氫氧化鋁在制備治療肝癌藥物中的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及化學(xué)藥物領(lǐng)域，涉及氫氧化鋁[Al(OH)3]化合物在制備抗肝癌藥物中的用途。本發(fā)明提供了氫氧化鋁作為單獨(dú)成分在制備肝癌治療藥物中的應(yīng)用。通過(guò)小鼠體內(nèi)腫瘤接種實(shí)驗(yàn)、免疫學(xué)分析、增殖、凋亡好免疫組化檢測(cè)等多種實(shí)驗(yàn)手段證明：給予氫氧化鋁干預(yù)后可明顯抑制肝癌細(xì)胞的體內(nèi)增殖，誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)腫瘤、腫瘤細(xì)胞凋亡，進(jìn)而抑制皮下腫瘤的體內(nèi)生長(zhǎng)并提高荷瘤小鼠的生存率，表明氫氧化鋁作為單獨(dú)唯一成分能夠有效抑制肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，可制備治療肝癌的藥物，還可作為單獨(dú)成分與其他有效的肝癌干預(yù)方法或抗肝癌藥物用于肝癌的綜合干預(yù)措施。
【專利說(shuō)明】氫氧化鋁在制備治療肝癌藥物中的應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及化學(xué)藥物領(lǐng)域，涉及氫氧化鋁[A1(0H)3]化合物在制藥中的新的用途，具體涉及氫氧化鋁[Al (OH) 3]化合物在制備治療肝癌藥物中的應(yīng)用。
[0002]背景材料
[0003]據(jù)報(bào)道，原發(fā)性肝癌(簡(jiǎn)稱肝癌)是世界范圍內(nèi)第六位的最常見(jiàn)惡性腫瘤，每年新增病例約70余萬(wàn)，其中肝細(xì)胞癌約占80%。調(diào)查顯示肝癌是中國(guó)最常見(jiàn)的惡性腫瘤，我國(guó)每年新發(fā)肝癌病例約占全球發(fā)病總數(shù)的55%，肝癌已成為我國(guó)第二大腫瘤致死原因。至今，臨床治療中手術(shù)切除仍是治療肝癌的最佳治療方法，也是早期肝癌的首選治療措施。但由于原發(fā)性肝癌發(fā)病隱匿，發(fā)展快速，導(dǎo)致確診時(shí)能手術(shù)切除者僅為10%左右，而且，即使施行手術(shù)，仍有許多病例無(wú)法完全切除或腫瘤難以避免術(shù)后復(fù)發(fā)。此外，由于手術(shù)對(duì)人體的創(chuàng)傷較大，常會(huì)使患者的免疫力降低，并且導(dǎo)致一系列并發(fā)癥，因此，臨床實(shí)踐中對(duì)于晚期肝癌患者，多因其肝功能不全而無(wú)法手術(shù)。這一部分病人，需通過(guò)各種非手術(shù)切除的方法進(jìn)行治療，或者先行非手術(shù)治療，使腫塊縮小局限，再行手術(shù)切除治療，即二期切除，以使患者獲得較好的益處。因此，尋找有效的肝癌非手術(shù)治療方式對(duì)于提高肝癌患者，尤其是中晚期肝癌患者的生存率是至關(guān)重要的。
[0004]目前,肝癌的非手術(shù)治療措施包括針對(duì)腫瘤的化學(xué)治療、放射治療、免疫治療和基因治療等。腫瘤的免疫治療是近年來(lái)興起的最有前景的新療法，該療法能增強(qiáng)免疫系統(tǒng)的自我調(diào)節(jié)能力，激發(fā)特異性免疫反應(yīng)，從而達(dá)到治療腫瘤并延緩和降低腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的目的。通常，肝癌的免疫治療分為以下幾類(lèi):(I)非特異性免疫治療，指應(yīng)用一些免疫調(diào)節(jié)劑通過(guò)非特異性地增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能，激活機(jī)體的抗腫瘤免疫應(yīng)答，以達(dá)到治療腫瘤的目的；目前應(yīng)用于腫瘤治療的有:細(xì)胞因子(1L-2、IFN、TNF等)、微生物及其產(chǎn)物、維生素K、熱休克蛋白(HSP)等。(2)主動(dòng)免疫治療，指利用腫瘤細(xì)胞或腫瘤抗原物質(zhì)誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫，進(jìn)而主動(dòng)殺傷腫瘤細(xì)胞，阻止腫瘤的生長(zhǎng)擴(kuò)散和復(fù)發(fā)以治療腫瘤的方法；目前常用的括擴(kuò)DC疫苗、腫瘤細(xì)胞疫苗及異種重組甲胎蛋白疫苗等。(3)過(guò)繼免疫治療，指向肝癌患者輸入具有抗瘤活性的免疫細(xì)胞，直接殺傷腫瘤或激發(fā)機(jī)體抗瘤免疫效應(yīng)，從而達(dá)到治療肝癌的目的。
