克力托辛在制備增敏劑中的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供克力托辛在制備逆轉(zhuǎn)腫瘤TRAIL耐藥性的增敏劑中的應(yīng)用，該克力托辛分子式為C9H13N5O6，分子量287。所述藥物由clitocine與制劑允許的藥物賦形劑或載體組成。本發(fā)明提供的clitocine對(duì)多種人的以及小鼠的肝癌細(xì)胞、結(jié)腸癌和乳腺癌細(xì)胞都有較強(qiáng)的TRAIL增敏效果，能夠在較低劑量下有效增加腫瘤細(xì)胞對(duì)TRAIL的敏感性，并以協(xié)同作用的方式誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，是一種廣譜的有效的TRAIL增敏劑，為TRAIL抗腫瘤藥物的安全、廣泛應(yīng)用提供了保障。
【專利說明】克力托辛在制備增敏劑中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬制藥【技術(shù)領(lǐng)域】，涉及克力托辛在制備逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞對(duì)TRAIL耐藥性的增敏劑中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]TRAIL (TNF-related apoptosis-1nducing ligand)是腫瘤壞死因子超家族的一個(gè)成員，由于能夠特異性地誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，自被發(fā)現(xiàn)以來研究人員就將其作為一個(gè)選擇性抗腫瘤藥物進(jìn)行著廣泛的研究。近期，以TRAIL為主體的腫瘤治療正在進(jìn)行I期和II期臨床試驗(yàn)(WWW.clinicaltrails.gov)。雖然TRAIL在臨床前試驗(yàn)中表現(xiàn)了良好的選擇特異性和較低的細(xì)胞毒性，TRAIL在腫瘤臨床治療中的療效非常有限。究其原因，就是腫瘤細(xì)胞特別是轉(zhuǎn)移性腫瘤細(xì)胞對(duì)TRAIL產(chǎn)生了耐藥性。已有的研究表明，腫瘤細(xì)胞對(duì)TRAIL的耐藥性的分子機(jī)制非常復(fù)雜。
[0003]因此，尋找新型有效的TRAIL增敏劑與TRAIL協(xié)同作用以治療腫瘤具備了廣泛的應(yīng)用前景。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是提供克力托辛(clitocine)在制備逆轉(zhuǎn)腫瘤TRAIL耐藥性的增敏劑中的應(yīng)用，該clitoci ne是從高等真菌大白樁燕菌Ueucopeixillus giganteus)子實(shí)體中分離所得，分子式為C9H13N5O6,分子量287。所述藥物由clitocine與制劑允許的藥物賦形劑或載體組成。本發(fā)明所述的高等真菌大白樁燕菌屬白蘑科，夏秋季于草原上單生或群生，有時(shí)生于林中草地上。分布于河北、內(nèi)蒙古、吉林、遼寧、山西、黑龍江、青海、新疆等地。所述腫瘤主要包括肝癌、結(jié)腸癌和乳腺癌。
[0005]本發(fā)明提供的藥物，其制劑形式主要包括液體制劑、顆粒劑、片劑、沖劑、軟膠丸、軟膠囊、滴丸劑或注射劑。
[0006]本發(fā)明提供的藥物，制劑的給藥形式主要包括口服給藥或注射給藥。
[0007]本發(fā)明提供的clitocine對(duì)多種人的以及小鼠的肝癌細(xì)胞、結(jié)腸癌和乳腺癌細(xì)胞都有較強(qiáng)的TRAIL增敏效果。表明clitocine是一廣譜的有效的TRAIL增敏劑。目前臨床上缺乏能有效逆轉(zhuǎn)腫瘤對(duì)TRAIL耐藥性的藥物，因此clitocine具有很好的應(yīng)用前景。本發(fā)明Clitocine能夠在較低劑量下有效增加腫瘤細(xì)胞對(duì)TRAIL的敏感性，并以協(xié)同作用的方式誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。因此clitocine具有很好的逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞對(duì)TRAIL耐藥性的應(yīng)用前景，為TRAIL抗腫瘤藥物的安全、廣泛應(yīng)用提供了保障。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0008]圖1是clitocine的液相色譜分析。
