直立百部非生物堿提取物及單體在制備腫瘤藥物中的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于直立百部非生物堿提取物、其制備方法及二苯乙烯類化合物逆轉(zhuǎn)腫瘤耐藥的新用途。該提取物為富含非生物堿成分，從該提取物中能夠分離出五種單體化合物，這五種單體化合物均為二苯乙烯類化合物，采用耐藥逆轉(zhuǎn)倍數(shù)測定實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了其逆轉(zhuǎn)腫瘤耐藥的活性。結(jié)果表明，直立百部非生物堿提取物及五種二苯乙烯類化合物具有顯著的逆轉(zhuǎn)腫瘤耐藥的作用，有望開發(fā)為逆轉(zhuǎn)腫瘤耐藥的藥物應(yīng)用于臨床。
【專利說明】直立百部非生物堿提取物及單體在制備腫瘤藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】:
[0001]本發(fā)明屬于直立百部非生物堿提取物及二苯乙烯類化合物逆轉(zhuǎn)腫瘤耐藥的新用途，具體涉及五種二苯乙烯類化合物在制備逆轉(zhuǎn)腫瘤耐藥藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】:
[0002]化療是臨床治療惡性腫瘤的主要手段。腫瘤細(xì)胞對抗腫瘤藥物產(chǎn)生的多藥耐藥性(Multidrug resistance,MDR)已成為腫瘤化療失敗的主要原因，尋找高效低毒的多藥耐藥逆轉(zhuǎn)劑一直是抗腫瘤藥物研究的熱點(diǎn)。
[0003]直立百部Stemona sessilifolia(Miq.)Miq.為百部科百部屬植物，是《中華人民共和國藥典》所收載的中藥百部的3個品種之一。直立百部總生物堿含量極低，約0.26%-2.1%，且不穩(wěn)定。藥理作用表現(xiàn)為殺蟲、止咳和抗乙酰膽堿酯酶活性。雖有文獻(xiàn)報道其根提取物、百部葉堿的逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞對長春堿耐藥活性，但百部葉堿的所需量遠(yuǎn)高于粗提物，即單體生物堿的生物活性不及根提取物。提示逆轉(zhuǎn)耐藥的活性成分不僅僅是生物堿成分，我們發(fā)現(xiàn)其主要藥效物質(zhì)正是其主要非生物堿成分二苯乙烯類成分。
[0004]二苯乙烯(sti Ibenoids)類化合物除具有抗老年癡呆、抗病原微生物、預(yù)防心臟病等多種重要的生物學(xué)功能外，還對多種腫瘤細(xì)胞有顯著的抑制作用。而隨著對藥物作用靶點(diǎn)的研究不斷深入，二苯乙烯類化合物在治療惡性腫瘤方面取得了進(jìn)一步的進(jìn)展。如有研究證實(shí)白藜蘆醇能通過減少P-gp基因表達(dá)產(chǎn)物，逆轉(zhuǎn)腫瘤的多藥耐藥性，最終與抗腫瘤藥物協(xié)同高效地抑制惡性腫瘤細(xì)胞生長。
[0005]目前已報道的直 立百部中有32個二苯乙烯類化合物，按結(jié)構(gòu)特征可分為四類，分別是1，2- 二苯乙烯衍生物(2個)，I, 2- 二苯乙烷衍生物(12個)，二氫菲衍生物(4個)和苯基苯并呋喃衍生物(11個)，其中我們獲得了五種單體化合物，目前為止，這些單體化合物的逆轉(zhuǎn)腫瘤耐藥活性還未見文獻(xiàn)報道。

【發(fā)明內(nèi)容】
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[0006]本發(fā)明提供了直立百部非生物堿提取物及所含二苯乙烯類化合物對腫瘤耐藥的逆轉(zhuǎn)活性，旨在將二苯乙烯類化合物再研究開發(fā)得到較好的逆轉(zhuǎn)腫瘤耐藥的新型藥物。
[0007]一種直立百部非生物堿提取物，其特征在于:該提取物為富含非生物堿成分，從該提取物中能夠分離出五種單體化合物，這五種單體化合物均為二苯乙烯類化合物，它們分別是:
A.2-(3, 5- 二甲氧基-2，4- 二甲基苯基)-4-羥基苯并呋喃；B.2-(3-羥基-5-甲氧基苯基)-4-羥基苯并呋喃；C.2-(3-羥基-5-甲氧基-2-甲基苯基)-4-羥基苯并呋喃；D.2, 4- 二羥基_ 二苯乙?。籈.2-甲氧基_3_ (5-甲氧基-3-羥基_苯乙基)苯酌.;它們的結(jié)構(gòu)式分別為:
【權(quán)利要求】
1.一種直立百部非生物堿提取物，其特征在于:該提取物為富含非生物堿成分，從該提取物中能夠分離出多種單體化合物，這五種單體化合物均為二苯乙烯類化合物，它們分別是: A:2-(3, 5- 二甲氧基-2，4- 二甲基苯基)-4-羥基苯并呋喃；B:2-(3-羥基-5-甲氧基苯基)-4-羥基苯并呋喃；C:2-(3-羥基-5-甲氧基-2-甲基苯基)-4-羥基苯并呋喃；D:2，4- 二羥基-二苯乙烯；E:2-甲氧基-3-(5-甲氧基-3-羥基-苯乙基)苯酚；它們的結(jié)構(gòu)式分別為:
2.一種制備如權(quán)利要求1所述直立百部非生物堿提取物的方法，其特征在于:取直立百部藥材,用60%乙醇回流提取2~3次，每次0.5~2小時，回收乙醇，得浸膏；將浸膏分散于水中，石油醚脫脂，二氯甲烷萃取；再將二氯甲烷提取液用3%鹽酸溶液萃取，得二氯甲烷層，揮干即為富含非生物堿成分的提取物浸膏；該浸膏經(jīng)過反復(fù)硅膠色譜、SephadexLH-20、ODS及制備液相分離手段，并結(jié)合理化性質(zhì)和現(xiàn)代波譜學(xué)手段從中分離鑒定出單體化合物，主要為二苯乙烯類化合物。
3.—種如權(quán)利要求1所述直立百部非生物堿提取物及所含二苯乙烯類化合物在制備逆轉(zhuǎn)耐藥腫瘤藥物中的應(yīng)用，其特征在于:從該提取物中分離出的五種二苯乙烯類化合物在制備逆轉(zhuǎn)腫瘤耐藥物中的應(yīng)用。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的直立百部非生物堿提取物及所含二苯乙烯類化合物在制備逆轉(zhuǎn)耐藥腫瘤藥物中的應(yīng)用，其特征在于:該藥物對人乳腺癌耐藥細(xì)胞的抑制活性，表明直立百部非生物堿提取物及五種單體化合物均具有顯著的逆轉(zhuǎn)腫瘤耐藥作用。
【文檔編號】A61K31/09GK103467421SQ201310421700
【公開日】2013年12月25日 申請日期:2013年9月16日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月16日
【發(fā)明者】趙慶春, 馬陽妹, 韓璐, 張喬, 史國兵 申請人:趙慶春