[0005] 氫氧化鋁[A1(0H)3]作為美國(guó)FDA和中國(guó)食品藥品監(jiān)督局批準(zhǔn)的唯一人用疫苗佐劑，在疫苗中使用不僅可以提高機(jī)體的免疫應(yīng)答而且具有較好的安全性。氫氧化鋁佐劑經(jīng)80余年的使用，其有效性和安全性已得到了實(shí)踐的驗(yàn)證和人們的公認(rèn)，并已獲得批準(zhǔn)應(yīng)用于商業(yè)性的疫苗，如白百破三聯(lián)疫苗(DTP)、型流感嗜血桿菌疫苗、乙肝疫苗(HBV)等。有關(guān)商品化的氫氧化鋁佐劑，其實(shí)質(zhì)是Al (OH) 3的不完全脫水產(chǎn)物，即纖維狀結(jié)晶形態(tài)的粒子，大小4.5nmX2.2nmX 1nm,等電點(diǎn)11.4。這種粒子聚集后以松散的I~10 μ m大小的形式存在。在化學(xué)上，氫氧化鋁佐劑是以鋁羥基形式存在的，其羥基可以提供或接受質(zhì)子，從而表現(xiàn)為兩性化合物。商業(yè)產(chǎn)品的佐劑氫氧化鋁為近乎透明的溶膠，黏附疫苗抗原后，抗原被限定在膠體形成的特定網(wǎng)格結(jié)構(gòu)中，可通過(guò)“儲(chǔ)存庫(kù)效應(yīng)”和“免疫刺激效應(yīng)”兩種機(jī)制增強(qiáng)機(jī)體對(duì)抗原的免疫應(yīng)答。儲(chǔ)存庫(kù)效應(yīng)是指抗原提呈細(xì)胞(APC)在對(duì)抗原攝取、加工、處理過(guò)程中，抗原與免疫細(xì)胞作用時(shí)間越長(zhǎng)，就越有利于后續(xù)的免疫應(yīng)答。氫氧化鋁黏附疫苗抗原后，在其表面和內(nèi)部高度濃聚著許多抗原，物理性的呈遞給免疫細(xì)胞，而不改變其化學(xué)結(jié)構(gòu)，以便于免疫細(xì)胞能充分地、高水平地、長(zhǎng)時(shí)間地與疫苗抗原接觸作用，從而使有意義的免疫應(yīng)答被誘導(dǎo)。免疫刺激效應(yīng)主要是指氫氧化鋁后可激活B細(xì)胞母細(xì)胞化，進(jìn)而促進(jìn)抗體產(chǎn)生。近來(lái)隨著研究的深入，人們發(fā)現(xiàn)氫氧化鋁還可通過(guò)多種方式刺激機(jī)體的免疫效應(yīng)，包括I)促進(jìn)炎性細(xì)胞的聚集，如中性粒細(xì)胞、炎性單核細(xì)胞和樹(shù)突狀細(xì)胞(DC) ；2)作用于人的外周血單核細(xì)胞，誘導(dǎo)單核細(xì)胞分化為成熟的CD40+、CD83+DC ；3)誘導(dǎo)動(dòng)物模型的Th2型免疫應(yīng)答；4)介導(dǎo)炎性因子的分泌，如通過(guò)Nlrp3炎癥小體介導(dǎo)IL-1 β分泌；5)通過(guò)細(xì)胞表面脂類(lèi)的活化促使DC攝入抗原；6)體外誘導(dǎo)T細(xì)胞顯著增殖，增強(qiáng)記憶性CD8+T細(xì)胞，誘導(dǎo)殺傷性T細(xì)胞的分化。
[0006]目前，有關(guān)氫氧化鋁作為疫苗佐劑的作用機(jī)制已在體內(nèi)外進(jìn)行了大量的實(shí)驗(yàn)研究，但迄今尚未見(jiàn)氫氧化鋁單獨(dú)用于抗腫瘤及其相關(guān)機(jī)制研究的報(bào)道。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明的目的是提供氫氧化鋁[Al(OH)3]化合物的新的藥用用途。
[0008]本發(fā)明提供了氫氧化鋁[Al(OH)3]在制備抗腫瘤藥物中的用途，尤其涉及氫氧化鋁作為單獨(dú)成分在制備治療肝癌的藥物中的應(yīng)用。
[0009]本發(fā)明的氫氧化鋁[Al (OH)3]是指廣泛用于多種疫苗的氫氧化鋁佐劑。
