專利名稱：墨旱蓮藥材中總三萜皂苷的動態(tài)連續(xù)循環(huán)提取方法及裝置的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及ー種藥材提取方法，特別涉及一種墨旱蓮藥材中總三萜皂苷的動態(tài)連續(xù)循環(huán)提取方法及裝置。
背景技術：
墨旱蓮(EcliptaeHerba)為菊科一年生草本植物鱧腸(Ecliptae ProstrataL.)的干燥地上部分。中國藥典記載，墨旱蓮性寒、味甘，歸肝、腎經，具有涼血止血，滋陰益腎之功效。中醫(yī)文獻記載，墨旱蓮可以烏須黑發(fā)，生發(fā)。在臨床上用于治療多種出血病癥，如咳血、吐血、便血、尿血、崩漏、產后血崩、外傷出血等；用于治療皮膚性病如脂溢性皮炎，治療斑禿和尖鋭濕疣，還可治療冠心病等?，F在藥理研究表明，三萜皂苷類化合物是墨旱蓮中主要的活性成分，分為齊墩果烷型和蒲公英賽烷型，主要有旱蓮苷A、B、C、D、刺囊酸、齊墩果酸、熊果酸。具有以下藥理作用(I)止血作用；(2)保肝作用；(3)免疫調節(jié)作用；(4)抗炎和抗腫瘤作用；(5)抗氧化與抗衰老作用；(6)降血脂作用。墨旱蓮藥材傳統(tǒng)的提取方法是こ醇回流提取。目前，有關于微波提取、超聲輔助提取或超臨界提取方面的報道。傳統(tǒng)提取方法消耗大量溶劑與能量，有效成分提取效率低，増加大生產成本。因此急需尋求ー種低能耗、減少溶劑使用率的綠色提取技術，同時提高藥材的利用率。

發(fā)明內容
為了解決現有技術的問題，本發(fā)明實施例提供了ー種提取、濃縮溫度低，時間短，所用提取溶劑能循環(huán)使用的墨旱蓮藥材中總三萜皂苷的動態(tài)連續(xù)循環(huán)提取方法。為了實現上述目的本發(fā)明采取的技術方案是一種墨旱蓮藥材中總三萜皂苷的動態(tài)連續(xù)循環(huán)提取方法，所述方法包括將墨旱蓮干燥后超微粉碎，再投入提取罐中，提取罐中加入體積分數為70%_80%的こ醇溶液，攪拌并熱水循環(huán)加熱提取，提取20-45min后，通過藥液泵把墨旱蓮粗提液輸送到低溫濃縮罐中真空濃縮到所需要的濃度，濃縮溫度為60-80°C，回收的溶劑通過藥液泵輸送回提取罐中，循環(huán)使用。所述提取溫度為60-70°C，所述墨旱蓮粗提液流速為20-30mL/min，所述回收的溶劑與所述墨旱蓮粗提液的流速相等。所述こ醇溶液與所述墨旱蓮的加入比例為質量比5-15:1。進ー步還包括，在提取液輸送ロ與濃縮罐中設置在線檢測ロ，利用遠紅外光譜、紫外可見光譜、高效液相色譜或者超效液相色譜儀檢測墨旱蓮總三萜皂苷的含量，監(jiān)測提取過程含量的變化，當提取液輸出ロ檢測到墨旱蓮總三萜皂苷濃度低于0. 2mg/mL吋，提取完成。優(yōu)選的方法包括稱取超微粉碎10min的墨旱蓮藥材粉末100g，置于提取罐中，カロ入體積分數為75%的こ醇溶液IOOOmL, 65°C回流40min后開始循環(huán)提取，調節(jié)提取罐溶劑流速為24mL/min，放出300mL提取液于濃縮裝置中濃縮，補充提取罐內溶劑至lOOOmL，3h后停止回流，濃縮液65°C下濃縮定容至500mL。