專利名稱：當(dāng)藥醇苷在制備防治心律失常藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及尖葉假龍膽中單體化合物當(dāng)藥醇苷(swertianolin)的新用途,更具體的說(shuō)是當(dāng)藥醇苷(swertianolin)及其提取物在制備防治心律失常藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
根據(jù)中國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)藥相關(guān)文獻(xiàn)記載，假龍膽屬藥用植物經(jīng)常替代獐牙菜屬和肋柱花屬的一些藥用植物用于治療肝炎和膽絞痛。從植物親緣學(xué)角度分析，假龍膽屬與獐牙菜屬、肋柱花屬親緣較近；從化學(xué)成分角度分析，本屬植物化學(xué)成分與獐牙菜屬和肋柱花屬植物化學(xué)活性成分具有相似性，相互替代用藥有一定的科學(xué)道理。假龍膽屬植物在我國(guó)民族(藏、蒙等)藥物中得到應(yīng)用，所以為了更深入挖掘中國(guó)傳統(tǒng)藥物資源，也為了擴(kuò)大龍膽科藥 用植物資源，應(yīng)該對(duì)其進(jìn)行深入的藥理學(xué)研究。此外，還應(yīng)該加強(qiáng)和提高有效單體成分的高效分離與綜合利用。尖葉假龍膽acwia),又名苦龍膽，蒙藥名為阿古特-其其格,是龍膽科假龍膽屬一年生草本植物，廣泛分布于我國(guó)的河北、東北、內(nèi)蒙古、山西等地區(qū)。全草入蒙藥，味苦、性涼，具有清熱、利濕的功效，與同科植物肋柱花
等同入藥，是蒙醫(yī)用于治療黃疸性肝炎、頭痛、發(fā)燒的主藥。資源調(diào)查結(jié)果顯示，大興安嶺地區(qū)鄂侖春族獵民長(zhǎng)期用其治療心絞痛等疾病，療效極為顯著。該植物主要含有山酮類、裂環(huán)烯醚萜類、萜類以及留醇類化合物。據(jù)報(bào)道，萜類化合物如齊墩果酸具有抗炎、鎮(zhèn)靜等作用，對(duì)治療急性黃疸性肝炎有一定療效；裂環(huán)環(huán)烯醚萜類化合物具有保肝利膽和抗炎等作用；山酮類化合物則具有抗氧化、抗炎、抗血栓、保護(hù)心血管等作用。我們從尖葉假龍膽中分離得到了如下5種山酮類化合物去甲當(dāng)藥醇苷(norswertianolin)、芒果苷(mangiferin)、當(dāng)藥醇苷(swertianolin)、雛菊葉龍膽酮(bellidifolin)及去甲基雛菊葉龍膽酮(demethylbellidifolin)。對(duì)當(dāng)藥醇苷(swertianolin)的體外藥理學(xué)研究表明，其具有抑制膽堿酯酶活性的作用，提示其在增強(qiáng)記憶力方面可能有作用；同時(shí)當(dāng)藥醇苷能夠清除自由基，發(fā)揮抗氧化、抗輻射、保肝等作用；另外，當(dāng)藥醇苷對(duì)于結(jié)核桿菌等致病菌也有抑制作用。目前，對(duì)當(dāng)藥醇苷單體的在體藥理研究報(bào)道較少，對(duì)其抗心律失常作用的研究更是未見(jiàn)報(bào)道。心律失常(cardiacarrhythmia)是臨床的常見(jiàn)病、多發(fā)病。多年的臨床研究發(fā)現(xiàn)很多藥用植物有較好的抗心律失常作用，目前研究較多的有苦參、黃連、炙甘草、青蒿、黃芪、常山、甘松、人參、麻黃等。用中藥治療心律失常，療效肯定，不但有效避免了西醫(yī)治療的不良反應(yīng)，而且達(dá)到了標(biāo)本兼治的效果，很大程度上為患者減輕了痛苦。我們通過(guò)傳統(tǒng)藥物學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)民間藥用植物尖葉假龍膽有治療心臟病的作用，并且對(duì)從該植物中分離得到的單體化合物進(jìn)行了防治心律失?