[0010]本發(fā)明提供了氫氧化鋁作為單獨(dú)成分在制備治療肝癌藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明中，進(jìn)行了荷瘤實(shí)驗(yàn)小鼠體內(nèi)腫瘤接種實(shí)驗(yàn)、免疫學(xué)分析、增殖、凋亡和免疫組化檢測(cè)等多種實(shí)驗(yàn)手段，結(jié)果顯示:給予氫氧化鋁干預(yù)可明顯抑制肝癌細(xì)胞的體內(nèi)增殖，誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)腫瘤、腫瘤細(xì)胞凋亡，進(jìn)而抑制皮下腫瘤的體內(nèi)生長(zhǎng)并提高荷瘤小鼠的生存率,表明本發(fā)明采用氫氧化鋁作為單獨(dú)唯一成分能夠有效抑制肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，具有抗肝癌作用。
[0011]本發(fā)明利用氫氧化鋁[Al(OH)3]化合物(通過(guò)市購(gòu)渠道獲得，本發(fā)明的實(shí)施例中由復(fù)旦大學(xué)上海醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)分子病毒學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供，)作為單獨(dú)成分在小鼠肝癌荷瘤模型中進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。通過(guò)皮下注射小鼠來(lái)源的肝癌細(xì)胞系(Hepal-6細(xì)胞，本發(fā)明的實(shí)施例中由第二軍醫(yī)大學(xué)王紅陽(yáng)教授實(shí)驗(yàn)室提供)，建立小鼠肝癌荷瘤模型，觀察小鼠皮下腫瘤的生長(zhǎng)情況和小鼠的生存情況，結(jié)果顯示，空白組和給予生理鹽水組皮下腫瘤體積明顯增大并有多只實(shí)驗(yàn)小鼠死亡，而實(shí)驗(yàn)組給藥氫氧化鋁[Al(OH)3]后僅有一只小鼠死亡，小鼠皮下腫瘤生長(zhǎng)速率明顯減慢，并有數(shù)只小鼠的皮下腫瘤明顯縮小，幾不可見(jiàn)。通過(guò)對(duì)小鼠器官的H&E染色，顯示給藥Al (OH)3后，與空白組和給予生理鹽水組相同，小鼠主要臟器未見(jiàn)明顯損傷。通過(guò)對(duì)小鼠皮下腫瘤的免疫組化染色，顯示給藥Al (OH)3后，腫瘤細(xì)胞的增殖明顯減慢、細(xì)胞凋亡明顯增多。
[0012]本發(fā)明經(jīng)實(shí)驗(yàn)表明，給予Al (OH)3干預(yù)后，可明顯抑制肝癌細(xì)胞的增殖，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，進(jìn)而抑制皮下腫瘤的體內(nèi)生長(zhǎng)并提高荷瘤小鼠的生存率，表明本發(fā)明的Al (OH)3作為單獨(dú)唯一成分能夠安全、有效地抑制肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，具有抗肝癌作用。
[0013]進(jìn)一步的，本發(fā)明所述的Al (OH)3可作為單獨(dú)活性成分制備治療肝癌的藥物，還可作為單獨(dú)成分與其他有效的肝癌干預(yù)方法或抗肝癌藥物用于肝癌的綜合干預(yù)措施。如，將Al (OH)3作為單獨(dú)活性成分與手術(shù)或放射干預(yù)方法或其他抗肝癌藥物聯(lián)合用于肝癌的綜合干預(yù)。
[0014]本發(fā)明為肝癌干預(yù)措施的選擇和Al (OH)3的臨床應(yīng)用提供了新的思路。
[0015]為了便于理解，以下將通過(guò)具體的附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)地描述。需要特別指出的是，具體實(shí)例和附圖僅是為了說(shuō)明，顯然本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員可以根據(jù)本文說(shuō)明，在本發(fā)明的范圍內(nèi)對(duì)本發(fā)明做出各種各樣的修正和改變，這些修正和改變也納入本發(fā)明的范圍內(nèi)。

【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0016]圖1是建立的小鼠肝癌荷瘤模型。
[0017]圖2是空白組、生理鹽水組和Al (OH)3組小鼠腫瘤生長(zhǎng)關(guān)系圖，
