Tc的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于分子影像探針領域，具體涉及一種基于葡聚糖的雙模態(tài)納米影像藥物Dex-Rho-99mTc的制備方法及其在影像診斷方面的應用。通式為：Rho-Dex-PEG-DTPA-99mTc，其中Dex表示分子量為10k-100k的葡聚糖；PEG為分子量為1k-10k的聚乙二醇；Rho為熒光基團羅丹明，DTPA為影像核素的螯合劑，99mTc為用于SPECT成像的放射性同位素99m锝。本發(fā)明中在高分子材料葡聚糖表面修飾一定數目的氨基，將聚乙二醇、熒光基團和SPECT成像基團通過氨基連接在葡聚糖載體上，最后標記放射性核素锝[99mTc]。該藥物具有生物相容性好、制備方法簡單、使用安全方便、可用于雙模態(tài)成像的優(yōu)點。所述影像藥物，在癌癥早期診斷，影像指導下遞藥，無創(chuàng)影像學療效評估等生物醫(yī)學領域具有廣泛的應用前景。
【專利說明】基于葡聚糖的雙模態(tài)納米影像藥物-Dex-Rho-99mTc

【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于分子影像探針領域，涉及影像藥物，具體涉及了一種基于葡聚糖載體 的雙模態(tài)納米影像藥物的制備方法及其在影像診斷中的應用。

【背景技術】
[0002] 腫瘤是威脅人類健康的重大疾病之一。現階段導致癌癥高死亡率的一個重要原因 在于腫瘤診斷的滯后性。對腫瘤進行及時準確診斷并采取相應治療措施對提高癌癥病人的 生存率和改善其生活質量都有重要的科研和臨床意義。
[0003] 單光子發(fā)射計算機斷層成像（SPECT)是通過探測進入體內特定組織器官的放射 性藥物所發(fā)射Y射線而成像的技術。該技術具有靈敏度高、成像迅速、所需核素易獲得、標 記簡單等優(yōu)點，被廣泛應用于臨床核醫(yī)學成像。光學成像作為新興分子影像技術具有靈敏 度高，無電離輻射，操作簡便，運行成本低等優(yōu)點。多種光學影像技術已運用于疾病診斷和 療效評估。例如光學相干斷層掃描技術（optical coherence tomography, 0CT)已運用于 皮膚癌的診斷。SPECT和光學成像相結合的雙模態(tài)影像技術可以克服單一成像技術固有缺 點，通過不同影像模式間融合、比較，得到較單一成像模式更為豐富和準確的病灶信息。
[0004] 納米影像探針在生物醫(yī)學、電子學等領域具有廣泛的應用潛力而受到很多研究者 的廣泛關注。通過控制納米探針的組成、形狀和尺寸，可以滿足不同的診斷需求。在腫瘤 靶向診斷和治療中，納米尺度效應是實現納米探針/藥物對腫瘤被動靶向性的重要原因之 一。與正常血管組織相比，腫瘤的新生血管組織往往呈現出不成熟性，高滲透性和大孔徑等 特征。研究表明腫瘤新生血管的管壁孔徑上限可以達到400nm-2 μ m，而正常組織血管壁孔 徑小于8nm。因此直徑在10 - IOOnm的納米微粒往往可以選擇性的穿過腫瘤新生血管進入 腫瘤組織，從而達到納米尺度效應而引起的腫瘤被動靶向性。
[0005] 在某些腦部疾病如腦腫瘤、腦中風、帕金森、阿爾茨海默病中，病灶部位血腦屏障 被不同程度損傷，會顯示出通透性增加的特點。識別病灶部位血腦屏障通透性的改變及其 程度，對用于判斷腦部疾病嚴重程度以及采取合適的治療手段具有重要意義。目前，臨床缺 乏可以識別和刻畫血腦屏障通透性改變部位和程度的藥物。研制不同粒徑納米影像藥物， 通過追蹤影像藥物入腦部位和入腦量可以實現血腦屏障完整性的評估。
[0006] 多糖類化合物葡聚糖（Dextran)具有水溶性好，無毒和生物可降解性等優(yōu)點，并已 經被FDA批準作為生物安全材料"Generally recognized as safe, GRAS"用于醫(yī)藥，食品 添加劑等領域。葡聚糖被選為探針載體還具有可控分子量（5 - 2000kDa)，眾多可供修飾的 活性基團和價格合理等優(yōu)點。與正常組織血管相比，腫瘤新生血管具有不成熟，不規(guī)則和高 通透性等特點?；谄暇厶禽d體的大分子探針能夠利用腫瘤和正常血管間通透性差異實現 腫瘤被動祀向性（enhanced permeability and retention effect, EPR effect)。


