專利名稱：一種注射用地西他濱及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種注射用地西他濱及其制備方法。
背景技術(shù)：
骨髓增生異常綜合征(myelodysplastic syndrome, MDS)是一組起源于造血干細(xì)胞的獲得性克隆性疾病，以增生異常和無效造血為特點，發(fā)病率為(10 12) /10萬人，男女之比為2 :1，多累及中老年人，50歲以上的病例占50% 70%。MDS的發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，是一個累及多基因的多階段的病理過程，干細(xì)胞基因異常、造血微環(huán)境改變和免疫機(jī)制缺陷在發(fā)病中均起著重要作用。臨床表現(xiàn)以全血細(xì)胞減少、骨髓病態(tài)造血和向白血病(AL)進(jìn)展的高風(fēng)險為特征，主要表現(xiàn)為貧血、發(fā)熱、出血(包括齒粘膜及下出血等)、感染、淺表淋巴結(jié)腫大等癥狀。
在人類的惡性腫瘤中，DNA甲基化的改變是普遍的異?，F(xiàn)象，DNA甲基化的修飾參與腫瘤形成。地西他濱是一種低甲基化因子的藥物，為2’-去氧胞苷的類似物，氮原子取代了雜環(huán)5位上的碳。1968年首次發(fā)現(xiàn)了地西他濱的抗白血病的活性。在首次合成后數(shù)年，地西他濱抑制DNA甲基化的作用引起了人們對它的新一輪的興趣。地西他濱是去甲基化治療白血病的代表性藥物，腫瘤抑制基因的啟動被甲基化后抑制其基因的表達(dá)，地西他濱可使啟動子去甲基化，恢復(fù)腫瘤抑制基因表達(dá)，通過抑制DNA甲基轉(zhuǎn)移酶促進(jìn)DNA的低甲基化使得細(xì)胞發(fā)生分化或凋亡，從而修復(fù)正?；虻墓δ?。地西他濱在國外的原發(fā)廠家為MGI Pharma INC, 1999年3月8日，美國FDA批準(zhǔn)注射用地西他濱治療骨髓增生異常綜合征(MDS)的罕見病用藥地位，2003年2月14日，歐盟也批準(zhǔn)該藥用于治療MDS的罕見病用藥地位。作為新型DNA去甲基化的抗腫瘤藥，地西他濱對MDS具有確切的療效和安全性，能有效延長MDS患者的生命，提高患者的生活質(zhì)量。地西他濱在水中容易降解，為解決地西他濱在水溶液中的降解問題,美國專利US20060128653公開了將地西他濱和環(huán)糊精結(jié)合成化合物，利用包合技術(shù)避免地西他濱與水接觸發(fā)生降解。然而，環(huán)糊精本身有一定的腎毒性，注射進(jìn)入體內(nèi)，存在安全性隱患。另有研究將地西他濱制成無水注射液，利用甘油、丙二醇或聚乙二醇作為注射劑的溶劑，從而避免地西他濱與水接觸。但有機(jī)溶劑作為注射劑注入血液中，無疑增加了毒副作用。專利CN101584670A公開了在配置過程中使用叔丁醇和注射用水組成的混合溶劑，再進(jìn)行過濾凍干制備地西他濱粉針，同樣采用了有機(jī)溶劑叔丁醇，存在安全性隱患。專利CN101361718A將地西他濱均勻分散于有機(jī)溶劑叔丁醇、乙醇、甲醇或溶于有機(jī)溶劑二甲基亞砜中的至少一種，再與注射用水或溶解了凍干支撐劑和/或pH調(diào)節(jié)劑的注射用水混溶，過濾，凍干制備地西他濱注射劑，同樣采用了有機(jī)溶劑，并最終控制有機(jī)溶劑殘余量在1%以內(nèi)，但是殘存的有機(jī)溶劑也必然會對人體造成傷害。專利CN101637458公開了一種地西他濱粉針劑的制備方法，采用低溫灌裝實現(xiàn)最大限度降低地西他濱的水解，但是并未對pH調(diào)節(jié)劑的種類和用量進(jìn)行優(yōu)化和篩選。