；钚苑矫娴难芯俊Ｎ覀兊乃幚韺W(xué)研究結(jié)果表明，雛菊葉龍膽酮(bellidifolin)、當(dāng)藥醇苷(swertianolin)及去甲基雛菊葉龍膽酮(demethylbel lidifol in)具有抗心律失?；钚?其中雛菊葉龍膽酮(bel lidifol in)和當(dāng)藥醇苷(swertianolin)的活性強(qiáng)于去甲基雛菊葉龍膽酮(demethylbel lidifol in)。到目前為止，關(guān)于當(dāng)藥醇苷(swertianolin)防治心律失常的作用尚未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道。因此，本研究對(duì)于藥用植物尖葉假龍膽及其單體成分的開(kāi)發(fā)與綜合利用具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個(gè)目的是公開(kāi)了當(dāng)藥醇苷及其提取物在制備預(yù)防、治療心律失常藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的另一個(gè)目的是公開(kāi)了當(dāng)藥醇苷及其提取物的制備方法。本發(fā)明的再一個(gè)目的是公開(kāi)了含有治療有效量的當(dāng)藥醇苷及其提取物和藥學(xué)上可接受的藥用載體組成的口服制劑或胃腸外給藥制劑。為實(shí)現(xiàn)上述目的本發(fā)明公開(kāi)了如下的技術(shù)內(nèi)容 當(dāng)藥醇苷及其提取物在制備預(yù)防、治療心律失常藥物中的應(yīng)用。所述的預(yù)防、治療心律失常指的是使房室傳導(dǎo)阻滯和室性心動(dòng)過(guò)速的嚴(yán)重程度減輕，并降低心律失常發(fā)生時(shí)伴隨的血清心肌酶活性增高。本發(fā)明所述的當(dāng)藥醇苷提取物含當(dāng)藥醇苷的含量為80-99%。本發(fā)明進(jìn)一步公開(kāi)了當(dāng)藥醇苷及其提取物的制備方法，其特征在于，按如下的步驟進(jìn)行
(I)粉碎干燥尖葉假龍膽地上部分，用70%乙醇回流提取3次，合并提取液濃縮至浸膏。將所得浸膏溶解于水中，分別用石油醚(60 90°C)、乙酸乙酯、正丁醇萃取。取其中的正丁醇萃取液，減壓回收溶劑，得到正丁醇部分浸膏。(2)取正丁醇部分浸膏，用20倍量甲醇溶解過(guò)濾后，用葡聚糖凝膠(Sephadex1^-20)裝柱(柱規(guī)格8(^1\80(^)，用70%甲醇作為流動(dòng)相洗脫。合并含有當(dāng)藥醇苷的餾分，減壓回收溶劑，得到含當(dāng)藥醇苷大于80%的提取物。(3)將當(dāng)藥醇苷提取物用葡聚糖凝膠柱(Sephadex LH-20)(柱規(guī)格3cmX 100cm)純化，80%甲醇洗脫，收集餾分并減壓回收溶劑，即得當(dāng)藥醇苷，含量大于95%。本發(fā)明所述的藥物為含有治療有效量的當(dāng)藥醇苷及其提取物以及藥學(xué)上可接受組分和/或載體組成的口服制劑或胃腸外給藥制劑。所述的藥物為含有O. 06-60mg (—般以成人體重為60公斤計(jì)算,相當(dāng)于O. 001mg/kg-lmg/kg)的當(dāng)藥醇苷及其提取物。本發(fā)明所述的當(dāng)藥醇苷化合物及其提取物通常是以藥物組合物的形式服用的，可口服或非口服給藥，或者以和藥學(xué)上可接受的載體、賦形劑及其它添加劑形成的化合物(如片劑、緩釋制劑、膠囊劑、注射劑、溶液劑)安全的口服或非口服給藥。當(dāng)口服給藥時(shí)，組合物可配制成片劑、糖衣劑或膠囊。