一種大黃中有效成分的磁性提取富集方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種大黃中有效成分的磁性提取富集方法：大黃藥材或大黃固體制劑按照藥典進(jìn)行提取，制得大黃提取液，大黃提取液與介孔四氧化三鐵納米顆粒、離子液體加水配成富集混合液，每1230μL富集混合液中包括以下組分：大黃提取液20μL、納米介孔四氧化三鐵8～20mg、離子液體0.2～0.6mg，余量為水，pH值9～13；所述富集混合液裝入離心管，置于渦旋儀上渦旋10～30s，靜置后用磁鐵靠近離心管底部，將介孔四氧化三鐵納米顆粒聚集于離心管底部，棄去上層水溶液，得富集后的介孔四氧化三鐵納米顆粒，用含有質(zhì)量分?jǐn)?shù)1～4%乙酸的甲醇溶液洗脫，收集洗脫液，蒸干，制得富集的大黃浸膏；所述離子液體為溴化1-十二烷基-3-甲基咪唑、氯化1-十二烷基-3-甲基咪唑、1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸鹽或1-丁基-3-甲基咪唑聚苯乙烯磺酸鹽，優(yōu)選為氯化1-十二烷基-3-甲基咪唑。本發(fā)明方法富集速度快，富集效果好，重復(fù)性和再現(xiàn)性高。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種大黃中有效成分的磁性提取富集方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于天然藥物提取制備領(lǐng)域。它涉及一種中藥提取富集方法，具體地說(shuō)，它涉及由離子液包裹介孔四氧化三鐵納米材料作為吸附劑，提取、富集中藥大黃中有效成分的新方法。
【背景技術(shù)】
[0002]大黃是傳統(tǒng)瀉下類(lèi)中藥的代表，為歷版《中國(guó)藥典》和歷代醫(yī)家本草收載的常用中藥，來(lái)源于寥科植物藥用大黃、掌葉大黃或唐古特大黃的干燥根及根莖，具有瀉下攻積、逐瘀通經(jīng)、利濕退黃、清熱瀉火、涼血解毒之功效。大黃中含有多種有效成分，其中以蒽醌類(lèi)、二蒽酮類(lèi)、芪類(lèi)、鞣質(zhì)和多糖研究最多，以蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚等有效成分作為代表。其藥理作用主要有調(diào)節(jié)胃腸功能、保護(hù)心腦血管、抗炎、抗病原微生物、抗腫瘤、保肝及抗衰老等。
[0003]在分析化學(xué)中，樣品預(yù)處理的好壞直接影響分析結(jié)果的靈敏度和準(zhǔn)確度。目前，樣品分離富集最常用的方法仍是溶劑萃取法，而且多以甲醇或含鹵溶劑(諸如二氯甲烷、三氯甲烷)為主，這類(lèi)傳統(tǒng)的分離富集方法存在費(fèi)時(shí)、溶劑毒性大、用量多、環(huán)境污染嚴(yán)重等缺點(diǎn)。為提高分離富集效率，人們一直在探索新的分離富集技術(shù)。
[0004]目前較為先進(jìn)的中藥分離富集方法包括蒸餾法、頂空萃取法、固相微萃取法、超臨界流體萃取法、分子印跡技術(shù)、膜富集技術(shù)、分子蒸餾及其耦合技術(shù)以及磁性富集技術(shù)等。
[0005]磁性介孔材料，兼具磁性材料和介孔材料的雙重優(yōu)勢(shì)。如高吸附性、可磁分離性、高比表面積和孔徑均一，具有重大的研究意義和廣泛的應(yīng)用前景，深受廣大化學(xué)和材料工作者的青睞。因磁性介孔材料其優(yōu)越的性能，故而在污水處理、催化反應(yīng)、藥物控釋、生物分子的分離提純領(lǐng)域有廣泛的應(yīng)用。目前，磁性介孔材料在中藥及天然產(chǎn)物的分離富集領(lǐng)域尚未見(jiàn)報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的在于尋求一種相比以往富集方法更加快速高效的富集方法，用于提取富集天然產(chǎn)物中的活性成分。發(fā)明要點(diǎn)在于將磁性富集和離子液提取兩者巧妙結(jié)合，充分發(fā)揮了這兩種提取富集方式的優(yōu)點(diǎn)，用這一組合技術(shù)提取富集天然產(chǎn)物中的有效成分，可以取得顯著的效果。
[0007]本發(fā)明具體提供了一種以離子液包裹磁性納米材料作為吸附劑的磁性富集技術(shù)，用于富集大黃中有效成分。
