專利名稱：紫杉醇或多西紫杉醇的多肽偶合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種抗癌藥物的偶合物，特別是涉及紫杉醇或多西紫杉醇的一種多肽偶合物。
背景技術：
紫杉醇(Paclitaxel, PTAX)是從紅豆杉屬(Taxus)植物的樹皮中分離提取的二萜類天然產物，為近二十年來所研發(fā)上市的最有效的化學抗癌藥物之一。通過特異性結合到細胞微管小管的β位，使微管聚合為團塊或束狀，紫杉醇可有效抑制微管網的正常重組，使細胞的分裂，繁殖及生長受到阻礙并停滯在G2期和M期。作為國際上廣泛認可的高效化學抗癌藥物，紫杉醇已被眾多國家批準用于臨床，以治療包括乳腺癌，卵巢癌，結腸癌，食管癌，非小細胞肺癌，膀胱癌、前列腺癌，黑素瘤(Melanoma)，淋巴瘤，白血球過多癥(Leukemias)及胃癌等多種癌癥1A紫杉醇的結構復雜，目前難以通過化學合成方法制備，因天然資源有限，使其價格極為昂貴。紫杉醇具有高效細胞毒性，但卻缺乏細胞選擇性。在體內除腫瘤組織外，也可分布于正常組織中，除導致生物利用度明顯降低外，也使得紫杉醇在殺滅癌細胞的同時，對正常細胞及組織造成傷害。紫杉醇細胞選擇性差也導致了臨床應用中產生嚴重毒副作用，包括中性白細胞減少，骨髓抑制，血管性水腫，低血壓，過敏性反應，全身性蕁麻疹，感覺及中樞神經病變，觸覺異常，感覺減退，位置感覺缺失等，常使需要長期用藥的癌癥患者難以承受。此外，紫杉醇水溶性極差r0.4ug/ml)，在劑型及給藥方式上受到諸多限制。臨床制劑中將紫杉醇加入聚氧乙烯蓖麻油(Cremphor EL):無水乙醇(V: V=1:1)中，再以生理鹽水稀釋后通過靜脈輸液給藥，除給患者帶來不便外，聚氧乙烯蓖麻油還可引起人體的過敏反應。對一些需要增加劑量才能獲得較好 療效的病例，紫杉醇也因其水溶性極差而難以有效使用
2，4-7
O多西紫杉醇(DocetaxeLDTAX)是以從紫杉樹葉中提取的、含有紫杉醇基本母核結構的去乙酰衆(zhòng)果赤霉素IIK 10-Deacetyl baccatin III)為原料,通過在其3,位的氨基進行叔丁氧?；蟮玫降陌牒铣勺仙即碱愃莆?，9。通過與紫杉醇相同的作用機制，多西紫杉醇在臨床上也用作有效的化學抗癌藥物。但多西紫杉醇在應用中同樣顯示出細胞選擇性差的弱點，在抑制腫瘤細胞的同時，對正常細胞及組織造成傷害，導致各種與紫杉醇類似的毒副作用1(U1。紫杉醇與多西紫杉醇具有如下結構:
權利要求
1.一種紫杉醇或多西紫杉醇的多肽偶合物，其特征在于所述紫杉醇或多西紫杉醇在2’位羥基通過連接序列與多肽的氨基相連。
2.根據權利要求I所述的紫杉醇或多西紫杉醇的多肽偶合物，其特征在于所述連接序列為-CO-CH2-(X) J1-CH2-CO-；其中，X 為 0(CH2CH20CH2CH2CH2NHC0CH2_)2，-CO-, -O-, -S-, -CH2-, -CHCH3-或-C(CH3)2-；η為O或I。
3.根據權利要求I或2所述的一種紫杉醇或多西紫杉醇的多肽偶合物，其特征在于所述多肽為奧曲肽或者奧曲肽的3位苯丙氨酸(Phe3)用酪氨酸(Tyr)取代后得到奧曲肽-Tyr3。
4.根據權利要求3所述的一種紫杉醇或多西紫杉醇的多肽偶合物，其特征在于所述紫杉醇或多西紫杉醇在2’位羥基通過連接序列與奧曲肽或奧曲肽-Tyr3的N-端氨基和/或5位賴氨酸(Lys5)側鏈的-氨基相連接。
5.權利要求I 4任意一項所述的紫杉醇或多西紫杉醇的多肽偶合物的制備方法，所述方法包括 將紫杉醇或多西紫杉醇與連接劑反應得到2’位羥基上連接有連接序列-CO-CH2-(X)n-CH2-C0-0H的紫杉醇-Linker中間體或多西紫杉醇-Linker中間體，其中X為O(CH2CH2C)CH2CH2CH2NHC0CH2-)2, -CO-, -O-, -S-, -CH2-, -CHCH3-或-C(CH3)2-, η 為 O 或 I ; 將紫杉醇-Linker中間體或多西紫杉醇-Linker中間體通過固相或液相合成方法與多肽的氨基相連。
