/082293、美國專利第 7, 101，882 號、第 7, 157, 457 號、第 7, 531，651 號 和第7, 560, 548號中，并且可以使用此處公開的CCR3抑制分析發(fā)現(xiàn)。
[0076] 上述段落中列舉的所有申請都援引加入本文。相信這些文獻(xiàn)中公開的任何或所有 化合物都可用于AMD的預(yù)防或治療。如實(shí)施例中列舉的此處描述的模型可被本領(lǐng)域技術(shù)人 員使用以確定何種所公開的化合物或CCR3的其他抑制劑例如抗體或RNAi可有效地治療和 預(yù)防此處主張的眼部疾病或障礙。
[0077] 實(shí)施例
[0078] 此處所示的實(shí)施例涉及通過CCR3抑制用于眼部新血管障礙等的預(yù)防和/或治療 的方法和組合物。在整個此申請中引用了多個公開。全部這些公開和這些公開中引用的那 些參考文獻(xiàn)的公開全文援引加入本文，以更完全地描述本發(fā)明所述的【技術(shù)領(lǐng)域】的狀態(tài)。以 下實(shí)施例并非意圖將權(quán)利要求的范圍限于本發(fā)明，而是意圖例舉某些實(shí)施方案。本領(lǐng)域技 術(shù)人員想到的示例的方法的任何變體都意圖落入本發(fā)明的范圍內(nèi)。
[0079] 在一些實(shí)施方案中，可以在此處公開的動物模型中評價抑制CCR3的試劑在降低 激光誘導(dǎo)的CNV中的作用。
[0080] 在一些實(shí)施方案中，可以在此處公開的動物模型中評價抑制CCR3的試劑，例如獼 猴中的激光誘導(dǎo)的脈絡(luò)膜新血管AMD研究。
[0081] 在一些實(shí)施方案中，可以在動物模型中評價單獨(dú)的抑制CCR3的試劑或其與抗 VEGF抑制劑的組合，例如在CNV AMD的JR5558獼猴模型中限制CNV的發(fā)展。
[0082] 實(shí)施例1
[0083] 方法
[0084] C57/BL6小鼠中激光誘導(dǎo)的CNV
[0085] 將成年的12周齡雌性C57BL/6小鼠用于產(chǎn)生激光誘導(dǎo)的CNV模型。通過腹膜內(nèi) 鹽酸氯胺酮（25mg/kg)和賽拉嗪（10mg/kg)將小鼠麻醉，并通過局部托批卡胺（1% )使其 瞳孔擴(kuò)張。在直視下使用二極管激光器^80nm ;210mW功率、100ms持續(xù)時間、100m光斑直 徑）進(jìn)行激光光凝固術(shù)，使用手持蓋玻片作為接觸鏡并定位至雙眼中的視網(wǎng)膜的后極的2 點(diǎn)、10點(diǎn)和6點(diǎn)鐘位置。這些激光設(shè)置持續(xù)地產(chǎn)生視網(wǎng)膜下的氣泡，其與Bruch膜的激光 誘導(dǎo)的破裂和CNV的成功誘導(dǎo)密切相關(guān)。僅將其中形成氣泡的損傷包括入分析中。在誘導(dǎo) CNV后1周和2周時使用Kowa Genesis小動物眼底照相機(jī)進(jìn)行突光素血管造影。通過數(shù) 字圖像分析早期（熒光素注射后90秒）期間每損傷的強(qiáng)熒光的平均面積來對CNV損傷的 大小進(jìn)行定量。通過局部托吡卡胺1%使瞳孔擴(kuò)張，通過腹膜內(nèi)注射給藥〇. 2ml熒光素鈉 (2% )。如果眼有能夠影響激光能量輸送或血管造影的顯著的白內(nèi)障或角膜病變，則將其排 除在外。
[0086] TR5558CNV 和分析