為制備口服藥物組合物可采用乳糖或淀粉做載體，明膠，羧甲基纖維素鈉，甲基纖維素，聚乙烯吡咯烷酮等是合適的結(jié)合劑或成顆劑。作為崩解劑可選用淀粉或微晶纖維素，常以滑石粉，膠體硅膠，硬脂酸甘油酯，硬脂酸鈣或鎂等作為合適的抗粘合劑和潤(rùn)滑劑。例如，可通過(guò)壓制濕顆粒來(lái)制備片劑?；钚猿煞峙c載體以及選擇性的與一份崩解添加劑組成混合物，該混合物與粘合劑的含水溶液，醇性或含水醇性溶液在合適的設(shè)備中進(jìn)行顆?；稍镱w粒隨后加入其它的崩解劑，潤(rùn)滑劑和抗粘劑將此混合物壓片。本發(fā)明的系列化合物可以注射劑形式給藥，雖然劑量依治療對(duì)象、給藥方式、癥狀及其它因素而改變。當(dāng)非腸道給藥時(shí)，本發(fā)明的組合物被制成注射制劑。本發(fā)明的當(dāng)藥醇苷化合物及其提取物在相當(dāng)寬的劑量范圍內(nèi)是有效的。例如每天服用的劑量可在每公斤體重大約O. OOlmg-1mg的范圍內(nèi)。在成人的治療中,劑量范圍最好是在O. OOlmg/kg-O. 8mg/kg或O. 001mg/kg-0. 4mg/kg,—次或幾次服用。實(shí)際服用的化合物的劑量應(yīng)該由醫(yī)生根據(jù)有關(guān)的情況來(lái)決定，這些情況包括被治療者的身體狀態(tài)，選擇的給藥途徑、年齡、體重、患者對(duì)藥物的個(gè)體反應(yīng)，患者癥狀的嚴(yán)重程度等等，因此上述劑量范圍并不是以任何方式限制本發(fā)明的范圍。


圖1為當(dāng)藥醇苷(1，5，8_三羥基-3-甲氧基山酮-8-氧葡萄糖苷)結(jié)構(gòu)式。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例說(shuō)明本發(fā)明，這里所述實(shí)施例的方案，不限制本發(fā)明，本領(lǐng)域的專業(yè)人員按照本發(fā)明的精神可以對(duì)其進(jìn)行改進(jìn)和變化，所述的這些改進(jìn)和變化都應(yīng)視為在本發(fā)明的范圍內(nèi)，本發(fā)明的范圍和實(shí)質(zhì)由權(quán)利要求來(lái)限定。所用活性成分當(dāng)藥醇苷及其提取 物有市售，也可采用本發(fā)明的方法提取制備得到。實(shí)施例1
尖葉假龍膽中單體化合物當(dāng)藥醇苷(swertianolin)藥理作用研究I材料與方法1.1動(dòng)物雄性KM小鼠，體重18 22g，由內(nèi)蒙古大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。1.2藥物當(dāng)藥醇苷(自制，經(jīng)HPLC檢測(cè)純度大于98%);利多卡因注射液5mg/支(批號(hào)1006182，河北天成藥業(yè)有限公司);烏頭堿(批號(hào)110819，四川省維克奇生物科技有限公司)；烏拉坦(武漢金諾化工有限公司)。1. 3儀器BL-420F生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，中國(guó)成都泰盟科技有限公司。1. 4 方法
健康雄性KM小鼠80只，隨機(jī)分為5組(分別為空白對(duì)照組、利多卡因?qū)φ战M、受試藥高、中、低劑量組)，每組16只?？瞻讓?duì)照組灌胃給與蒸餾水(O. lmL/10g);利多卡因組腹腔注射利多卡因O. lmL/10g(0. lmg/mL);受試藥物組分別灌胃給予當(dāng)藥醇苷水溶液O. lmL/10g(濃度分別為O. 12 μ g/mLU. 2 μ g/mL、12 μ g/mL)。各組動(dòng)物給藥30min后腹腔注射25%烏拉坦(O. 04mL/10g)待動(dòng)物麻醉后，仰臥固定，右前肢、左后肢及右后肢安插針狀電極，用BL-410生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)記錄I I
