意大利牛舌草活性部位在制備抗氧化藥物、化妝品和保健品中的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及植物提取物在具有抗氧化作用的藥物、化妝品和保健品領(lǐng)域中的應(yīng)用，公開了一種意大利牛舌草活性部位在具有抗氧化作用藥物、化妝品和保健品中的應(yīng)用。這種活性部位的制備方法為取意大利牛舌草全草干燥粉末，以乙醇提取，濾液合并，減壓回收溶劑，得到粗提物；粗提物經(jīng)石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，萃取物蒸干，得到活性部位。這種活性部位，是一種天然的植物抗氧化劑，對(duì)人體無副作用，在抗氧化領(lǐng)域有應(yīng)用潛能。
【專利說明】意大利牛舌草活性部位在制備抗氧化藥物、化妝品和保健品中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及植物提取物、藥品、保健品和化妝品領(lǐng)域，具體為意大利牛舌草活性部位在具有抗氧化藥物、化妝品和保健品領(lǐng)域中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]抗氧化劑(Antioxidants)是阻止氧氣不良影響的物質(zhì)。它是一類能幫助捕獲并中和自由基，從而祛除自由基對(duì)人體損害的一類物質(zhì)。人體的抗氧化劑有自身合成的，也有由食物供給的。所有水果和蔬果中都含有極高的天然抗氧化劑，如維生素A、C、E、P、多酚等。竹葉中提取的竹葉黃酮就是一種優(yōu)質(zhì)的天然抗氧化劑，茶葉中也含有天然抗氧化劑，如多酚等。研究表明水果和蔬菜中的天然抗氧化劑具有保護(hù)效果。例如維生素E和β —胡蘿卜素可以保護(hù)細(xì)胞膜；維生素C可以排出細(xì)胞內(nèi)的自由基，等等。天然抗氧化劑可以幫助人類預(yù)防心臟病和癌癥等多種疾病，并能增進(jìn)腦力，延緩衰老。我國(guó)臺(tái)灣學(xué)者對(duì)195種中草藥的抗氧化性能進(jìn)行系統(tǒng)篩選和評(píng)價(jià)，發(fā)現(xiàn)幾乎一半的中草藥表現(xiàn)出抗氧化作用，其中22種中草藥乙醇提取物抗氧化能力強(qiáng)于等重量生育酚。
[0003]以天然抗氧化劑取代合成抗氧化劑是藥品、化妝品和保健品行業(yè)的發(fā)展趨勢(shì)，天然植物是一種極有潛力的天然抗氧化劑資源，從天然植物中尋找新的清除體內(nèi)自由基的抗氧化劑也將是現(xiàn)代醫(yī)藥、保健行業(yè)的發(fā)展方向，因?yàn)樯矬w內(nèi)或食物中的脂類的氧化產(chǎn)物可能是許多疾病的誘因，而從天然藥物中分離出來的許多抗氧化成分都有治療作用。從天然植物中篩選和開發(fā)抗氧化作用確切、安全無毒的新品種或分離提取其有效抗氧化成分，已是當(dāng)務(wù)之急。天然植物抗氧化作用有很大可挖掘的潛能，加之運(yùn)用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)，結(jié)合現(xiàn)代中醫(yī)藥學(xué)理論，盡早創(chuàng)立中西醫(yī)結(jié)合的抗氧化理論體系，定將有益于天然植物抗氧化劑的開發(fā)和應(yīng)用。另外，天然抗氧化劑尚需在有效成分的抗氧化機(jī)理、協(xié)同作用、構(gòu)效關(guān)系和分子設(shè)計(jì)等方面開展深入研究，為中草藥開發(fā)抗氧化劑的應(yīng)用奠定理論基礎(chǔ)，同時(shí)要加強(qiáng)天然植物原料提取、分離純化有效成分工藝研究，以盡快實(shí)現(xiàn)天然抗氧化劑的產(chǎn)業(yè)化。