[0087] JR5558小鼠自發(fā)產(chǎn)生CNV (在萎縮背景中），在出生后約12天時CNV損傷第一次出 現(xiàn)。由P14開始，用不同量的大鼠抗小鼠 VEGF受體（VEGFR)-2阻斷抗體（MAB4431 ;R&D系 統(tǒng)）或純化的大鼠未免疫同型匹配對照IgG2a抗體（R&D系統(tǒng)）腹膜內(nèi)處理JR5558小鼠， 在11天內(nèi)總計(jì)10次給藥，并于P25進(jìn)行最后一次給藥之24小時后通過熒光素血管造影術(shù) (FA)分析CNV進(jìn)展。對于用CCR3抑制劑'994處理的小鼠，自P14開始，通過腹膜內(nèi)或通過 滴眼劑對其給藥不同濃度的所述藥物，持續(xù)總計(jì)12天，并且在P26時最后一次給藥之24小 時后，通過FA分析CNV進(jìn)展。為了研究抗-VEGFR2抗體和CCR3抑制劑'994的組合作用， 自P14起，用各物質(zhì)單獨(dú)地或組合地腹膜內(nèi)處理小鼠，在11天內(nèi)總計(jì)10次給藥，于P25進(jìn) 行最后一次給藥的24小時后通過FA分析CNV進(jìn)展。進(jìn)行多個實(shí)驗(yàn)來研究VEGF-A和CCR3 拮抗劑對現(xiàn)有CNV損傷所致的血管滲透性的影響，所用的JR5558小鼠在發(fā)生CNV損傷后僅 給藥兩天，并且是用不同量的VEGFR-2抗體或CCR3抑制劑'994或其組合在P24和P25時 處理。在P26進(jìn)行熒光素血管造影術(shù)（FA)。
[0088] 熒光素血管誥影術(shù)（FA)和圖像分析
[0089] 使用2.5(%托批卡胺0^118(311&]^〇1]113，1?〇(31168七61'，附）使小鼠的瞳孔擴(kuò)張并通過腹 膜內(nèi)注射給藥0. 2ml于水中稀釋的突光素鈉（Bausch&Lomb) oKowa Genesis-Df眼底照相機(jī) (Kowa, Tokyo, Japan)用于獲得染料運(yùn)輸?shù)脑缙冢ㄍ还馑刈⑸浜?0秒）和晚期（7分鐘）時 的熒光素血管造影圖。在早期時，CNV組織的脈管系統(tǒng)明顯地由血管內(nèi)的熒光素染料界定。 在晚期時，明顯有高熒光斑點(diǎn)形式的血管外熒光素。為了定量CNV面積，使用早期FA圖像 經(jīng)Image J程序確定各眼中各個高熒光CNV的大小。用Image J從晚期（熒光素注射后7 分鐘）FA圖像的高熒光面積減去早期（熒光素注射后90秒）FA圖像的高熒光面積，來確定 各CNV的滲透性。
[0090] CNV損傷的視網(wǎng)臘全封固染色
[0091] FA后24小時時摘除眼球，并在4°C下用4%多聚甲醛（PFA)在PBS中的溶液固定3 小時。將移除了視網(wǎng)膜或未移除視網(wǎng)膜的眼杯解剖，在室溫下在含0.3% Triton X-100和 5% FBS的PBS緩沖液（封閉緩沖液）中封閉1小時，并在4°C下用在封閉緩沖液中1:200 稀釋的0.5%突光素異硫氰酸酯$11'〇-同工凝集素134(￥6(31:〇1'，13111'1;[叩31116,04)溫育整 夜。洗滌5次之后，用含DAPI的介質(zhì)將樣本封固，并使用落射熒光顯微鏡觀察。
[0092] 獼猴中的激光誘導(dǎo)的脒絡(luò)臘新血管AMD研究
[0093] 如表A中所示對獼猴給藥運(yùn)載體或CCR3拮抗劑工具化合物' 415化合物，持續(xù)29 天，在激光光凝固術(shù)之1天后出現(xiàn)激光。在激光后14、21和28天時進(jìn)行熒光血管造影術(shù)分 析。
[0094]

【權(quán)利要求】
1. 治療和/或預(yù)防對象中與血管新生相關(guān)的眼部障礙或疾病的方法，所述方法包括： 識別患有與血管新生相關(guān)的眼部疾病或障礙或具有發(fā)展與血管新生相關(guān)的眼部疾病 或障礙的風(fēng)險(xiǎn)的對象，和 向有需要的對象給藥包含用于抑制CCR3蛋白的活性和/或表達(dá)的試劑的藥物組合物。
2. 如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述眼部疾病或障礙為新血管AMD。