導(dǎo)心電圖，記錄心電圖5min后,待心電圖穩(wěn)定,尾靜脈快速注射烏頭堿(10 μ g/mL,O. 3mL/只)記錄30min心電圖。觀察各組心電圖改變,記錄以下實(shí)驗(yàn)指標(biāo)早搏、傳導(dǎo)阻滯、心動(dòng)過(guò)速、室顫的次數(shù)和時(shí)間，并按照以下方法計(jì)分1、正常心電O分；2、竇性心律失常，且未出現(xiàn)明顯室上性及室性心律失常O. 5分；3、出現(xiàn)早搏2分，連續(xù)出現(xiàn)3次以上早搏3分；4、傳導(dǎo)阻滯3分；5、小于30秒的室速3分，一陣或累計(jì)大于30秒的室速4分；6、出現(xiàn)室顫6分，持續(xù)30秒以上的室顫或在觀察期間死亡7分。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物心電圖測(cè)定完畢后解除束縛，待給藥后第4小時(shí)眼眶采血，測(cè)定血清CK-MB的活性。1. 5資料處理試驗(yàn)結(jié)果使用SPSS16. O統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以Mean 土 S. E. Μ.表示。樣本均數(shù)之間比較用單因素方差分析(one-way AN0VA)判斷總體顯著性，P < O. 05認(rèn)為有顯著
性差異。2 結(jié)果
與對(duì)照組相比，當(dāng)藥醇苷三個(gè)劑量組均顯著緩解了小鼠由烏頭堿引起的傳導(dǎo)阻滯和心動(dòng)過(guò)速等癥狀，使小鼠心律失常總評(píng)分顯著降低。詳情見(jiàn)表I。同時(shí)，在由烏頭堿制備的小鼠心律失常模型中，小鼠血清CK-MB的活性顯著增強(qiáng)，當(dāng)藥醇苷在給藥濃度為1. 2 μ g/mL和12 μ g/mL時(shí)能夠顯著降低CK-MB活性，表現(xiàn)出與陽(yáng)性對(duì)照藥物利多卡因相似的藥理活性，詳情見(jiàn)表2。綜上，得出結(jié)論當(dāng)藥醇苷對(duì)烏頭堿所致小鼠心律失常具有防治作用，并且具有與陽(yáng)性對(duì)照藥物利多卡因相似的藥理性質(zhì)。 表I當(dāng)藥醇苷對(duì)烏頭堿致心律失常的防治作用
N‘.早爆，傳導(dǎo)Bit·.心_過(guò)逢室靈總分.空白對(duì)照16-◎'6=0.4.11=0.4.L 8=0.6*CW=版 O. +4.4:01fii多卡gl·16-0.3.:0.3'0.6=0.;·.0.5=.0.3'1.2=0.6.1 1=0*·.C低劑畺— 0-0012 igkg) ^16..0j=0.5·0.S=0..4'.1.純6'om3.2=1.7':C中煙I (O OlZiHf k|)16.0.5=0,4-0 5:0 5'..0.0=0 O'2fcL2·-3.0=12'..C敲· (0J 2 mg kg)K·O—fcO.O.·0制J'O 0=0.0'0.0=0.0..1..1=0.4"
注給藥各劑量組與空白對(duì)照組比較*/7 < O. 05,**P < O. Ol0
表2當(dāng)藥醇苷對(duì)小鼠血清CK-MB的影響
組別NCK-MB空白對(duì)照16232.75±12.79模型對(duì)照164737. 29±637.50*利多卡因161796. 71±663.99^C 低劑量(O. 0012mg/kg)165513. 14±945.75*C 中劑量(O. 012mg/kg)163323. 67±359.C 高劑量(O. 12mg/kg)162228. 33±633.25*s