[0008]本發(fā)明采用的技術(shù)方案是:
[0009]一種大黃中有效成分的磁性提取富集方法，其特征在于所述方法為:大黃藥材或大黃固體制劑按照藥典進(jìn)行提取，制得大黃提取液，大黃提取液與介孔四氧化三鐵納米顆粒、離子液體加水配成富集混合液，每1230 y L富集混合液中包括以下組分:大黃提取液20 V- L、納米介孔四氧化三鐵8·~20mg、離子液體0.2~0.6mg,余量為水,pH值9~13 ;所述富集混合液裝入離心管，置于渦旋儀上渦旋10~30s,靜置(通常靜置5~IOmin)后用磁鐵靠近離心管底部，將介孔四氧化三鐵納米顆粒聚集于離心管底部，棄去上層水溶液，得富集后的介孔四氧化三鐵納米顆粒，用含有質(zhì)量分?jǐn)?shù)I~4%乙酸的甲醇溶液洗脫，收集洗脫液，蒸干，制得富集的大黃浸膏；所述離子液體為溴化1-十二烷基-3-甲基咪唑、氯化1-十二烷基-3-甲基咪唑、1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸鹽或1-丁基-3-甲基咪唑聚苯乙烯磺酸鹽，優(yōu)選為氣化1_十二烷基_3_甲基咪唑。
[0010]進(jìn)一步，優(yōu)選每1230i! L富集混合液中包括以下組分:大黃提取液20iiL、納米介孔四氧化三鐵8mg、氯化1-十二烷基-3-甲基咪唑0.4mg，余量為水，pH值11。
[0011]所述洗脫優(yōu)選用含有質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%乙酸的甲醇溶液洗脫。更優(yōu)選用含有質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%乙酸的甲醇溶液洗脫三次,每次200 u L0
[0012]本發(fā)明所述大黃藥材或大黃固體制劑按照藥典2010版進(jìn)行提取，所述提取方法為:將大黃藥材或大黃固體制劑粉碎，取粉末(過(guò)四號(hào)篩)0.15g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加人甲醇25mL，稱(chēng)定重量，加熱回流I小時(shí)，放冷，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液5mL，置燒瓶中，揮去溶劑，加8%鹽酸溶液10mL，超聲處理2分鐘，再加三氯甲烷10mL，加熱回流I小時(shí)，放冷，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗滌容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷層，酸液再用三氯甲烷提取3次，每次10mL，合并三氯甲烷液，減壓回收溶劑至干，殘?jiān)蛹状际谷芙猓D(zhuǎn)移至IOmL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得大黃提取液。
[0013]所述離子液體優(yōu)選先加水配成10~60mg/mL的離子液體水溶液，用于配制富集混合液。配制時(shí)按照離子液體水溶液的濃度和富集混合液中離子液體的質(zhì)量，計(jì)算并量取所需離子液體水溶液的體積即可。
[0014]所述介孔四氧化三鐵納米顆?？梢韵燃铀⒎稚⒕鶆蚺涑?0~100mg/mL的介孔四氧化三鐵納米分散液，用于配制富集混合液。配制時(shí)按照介孔四氧化三鐵納米分散液的濃度和富集混合液中介孔四氧化三鐵納米顆粒的質(zhì)量，計(jì)算并量取介孔四氧化三鐵納米分散液的體積即可。
[0015]本發(fā)明富集混合液的pH值為9~13，優(yōu)選pH值為11。pH值可利用氫氧化鈉、鹽酸來(lái)進(jìn)行調(diào) 節(jié)。
[0016]本發(fā)明所述介孔四氧化三鐵納米顆粒可按以下方法制得:
[0017]將氯化亞鐵四水合物和氯化鐵按照三價(jià)鐵離子與二價(jià)鐵離子的物質(zhì)的量之比為3:2，加入IOOmL水中溶解，氮?dú)獗Ｗo(hù)下攪拌，制得鐵的物質(zhì)的量濃度為0.015mol/L的鐵酸鹽水溶液，并加入Ig的聚乙二醇4000乳化劑，所得混合溶液中緩慢加入濃度為0.3mol/L的氨水直至PH=Il.0，再經(jīng)氮?dú)獗Ｗo(hù)，水浴50°C下超聲30分鐘，再加熱至80°C，反應(yīng)I小時(shí)后，過(guò)濾，濾餅依次用乙醇、二次蒸餾水洗滌，直至洗滌液pH=7.0，最后在60°C真空干燥4小時(shí)即得介孔四氧化三鐵納米顆粒。
