一種鏈霉菌和以鏈霉菌產生的spiroteteronate類化合物及其制備和應用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及微生物和新型醫(yī)藥農藥領域，具體為一種海洋鏈霉菌和以海洋鏈霉菌產生的spiroteteronate類化合物及其制備和應用。鏈霉菌為Streptomyces?sp.12A35，于2012年12月18日保藏于中國典型微生物保藏中心，保藏編號：CCTCC?M2012529。以海洋鏈霉菌產生的spiroteteronate類化合物如(I)所示的lobophorins?G和H。本發(fā)明所得lobophorins?G和H可作為新型抗菌素，lobophorins?G抗菌性能和氨芐青霉素相當，所述的化合物能通過微生物發(fā)酵生產，其制備方法簡單、高效，所得產物純度高。該發(fā)明具有良好的應用前景。
【專利說明】—種鏈霉菌和以鏈霉菌產生的spiroteteronate類化合物及其制備和應用
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及微生物和新型醫(yī)藥農藥領域，具體為一種鏈霉菌和以鏈霉菌產生的spiroteteronate類化合物及其制備和應用。
【背景技術】
[0002]海洋微生物已成為新型醫(yī)藥和農藥的重要來源，更是新型藥物創(chuàng)制的新的增長點。當前，海洋微生物因具有極其龐大的類群和豐富的代謝產物，越來越受到各國科學家的重視，尤其是深海微生物，因其獨特的海洋環(huán)境和特殊的微生物類群，新的活性化合物被不斷發(fā)現(xiàn)。這將為新發(fā)生的感染性疾病、耐藥病菌的治療和高效、安全、低毒的獸藥和農藥的開發(fā)提供良好的候選藥物。
[0003]Spiroteteronates是一類具有抗菌、抗腫瘤、抗病毒、抗痕疾等廣泛生物活性的天然抗生素。目前已發(fā)現(xiàn)的spiroteterona tes類化合物有kijanimicin, tetrocarcins, chiorothricin, decatromicins，saccharocarcins, antlermicins，versipelostatins,arisostatins, quartromicins, chrolactomycin 和 lobophorins。其獨特的化學結構和生物活性不斷吸引藥物學家的關注。

【發(fā)明內容】

[0004]本發(fā)明目的在于提供一種鏈霉菌和以鏈霉菌產生的spiroteteronate類化合物及其制備和應用。
[0005]為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術方案為:
[0006]一種鏈霉菌，鏈霉菌分類學命名為鏈霉菌12A35Streptomyces sp.12A35，于2012年12月18日保藏于中國典型微生物保藏中心，保藏編號:CCTCC M2012529，保藏單位地址為中國.武漢.武漢大學。
[0007]以鏈霉菌產生的spiroteteronate類化合物,如(I)所示的1bophorinsG和H。
[0008]
【權利要求】
1.一種鏈霉菌,其特征在于:鏈霉菌為Str印tomyces sp.12A35，于2012年12月18日保藏于中國典型微生物保藏中心，保藏編號=CCTCC M 2012529。
2.一種權利要求1所述的以鏈霉菌產生的spiroteteronate類化合物,其特征在于:如(I)所不的 lobophorins G和 H;
3.一種權利要求2所述的以鏈霉菌產生的spiroteteronate類化合物的制備方法,其特征在于: 1)將鏈霉菌Str印tomycessp.12A35接種于含人工海鹽的PSA液體培養(yǎng)基中發(fā)酵4_10天；將發(fā)酵液和菌絲體固液分離，其中發(fā)酵液用大孔吸附樹脂吸附，樹脂與發(fā)酵液質量體積比為之比為1:10-30 ;吸附完成后，先用蒸餾水洗滌樹脂，再用乙醇解吸，回收乙醇溶劑后得spiroteternate的粗提物A ;菌絲體經(jīng)丙酮浸提3次，將浸泡液減壓濃縮為浸膏使用甲醇精制得到spiroteternate的粗提物B ； 2)將spiroteternate的粗提物A和B合并,采用快速娃膠柱色譜法分離,按照二氯甲烷:甲醇(v/v)比為10:0-0:10梯度洗脫，收集體積比為9:1-7:3的二氯甲烷-甲醇(v/v)的洗脫組分，即得含spiroteternate類化合物的色譜流分； 3)上述所得色譜流分再采用反相中壓色譜進行純化，按照甲醇:水(v/v)比為1:9-10:0梯度洗脫，收集體積百分比為80%-95%的甲醇水溶液洗脫液，將收集的組分再以反相HPLC進行純化，流動相為含0.05%TFA的體積百分比90%的甲醇水溶液等度洗脫，流速為 2_5ml/min;收集保留時間分別為 7-9min、9_llmin、ll_15min、15_17min、16_20min 的色譜峰即得得到 O-β -ki janosyl-(I — 17)_ki janolide (4d)、H (4e)>lobophorins B (4a)、G (4b)和 F (4c)。
4.按權利要求3所述的以鏈霉菌產生的spiroteteronate類化合物的制備方法,其特征在于:將鏈霉菌Streptomyces sp.12A35經(jīng)海水高氏一號培養(yǎng)基活化后接種于含人工海鹽的PSA液體培養(yǎng)基中，溫度20-37°C，轉速100-300rpm，發(fā)酵培養(yǎng)4_10d。
5.按權利要求4所述的以鏈霉菌產生的spiroteteronate類化合物的制備方法,其特征在于:所述含人工海鹽的PSA液體培養(yǎng)基為，10.0?30.0g蔗糖，IOOg?350g 土豆浸出液,20.0?40.0g人工海鹽,用蒸懼水配平至1L, pH5.0?8.0。
6.一種權利要求1所述的以鏈霉菌產生的spiroteteronate類化合物的應用，其特征在于:所述化合物可作為制備成醫(yī)用、獸用或農用非治療目的的抗菌劑。
7.按權利要求6所述的以鏈霉菌產生的spiroteteronate類化合物的應用，其特征在于:所述化合物可作為 抗金黃色葡萄球菌或地衣芽孢桿菌的抑菌劑。
【文檔編號】A61P31/04GK103436458SQ201310145450
【公開日】2013年12月11日 申請日期:2013年4月24日 優(yōu)先權日:2013年4月24日
【發(fā)明者】潘華奇, 胡江春, 王書錦 申請人:中國科學院沈陽應用生態(tài)研究所