上述技術(shù)無論是采用環(huán)糊精包合、有機(jī)溶媒凍干或者低溫控制，均帶有毒副作用和局限性，且國內(nèi)目前沒有可供注射用的叔丁醇、甲醇，這也是國內(nèi)遲遲未有自己產(chǎn)品上市的主要原因。地西他濱在血液中沒有蓄積。地西他濱在體內(nèi)的表觀分布容積Vd為75. 8L*m_2，血漿清除率CL為消除半衰期tl/2為O. 58h。地西他濱的推薦劑量為15mg/m2，持續(xù)靜滴3小時以上，每8小時重復(fù)一次，連續(xù)3天。上述周期每6周重復(fù)一次。較短的半衰期，頻繁的給藥，這無疑給病人臨床用藥帶來了痛苦，造成了生活不便。

發(fā)明內(nèi)容
為克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提高地西他濱的穩(wěn)定性，延長體內(nèi)藥效，減少病人頻繁用藥的痛苦，本發(fā)明通過大量的試驗獲得了一種注射用地西他濱，其為一種含有地西他濱的
載藥微球，并提供了一種制備注射用地西他濱的方法。這里的術(shù)語“微球”是指藥物分散或被吸附在高分子、聚合物基質(zhì)中而形成的微粒分散體系，可以將藥物包裹在可生物降解的載體材料中，藥物隨著載體材料的溶蝕逐漸釋放，可以使體內(nèi)藥物濃度長時間維持一定的水平，起到長效緩釋的作用，減少用藥次數(shù)，增加病人順應(yīng)性。本發(fā)明的目的是這樣實現(xiàn)的一種注射用地西他濱，該制劑為皮下注射微球，由O. 05、. 15重量份的地西他濱、O. Γ0. 5重量份的明膠和f 10重量份的聚乳酸-羥基乙酸(PLGA)組成。所述的注射用地西他濱，優(yōu)選地，含地西他濱為O.1重量份。所述的注射用地西他濱，優(yōu)選地，含有O. 3重量份的明膠。所述的注射用地西他濱，優(yōu)選地，聚乳酸-羥基乙酸(PLGA)的含量為5重量份。所述的注射用地西他濱，優(yōu)選地，聚乳酸-羥基乙酸(PLGA)的分子量為600(Γ35000，更優(yōu)選分子量為6000。本發(fā)明對聚乳酸-羥基乙酸(PLGA)中丙交酯與乙交酯的比例進(jìn)行了優(yōu)選，優(yōu)選地，上述聚乳酸-羥基乙酸(PLGA)中丙交酯與乙交酯的比例為50/50或65/35或75/25，更優(yōu)選丙交酯與乙交酯的比例為75/25。本發(fā)明所述的注射用地西他濱，通過以下步驟獲得I)將O. 05、. 15重量份的地西他濱和明膠溶于2飛體積份的水中，溶解并混勻作為內(nèi)水(Wl)相；2)將f 10重量份的聚乳酸-羥基乙酸溶解于3(Γ60體積份的二氯甲烷中作為油
(O)相；3)將5 10重量份的聚乙烯醇溶解于80°C的500 1000份的注射用水中作為外水(W2)相；4)將Wl相緩慢滴入到O相中，15000r/min高速振蕩乳化約3 5min后，冷卻到10°c，作為初乳，并加入到W2相中，15000r/min高速振蕩乳化約:T5min，300(T6000r/min保持4h揮去二氯甲烷，10000r/min高速離心,使用注射用水洗滌3 7次后分裝,冷凍干燥即得。在微球制劑中有效成分的載藥量不應(yīng)過低，否則對患者給藥時，注射微球的量過大，會給患者造成疼痛等不必要的副作用；相反如果載藥量過大，在對患者給藥時，藥物突釋較為嚴(yán)重，容易造成藥物過量。本發(fā)明人通過大量試驗研究得知，油相中聚乳酸羥基乙酸濃度的增加可以提高油相的黏度，減少地西他濱向外水相的流失，提高了載藥量和包封率，但當(dāng)其濃度達(dá)到一定水平后，再提高濃度反而會降低載藥量，本發(fā)明在微球制備過程中對水相(包含內(nèi)水相和外水相)與油相中的各組分配比以及水相與油相的體積比、初乳與聚乙烯醇溶液體積比進(jìn)行了優(yōu)選，提高了微球的包封率，載藥量提高至62. 