本發(fā)明還提供一種用于墨旱蓮藥材中總三萜皂苷的動態(tài)連續(xù)循環(huán)提取方法中的裝置，包括提取罐，所述提取罐連接循環(huán)加熱器，所述提取罐下部通過第一藥液泵連接濃縮罐，所述濃縮罐連接真空系統(tǒng)及第一冷凝器，所述第一冷凝器分別連接循環(huán)冷凝機組及中轉罐，所述中轉罐通過第二藥液泵連接第二冷凝器，所述第二冷凝器連接所述提取罐。所述提取罐內設有渦輪式攪拌器。所述提取罐內設有第一液位計，所述濃縮罐內設有第二液位計。所述提取罐與所述第一藥液泵連接的管線上設有三通閥和提取液樣ロ，所述濃縮罐上設有濃縮液取樣ロ。所述提取液取樣ロ與濃縮液取樣ロ連接遠紅外光譜儀、紫外可見光譜儀、高效液相色譜儀或者超效液相色譜儀。本發(fā)明實施例提供的技術方案帶來的有益效果是與現有技術相比，本發(fā)明減少了提取過程的能耗，溶劑能循環(huán)使用，采用低溫動態(tài)提取與低溫真空濃縮エ藝，減少墨旱蓮藥材在提取過程的損失，墨旱蓮總三萜皂苷的提取率明顯高于傳統(tǒng)こ醇回收提取法。與微波提取、 超聲輔助提取或超臨界提取相比，本法提取條件溫和穩(wěn)定，設備成本投入較少，能有效降低生產成本，適用于墨旱蓮提取的大生產エ藝。


為了更清楚地說明本發(fā)明實施例中的技術方案，下面將對實施例描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本發(fā)明的一些實施例，對于本領域普通技術人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動的前提下，還可以根據這些附圖獲得其他的附圖。圖1是本發(fā)明實施例提供的裝置的結構示意圖；圖2是本發(fā)明實施例提供的30min提取液紫外_可見全波長掃描圖；圖3是本發(fā)明實施例提供的45min提取液紫外_可見全波長掃描圖；圖4是本發(fā)明實施例提供的60min提取液紫外_可見全波長掃描圖；圖5是本發(fā)明實施例提供的75min提取液紫外_可見全波長掃描圖；圖6是本發(fā)明實施例提供的90min提取液紫外_可見全波長掃描圖；圖7是本發(fā)明實施例提供的120min提取液紫外_可見全波長掃描圖；圖8是本發(fā)明實施例提供的150min提取液紫外_可見全波長掃描圖；圖9是本發(fā)明實施例提供的180min提取液紫外-可見全波長掃描圖；圖10是本發(fā)明實施例提供的210min提取液紫外-可見全波長掃描圖；圖11是本發(fā)明實施例提供的240min提取液紫外_可見全波長掃描圖；圖12是本發(fā)明實施例提供的300min提取液紫外_可見全波長掃描圖；圖13是本發(fā)明實施例提供的360min提取液紫外-可見全波長掃描圖；圖14是本發(fā)明實施例提供的不同時間點提取液墨旱蓮總三萜皂苷含量曲線圖15是本發(fā)明實施例提供的60min濃縮液紫外-可見全波長掃描圖；圖16是本發(fā)明實施例提供的75min濃縮液紫外-可見全波長掃描圖；圖17是本發(fā)明實施例提供的90min濃縮液紫外-可見全波長掃描圖；圖18是本發(fā)明實施例提供的120min濃縮液紫外-可見全波長掃描圖；圖19是本發(fā)明實施例提供的150min濃縮液紫外-可見全波長掃描圖；圖20是本發(fā)明實施