注給藥各劑量組與空白對(duì)照組比較*p < O. 05，與模型對(duì)照組相比sP < O. 05。烏頭堿可使心肌細(xì)胞鈉通道開(kāi)放，加速Na+內(nèi)流，促使細(xì)胞膜去極化，提高心房傳導(dǎo)組織和房室束一浦肯野纖維等快反應(yīng)細(xì)胞的自律性，形成一源性或多源性異位節(jié)律，縮短不應(yīng)期，而導(dǎo)致心律失常。本研究結(jié)果表明，當(dāng)藥醇苷可顯著降低傳導(dǎo)阻滯和心動(dòng)過(guò)速的發(fā)生，具有抗烏頭堿誘發(fā)小鼠心律失常的作用。其作用原理可能是通過(guò)穩(wěn)定心肌細(xì)胞膜，減弱Na+內(nèi)流，從而抑制易位起搏點(diǎn)的自律性，發(fā)揮預(yù)防心律失常的作用。由于烏頭堿的主要毒性靶器官是心臟，它能抑制心肌三羧酸循環(huán)和呼吸鏈的氧化磷酸化作用，使心肌有氧代謝障礙，心肌供能不足，導(dǎo)致心肌細(xì)胞凋亡和壞死。天門(mén)冬氨酸轉(zhuǎn)移酶(AST)、乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶(CK)以及肌酸激酶的同功酶MB (CK-MB)等主要存在于心肌中，一般稱為心肌酶類。在心肌細(xì)胞膜受到損傷后，心肌細(xì)胞內(nèi)的這些酶類就會(huì)漏出。因此，測(cè)定這些酶類的的活力可反映細(xì)胞膜受損的情況。本研究對(duì)造模后小鼠心肌酶CK-MB的活性進(jìn)行了測(cè)定，試驗(yàn)結(jié)果提示，與模型組相比，當(dāng)藥醇苷可降低小鼠血清中CK-MB的活性，進(jìn)一步說(shuō)明受試藥物對(duì)心肌細(xì)胞膜有一定的穩(wěn)定作用，并可能通過(guò)這種作用來(lái)保護(hù)心肌細(xì)胞，從而起到預(yù)防心律失常的作用。實(shí)施例2
當(dāng)藥醇苷化合物及其提取物的制備方法I材料與方法
1.1材料尖葉假龍膽于2008年7月采自內(nèi)蒙古自治區(qū)根河市，樣品經(jīng)包頭醫(yī)學(xué)院藥用植物教研室王振旺老師鑒定為龍膽科植物尖葉假龍膽；薄層硅膠G購(gòu)自青島海洋化工廠；葡聚糖凝膠(S^hadex LH-20)購(gòu)自美國(guó)GE公司；所用試劑(石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇、甲醇)均為分析純。 1.2當(dāng)藥醇苷的提取
稱量已粉碎干燥的尖葉假龍膽地上部分1kg，用70%乙醇回流提取3次，每次2h，合并提取液濃縮至浸膏，得浸膏230g。將所得浸膏溶解于IOOOmL水中，分別用石油醚(60 90°C)、乙酸乙酯、正丁醇萃取，合并相同萃取液。減壓回收溶劑，分別得到石油醚部分(36g)、乙酸乙酯部分(45g)、正丁醇部分(65g)和水部分(84g)。將各部分與當(dāng)藥醇苷對(duì)照品點(diǎn)于同一硅膠薄層G板，以乙酸乙酯乙醇水(40 2 :1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出晾干，用碘顯色。發(fā)現(xiàn)正丁醇部分與對(duì)照品Rf值相同的斑點(diǎn)十分明顯，表明當(dāng)藥醇苷主要集中在正丁醇部分。1.3當(dāng)藥醇苷的分離、純化