[0018]這是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法。
[0019]所述洗脫液優(yōu)選于80°C水浴鍋中揮發(fā)除去溶劑，制得富集的大黃浸膏。
[0020]制得的富集的大黃浸膏可用純甲醇50 L溶解，超聲2min，置于13000rpm離心儀中離心5min，取上層清液裝樣，超高效液相色譜(UPLC)進(jìn)樣分析。
[0021]所述的富集效果,通過(guò)Waters Acquity Uplc H-Class測(cè)定大黃中有效成分的含量來(lái)表征該富集方法的有效性。
[0022]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于:
[0023]1.首次采用了離子液包裹磁性介孔材料這一項(xiàng)新技術(shù)，用離子液對(duì)介孔四氧化三鐵納米粒子進(jìn)行修飾，使其具備優(yōu)越的分離富集性能，并且應(yīng)用在天然產(chǎn)物提取富集領(lǐng)域。所采用的新型綠色提取體系——離子液表面活性劑體系，尤其是采用長(zhǎng)鏈離子液——氯化1-十二烷基-3-甲基咪唑作為提取劑用于分離富集大黃有效成分時(shí)，與單一采用介孔四氧化三鐵納米材料相比，富集效果提高10~60多倍。與未采用離子液包裹的介孔材料相比，靈敏度提高20~60倍左右。
[0024]2.本方法富集速度快。本方法的富集環(huán)節(jié)用到磁鐵，在靠近磁鐵附近時(shí)，強(qiáng)大的磁場(chǎng)作用能使磁性納米顆粒迅速聚集，這樣就使得本發(fā)明所述的富集環(huán)節(jié)幾乎是瞬間即可完成，具有其他分離富集技術(shù)所無(wú)法比擬的高效和迅捷，遠(yuǎn)遠(yuǎn)勝過(guò)常規(guī)方法的富集效率。
[0025]3.本方法應(yīng)用范圍廣泛，無(wú)論是大黃的原料藥材還是大黃的藥物制劑，均能用本發(fā)明方法進(jìn)行分離富集。且本發(fā)明所述的測(cè)定大黃藥材和大黃制劑這兩個(gè)應(yīng)用亦屬首例。
[0026]4.無(wú)論是采用的離子液，還是四氧化三鐵介孔材料，它們的理化性質(zhì)均具備一系列優(yōu)異突出的特性:對(duì)人體無(wú)毒、不污染環(huán)境，熱穩(wěn)定性和化學(xué)穩(wěn)定性良好，不易燃。
[0027]5.本發(fā)明提供的實(shí)驗(yàn)操作步驟簡(jiǎn)潔明了，操作簡(jiǎn)單，操作環(huán)境安全，且富集效果高效顯著。
[0028]即本發(fā)明提供了一種新方法，該方法將離子液技術(shù)與磁性納米材料技術(shù)巧妙結(jié)合起來(lái)，能快速有效地富集天然產(chǎn)物中的有效成分。`【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0029]圖1本發(fā)明磁性提取富集方法的工藝流程圖。
[0030]圖2為考察不同pH下的富集效果柱狀圖。圖中，1、2、3、4、5分別代表大黃中不同的有效成分，分別為:1:蘆薈大黃素；2:大黃酸；3:大黃素；4:大黃酚；5:大黃素甲醚。
[0031]圖3為考察不同離子液種類(lèi)的富集效果柱狀圖。圖中，1、2、3、4、5分別代表大黃中不同的有效成分，分別為:蘆薈大黃素；2:大黃酸；3:大黃素；4:大黃酚；5:大黃素甲醚。字母A、B、C、D分別代表不同的離子液，分別為:A:溴化1-十二烷基-3-甲基咪唑；B:氯化1-十二烷基-3-甲基咪唑；C:1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸鹽；D:1-丁基-3-甲基咪唑聚苯乙烯磺酸鹽。
[0032]圖4為考察不同離子液加入量的富集效果折線(xiàn)圖。圖中，1、2、3、4、5分別代表大黃中不同的有效成分，分別為:蘆薈大黃素；2:大黃酸；3:大黃素；4:大黃酚；5:大黃素甲醚。
[0033]圖5為考察洗脫液中乙酸含量的富集效果折線(xiàn)圖。圖中，1、2、3、4、5分別代表大黃中不同的有效成分，分別為:蘆薈大黃素；2:大黃酸；3:大黃素；4:大黃酚；5:大黃素甲醚。
