專利名稱：用于治療糖尿病及其并發(fā)癥的黃蜀葵提取物、制備方法及用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
背景技術(shù)：
糖尿病腎病是糖尿病常見的并發(fā)癥，是糖尿病全身性微血管病變表現(xiàn)之一，臨床特征為蛋白尿，漸進(jìn)性腎功能損害，高血壓，水腫，晚期出現(xiàn)嚴(yán)重腎功能衰竭，是糖尿病患者的主要死亡原因之一。近年來(lái)隨著我國(guó)人口人均壽命延長(zhǎng)，生活飲食習(xí)慣，結(jié)構(gòu)的改變，糖尿病的患病率呈直線上升趨勢(shì)，且由于治療方法的改善，生存時(shí)間的增加，從而腎臟及其它并發(fā)癥也增加。據(jù)最新統(tǒng)計(jì)，我國(guó)目前約有5000萬(wàn)人正面臨著糖尿病的威脅。在美國(guó)，糖尿病腎病占終末期腎功能衰竭的首位，約為35% 38%。I型(IDDM)糖尿病發(fā)生糖尿病腎病比例較高，約為35% 50%，II型(NIDDM)發(fā)生率約20%左右。黃蜀葵花又名甲花，為錦葵科秋葵屬植物黃蜀葵Abelmoschus rnanihot (L.)Medic.的花朵，國(guó)內(nèi)廣泛栽培,主產(chǎn)于河北、河南、甘肅、山東、四川及云貴地區(qū)。黃蜀葵花主要含有黃酮類、還原糖類、鞣酸類及長(zhǎng)鏈烴類等化合物?，F(xiàn)代藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)證明，其對(duì)腎病綜合征、關(guān)節(jié)炎及心血管疾病，等具有一定的防治作用?，F(xiàn)代藥理研究表明，黃蜀葵醇提取物的乙酸乙酯萃取部分有較強(qiáng)的a-葡萄糖苷酶抑制及抗氧化作用；正丁醇萃取部分有較強(qiáng)的抗氧化作用。但目前對(duì)于黃蜀葵提取物的藥理學(xué)報(bào)道較少。

發(fā)明內(nèi)容
為了解決上述問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種用于治療糖尿病腎病的黃蜀葵提取物、制備方法及用途。本發(fā)明申請(qǐng)將黃蜀葵的不同極性部位的提取物開展了 PPA受體細(xì)胞模型活性評(píng)價(jià)，篩選出對(duì)PPARP及PPA Ry激活作用明顯的極性部位提取物作為用于治療糖尿病腎病的黃蜀葵提取物；具體為:一種用于治療糖尿病腎病的黃蜀葵提取物制備方法，包括以下步驟:I)分別稱取黃蜀葵藥材用乙醇或甲醇提取得到醇提取液；2)將醇提取液回收至無(wú)醇味，用乙酸乙酯萃取得到乙酸乙酯萃取液和母液I ;3)將母液I用正丁醇萃取得到正丁醇萃取液和母液II。所述步驟I)的黃蜀葵藥材再用乙醇或甲醇提取前，還用石油醚或汽油進(jìn)行了脫脂處理。所述的方法制備的用于治療糖尿病腎病的黃蜀葵提取物，包括正丁醇萃取部位和乙酸乙酯提取部分一種或兩種的組合物。所述的用于治療糖尿病腎病的黃蜀葵提取物在制備治療II型糖尿病藥物中的應(yīng)用。所述的用于治療糖尿病腎病的黃蜀葵提取物在制備治療糖尿病腎病藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明的有益技術(shù)效果是:本發(fā)明申請(qǐng)?zhí)峁┝它S蜀葵用于治療II型糖尿病和糖尿病腎病活性部位，為開發(fā)新的劑型改善或改變給藥途徑創(chuàng)造了條件。


圖1不同濃度VE對(duì)PPAR P的相對(duì)激活效應(yīng)；圖2不同濃度VA對(duì)PPARP的相對(duì)激活效應(yīng)；圖3不同濃度NB對(duì)PPARP的相對(duì)激活效應(yīng)；圖4不同濃度RA對(duì)PPARP的相對(duì)激活效應(yīng)；圖5不同濃度VE對(duì)PPAR y的相對(duì)激活效應(yīng)；圖6不同濃度VA對(duì)PPAR y的相對(duì)激活效應(yīng)；圖7不同濃度NB對(duì)PPAR y的相對(duì)激活效應(yīng)；圖8不同濃度RA對(duì)PPAR y的相對(duì)激活效應(yīng)。