[0009]圖2 (A、B)是clitocine與TRAIL協(xié)同作用有效抑制人肝癌細(xì)胞H印G2的體外生長(zhǎng)。[0010]圖3 (A、B)是clitocine與TRAIL協(xié)同作用有效抑制人乳腺癌細(xì)胞MCF-7的體外生長(zhǎng)。
[0011]圖4(A、B)是clitocine與TRAIL協(xié)同作用有效抑制人結(jié)腸癌細(xì)胞SW620的體外生長(zhǎng)。
[0012]圖5(A、B)是clitocine與TRAIL協(xié)同作用有效抑制人結(jié)腸癌細(xì)胞LS411N的體外生長(zhǎng)。
[0013]圖6(A、B)是clitocine與TRAIL協(xié)同作用有效抑制人結(jié)腸癌細(xì)胞HCT116的體外生長(zhǎng)。
【具體實(shí)施方式】
[0014]以下將結(jié)合具體實(shí)施例與附圖詳細(xì)說明本發(fā)明，這些實(shí)例僅用于說明目的，而不用于限制本發(fā)明范圍。
[0015]實(shí)施例1:從新鮮大白樁菇菌子實(shí)體提取分離純化抗腫瘤活性化合物及其結(jié)構(gòu)鑒定
1.提取和純化:將原料新鮮大白樁菇菌子實(shí)體(2.7kg)真空冷凍干燥，粉碎機(jī)粉碎，所得340g菌粉浸于1.5L 95%(v/v)酒精中，其間更換新鮮溶劑一次，合并兩次浸提液，減壓濃縮得酒精浸膏(25.7g)，浸膏經(jīng)乙酸乙酯萃取，減壓濃縮得乙酸乙酯浸膏(15.7 g)。取15g乙酸乙酯浸膏上硅膠柱，CH2Cl2/MeOH (10:0- 0:10)梯度洗脫，收集細(xì)胞篩選有活性的洗脫峰(6.5g)，然后上反相株 RP-18 (0DS, 50 mm, Φ25X420 mm),Me0H/H20 (1:9)洗脫，細(xì)胞篩選有活性的部分再經(jīng)過反相株`RP-C8制備[5 mm ；Φ20Χ250 mm ；Me0H/H20 (5:95) ；8 ml/min],得到目的化合物clitocine (815mg)。其液相色譜分析圖參見附圖1，在洗脫時(shí)間9.0分時(shí)出現(xiàn)單一峰即為clitocine。
[0016]2.結(jié)構(gòu)鑒定:核磁共振儀(IN0VA-400),質(zhì)譜儀(Bruker Esquire 3000 plus)
3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果:clitocine,分子式為C9H13N5O6, ES1-MS 287。其一維的二維的核磁數(shù)據(jù)列于表1。根據(jù)表1數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)比較所得clitocine的化學(xué)結(jié)構(gòu):
【權(quán)利要求】
1.一種克力托辛在制備逆轉(zhuǎn)腫瘤TRAIL耐藥性的增敏劑中的應(yīng)用，所述克力托辛的分子式為C9H13N5O6，分子量287，其特征在于，所述藥物由克力托辛與制劑允許的藥物賦形劑或載體制成，所述腫瘤為肝癌、結(jié)腸或乳腺癌。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種克力托辛在制備逆轉(zhuǎn)腫瘤TRAIL耐藥性的增敏劑中的應(yīng)用，其特征在于， 所述藥物的制劑形式選用液體制劑、固體制劑或膠囊劑。
【文檔編號(hào)】A61K31/7064GK103520195SQ201310230334
【公開日】2014年1月22日 申請(qǐng)日期:2013年6月11日 優(yōu)先權(quán)日:2013年6月11日
【發(fā)明者】孫建國(guó), 劉非燕, 吳平 申請(qǐng)人:浙江大學(xué)