7^70. 6%。本發(fā)明提供的注射用地西他濱制備技術(shù)，將地西他濱溶解于油相中后，包裹于PLGA中，避免了其遇水降解，提高了產(chǎn)品質(zhì)量，增加了其穩(wěn)定性。本領(lǐng)域技術(shù)人員公知，制備所得的微球粒徑若是過小，難以維持長時間的藥效，同時有可能阻塞毛細(xì)血管，影響微循環(huán)，而粒徑過大，初期釋放太慢，達(dá)不到治療有效血藥濃度。本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，聚乙烯醇溶液濃度提高可以增加外水相的黏度，使微球更加容易形成 球狀，明顯改善了該制劑的微球形態(tài)。通過本發(fā)明所制備得到的注射用地西他濱微球跨距Γ5,平均粒徑5 50 μ m,優(yōu)選粒徑1(Γ25 μ m,如此既可以使本微球達(dá)到緩釋的效果，又能保證注射入體內(nèi)后不影響血液循環(huán)。乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)具有良好的生物相容性和可降解性，是用于制備緩釋微球的生物可降解聚合物材料，目前已經(jīng)被FDA批準(zhǔn)用于皮下注射用微球，為產(chǎn)品最終上市提供了依據(jù)。本發(fā)明制備所得的制劑還需要使用注射用水洗滌3 7次，以便去除微球表面的聚乙烯醇，減少了聚乙烯醇對人體的危害；同時本發(fā)明的微球制劑使用注射用水洗滌后，不需要添加賦形劑，直接分裝凍干即得。本發(fā)明所公開的注射用地西他濱，是一種皮下注射微球，通過優(yōu)選處方中的組分配比，優(yōu)化制備方法，促使有效成分地西他濱隨著載體材料聚乳酸羥基乙酸的溶蝕降解逐漸釋放，可以長時間維持有效濃度，起到長效緩釋作用，增加了患者順應(yīng)性。通過本發(fā)明所制備得到的注射用地西他濱微球跨距廣5，平均粒徑5 50 μ m,包封率> 85. 7%，且最高達(dá)到94. 5% ;載藥量> 62. 7%，最高達(dá)到70. 6%，體外釋放度試驗表明在開始I小時內(nèi)的釋放量低于30%，微球的體外釋放時間可持續(xù)14天，避免了每日給藥的缺陷，改善了病人的生活質(zhì)量。通過本發(fā)明制備的微球注射劑，重現(xiàn)性好，包封率及載藥量高、藥物釋放持續(xù)而穩(wěn)定，可以長時間維持有效血藥濃度，解決了常規(guī)制劑帶來的血藥濃度波動、給藥次數(shù)頻繁等問題。
具體實施例方式為了更好的說明本發(fā)明，通過實施例進(jìn)一步闡述本發(fā)明，但是并不因此將本發(fā)明限制在所述的實施例中。實施例1將O.1重量份的地西他濱、O. 3重量份的明膠溶于4體積份的水中，溶解并混勻作為內(nèi)水(Wl)相；將5重量份的聚乳酸-羥基乙酸(聚乳酸-羥基乙酸中丙交酯與乙交酯的比例為75/25，分子量6000)溶解于40體積份的二氯甲烷中作為油(O)相；將5重量份的聚乙烯醇溶解于80°C的500份的注射用水中作為外水(W2)相；將Wl相緩慢滴入到O相中，15000r/min高速振蕩乳化約3 5min后，冷卻到10°C，作為初乳，并加入到W2相中，15000r/min高速振蕩乳化約3 5min, 5000r/min保持4h揮去二氯甲燒，10000r/min高速離心,使用注射用水洗滌5次后分裝，冷凍干燥即得。實施例2將O.1重量份的地西他濱、O. 3重量份的明膠溶于4體積份的水中，溶解并混勻作為內(nèi)水(Wl)相；將5重量份的聚乳酸-羥基乙酸(聚乳酸-羥基乙酸中丙交酯與乙交酯的比例為75/25，分子量20000)溶解于40體積份的二氯甲烷中作為油(O)相；將5重量份的聚乙烯醇溶解于80°C的500份的注射用水中作為外水(W2)相；將Wl相緩慢滴入到O相中，15000r/min高速振蕩乳化約3 5min后，冷卻到10°C，作為初乳，并加入到W2相中，15000r/min高速振蕩乳化約3 5min, 5000r/min保持4h揮去二氯甲燒，10000r/min高速離心,使用注射用水洗滌5次后分裝，冷凍干燥即得。實施例3