【發(fā)明內容】

[0007] 本發(fā)明的目的在于提供一種新的影像藥物，尤其涉及一種基于葡聚糖的雙模態(tài)診 斷納米影像藥物及其制備方法和用途。
[0008] 本發(fā)明所述的基于葡聚糖的雙模態(tài)診斷納米影像藥物Dex-Rh0-99mTc的通式為：
[0009] Rho-Dex-PEG-DTPA-99mTc
[0010] 其中Dex為分子量為IOkDa-IOOkDa的葡聚糖；PEG為分子量為IkDa-IOkDa的聚 乙二醇；Rho為熒光影像基團羅丹明B，DTPA為影像核素的螯合劑二乙基三胺五乙酸，99mTc 為用于SPECT成像的放射性同位素99111锝。
[0011] 本發(fā)明所述的影像藥物的具體結構式為：
[0012]

【權利要求】
1. 一種基于葡聚糖的雙模態(tài)納米影像藥物-Dex-Rho-99mTc,其通式如下： Rho-Dex-PEG-DTPA-99mTc 通式中Dex表示載體材料葡聚糖（Dextran) ;PEG表示聚乙二醇；Rho表示突光影像基 團羅丹明B，DTPA表示放射性影像核素螯合劑二乙基三胺五乙酸，99mTc表示用于SPECT成像 的放射性同位素"-锝。
2. 按權利要求1所述的基于葡聚糖的雙模態(tài)納米影像藥物-Dex-Rho-99mTc,其特征在 于，所述的影像藥物的結構式為：
3. 如權利要求1所述的基于葡聚糖的雙模態(tài)納米影像藥物-Dex-Rho-99mTc,其特征在 于，所述的載體材料Dextran分子量為IOk-IOOk,所用PEG分子量為lk-10k。
4. 如權利要求1所述的基于葡聚糖的雙模態(tài)納米影像藥物-Dex-Rho-99mTc,其特征在 于，所述的載體材料Dextran分子量為20k，所用PEG分子量為2k。
5. 權利要求1的基于葡聚糖的雙模態(tài)納米影像藥物-Dex-Rho-99mTc的制備方法，其特 征在于，其包括步驟： 步驟1 :合成納米影像藥物載體材料Dex-NH2 將高分子載體材料Dextran溶于6M的NaOH溶液中，冰浴冷卻至(TC，加入氯代乙酸鈉； 60°C攪拌反應50min后，將反應液冷卻至室溫，滴加入甲醇中得白色絮狀沉淀Dex-COOH ;將 Dex-COOH溶于水中，滴加入2-乙氧基-1-乙氧碳?；?1，2-二氫喹啉（EEDQ)的DMF溶液； 將獲得的混合液滴加到乙二胺中，常溫攪拌4小時；旋蒸濃縮反應液至3mL，滴入甲醇中得 白色絮狀產物Dex-NH 2 ;將Dex-NH2水溶液用截留分子量為3kDa的超濾管超濾純化3次，除 去反應原料和副產物，濃縮液冷凍干燥得白色絮狀物即載體材料Dex-NH 2 ; 步驟2 :標記PEG和熒光基團羅丹明 載體材料Dex-NH2溶于0. IM HEPES緩沖溶液中，溶解并調節(jié)pH至8. 3 ;滴入N-羥基琥 珀酰亞胺活化的PEG，室溫攪拌反應6小時，反應液用截留分子量為3kDa的超濾管超濾純 化3次；濃縮液冷凍干燥得白色絮狀固體產物Dex-PEG ;將Dex-PEG溶解于0. IM HEPES緩 沖溶液中，滴入NHS活化的Rho-NHS的DMF溶液；室溫反應6小時后，用截留分子量為IOkDa 的超濾管超濾純化3次，濃縮液冷凍干燥得紅色絮狀固體產物Rho-Dex-PEG ; 步驟3 :標記SPECT成像基團DTPA-99niTc Rho-Dex-PEG溶于0. IM NaHCO3 (pH9. 5)溶液中，攪拌下，將DTPA分次加入，控制溶液 pH為9. 5 ;室溫攪拌反應12小時后,用超濾管超濾純化3次；濃縮液冷凍干燥得紅色絮狀固 體產物Rho-Dex-PEG-DTPA ;Rh〇-Dex-PEG-DTPA和氯化亞錫用0. IM HCl溶解，加入高锝酸鈉 (Na99mTcO4)的水溶液；60°C反應30min ;反應液用截留分子量為IOkDa的超濾管超濾純化3 次；濃縮液即為目標影像藥物Dex-Rh0-99mTc的溶液。
6. 權利要求1的雙模態(tài)納米影像藥物在制備腫瘤影像診斷制劑中的用途。
7. 權利要求1的雙模態(tài)納米影像藥物在制備用于腫瘤影像跟蹤療效評估制劑中的用 途。
8. 權利要求1的雙模態(tài)納米影像藥物在制備用于腫瘤腦血腦屏障完整性評價制劑中 的用途。
【文檔編號】A61K103/10GK104511030SQ201310460940
【公開日】2015年4月15日 申請日期:2013年9月29日 優(yōu)先權日:2013年9月29日
【發(fā)明者】李聰, 高西輝, 錢雋 申請人:復旦大學