[0018]其中，圖2-1是各組小鼠腫瘤的生長(zhǎng)曲線；圖2-2是給予處理6周后，各組小鼠皮下腫瘤的代表性圖片。
[0019]圖3是空白組、生理鹽水組和Al (OH)3組小鼠的生存曲線。
[0020]圖4是空白組、生理鹽水組和Al (OH)3組小鼠臟器情況圖，
[0021]其中，圖4-1是給予處理6周后，各組小鼠臟器的代表性圖片；圖4-2是各組小鼠臟器的H&E染色圖。
[0022]圖5是空白組、生理鹽水組和Al (OH)3組小鼠皮下腫瘤的Ki67免疫組化染色圖。
[0023]圖6是空白組、生理鹽水組和Al (OH)3組小鼠皮下腫瘤的TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)圖。
[0024]圖7是生理鹽水組、Al (OH) 37天和11天開(kāi)始治療組的小鼠皮下腫瘤生長(zhǎng)曲線圖，體內(nèi)免疫細(xì)胞檢測(cè)及統(tǒng)計(jì)圖和皮下腫瘤切片的H&E染色圖，
[0025]其中圖7-1是生理鹽水組、Al (OH) 37天和11天開(kāi)始治療組的小鼠皮下腫瘤生長(zhǎng)曲線圖；
[0026]圖7-2是生理鹽水組、Al (OH) 37天和11天開(kāi)始治療組的小鼠脾臟和腫瘤中中性粒細(xì)胞的流式檢測(cè)圖及數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)圖；
[0027]圖7-3是生理鹽水組、Al (OH) 37天和11天開(kāi)始治療組的小鼠皮下腫瘤切片的H&E染色圖。

【具體實(shí)施方式】
[0028]實(shí)施例1:小鼠肝癌荷瘤模型的建立
[0029]選取4-6周齡、雄性C57BL/6J小鼠40只，采用皮下注射方式每只接種IX 17個(gè)Hepal-6細(xì)胞，兩周后觀察成瘤情況。共有29只小鼠成瘤，隨即分為空白組(9只)、對(duì)照組給予生理鹽水(10只)和實(shí)驗(yàn)組給予Al (OH) 3 (10只)。
[0030]實(shí)施例2:空白組、生理鹽水組和Al (OH) 3組小鼠腫瘤生長(zhǎng)情況
[0031]空白組小鼠不予處理、實(shí)驗(yàn)組小鼠給予Al (OH) 3溶液(溶于生理鹽水)，0.25mg/只，每隔3天一次，腹腔注射。對(duì)照組給予等量的生理鹽水(0.9% NaCl液體)，每隔3天一次，腹腔注射。給藥后每周測(cè)量各組小鼠皮下腫瘤大小，計(jì)算腫瘤體積(腫瘤體積=腫瘤長(zhǎng)徑X腫瘤短徑2/2)。給予處理6周后，處死各組小鼠，取出皮下腫瘤并繪制腫瘤生長(zhǎng)曲線。
[0032]如圖2-1和2-2所示，空白組與生理鹽水組小鼠的皮下腫瘤生長(zhǎng)較迅速，體積明顯增大，兩組間腫瘤體積和生長(zhǎng)曲線無(wú)明顯差異。給予Al (OH) 3后，小鼠皮下腫瘤生長(zhǎng)速度明顯減慢，體積明顯縮小，實(shí)驗(yàn)證實(shí)注射Al (OH) 3可明顯抑制小鼠體內(nèi)肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)。
[0033]實(shí)施例3:空白組、生理鹽水組和Al (OH) 3組小鼠的生存曲線
[0034]空白組、生理鹽水組和Al (OH) 3組小鼠按實(shí)施例2所述方法給予處理，每日觀察小鼠的生存情況并繪制生存曲線。如圖3結(jié)果所示，截止至實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，空白組共有4只小鼠死亡，生理鹽水組有5只小鼠死亡，而Al (OH) 3組僅有一只小鼠死亡。結(jié)果表明注射Al (OH) 3能明顯提高荷瘤小鼠的生存率。
[0035]實(shí)施例4:空白組、生理鹽水組和Al (OH) 3組小鼠臟器情況
[0036]空白組、生理鹽水組和Al (OH) 3組小鼠按實(shí)施例2所述方法給予處理，6周后處死小鼠，收取各組小鼠臟器(心、肝、脾、肺和腎)，以福爾馬林液固定，石蠟包埋，制作切片并進(jìn)行H&E染色。H&E染色方法:1)臟器組織石蠟切片脫蠟至水；2)蘇木精液染色5min，水洗；3)1%鹽酸乙醇l_3s,水洗；4)0.5%伊紅液染色I(xiàn)min,水洗；5)脫水封片。