6.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于所述多肽為奧曲肽或者奧曲肽的3位苯丙氨酸(Phe3)用酪氨酸(Tyr)取代后得到奧曲肽-Tyr3，并且所述方法進一步包括步驟 將紫杉醇-Linker中間體或多西紫杉醇-Linker中間體與連接于固相合成樹脂、側鏈保護但N-端氨基游離的奧曲肽或奧曲肽-Tyr3通過固相合成方法進行連接反應，制備得到紫杉醇-Linker連接于肽鏈N-端氨基的紫杉醇-奧曲肽偶合物或紫杉醇_奧曲肽-Tyr3偶合物，或多西紫杉醇-Linker連接于肽鏈N-端氨基的多西紫杉醇-奧曲肽偶合物或多西紫杉醇-奧曲肽-Tyr3偶合物。
7.根據權利要求6所述的制備方法，其特征在于所述固相合成反應具體是指， 將與固相合成樹脂相連，已形成分子內二硫鍵，側鏈保護但N-端氨基游離的奧曲肽-樹脂或奧曲肽-Tyr3-樹脂置于固相合成反應器中； 將紫杉醇-Linker中間體或多西紫杉醇-Linker中間體溶于有機溶劑,并按I: I I. 5的摩爾比分別加入PyBop及有機溶劑后滴入固相合成反應器中，并用干燥氮氣進行攪拌； 洗滌樹脂并收集產物。
8.根據權利要求6或7所述的制備方法，其特征在于所述方法進一步包括步驟 將制備得到、并從固相合成樹脂上分離的偶合物進一步與紫杉醇-Linker中間體或多西紫杉醇-Linker中間體在液相合成條件下進行連接反應，制備得到奧曲肽/奧曲肽-Tyr3的N-端氨基與5位賴氨酸(Lys5)側鏈的-氨基分別連接有紫杉醇-Linker的雙紫杉醇-奧曲肽偶合物、雙紫杉醇-奧曲肽-Tyr3偶合物；或奧曲肽/奧曲肽-Tyr3的N-端氨基與5位賴氨酸(Lys5)側鏈的-氨基分別連接有多西紫杉醇-Linker的雙多西紫杉醇-奧曲肽偶合物或雙多西紫杉醇-奧曲肽-Tyr3偶合物。
9.根據權利要求8所述的制備方法，其特征在于所述在液相合成條件下進行反應是指， 將制備得到、并從固相合成樹脂上分離的偶合物溶于無水二甲基甲酰胺； 將紫杉醇-Linker中間體或多西紫杉醇-Linker中間體溶于有機溶劑,并按I : I .I. 5的摩爾比分別加入PyBop及有機溶劑后滴入上述偶合物的有機溶劑溶液； 充分反應后收集產物。
10.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于所述多肽為奧曲肽或者奧曲肽的3位苯丙氨酸(Phe3)用酪氨酸(Tyr)取代后得到奧曲肽-Tyr3，并且所述方法進一步包括步驟 將紫杉醇-Linker中間體或多西紫杉醇-Linker中間體與奧曲肽或奧曲肽-Tyr3在液相合成條件下反應，制備得到奧曲肽/奧曲肽-Tyr3的N-端氨基與5位賴氨酸(Lys5)側鏈的-氨基分別連接有紫杉醇-Linker或多西紫杉醇-Linker的雙紫杉醇-奧曲肽/奧曲肽-Tyr3偶合物或雙多西紫杉醇-奧曲肽/奧曲肽-Tyr3偶合物。
11.根據權利要求10所述的制備方法，其特征在于所述在液相合成條件下反應是指， 將紫杉醇-Linker中間體或多西紫杉醇-Linker中間體溶于有機溶劑并按I: I I. 5的摩爾比分別加入PyBop及N，N- 二異丙基乙胺后滴入奧曲肽或奧曲肽-Tyr3的無水二甲基甲酰胺溶液中，反應后分離純化所得產物。
12.權利要求I 4任意一項所述的紫杉醇或多西紫杉醇的多肽偶合物在制備用于預防和/或治療腫瘤的藥物方面的應用。
全文摘要
本發(fā)明公開了系列紫杉醇或多西紫杉醇的多肽偶合物，所述紫杉醇或多西紫杉醇在2’位羥基通過不同連接序列與多肽的氨基相連。本發(fā)明還公開了所述偶合物的制備方法及在制備藥物方面的應用。本發(fā)明的偶合物具備優(yōu)異抗癌活性與癌細胞選擇性，以及具有良好水溶性。
文檔編號A61K47/48GK103254279SQ201310045580
公開日2013年8月21日 申請日期2008年10月10日 優(yōu)先權日2008年10月10日
發(fā)明者王樸, 傅雪琦 申請人:江蘇天一時制藥有限公司