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1分別稱取黃蜀葵藥材組，各1.0kg，取中一組用3L (60_90°C)石油醚(在工業(yè)化生產(chǎn)中也可以用汽油代 替石油醚)回流提取3次，得到小極性溶劑回流液和殘?jiān)麵 ;將小極性溶劑回流液TLC分析,在254nm及365nm下均無(wú)特別明顯斑點(diǎn)，且噴濃硫酸-香草醛顯色劑顯黃色(條帶拖尾)，判斷該部分中主要含有脂肪酸及其酯類化合物。將殘?jiān)麵用80%乙醇或甲醇回流提取3次，溶媒的量為藥材重量的5倍，得到醇溶劑回流液A和殘?jiān)麵I，留樣醇溶劑回流液A ;將醇溶劑回流液A采用鹽酸-鎂粉顯色反應(yīng)進(jìn)行檢識(shí)，同時(shí)采用分光光度法，以蘆丁做對(duì)照，測(cè)定吸光度，對(duì)提取物進(jìn)行分析，結(jié)果判定該組分含有黃酮類化合物。將醇溶劑回流液A回收至無(wú)醇味，用2倍體積乙酸乙酯萃取3次，得到乙酸乙酯萃取液和母液I ;將母液I用水飽和過(guò)的用2倍體積正丁醇萃取3次，得到正丁醇萃取液和母液II ;分別回收乙酸乙酯萃取液、正丁醇萃取液和醇溶劑回流液A至干分別得到乙酸乙酯提取部分、正丁醇提取部分和醇溶劑部分A。其中，乙酸乙酯提取部分命名為:VE，正丁醇提取部分命名為:VA，醇溶劑部分A命名為:NB。將另外一組黃蜀葵藥材組，用80%乙醇或甲醇回流提取3次，溶媒的量為藥材重量的5倍，得到醇溶劑回流液B和殘?jiān)黫，留樣醇溶劑回流液B ;將醇溶劑回流液B采用鹽酸-鎂粉顯色反應(yīng)進(jìn)行檢識(shí)，同時(shí)采用分光光度法，以蘆丁做對(duì)照，測(cè)定吸光度，對(duì)提取物進(jìn)行分析，結(jié)果判定該組分含有黃酮類化合物?；厥沾既軇┗亓饕築至干，得到醇溶劑部分B ;醇溶劑部分B命名為:RA。用HPLC方法分別檢測(cè)，VE、VA、NB和RA，對(duì)上述個(gè)提取物樣品進(jìn)行定性檢測(cè)；HPLC條件為:色譜柱:C18柱(150mmX4.6rnm, 5 u m);檢測(cè)波長(zhǎng):358nm ;流動(dòng)相:甲醇-水-冰醋酸(60:40:0.5)，流速:0.5mL MirT1,柱溫:25°C，進(jìn)樣量:50uLo上述4個(gè)樣品的含有的成分如表I所示。表I各部位中的活性成分
權(quán)利要求
1.一種用于治療糖尿病腎病的黃蜀葵提取物制備方法，特征在于:包括以下步驟: 1)分別稱取黃蜀葵藥材用乙醇或甲醇提取得到醇提取液； 2)將醇提取液回收至無(wú)醇味，用乙酸乙酯萃取得到乙酸乙酯萃取液和母液I; 3)將母液I用正丁醇萃取得到正丁醇萃取液和母液II。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于治療糖尿病腎病的黃蜀葵提取物制備方法，特征在于: 所述步驟I)的黃蜀葵藥材在用乙醇或甲醇提取前，還用石油醚或汽油進(jìn)行了脫脂處理。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法制備的用于治療糖尿病腎病的黃蜀葵提取物，其特征在于:包括正丁醇萃取部位和乙酸乙酯提取部分一種或兩種的組合物。
4.權(quán)利要求1、2或3所述的用于治療糖尿病腎病的黃蜀葵提取物在制備治療II型糖尿病藥物中的應(yīng)用。
5.權(quán)利要求1、2或3所述的用于治療糖尿病腎病的黃蜀葵提取物在制備治療糖尿病腎病藥物中的應(yīng)用。`
全文摘要
本發(fā)明提供了一種用于治療糖尿病腎病的黃蜀葵提取物、制備方法及用途；本發(fā)明申請(qǐng)?zhí)峁┝它S蜀葵用于治療Ⅱ型糖尿病和糖尿病腎病活性部位，為開發(fā)新的劑型改善或改變給藥途徑創(chuàng)造了條件。
文檔編號(hào)A61P3/10GK103239490SQ201310169010
公開日2013年8月14日 申請(qǐng)日期2013年5月9日 優(yōu)先權(quán)日2013年5月9日
發(fā)明者楊憲, 楊水平, 張雪, 余曉東, 蘭作平, 況剛, 何興國(guó), 和七一 申請(qǐng)人:重慶師范大學(xué)