[0037]如圖4-1和4-2所示，各組小鼠臟器的形態(tài)、體積和組成細(xì)胞均未見(jiàn)明顯異常，表明注射Al (OH)3對(duì)小鼠主要臟器沒(méi)有明顯的損傷作用。
[0038]實(shí)施例5:空白組、生理鹽水組和Al (OH) 3組小鼠皮下腫瘤的Ki67免疫組化染色
[0039]空白組、生理鹽水組和Al (OH) 3組小鼠按實(shí)施例2所述方法給予處理，6周后處死小鼠，取出皮下腫瘤組織，以福爾馬林液固定，石蠟包埋，制作切片并進(jìn)行Ki67免疫組化染色。Ki67是一種增殖細(xì)胞相關(guān)的核抗原，其功能與有絲分裂密切相關(guān)，在細(xì)胞增殖中是不可缺少。Ki67作為標(biāo)記細(xì)胞增殖狀態(tài)的抗原，其陽(yáng)性染色說(shuō)明細(xì)胞增殖活躍。Ki67染色方法:1)腫瘤組織石蠟切片脫蠟至水；2)3% H202室溫lOmin，水洗；3)抗原修復(fù)；4)山羊血清封閉 30min ；5)滴加 Κ?67 抗體(1: 100,購(gòu)自 Cell Signaling Technology 公司),4°C過(guò)夜；6)滴加辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的二抗(購(gòu)自上海長(zhǎng)島生物公司)37°C 30min ;7)DAB顯色(購(gòu)自DAKO公司)；8)蘇木素復(fù)染，鹽酸酒精分化；9)脫水封片。
[0040]如圖5所示，與空白組和生理鹽水組相比，Al (0H)3組小鼠皮下腫瘤中Ki67染色陽(yáng)性細(xì)胞明顯減少，證明注射Al (OH)3明顯抑制小鼠體內(nèi)肝癌細(xì)胞的增殖。
[0041]實(shí)施例6:空白組、生理鹽水組和Al (OH) 3組小鼠皮下腫瘤的TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)
[0042]空白組、生理鹽水組和Al (OH) 3組小鼠按實(shí)施例2所述方法給予處理，6周后處死小鼠，取出皮下腫瘤組織，以福爾馬林液固定，石蠟包埋，制作切片并進(jìn)行TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)(TUNEL FITC染色試劑盒購(gòu)自上海睿安生物，實(shí)驗(yàn)步驟參見(jiàn)試劑盒說(shuō)明書(shū))。TUNEL法是應(yīng)用末端脫氧核糖核苷酸轉(zhuǎn)移酶的作用在凋亡細(xì)胞斷裂DNA的末端催化摻入熒光素FITC標(biāo)記的脫氧三磷酸尿苷，進(jìn)而在熒光顯微鏡下直接觀察FITC標(biāo)記細(xì)胞，即為凋亡細(xì)胞。
[0043]如圖6所示，與空白組和生理鹽水組相比，Al (OH) 3組小鼠皮下腫瘤中TUNEL FITC染色陽(yáng)性細(xì)胞明顯增多，證明注射Al (OH)3明顯誘導(dǎo)小鼠體內(nèi)肝癌細(xì)胞的凋亡。
[0044]實(shí)施例7:鋁佐劑治療方案的確立及機(jī)制研究
[0045] 選取5-6周齡、雄性C57BL/6J小鼠21只，隨機(jī)分為3組，每組7只，采用皮下注射方式每只小鼠分別接種I X 17個(gè)Hepal-6細(xì)胞，兩組實(shí)驗(yàn)組小鼠分別于接種后7，11天開(kāi)始給予Al (OH) 3溶液(溶于生理鹽水)，0.25mg/0.25mL/只，每隔3天一次，腹腔注射。對(duì)照組于接種后7天給予等量的生理鹽水(0.9% NaCl液體)，每隔3天一次，腹腔注射。給藥后每周測(cè)量各組小鼠皮下腫瘤大小兩次，并計(jì)算腫瘤體積(腫瘤體積=腫瘤長(zhǎng)徑X腫瘤短徑2/2)。最后一次免疫后3天，處死所有小鼠，取其脾臟經(jīng)研磨，裂紅等處理，獲得單細(xì)胞懸疑，進(jìn)行中性粒細(xì)胞，巨噬細(xì)胞，N K,C D4，C D8T，T r e g等細(xì)胞流式檢測(cè)。腫瘤組織經(jīng)剪切，膠原酶和DNA酶消化處理后獲單細(xì)胞懸液，進(jìn)行中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的流式檢測(cè)。并取部分腫瘤組織進(jìn)行病理切片，參照實(shí)例2進(jìn)行HE染色。