將O.1重量份的地西他濱、O. 3重量份的明膠溶于4體積份的水中，溶解并混勻作為內(nèi)水(Wl)相；將5重量份的聚乳酸-羥基乙酸(聚乳酸-羥基乙酸中丙交酯與乙交酯的比例為75/25，分子量35000)溶解于40體積份的二氯甲烷中作為油(O)相；將5重量份的聚乙烯醇溶解于80°C的500份的注射用水中作為外水(W2)相；將Wl相緩慢滴入到O相中，15000r/min高速振蕩乳化約3 5min后，冷卻到10°C，作為初乳，并加入到W2相中，15000r/min高速振蕩乳化約3 5min, 5000r/min保持4h揮去二氯甲燒，10000r/min高速離心,使用注射用水洗滌5次后分裝，冷凍干燥即得。實施例4將O.1重量份的地西他濱、O. 3重量份的明膠溶于4體積份的水中，溶解并混勻作為內(nèi)水(Wl)相；將5重量份的聚乳酸-羥基乙酸(聚乳酸-羥基乙酸中丙交酯與乙交酯的比例為65/35，分子量6000)溶解于40體積份的二氯甲烷中作為油(O)相；將5重量份的聚乙烯醇溶解于80°C的500份的注射用水中作為外水(W2)相；將Wl相緩慢滴入到O相中，15000r/min高速振蕩乳化約:T5min后，冷卻到10°C，作為初乳，并加入到W2相中，15000r/min高速振蕩乳化約3 5min, 5000r/min保持4h揮去二氯甲燒，10000r/min高速離心,使用注射用水洗滌5次后分裝，冷凍干燥即得。實施例5將O.1重量份的地西他濱、O. 3重量份的明膠溶于4體積份的水中，溶解并混勻作為內(nèi)水(Wl)相；將5重量份的聚乳酸-羥基乙酸(聚乳酸-羥基乙酸中丙交酯與乙交酯的比例為50/50，分子量6000)溶解于40體積份的二氯甲烷中作為油(O)相；將5重量份的聚乙烯醇溶解于80°C的500份的注射用水中作為外水(W2)相；將評1相緩慢滴入到O相中，15000r/min高速振蕩乳化約3 5min后，冷卻到10°C，作為初乳，并加入到W2相中，15000r/min高速振蕩乳化約3 5min, 5000r/min保持4h揮去二氯甲燒，10000r/min高速離心,使用注射用水洗滌5次后分裝，冷凍干燥即得。實施例6將O. 05重量份的地西他濱、O.1重量份的明膠溶于2體積份的水中，溶解并混勻作為內(nèi)水(Wl)相；將I重量份的聚乳酸-羥基乙酸(聚乳酸-羥基乙酸中丙交酯與乙交酯的比例為75/25，分子量6000)溶解于30體積份的二氯甲烷中作為油(O)相；將5重量份的聚乙烯醇溶解于80°C的500份的注射用水中作為外水(W2)相；將評1相緩慢滴入到O相中，15000r/min高速振蕩乳化約3 5min后，冷卻到10°C，作為初乳，并加入到W2相中，15000r/min高速振蕩乳化約3 5min, 3000r/min保持4h揮去二氯甲燒，10000r/min高速離心,使用注射用水洗滌3次后分裝，冷凍干燥即得。實施例7將O. 15重量份的地西他濱、O. 5重量份的明膠溶于6體積份的水中，溶解并混勻作為內(nèi)水(Wl)相；將10重量份的聚乳酸-羥基乙酸(聚乳酸-羥基乙酸中丙交酯與乙交酯的比例為75/25，分子量6000)溶解于60體積份的二氯甲烷中作為油(O)相；將10重量份的聚乙烯醇溶解于800C的1000份的注射用水中作為外水(W2 )相；將Wl相緩慢滴入到O相中，15000r/min高速振蕩乳化約3 5min后，冷卻到10°C，作為初乳，并加入到W2相中，15000r/min高速振蕩乳化約3 5min,6000r/min保持4h揮去二氯甲燒，10000r/min高速離心,使用注射用水洗滌7次后分裝，冷凍干燥即得。實施例8. 凍干所得微球用注射用水分散后，實施例1-7所制備得到的微球粒徑、包封率和載藥量具體檢測數(shù)據(jù)見表I。表I各實施例制備的微球粒徑、載藥量和包封率