(I)稱取正丁醇部分浸膏50g，用20倍量甲醇溶解過(guò)濾后，用葡聚糖凝膠(SephadexLH-20)裝柱(柱規(guī)格8cmX80cm)，用3000-4000mL 70%甲醇作為流動(dòng)相洗脫。每餾分30mL，將各餾分與當(dāng)藥醇苷對(duì)照品點(diǎn)于同一硅膠薄層G板，以乙酸乙酯乙醇水(40 2 1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出晾干，用碘蒸汽顯色。合并含有當(dāng)藥醇苷的餾分，減壓回收溶劑，得到含當(dāng)藥醇苷的提取物。(2)將當(dāng)藥醇苷提取物(3. 9g)用葡聚糖凝膠柱(Sephadex LH-20)(柱規(guī)格3cmX 100cm)純化，80%甲醇洗脫，收集餾分并減壓回收溶劑，即得黃色粉末3.1go將黃色粉末與對(duì)照品經(jīng)薄層板檢測(cè)，Rf值一致，表明為當(dāng)藥醇苷。2 結(jié)果
所得當(dāng)藥醇苷經(jīng)高效液相色譜儀檢測(cè)，純度達(dá)到98. 2%。實(shí)施例3
(I)粉碎干燥尖葉假龍膽地上部分，用70%乙醇回流提取3次，合并提取液濃縮至浸膏。將所得浸膏溶解于水中，分別用石油醚(60 90°C)、乙酸乙酯、正丁醇萃取。取其中的正丁醇萃取液，減壓回收溶劑，得到正丁醇部分浸膏。(2)取正丁醇部分浸膏，用20倍量甲醇溶解過(guò)濾后，用葡聚糖凝膠(SephadexLH-20)裝柱(柱規(guī)格8cmX80cm)，用70%甲醇作為流動(dòng)相洗脫。合并含有當(dāng)藥醇苷的餾分，減壓回收溶劑，得到含當(dāng)藥醇苷為82. 5%的提取物。(3)將當(dāng)藥醇苷提取物用葡聚糖凝膠柱(Sephadex LH-20)(柱規(guī)格3cmX 100cm)純化，80%甲醇洗脫，收集餾分并減壓回收溶劑，即得當(dāng)藥醇苷，含量為97. 6%。
實(shí)施例4
每片含IOmg活性成分的片劑制備如下
用量/片重暈濃度(%)當(dāng)藥醇苷(含量98. 2%)10 mg10. 0微晶纖維素35 mg35. 0淀粉45 mg45.0聚乙烯吡咯烷酮4 mg4.0羧甲基淀粉鈉鹽4. 5 mg4. 5硬脂酸鎂0. 5 mg0. 5滑石粉I mg1.0總計(jì)100100.0
將活性成分，淀粉和纖維素過(guò)篩，并充分混合，將聚乙烯吡咯烷酮溶液與上述粉末混 合，過(guò)篩，制得濕顆粒于50°C干燥，將羧甲基淀粉鈉鹽，硬脂酸鎂和滑石粉預(yù)先過(guò)篩，然后加入到上述的顆粒中壓片。實(shí)施例5注射劑的制備
當(dāng)藥醇苷(含量98. 2%)200 mg
甘露醇700 mg
PEG300010 mg
蒸餾水100 mL
使PH值為7. 0-7. 5過(guò)濾濾液濃度為3mg/mL，按每安瓶2射劑。實(shí)施例6
每囊含IOOmg活性成分的膠囊的制備如下
用量/囊重量濃度(％)
當(dāng)藥醇苷提取物(含量大于80%)100 mg
聚氧乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯O. 05 mg
淀粉250 mg
總計(jì)350. 05 mg
實(shí)施例7
取當(dāng)藥醇苷5g，加入到已溶解IOg三羥甲基氨基甲烷的注射用水440mL中，加入2gEDTA-2Na攪拌溶解，加入碳酸氫鈉調(diào)節(jié)PH為7. 5-9. 0，補(bǔ)加水至500mL，加入5g活性炭，室溫?cái)嚢栉?0分鐘，除炭，精濾，以每支2mL灌封、滅菌，即得當(dāng)藥醇苷注射液。
毫升分裝，冷凍干燥后即得注
30. OO. 0269. 98100. 00
權(quán)利要求
1.當(dāng)藥醇苷及其提取物在制備預(yù)防、治療心律失常藥物中的應(yīng)用。
2.當(dāng)藥醇苷及其提取物在制備預(yù)防、治療房室傳導(dǎo)阻滯、室性心動(dòng)過(guò)速及伴隨血清心肌酶活性增高藥物中的應(yīng)用。
3.權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其中所述的當(dāng)藥醇苷及其提取物含當(dāng)藥醇苷的含量為80-99%ο