[0034]圖6為考察介孔四氧化三鐵加入量的富集效果折線(xiàn)圖。圖中，1、2、3、4、5分別代表大黃中不同的有效成分，分別為:1:蘆薈大黃素；2:大黃酸；3:大黃素；4:大黃酚；5:大黃素甲醚。
[0035]圖7為大黃中五種有效成分的對(duì)照品混合液的液相色譜圖。圖中1、2、3、4、5代表著大黃中的5種有效成分，分別為:1:蘆薈大黃素；2:大黃酸；3:大黃素；4:大黃酚；5 --大黃素甲醚。
[0036]圖8為大黃藥材提取液的稀釋液的液相色譜圖。圖中1、2、3、4、5代表著大黃中的5種有效成分,分別為:1:蘆薈大黃素；2:大黃酸；3:大黃素；4:大黃酚；5:大黃素甲醚。
[0037]圖9為大黃藥材提取液富集后的液相色譜圖。圖中1、2、3、4、5代表著大黃中的5種有效成分，分別為:1:蘆薈大黃素；2:大黃酸；3:大黃素；4:大黃酚;5:大黃素甲醚。[0038]圖10為大黃通便顆粒提取液的稀釋液的液相色譜圖。圖中1、2、3、4、5代表著大黃中的5種有效成分，分別為:1:蘆薈大黃素；2:大黃酸；3:大黃素；4:大黃酚；5:大黃素甲醚。
[0039]圖11為大黃通便顆粒富集后的液相色譜圖。圖中1、2、3、4、5代表著大黃中的5種有效成分，分別為:1:蘆薈大黃素；2:大黃酸；3:大黃素；4:大黃酚;5:大黃素甲醚。
【具體實(shí)施方式】
[0040]通過(guò)以下實(shí)例來(lái)對(duì)本發(fā)明所提供的離子液(購(gòu)于上海成捷化學(xué)有限公司)包裹磁性納米材料富集技術(shù)進(jìn)行更為詳細(xì)的描述。由于其應(yīng)用范圍廣，故具體實(shí)施方案也多，下面將結(jié)合幾個(gè)實(shí)例的討論對(duì)本發(fā)明的內(nèi)容作進(jìn)一步的闡述。
[0041]實(shí)施例中介孔四氧化三鐵納米顆?？砂匆韵路椒ㄖ频?
[0042]按比例將氯化亞鐵四水合物和氯化鐵溶解于IOOmL去離子水中，三價(jià)鐵離子與二價(jià)鐵離子的物質(zhì)的量之比為3:2，氮?dú)獗Ｗo(hù)下攪拌，從而制得濃度為0.015mol/L的鐵酸鹽水溶液，并加入Ig的聚乙二醇4000乳化劑。混合溶液中緩慢加入濃度為0.3mol/L的氨水直至pH=ll.0。再經(jīng)氮?dú)獗Ｗo(hù)，水浴50°C，持續(xù)超聲30分鐘?；旌衔镌偌訜嶂?0°C，反應(yīng)I小時(shí)后，過(guò)濾，濾餅加入乙醇洗滌。再用二次蒸餾水洗滌，直至pH=7.0。最后在60°C真空干燥4小時(shí)即得介孔四氧化三鐵納米顆粒。加水配成80mg/mL的介孔四氧化三鐵納米分散液
[0043]實(shí)施例1.考察離子液種類(lèi)對(duì)富集效果的影響
[0044]1.1取4個(gè)干凈的1.5mL規(guī)格離心管，編號(hào)為1、2、3、4。1_4均加入介孔四氧化三鐵納米分散液(80mg/mL) IOOy L、pH=ll的水1100 y L、大黃藥材提取液20 y L。
[0045]1.2在I號(hào)離心管中加入溴化1-十二烷基-3-甲基咪唑水溶液(40mg/mL)10ii L，2號(hào)離心管中加入氯化1-十二烷基-3-甲基咪唑水溶液(40mg/mL) IOy L，3號(hào)離心管中加入1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸鹽水溶液(40mg/mL) 10 y L，4號(hào)離心管中加入1-丁基-3-甲基咪唑聚苯乙烯磺酸鹽水溶液(40mg/mL) 10 u L。
[0046]1.3將4個(gè)離心管一同置于渦旋儀上渦旋IOs,靜置5min。
[0047]1.4用磁鐵靠近離心管底部，將介孔四氧化三鐵納米顆粒聚集于離心管底部，棄去上層水溶液。
[0048]1.5用含有2%乙酸的甲醇溶液對(duì)4個(gè)離心管中的介孔四氧化三鐵納米顆粒均洗脫三次，每次200 ii L。另取干凈的4個(gè)離心管編號(hào)a，b，c，d，對(duì)應(yīng)1、2、3、4離心管，合并裝入洗脫液。將a，b，c，d離心管置于80°C水浴鍋中揮干。
[0049]1.6揮干后的殘留固體用純甲醇50ii L溶解,超聲2min,置于13000rpm離心儀中離心5min，取上層清液裝樣，用超高效液相色譜(UPLC)進(jìn)樣分析。