例提供的180min濃縮液紫外-可見全波長掃描圖；圖21是本發(fā)明實施例提供的2IOmin濃縮液紫外-可見全波長掃描圖；圖22是本發(fā)明實施例提供的240min濃縮液紫外-可見全波長掃描圖；圖23是本發(fā)明實施例提供的300min濃縮液紫外-可見全波長掃描圖；圖24是本發(fā)明實施例提供的360min濃縮液紫外-可見全波長掃描圖；圖25是本發(fā)明實施例提供的不同時間點濃縮液墨旱蓮總三萜皂苷含量曲線圖；圖26是本發(fā) 明實施例提供的不同提取方法對墨旱蓮中總三萜皂苷轉移率的影響柱圖。圖1中I提取罐，2三通閥，3第一藥液泵，4濃縮罐，5第一冷凝器，6中轉罐，7第ニ藥液泵，8第二冷凝器，9循環(huán)加熱器，10循環(huán)冷凝機組，11真空系統(tǒng)，12第一液位計，13提取液樣ロ，14濃縮液取樣ロ，15第二液位計。
具體實施例方式為使本發(fā)明的目的、技術方案和優(yōu)點更加清楚，下面將結合附圖對本發(fā)明實施方式作進ー步地詳細描述。參見圖1，一種用于墨旱蓮藥材中總三萜皂苷的動態(tài)連續(xù)循環(huán)提取方法中的裝置，包括提取罐1，提取罐I連接循環(huán)加熱器9，提取罐I下部通過第一藥液泵3連接濃縮罐4，濃縮罐4連接真空系統(tǒng)11及第一冷凝器5，第一冷凝器5分別連接循環(huán)冷凝機組10及中轉罐6，中轉罐6通過第二藥液泵7連接第二冷凝器8，第二冷凝器8連接提取罐I。作為優(yōu)選，所述提取罐I內設有渦輪式攪拌器。提取罐I內設有第一液位計12。濃縮罐4內設有第二液位計15。提取罐I與第一藥液泵3連接的管線上設有三通閥2和提取液樣ロ 13，濃縮罐4上設有濃縮液取樣ロ 14。提取液取樣ロ 13與濃縮液取樣ロ 14連接遠紅外光譜儀、紫外可見光譜儀、高效液相色譜儀或者超效液相色譜儀，以實現在線檢測。利用本發(fā)明的設備和方法，提取時間短，一般為3-4小吋。在提取罐與濃縮罐設置液位計與感溫元件，提取濃縮溫度與提取溶劑體積變化值小于5%，墨旱蓮粗提液的輸送速度與回收溶劑輸送速度保持一致，提取體系穩(wěn)定，可長期處于動態(tài)連續(xù)狀態(tài)。利用本發(fā)明的裝置提取墨旱蓮藥材中的總三萜皂苷的動態(tài)連續(xù)循環(huán)提取方法如下將墨旱蓮干燥地上部分超微粉碎后，將粉末放進提取罐I上端入口中，并從提取罐I上端溶劑入口加入適量提取溶剤。啟動循環(huán)加熱器9，其產生的恒溫加熱介質在提取罐I外夾套中循環(huán)加熱，設置提取溫度為60-70°C，優(yōu)選65°C，啟動提取罐內設置的渦輪式攪拌器，提取罐I內提取溶劑產生切向和徑向運動，使藥材粉體呈懸浮狀態(tài)，提取時所蒸發(fā)的溶劑由第二冷凝器8冷凝后回流到提取罐I中，提取30min后，墨旱蓮總三萜皂苷的濃度在提取介質中達到平衡狀態(tài)時，打開提取罐I下端三通閥2，墨旱蓮粗提取液通過第一藥液泵3輸送到濃縮罐4中，調節(jié)流速至20-30mL/min，啟動濃縮罐4，設定濃縮溫度于60_80°C，調節(jié)第一液位計12，補充提取罐I中的提取溶剤。