權(quán)利要求
1.一種注射用地西他濱，其特征在于它由O. 05、. 15重量份的地西他濱、O.廣0.5重量份的明膠和f 10重量份的聚乳酸-羥基乙酸組成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的注射用地西他濱，其特征在于它含有O.1重量份的地西他濱。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的注射用地西他濱，其特征在于它含有O.3重量份的明膠。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的注射用地西他濱，其特征在于它含有5重量份的聚乳酸-羥基乙酸。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的注射用地西他濱，其特征在于聚乳酸-羥基乙酸的分子量為6000 35000。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的聚乳酸-羥基乙酸，其特征在于聚乳酸-羥基乙酸的分子量為 6000。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的聚乳酸-羥基乙酸，其特征在于聚乳酸-羥基乙酸中丙交酯與乙交酯的比例為50/50、65/35或75/25。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的聚乳酸-羥基乙酸，其特征在于聚乳酸-羥基乙酸中丙交酯與乙交酯的比例為75/25。
9.一種注射用地西他濱，通過以下步驟獲得 1)將O.05、. 15重量份的地西他濱和明膠溶于2飛體積份的水中，溶解并混勻作為內(nèi)水相； 2)將f10重量份的聚乳酸-羥基乙酸溶解于3(Γ60體積份的二氯甲烷中作為油相； 3)將5 10重量份的聚乙烯醇溶解于80°C的50(Tl000份的注射用水中作為外水相； 4)將步驟(I)得到的內(nèi)水相緩慢滴入到步驟(2)得到的油相中，15000r/min高速振蕩乳化約3 5min后，冷卻到10°C，作為初乳，并加入到步驟(3)得到的外水相中，15000r/min高速振蕩乳化約3 5min, 3000 6000r/min保持4h揮去二氯甲燒，10000r/min高速離心,使用注射用水洗滌3 7次后分裝，冷凍干燥即得。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種注射用地西他濱及其制備方法。本發(fā)明的注射用地西他濱包含地西他濱、明膠和PLGA。通過本發(fā)明制備的注射劑，重現(xiàn)性好，穩(wěn)定性高，包封率高，提高了載藥量，藥物釋放持續(xù)而穩(wěn)定，可以長時間維持有效血藥濃度，降低了給藥次數(shù)，避免了每日給藥的缺陷，改善了病人的生活質(zhì)量，解決了常規(guī)制劑帶來的血藥濃度波動、給藥次數(shù)頻繁等問題。
文檔編號A61K9/16GK103006587SQ20131001339
公開日2013年4月3日 申請日期2013年1月14日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月14日
發(fā)明者趙志全, 馮中, 蔣新利, 郝貴周, 李娜 申請人:山東新時代藥業(yè)有限公司