[0050]UPLC色譜條件為:[0051]色譜柱:ACQUITYUPLC ? BEH C18,l.7um,2.1 X 50mm(Waters)。流動(dòng)相:0.1% 甲酸水溶液(A)-甲醇(B)，0 ~lmin，B 為 25% ~30% ; I ~3min，B 為 30% ~45% ；3 ~5min，B 為 45% ~60% ；5 ~7min，B 為 60% ~80% ；7 ~8min，B 為 80% ~100% ；8 ~8.5min, B 為100% ~100% ；8.5 ~IOmin, B 為 100% ~25%。流速 0.5mL/min,進(jìn)樣量 l.0uL,檢測(cè)波長(zhǎng)254nm，柱溫 30°C。
[0052]實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表1，表1中的數(shù)據(jù)為峰面積。
[0053]表1
離子液種類(lèi)蘆薈大黃素大黃酸大黃素大黃酚大黃素甲醚
A1813 4415 7703 4900900~ [0054]B21151 40300 27061 5442810190
C 178 582 400 1224 606
D 691 556 1479 3954 937
[0055]A:溴化1-十二烷基-3-甲基咪唑
[0056]B:氯化1-十二烷基-3-甲基咪唑
[0057]C:1_ 丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸鹽
[0058]D:1_ 丁基-3-甲基咪唑聚苯乙烯磺酸鹽
[0059]圖3也顯示了不同離子液種類(lèi)的富集效果柱狀圖。圖中，1、2、3、4、5分別代表大黃中不同的有效成分，分別為:蘆薈大黃素；2:大黃酸；3:大黃素；4:大黃酚；5:大黃素甲醚。字母A、B、C、D分別代表不同的離子液，分別為:A:溴化1-十二烷基-3-甲基咪唑；B:氯化1-十二烷基-3-甲基咪唑；C:1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸鹽；D:1-丁基-3-甲基咪唑聚苯乙烯磺酸鹽。
[0060]通過(guò)比較峰面積可以發(fā)現(xiàn)，比較長(zhǎng)鏈離子液A、B和短鏈離子液C、D，可以發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)鏈離子液的富集效果更好，而在長(zhǎng)鏈離子液中，使用氯化1-十二烷基-3-甲基咪唑水溶液是最佳條件，而且4種離子液的色譜峰形最優(yōu)者為氯化1-十二烷基-3-甲基咪唑水溶液富集，而且富集后的溶液呈黃色，用氯化1-十二烷基-3-甲基咪唑水溶液富集之后的顏色最深。
[0061]實(shí)施例2.考察不同離子液加入體積對(duì)富集效果的影響
[0062]2.1取4個(gè)干凈的1.5mL規(guī)格離心管，編號(hào)為1、2、3、4。1_4均加入介孔四氧化三鐵納米分散液(80mg/mL) 100 u L、大黃藥材提取液20 u L。
[0063]2.2在I號(hào)離心管中加入純水IOii L和pH=ll的水IlOOii L，2號(hào)離心管中加入氯化1-十二烷基-3-甲基咪唑水溶液(40mg/mL) 5 y L和pH= 11的水1105 uL,3號(hào)離心管中加入氯化1-十二烷基-3-甲基咪唑水溶液(40mg/mL)10iiL和pH=ll的水IlOOy L，4號(hào)離心管中加入氯化1-十二烷基-3-甲基咪唑水溶液(40mg/mL)15iiL和pH=ll的水1095 yL。
[0064]2.3將4個(gè)離心管一同置于渦旋儀上渦旋IOs,靜置5min。
[0065]2.4用磁鐵靠近離心管底部，將介孔四氧化三鐵納米顆粒聚集于離心管底部，棄去上層水溶液。
[0066]2.5用含有2%乙酸的甲醇溶液對(duì)4個(gè)離心管中的介孔四氧化三鐵納米顆粒均洗脫三次，每次200 u L0另取干凈的4個(gè)離心管編號(hào)a，b，c，d，對(duì)應(yīng)1、2、3、4離心管，合并裝入洗脫液。將a，b，c，d離心管置于80°C水浴鍋中揮干。
[0067]2.6揮干后的殘留固體用純甲醇50iiL溶解，超聲2min，置于13000rpm離心儀中離心5min，取上層清液裝樣，用UPLC進(jìn)樣分析。
[0068]實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表2，表2中的數(shù)據(jù)為峰面積。
[0069]表 2
[0070]