[0046]如圖7-1所示，當(dāng)接種后7天開(kāi)始給予Al (OH) 3后，小鼠皮下腫瘤生長(zhǎng)速度明顯減慢，體積明顯縮小。而生理鹽水組和Al(OH)3Il天治療組小鼠的皮下腫瘤生長(zhǎng)較迅速，體積明顯增大。實(shí)驗(yàn)證實(shí)接種后7天開(kāi)始給予Al (OH) 3治療可明顯抑制小鼠體內(nèi)肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)。
[0047]經(jīng)過(guò)對(duì)小鼠脾臟和腫瘤中細(xì)胞進(jìn)行流式分析，結(jié)果顯示，小鼠脾臟中中性粒細(xì)胞(CDllb+Grl+)隨腫瘤的增大而增多，而腫瘤中的中性粒細(xì)胞則隨腫瘤的增大而減少，(如圖7-2)對(duì)切片進(jìn)行HE染色可見(jiàn)Al (OH) 37天治療組腫瘤內(nèi)有大量的中性粒細(xì)胞，其形態(tài)為具典型的分葉核的細(xì)胞(如圖7-4)。在顯微鏡下觀察腫瘤的切片結(jié)果可見(jiàn):1) 100倍下發(fā)現(xiàn)注射鋁佐劑會(huì)引起腫瘤內(nèi)細(xì)胞的壞死，Al (OH) 37天治療組的壞死比11天治療組的程度嚴(yán)重，生理鹽水組未見(jiàn)任何壞死；2)400倍下可見(jiàn)Al (OH) 37天治療組的腫瘤內(nèi)有大量的中性粒細(xì)胞的侵潤(rùn)，而在生理鹽水組和Al (OH) 311天治療組的小鼠腫瘤內(nèi)少有中性粒細(xì)胞的侵潤(rùn)，幾乎全是腫瘤細(xì)胞；3) Al (OH) 37天治療組的腫瘤內(nèi)除了壞死，還見(jiàn)有壞死后的纖維化修復(fù)，而在其他兩組則見(jiàn)到大量的腫瘤細(xì)胞處于核分裂相，表明腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)旺盛(如圖7-4)。鑒于中性細(xì)胞具有抗腫瘤的作用，據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道腫瘤微環(huán)境內(nèi)的TGF-β可誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞的功能發(fā)生變化 ，發(fā)揮促腫瘤生長(zhǎng)的功能，當(dāng)阻斷TGF-β后，中性粒細(xì)胞則具有抑制腫瘤生長(zhǎng)的功能；從本實(shí)驗(yàn)7天和11天治療組的效果差異可能也是因?yàn)槟[瘤微環(huán)境的變化所致。
【權(quán)利要求】
1.氫氧化鋁[Al(OH) 3]化合物作為單獨(dú)唯一成分在制備治療肝癌藥物中的用途。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述的氫氧化鋁抑制肝癌細(xì)胞的體內(nèi)增殖。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述的氫氧化鋁誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)腫瘤和誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，氫氧化鋁作為單獨(dú)成分聯(lián)合其他有效的抗肝癌藥物在制備治療肝癌藥物中的應(yīng)用。
5.根據(jù) 權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，氫氧化鋁作為單獨(dú)成分聯(lián)合其他有效的肝癌干預(yù)方法在制備肝癌綜合治療措施中的應(yīng)用。
6.根據(jù)權(quán)利要求6所述的用途，其特征在于，所述的其他有效的肝癌干預(yù)方法選自手術(shù)或放射干預(yù)方法。
【文檔編號(hào)】A61P35/00GK104042628SQ201310084217
【公開(kāi)日】2014年9月17日 申請(qǐng)日期:2013年3月15日 優(yōu)先權(quán)日:2013年3月15日
【發(fā)明者】王紅陽(yáng), 聞?dòng)衩? 王賓, 付靜, 王波, 任一彬, 朱俊杰, 汪萱怡 申請(qǐng)人:復(fù)旦大學(xué), 中國(guó)人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)