同時，啟動真空系統(tǒng)11，使?jié)饪s罐4處于真空環(huán)境中，調節(jié)第二液位計15，使?jié)饪s罐4內溶液體積處于恒定狀態(tài)，啟動低溫循環(huán)冷凝機組10，設定溫度于10°C以下，其產生的冷流體在第一冷凝器5中循環(huán)。濃縮罐4蒸發(fā)的溶劑在經冷凝后儲存于溶劑中轉罐6中，打開閥門，溶劑由第二藥液泵7經過第二冷凝器8輸送到提取罐I中，流速與墨旱蓮粗提液輸送速度保持一致，開始動態(tài)連續(xù)循環(huán)提取過程，在提取液取樣ロ 13與濃縮液取樣ロ 14均設置了在線檢測ロ，連接遠紅外光譜儀、紫外可見光譜儀、高效液相色譜儀或者超效液相色譜儀等分析儀器對提取情況進行實時監(jiān)控，當所測墨旱蓮總三萜皂苷含量小于0. 2mg/mL時，停止提取，將濃縮液濃縮至所需濃度。以紫外分光光度法為例，說明墨旱蓮總三萜皂苷的在線檢測方法從在線檢測ロ處實時吸取適量提取液，蒸干，加入IOmL蒸餾水溶解，精密吸取0.3mL供試品溶液于刻度試管中，水浴蒸干，置于分液漏斗中。加こ醚萃取3次(20mL/10mL/5mL),棄去こ醚層。水層加入水飽和正丁醇萃取4次(30mL/20mL/15mL/10mL),合并正丁醇萃取液，減壓回收正丁醇至干，用甲醇分次洗滌轉移至25mL容量瓶中，甲醇定容，作為供試品溶液。精密吸取0. 3mL供試品溶液于刻度試管中，水浴蒸干，精密加入5%的香草醒醋酸溶液0. 2mL和高氯酸0. 8mL,在60°C下水浴反應15min,冰水冷卻IOmin以終止反應，精密加入冰醋酸5mL，搖勻，在555nm下測定吸光度，并計算墨旱蓮總三萜皂苷含量。下面通過具體的實施例對墨旱蓮藥材中墨旱蓮總三萜皂苷的動態(tài)連續(xù)循環(huán)提取方法進行說明實施例1一種墨旱蓮藥材中總三萜皂苷的動 態(tài)連續(xù)循環(huán)提取方法，步驟如下稱取超微粉碎IOmin的墨旱蓮藥材粉末100g，置于提取罐中，加入體積分數為75%的こ醇溶液IOOOmL, 650C回流40min后開始循環(huán)提取,調節(jié)提取罐溶劑流速為24mL/min,放出300mL提取液于濃縮裝置中濃縮，補充提取罐內溶劑至lOOOmL，2h后停止回流，濃縮液65 °C下濃縮定容至500mL。實施例2稱取超微粉碎5min的墨旱蓮藥材粉末IOOg置于提取罐中，加入體積分數為70%的こ醇溶液850mL，60°C回流45min后開始循環(huán)提取，調節(jié)提取罐溶劑流速為20mL/min，放出300mL提取液于濃縮裝置中濃縮，補充提取罐內溶劑至850mL，3h后停止回流，濃縮液75 °C下濃縮定容至500mL。實施例3稱取超微粉碎15min的墨旱蓮藥材粉末IOOg置于提取罐中，加入體積分數為80%的こ醇溶液1150mL，70°C回流30min后開始循環(huán)提取，調節(jié)提取罐溶劑流速為30mL/min，放出300mL提取液于濃縮裝置中濃縮，補充提取罐內溶劑至850mL，4h后停止回流，濃縮液80 °C下濃縮定容至500mL。以上實施例，可在提取液輸送ロ與濃縮罐中設置在線檢測ロ，利用遠紅外光譜、紫外可見光譜、高效液相色譜或者超效液相色譜儀檢測墨旱蓮總三萜皂苷的含量，監(jiān)測提取過程含量的變化，當提取液輸出ロ檢測到墨旱蓮總三萜皂苷濃度低于0. 2mg/mL吋，提取完成。