[0004]意大利牛舌草(Anchusa italica Retz.)為紫草科植物，生長(zhǎng)于海拔210米至3，000米的地區(qū)，國(guó)外分布于伊朗、前蘇聯(lián)等國(guó)及歐洲等地，此種藥材多由巴基斯坦進(jìn)口，現(xiàn)在新疆南疆喀什地區(qū)大量人工栽培。維吾爾醫(yī)藥中將意大利牛舌草的地上部分入藥稱牛舌草，維藥名高孜萬，是維吾爾醫(yī)治療心腦血管疾病的常用藥材之一。牛舌草藥材具有生濕生熱，調(diào)節(jié)異常黑膽質(zhì)，生濕補(bǔ)腦，祛寒補(bǔ)心，爽心悅志，潤(rùn)燥消炎，止咳平喘等功效。主治干寒性或黑肥質(zhì)性疾病，如平性腦虛，寒性心虛、心悸，抑郁癥，干性腦膜炎、肺炎及結(jié)核疾病，寒性咳嗽、感冒、氣喘等。全草經(jīng)預(yù)試有皂苷，黃酮類，氨基酸，揮發(fā)油，黏液質(zhì)，糖類和微量生物堿反應(yīng)。[0005]牛舌草屬的植物在土耳其、印度和約旦民間用于治療創(chuàng)傷，胃潰瘍和尿路感染等疾患。土耳其的學(xué)者(Helvetica Chimica Acta, 93:457,2010)研究了蔚藍(lán)牛舌草(Anchusaazurea)的化學(xué)成分，從中分離鑒定了 11個(gè)化學(xué)成分，主要為三萜皂苷，黃酮類，脂肪酸和酹酸類化合物，并且發(fā)現(xiàn)其正丁醇萃取部位及一個(gè)黃酮類化合物quercetin3-( a -rhamnopyranosyl- β -glucopyranoside 和一個(gè)酌 酸類化合物 rosmarinic acid 具有很強(qiáng)的抗DPPH(2, 2-diphenyl-l-picrylhydrazyl)自由基的作用。
[0006]綜合現(xiàn)有文獻(xiàn)資料，未發(fā)現(xiàn)意大利牛舌草及其所含成分具有抗氧化作用的文獻(xiàn)和專利報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明旨在提供一種意大利牛舌草活性部位的用途，將該意大利牛舌草活性部位應(yīng)用于制備具有抗氧化效果的藥物、化妝品和保健品。
[0008]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是在于尋找開發(fā)高效且對(duì)人體無副作用或副作用小的天然植物抗氧化劑。本發(fā)明提供了一種在抗氧化領(lǐng)域有應(yīng)用潛能的意大利牛舌草活性部位。
[0009]一種意大利牛舌草活性部位在制備具有抗氧化作用的藥物、化妝品和保健品領(lǐng)域中的應(yīng)用。
[0010]所述的意大利牛舌草活性部位的提取方法，步驟包括:
[0011](I)取干燥的意大利牛舌草全草粉末，加入乙醇溶液冷浸后提取2~5次，取濾液；
[0012]提取方法為常溫(10~30°C )下用體積濃度為30%~95%乙醇溶液(優(yōu)選為60%~95% )冷浸、超聲提取10~60分鐘；每次提取時(shí)，乙醇溶液與意大利牛舌草粉末的用量比為5~15ml/g; [0013](2)合并濾液，依次以石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，各萃取物蒸干，即得。
[0014]本發(fā)明的技術(shù)方案為，取意大利牛舌草全草，干燥、粉碎成粗粉，取干燥粉末，以乙醇提取，濾液合并，減壓回收溶劑，得到意大利牛舌草全草粗提物；意大利牛舌草全草粗提物依次以石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，其中乙酸乙酯和正丁醇部位具有良好的抗氧化作用。
[0015]通過上述方法得到的意大利牛舌草活性部位，是一種天然的植物抗氧化劑，對(duì)人體無副作用，在抗氧化領(lǐng)域有應(yīng)用潛能。這種意大利牛舌草活性部位可用于制備具有抗氧化效果的藥物、化妝品和保健品。
【具體實(shí)施方式】
[0016]實(shí)施例1