3. 治療和/或預(yù)防對象中與脈絡(luò)膜血管滲透性增加相關(guān)的眼部障礙或疾病的方法，所 述方法包括： 識別患有與脈絡(luò)膜血管滲透性增加相關(guān)的新血管AMD或障礙或具有發(fā)展與脈絡(luò)膜血 管滲透性增加相關(guān)的新血管AMD或障礙的風(fēng)險(xiǎn)的對象，和 向需要其的對象給藥包含用于抑制CCR3蛋白的活性和/或表達(dá)的試劑的藥物組合物。
4. 如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述眼部疾病或障礙為干性AMD或地圖樣萎縮AMD。
5. 治療和/或預(yù)防患有AMD的對象或具有患AMD的風(fēng)險(xiǎn)的對象中的AMD的方法，包括 向所述對象給藥包含能夠抑制CCR3蛋白的活性和/或表達(dá)的試劑的藥物組合物。
6. 如權(quán)利要求5所述的方法，其中CCR3蛋白的抑制降低AMD的癥狀或使AMD的癥狀停 止。
7. 治療和/或預(yù)防患有AMD的對象或具有患AMD的風(fēng)險(xiǎn)的對象中的AMD的方法，包括 向所述對象給藥包含能夠抑制CCR3蛋白的活性和/或表達(dá)的試劑的藥物組合物，其中CCR3 蛋白的抑制降低AMD的癥狀或使AMD的癥狀停止，此外，所述試劑與抗-VEGF抑制劑組合給 藥。
8. 預(yù)防具有發(fā)展脈絡(luò)膜血管新生和/或隨后的脈絡(luò)膜血管滲透性增加的風(fēng)險(xiǎn)的對象 中的萎縮視網(wǎng)膜背景上的CNV損傷的發(fā)展的方法，包括向所述對象給藥包含能夠抑制CCR3 蛋白的活性和/或表達(dá)的試劑的藥物組合物，其中所述CCR3蛋白的抑制預(yù)防這樣的損傷的 發(fā)展，所述試劑可以單獨(dú)給藥或與抗-VEGF抑制劑組合給藥。
9. 預(yù)防萎縮性AMD和非血管AMD轉(zhuǎn)化成為新血管AMD的方法，包括向?qū)ο蠼o藥包含能 夠抑制CCR3蛋白的活性和/或表達(dá)的試劑的藥物組合物，其中所述CCR3蛋白的抑制防止 這樣的向新血管AMD的轉(zhuǎn)化，所述試劑可以單獨(dú)給藥或與抗-VEGF抑制劑組合給藥。
10. 如權(quán)利要求1、3、5、7、8或9所述的方法，其中所述試劑為 4-[[[[[[(2s)-4-[(3,4-二氯苯基）甲基]-2-嗎啉基]甲基]-氨基]羰基]-氨基]甲 基]苯甲酰胺，或其藥學(xué)上可接受的鹽。
11. 如權(quán)利要求1、3、5、7、8或9所述的方法，其中所述試劑為N- [ [ (2S) -4- [ (3, 4-二氟 苯基）甲基]-2-嗎啉基]-甲基]-3-[(甲基磺?；┌被鵠-苯乙酰胺，或其藥學(xué)上可接 受的鹽。
12. 如權(quán)利要求1、3、5、7、8或9所述的方法，其中所述對象為哺乳動物。
13. 如權(quán)利要求1、3、5、7、8或9所述的方法，其中所述對象為人類。
14. 如權(quán)利要求1、3、5、7、8或9所述的方法，另外包括向?qū)ο蠼o藥額外的治療劑。
15. 如權(quán)利要求14所述的方法，其中所述額外的治療劑為選自帕唑帕尼、 Lucentis?、Avastin?、和 Aflibercept? 的抗-VEGF 抑制劑。
16. 如權(quán)利要求1、3、5、7、8或9所述的方法，另外包括在給藥包含能夠抑制CCR3的試 劑的藥物組合物之后通過測量所述對象的視敏度來監(jiān)控治療。
17. 能夠抑制CCR3的表達(dá)和/或活性的試劑在制備用于治療和/或預(yù)防眼部新血管障 礙的藥物中的用途。
18. 能夠抑制CCR3蛋白的表達(dá)和/或活性的試劑在制備用于治療和/或預(yù)防AMD的藥 物中的用途。
【文檔編號】A61K31/395GK104203231SQ201280068923
【公開日】2014年12月10日 申請日期:2012年11月30日 優(yōu)先權(quán)日:2011年12月1日
【發(fā)明者】P.亞當(dāng)森, D.希馬, Y.S.E.恩格 申請人:葛蘭素集團(tuán)有限公司