下面結合一些試驗進ー步來說明本發(fā)明的效果1.方法與結果1.1墨旱蓮中總三萜皂苷的含量測定方法根據上述方法學考察結果，標準曲線、儀器精密度、樣品穩(wěn)定性、重復性、回收率均符合方法學考察要求，故墨旱蓮中總三萜皂苷含量的測定方法確定如下照紫外-可見分光光度法(2010版藥典附錄VA)測定對照品溶液的制備精密稱取人參皂苷Re對照品約6mg，置于5mL容量瓶中，加甲醇定容，搖勻，精密移取2mL至IOmL量瓶中，加甲醇定容，搖勻，S卩得。標準曲線的制備精密吸取人參皂苷對照品溶液0. lmL、0. 2mL、0. 4mL、0. 5mL、
0.6mL、0. 7mL、0. 8mL分別置于刻度試管中，水浴蒸干，精密加入5%的香草醛-冰醋酸溶液
0.2mL和高氯酸0. 8mL，在60°C下水浴反應15min，冰水冷卻IOmin以終止反應，精密加入冰醋酸5mL，搖勻，照紫外-可見分光光度法，在555nm處測定吸光度，以墨旱蓮總三萜皂苷重量(mg)為橫坐標，吸光度為縱坐標，繪制標準曲線。供試品溶液的制備取墨旱蓮藥材適量，粉碎過篩(過三號篩)。精密稱定墨旱蓮粗粉約0.1g,置圓底燒瓶中，加75%こ醇50mL，加熱連續(xù)回流lh，趁熱過濾，回收こ醇至無醇味，用IOmL蒸餾水分次洗滌，轉移至分液漏斗中。加こ醚萃取3次(25mL/20mL/20mL)以除去脂溶性雜質，棄去こ醚層。然后用水飽和的正丁醇溶液萃取4次(20111171511117151111710111し)，合并正丁醇萃取液，回收正丁醇至干，用甲醇分次洗滌轉移至25mL容量瓶中，甲醇定容，作為供試品溶液。測定法精密吸取0. 5mL待測溶液至刻度試管中，水浴蒸干，精密加入5%的香草醛醋酸溶液0. 2mL和高氯酸0. 8mL，在60°C下水浴反應15min，冰水冷卻5min以終止反應，精密加入冰醋酸5mL，搖勻得到顯色溶液，在' =555nm處測定溶液的吸光度，根據標準曲線方程，計算供試品溶液中含墨旱蓮總三萜皂苷的含量。1.1.1墨旱蓮中總三萜皂苷的含量測定取批號為20100804墨旱蓮藥材，粉碎過篩，精密稱取藥材粉末約lg，按照“1.1”項下供試品的制備方法制備溶液。分別精密吸取0. 5mL待測溶液至刻度試管中，水浴蒸干，按“1.1”項下的顯色方法操作，在555nm處測定吸光度。根據標準曲線方程，計算樣品溶液中含墨旱蓮總三萜皂苷的含量，數據見表I。表I藥材含量測定結果
權利要求
1.一種墨旱蓮藥材中總三萜皂苷的動態(tài)連續(xù)循環(huán)提取方法，其特征在于，所述方法包括 將墨旱蓮干燥后超微粉碎，再投入提取罐中，提取罐中加入體積分數為70%-80%的こ醇溶液，攪拌并熱水循環(huán)加熱提取，提取20-45min后，通過藥液泵把墨旱蓮粗提液輸送到低溫濃縮罐中真空濃縮到所需要的濃度，濃縮溫度為60-80°C，回收的溶劑通過藥液泵輸送回提取罐中，循環(huán)使用。
2.根據權利要求1所述的墨旱蓮藥材中總三萜皂苷的動態(tài)連續(xù)循環(huán)提取方法，其特征在于，所述提取溫度為60-70°C，所述墨旱蓮粗提液流速為20-30mL/min，所述回收的溶劑與所述墨旱蓮粗提液的流速相等。
3.根據權利要求1所述的墨旱蓮藥材中總三萜皂苷的動態(tài)連續(xù)循環(huán)提取方法，其特征在于，所述こ醇溶液與所述墨旱蓮的加入比例為質量比5-15:1。