【權(quán)利要求】
1.一種大黃中有效成分的磁性提取富集方法，其特征在于所述方法為:大黃藥材或大黃固體制劑按照藥典進(jìn)行提取，制得大黃提取液，大黃提取液與介孔四氧化三鐵納米顆粒、離子液體加水配成富集混合液，每1230 UL富集混合液中包括以下組分:大黃提取液20 u L、納米介孔四氧化三鐵8~20mg、離子液體0.2~0.6mg,余量為水，pH值9~13 ;所述富集混合液裝入離心管，置于渦旋儀上渦旋10~30s，靜置后用磁鐵靠近離心管底部，將介孔四氧化三鐵納米顆粒聚集于離心管底部，棄去上層水溶液，得富集后的介孔四氧化三鐵納米顆粒，用含有質(zhì)量分?jǐn)?shù)I~4%乙酸的甲醇溶液洗脫，收集洗脫液，蒸干，制得富集的大黃浸膏；所述離子液體為溴化1-十二烷基-3-甲基咪唑、氯化1-十二烷基-3-甲基咪唑、1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸鹽或1-丁基-3-甲基咪唑聚苯乙烯磺酸鹽。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述離子液體為氯化1-十二烷基-3-甲基咪唑。
3.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于每1230y L富集混合液中包括以下組分:大黃提取液20 u L、納米介孔四氧化三鐵8mg、氯化1-十二烷基-3-甲基咪唑0.4mg，余量為水，pH值11。
4.如權(quán)利要求1~3之一所述的方法，其特征在于所述洗脫用含有質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%乙酸的甲醇溶液洗脫。
5.如權(quán)利要求1~3之一所述的方法,其特征在于所述大黃藥材或大黃固體制劑按照藥典2010版進(jìn)行提取，所述提取方法為:將大黃藥材或大黃固體制劑粉碎，取粉末(過(guò)四號(hào)篩)0.15g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加人甲醇25mL，稱(chēng)定重量，加熱回流I小時(shí)，放冷，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液5mL，置燒瓶中，揮去溶劑，加8%鹽酸溶液10mL，超聲處理2分鐘，再加三氯甲烷10mL，加熱回流I小時(shí)，放冷，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷`洗滌容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷層，酸液再用三氯甲烷提取3次，每次10mL，合并三氯甲烷液，減壓回收溶劑至干，殘?jiān)蛹状际谷芙?，轉(zhuǎn)移至IOmL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得大黃提取液。
6.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述離子液體先加水配成10~60mg/mL的離子液體水溶液，用于配制富集混合液。
7.如權(quán)利要求1~3之一所述的方法，其特征在于所述介孔四氧化三鐵納米顆粒先加水、分散均勻配成50~100mg/mL的介孔四氧化三鐵納米分散液,用于配制富集混合液。
8.如權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于所述洗脫用含有質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%乙酸的甲醇溶液洗脫三次，每次200 ii L。
9.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述洗脫液于80°C水浴鍋中揮發(fā)除去溶劑，制得富集的大黃浸膏。
【文檔編號(hào)】A61K36/708GK103655749SQ201310539843
【公開(kāi)日】2014年3月26日 申請(qǐng)日期:2013年11月4日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月4日
【發(fā)明者】曹君, 胡帥帥, 代菡鑌, 劉曉娟, 達(dá)建華, 曹婉 申請(qǐng)人:杭州師范大學(xué)