[0017]意大利牛舌草全草干燥粉末20g，室溫下(10~30°C )以體積濃度為30%乙醇200ml冷浸、超聲提取2次，每次IOmin (500W)，取濾液合并，減壓回收溶劑至干，取提取物適量，配制成0.5mg/ml溶液備用，測(cè)定其清除DPPH自由基能力和彈性蛋白酶抑制作用，以便與后續(xù)制得的意大利牛舌草活性部位的活性作比較。
[0018]結(jié)果:意大利牛舌草全草粗提物在50 μ g/ml濃度時(shí)DPPH自由基清除率為9%，在lmg/ml濃度時(shí)對(duì)彈性蛋白酶抑制率為2%。
[0019]實(shí)施例2
[0020]意大利牛舌草全草干燥粉末20g，室溫下以體積濃度為60%乙醇200ml冷浸、超聲提取2次，每次30min (500W)，取濾液合并，減壓回收溶劑至干，取提取物適量，配制成0.5mg/ml溶液備用，測(cè)定其清除DPPH自由基能力，以便與后續(xù)制得的意大利牛舌草全草活性部位的活性作比較。
[0021]結(jié)果:意大利牛舌草全草粗提物在50 μ g/ml濃度時(shí)DPPH自由基清除率為14%，在lmg/ml濃度時(shí)對(duì)彈性蛋白酶抑制率為4%。
[0022]實(shí)施例3
[0023]意大利牛舌草全草干燥粉末20g，室溫下以體積濃度為70%乙醇200ml冷浸、超聲提取2次，每次30min (500W)，取濾液合并，減壓回收溶劑至干，取提取物適量，配制成0.5mg/ml溶液備用，測(cè)定其清除DPPH自由基能力，以便與后續(xù)制得的意大利牛舌草全草活性部位的活性作比較。
[0024]結(jié)果:意大利牛舌草全草粗提物在50 μ g/ml濃度時(shí)DPPH自由基清除率為25%，在lmg/ml濃度時(shí)對(duì)彈性蛋白酶抑制率為12%。
[0025]實(shí)施例4
[0026]意大利牛舌草全草干燥粉末20g，室溫下以體積濃度為75%乙醇200ml冷浸、超聲提取2次，每次30min (500W)，取濾液合并，減壓回收溶劑至干，取提取物適量，配制成0.5mg/ml溶液備用，測(cè)定其清除DPPH自由基能力，以便與后續(xù)制得的意大利牛舌草全草活性部位的活性作比較。
[0027]結(jié)果:意大利牛舌草全草粗提物在50 μ g/ml濃度時(shí)DPPH自由基清除率為29%，在lmg/ml濃度時(shí)對(duì)彈性蛋白酶抑制率為14%。
[0028]實(shí)施例5
[0029]意大利牛舌草全草干燥粉末20g，室溫下(10~30°C )以體積濃度為95%乙醇200ml冷浸、超聲提取2次，每次30min (500W)，取濾液合并，減壓回收溶劑至干，取提取物適量，配制成0.5mg/ml溶液備用，測(cè)定其清除DPPH自由基能力，以便與后續(xù)制得的意大利牛舌草全草活性部位的活性作比較。
[0030]結(jié)果:意大利牛舌草全草粗提物在50 μ g/ml濃度時(shí)DPPH自由基清除率為41%，在lmg/ml濃度時(shí)對(duì)彈性蛋白酶抑制率為26%。
[0031]實(shí)施例6活性部位富集
[0032]取意大利牛舌草全草干燥粉末500g，室溫下(10~30°C )以體積濃度為95%乙醇5000ml冷浸、超聲提取2次，每次30min(500W)，取濾液合并，減壓回收溶劑至無醇味；依次以石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，分別收集各萃取液、蒸干，分別得到石油醚部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位，并配制成不同濃度的溶液備用。
[0033]實(shí)施例7清除DPPH自由基能力測(cè)試
[0034]在藥物、化妝品和保健品領(lǐng)域，通?？寡趸阅艿膬?yōu)劣是用清除DPPH自由基能力測(cè)試來表征的，清除DPPH自由基能力測(cè)試原理如下:
[0035]I, 1- 二苯基-2-三硝基苯月井[I, 1-Diphenyl-2-pi cry Ihydrazy I radical2,2-Diphenyl-l-(2,4,6-trinitrophenyl)hydrazyl, DPPH]是一種穩(wěn)定的氮中心有機(jī)自由基。DPPH法于1958年被提出，廣泛用于地量測(cè)定生物試樣、分類物質(zhì)和食品的抗氧化能力。此法是根據(jù)DPPH自由基有單電子，在517nm處有一強(qiáng)吸收，其醇溶液呈紫色的特性。當(dāng)有自由基清除劑存在時(shí)，由于與其單電子配對(duì)而使其吸收逐漸消失，其褪色程度與其接受的電子數(shù)量成定量關(guān)系，因而可用分光光度計(jì)進(jìn)行快速的定量分析，來檢測(cè)自由基清除情況，從而評(píng)價(jià)樣品的抗氧化能力。其能力用清除率來表示，清除率越大，則表明其抗氧化能力越強(qiáng)。
[0036]試驗(yàn)方法:
[0037]I)將不同稀釋度的待測(cè)樣品溶液2ml加入試管中；
[0038]2)加入 2ml76 μ mol/L DPPH 乙醇溶液，混勻；
[0039]3)室溫下避光在黑暗處反應(yīng)30min ；
[0040]4)在525nm處測(cè)定吸光度Abs ;每個(gè)濃度重復(fù)三次測(cè)試以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，最后取平均值作為擬合數(shù)據(jù)。
[0041]清除率I(%) = [1-(T-TO)/(C-CO)] X 100%
[0042]式中:
[0043]TO:2ml水或DMSO加2ml DPPH溶液的吸光度；
[0044]T: 2ml樣品液加2ml DPPH溶液的吸光度；
[0045]C:2ml樣品液加2ml95%乙醇的吸光度；
[0046]CO:2ml水或DMSO加2ml95%乙醇的吸光度；
[0047]按照上面公式計(jì)算清除率，清除率越大抗氧化能力越強(qiáng)。結(jié)果如表1。
[0048]表1意大利牛舌草各部位清除DPPH自由基活性測(cè)試結(jié)果
【權(quán)利要求】
1.意大利牛舌草活性部位在制備具有抗氧化作用藥物、化妝品和保健品中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述意大利牛舌草活性部位的應(yīng)用，其特征在于，所述的意大利牛舌草活性部位的制備方法包括以下步驟: (1)取干燥的意大利牛舌草全草粉末，加入乙醇溶液冷浸后提取2~5次，取濾液； (2)合并濾液，去除乙醇后用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇依次萃取，萃取物蒸干，即得。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述意大利牛舌草活性部位的應(yīng)用，其特征在于，步驟(I)中，所述乙醇溶液的體積濃度為30%~95%、超聲提取10~60分鐘。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述意大利牛舌草活性部位的應(yīng)用，其特征在于，步驟(I)中，所述乙醇溶液的體積濃度為60%~95%。
5.根據(jù)權(quán)利要求2任一項(xiàng)所述意大利牛舌草活性部位的應(yīng)用，其特征在于，步驟(I)中，每次提取時(shí)，乙醇溶液與意大利牛舌草全草粉末的用量比為5~15ml/g。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述意大利牛舌草全草活性部位，其特征在于，步驟(2)中，所述部位為乙酸乙酯部位和正丁醇部位。
【文檔編號(hào)】A61K8/97GK103463163SQ201310433113
【公開日】2013年12月25日 申請(qǐng)日期:2013年9月23日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月23日
【發(fā)明者】王琪, 謝周健, 戴溈 申請(qǐng)人:王琪