4.權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其中所述的當(dāng)藥醇苷及其提取物的制備方法為 (1)粉碎干燥尖葉假龍膽地上部分，用70%乙醇回流提取3次，合并提取液濃縮至浸膏；將所得浸膏溶解于水中，分別用60 90°C石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取；取其中的正丁醇萃取液，減壓回收溶劑，得到正丁醇部分浸膏； (2)取正丁醇部分浸膏，用20倍量甲醇溶解過(guò)濾后，用S印hadexLH-20葡聚糖凝膠裝柱，柱規(guī)格8cmX80cm，用70%甲醇作為流動(dòng)相洗脫；合并含有當(dāng)藥醇苷的餾分,減壓回收溶齊U，得到含當(dāng)藥醇苷大于80%的提取物； (3)將當(dāng)藥醇苷提取物用SephadexLH-20葡聚糖凝膠柱純化,柱規(guī)格3cmX 100cm, 80%甲醇洗脫，收集餾分并減壓回收溶劑，即得當(dāng)藥醇苷，含量大于95%。
5.權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于所述的預(yù)防、治療心律失常指的是使房室傳導(dǎo)阻滯和室性心動(dòng)過(guò)速的嚴(yán)重程度減輕，并降低心律失常發(fā)生時(shí)伴隨的血清心肌酶活性增聞。
6.權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于所述的藥物為含有治療有效量的當(dāng)藥醇苷及其提取物以及藥學(xué)上可接受的組分和/或載體。
7.權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于所述的藥物為含有治療有效量的當(dāng)藥醇苷及其提取物和藥學(xué)上可接受的載體組成的口服制劑或胃腸外給藥制劑。
8.權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于所述的藥物為含有O.06-60mg的當(dāng)藥醇苷及其提取物和藥學(xué)上可接受的組分和/或載體。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(1)所示的當(dāng)藥醇苷(化學(xué)名為1，5，8-三羥基-3-甲氧基山酮-8-氧葡萄糖苷，swertianolin)及其提取物在制備預(yù)防、治療心律失常藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明同時(shí)也公開(kāi)了包含作為活性成分當(dāng)藥醇苷或其藥學(xué)上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑組成的藥物組合物。藥理實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明當(dāng)藥醇苷化合物及其提取物具有抗心律失常的作用，能夠顯著降低烏頭堿引起的房室傳導(dǎo)阻滯和室性心動(dòng)過(guò)速的發(fā)生，并降低心律失常時(shí)血清心肌酶活性；與陽(yáng)性對(duì)照利多卡因組相比具有相似的藥理性質(zhì)。本發(fā)明的研究結(jié)果為尖葉假龍膽中藥材的合理利用提供了有力的科學(xué)依據(jù)。
文檔編號(hào)A61K36/51GK103006680SQ201310008829
公開(kāi)日2013年4月3日 申請(qǐng)日期2013年1月10日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月10日
發(fā)明者李旻輝, 呂麗娟, 閆暾 申請(qǐng)人:李旻輝