4.根據權利要求1所述的墨旱蓮藥材中總三萜皂苷的動態(tài)連續(xù)循環(huán)提取方法，其特征在干，還包括，在提取液輸送ロ與濃縮罐中設置在線檢測ロ，利用遠紅外光譜、紫外可見光譜、高效液相色譜或者超效液相色譜儀檢測墨旱蓮總三萜皂苷的含量，監(jiān)測提取過程含量的變化，當提取液輸出ロ檢測到墨旱蓮總三萜皂苷濃度低于0. 2mg/mL時，提取完成。
5.根據權利要求1所述的墨旱蓮藥材中總三萜皂苷的動態(tài)連續(xù)循環(huán)提取方法，其特征在于，所述方法包括 稱取超微粉碎IOmin的墨旱蓮藥材粉末100g，置于提取罐中，加入體積分數為75%的こ醇溶液IOOOmL, 65°C回流40min后開始循環(huán)提取，調節(jié)提取罐溶劑流速為24mL/min，放出300mL提取液于濃縮裝置中濃縮，補充提取罐內溶劑至lOOOmL，3h后停止回流，濃縮液65°C下濃縮定容至500mL。
6.一種用于墨旱蓮藥材中總三萜皂苷的動態(tài)連續(xù)循環(huán)提取方法中的裝置，其特征在干，包括提取罐，所述提取罐連接循環(huán)加熱器，所述提取罐下部通過第一藥液泵連接濃縮罐，所述濃縮罐連接真空系統(tǒng)及第一冷凝器，所述第一冷凝器分別連接循環(huán)冷凝機組及中轉罐，所述中轉罐通過第二藥液泵連接第二冷凝器，所述第二冷凝器連接所述提取罐。
7.根據權利要求6所述的裝置，所述提取罐內設有渦輪式攪拌器。
8.根據權利要求6所述的裝置，所述提取罐內設有第一液位計，所述濃縮罐內設有第ニ液位計。
9.根據權利要求6-8任一項所述的裝置，所述提取罐與所述第一藥液泵連接的管線上設有三通閥和提取液樣ロ，所述濃縮罐上設有濃縮液取樣ロ。
10.根據權利要求9所述的裝置，所述提取液取樣ロ與濃縮液取樣ロ連接遠紅外光譜儀、紫外可見光譜儀、高效液相色譜儀或者超效液相色譜儀。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種墨旱蓮藥材中總三萜皂苷的動態(tài)連續(xù)循環(huán)提取方法及裝置，所述方法包括將墨旱蓮干燥后超微粉碎，再投入提取罐中，提取罐中加入體積分數為70%-80%的乙醇溶液，攪拌并熱水循環(huán)加熱提取，提取20-45min后，通過藥液泵把墨旱蓮粗提液輸送到低溫濃縮罐中真空濃縮到所需要的濃度，濃縮溫度為60-80℃，回收的溶劑通過藥液泵輸送回提取罐中，循環(huán)使用。該裝置包括提取罐，提取罐連接循環(huán)加熱器，提取罐下部通過第一藥液泵連接濃縮罐，濃縮罐連接真空系統(tǒng)及第一冷凝器，第一冷凝器連接循環(huán)冷凝機組及中轉罐，中轉罐通過第二藥液泵連接第二冷凝器，第二冷凝器連接提取罐。采取本發(fā)明的提取工藝及裝置，墨旱蓮總三萜皂苷提取率高，溶劑循環(huán)使用，消耗量少。
文檔編號A61P1/16GK103054923SQ201310002410
公開日2013年4月24日 申請日期2013年1月4日 優(yōu)先權日2013年1月4日
發(fā)明者陳啟源, 萬玉華, 賴小平, 李耿, 楊廣榮, 張榕文 申請人:霸王(廣州)有限公司