超臨界二氧化碳制備納米熊果苷脂質(zhì)體的方法
【專利摘要】本發(fā)明是一種利用超臨界二氧化碳制備納米熊果苷脂質(zhì)體的方法，稱取磷脂以及膽固醇，將其溶解于無水乙醇中。同時，稱取熊果苷，將其溶解于去離子水中；將兩者混合均勻后加入超臨界反應(yīng)釜中，控制溫度和壓力，并保壓；泄壓后即得熊果苷脂質(zhì)體混懸液。本制備方法制備過程不使用有毒有機(jī)溶劑，對環(huán)境無污染，最終產(chǎn)物中無有毒溶劑殘留；制備的熊果苷脂質(zhì)體單分散性好；包封效果好，穩(wěn)定性高；工藝簡單，成本低廉，易于實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。
【專利說明】超臨界二氧化碳制備納米熊果苷脂質(zhì)體的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于藥物制劑領(lǐng)域，具體涉及一種利用超臨界二氧化碳制備納米熊果苷脂質(zhì)體的方法。
技術(shù)背景
[0002]熊果苷(arbutin)是從厚葉巖白菜、烏飯樹、毛大丁草中熊果等植物中提取的天然活性物質(zhì)，化學(xué)名稱為對羥基苯-B-D-吡喃葡萄糖苷。熊果苷是源于綠色植物的天然活性物質(zhì)，集“綠色植物、安全可靠”和“高效脫色”三者統(tǒng)一于一體的皮膚脫色組份，它能滲入肌膚，在不影響細(xì)胞增殖濃度的同時，能有效地抑制皮膚中的酪氨酸酶的活性，阻斷黑色素的形成，通過自身與酪氨酶直接結(jié)合，加速黑色素的分解與排泄，從而減少皮膚色素沉積，祛除色斑和雀斑，而且對黑色素細(xì)胞不產(chǎn)生毒害性、刺激性、致敏性等副作用，同時還有殺菌、消炎的作用。它是當(dāng)今流行的最為安全有效的美白原料，也是二十一世紀(jì)的理想皮膚美白祛斑活性劑。但熊果苷化妝品的皮膚透過吸收能力不甚理想，這嚴(yán)重影響了熊果苷化妝品的美白效率。
[0003]脂質(zhì)體是由磷脂等類脂形成的雙分子層的完全封閉的多層囊泡，其結(jié)構(gòu)類似于細(xì)胞，可包封水溶性和脂溶性兩種物質(zhì)，具有靶向高效、緩釋可控和安全無毒的特點。人的皮膚是由一層致密的細(xì)胞構(gòu)成，細(xì)胞膜對大分子生物活性物質(zhì)是不通透的?；瘖y品中的活性成分要達(dá)到營養(yǎng)、改善皮膚狀況和預(yù)防皮膚疾病的功效，關(guān)鍵是活性物質(zhì)必須透過角質(zhì)層而達(dá)到相應(yīng)的作用部位并維持一定時間。脂質(zhì)體具有與生物膜相似結(jié)構(gòu)，與膏劑等相比具有更大的皮膚角質(zhì)層透過量，同時脂質(zhì)體本身可生物降解，無毒性。研究表明脂質(zhì)體能很快地進(jìn)入皮膚深層，以脂質(zhì)體包封的活性物質(zhì)經(jīng)皮吸收后可使更多活性物質(zhì)留在表皮到真皮之間。此外含有脂質(zhì)體的化妝品對皮膚有良好的保濕作用，即使在空載形式下，脂質(zhì)體在皮膚深層仍可起到活化細(xì)胞和保留水分作用。脂質(zhì)體同時還含有豐富的不飽和脂肪酸，可以減少多余脂肪和毒素在皮膚上的沉積，與未使用脂質(zhì)體的護(hù)膚品相比，其護(hù)膚效力強(qiáng)幾倍至幾十倍。以上研究均表明脂質(zhì)體在皮膚病防治和化妝品方面有良好的應(yīng)用前景。Dior在1986年開發(fā)了第一個商品名為Capture的脂質(zhì)體化妝品，它的問世標(biāo)志著新一代化妝品的開始。
[0004]目前脂質(zhì)體的制備方法較多，常規(guī)的方法有薄膜分散法、逆向蒸發(fā)法、表面活性劑除去法、乙醇/乙醚注入法、乳化法以及PH梯度法等，這些制備方法均需要使用到大量對環(huán)境以及人體有害的有毒有機(jī)溶劑，例如氯仿、乙醚、氟利昂以及甲醇等。并且這些方法由于步驟過多，不適用于大規(guī)模工業(yè)化的生產(chǎn)。理想的脂質(zhì)體制備方法應(yīng)該具備以下特點:包封率高，粒徑分布范圍窄，穩(wěn)定性好；目前脂質(zhì)體的制備方法主要存在著穩(wěn)定性低，成本高，殘留有毒溶劑，以及包封率低等缺點；超臨界二氧化碳流體是一種環(huán)境友好型溶劑，在制備結(jié)束后易于與產(chǎn)物分離且不造成環(huán)境污染，并具備優(yōu)良溶劑的特性。近幾年來，隨著超臨界二氧化碳流體技術(shù)的迅速發(fā)展，應(yīng)用領(lǐng)域的不斷擴(kuò)大，其漸漸被應(yīng)用于脂質(zhì)體的制備中。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有熊果苷脂質(zhì)體制備方法中存在的有毒有機(jī)溶劑殘留，粒度單分散性不強(qiáng)，脂質(zhì)體穩(wěn)定性較差等缺陷，提供一種超臨界二氧化碳制備無有毒溶劑殘留，產(chǎn)物單分散性好，穩(wěn)定性好熊果苷脂質(zhì)體的方法。
[0006]一種超臨界二氧化碳制備納米熊果苷脂質(zhì)體的方法，其特征在于，具體步驟如下: (1)按照配方精確稱取磷脂和膽固醇，將其加入無水乙醇中，制備成溶液，放入超聲波震蕩器中5分鐘，混合均勻后放入冰箱中待用；精確稱取熊果苷，溶于去離子水中配置成熊果苷溶液；
(2)將熊果苷溶液與脂質(zhì)體膜材乙醇溶液混合均勻后置入超臨界反應(yīng)釜中，打開二氧化碳鋼瓶，二氧化碳?xì)怏w經(jīng)冷機(jī)冷卻成液體后，由高壓泵加壓后進(jìn)入反應(yīng)釜中；控制壓力和溫度，保壓；
(3)孵化結(jié)束后，釋放二氧化碳?xì)怏w將體系壓力降至常壓，即得產(chǎn)品。
[0007]所述膽固醇與磷脂的質(zhì)量比為1:3-1:20。
[0008]所述熊果苷與磷脂的質(zhì)量比為1:2-1:30 ;其中熊果苷溶液濃度為0.2mg/ml-3mg/ml ο
[0009]所述溶劑無水乙醇與磷脂的質(zhì)量比為1:5-1:30。
[0010]所述孵化溫度為30_60°C ;孵化壓強(qiáng)為15_30MPa ;孵化時間為30_50分鐘。
[0011]與傳統(tǒng)制備脂質(zhì)體的方法相比，超臨界流體技術(shù)制備脂質(zhì)體的優(yōu)勢主要體現(xiàn)在以下幾個方面:1，環(huán)境友好，綠色，無毒，價廉；2，與傳統(tǒng)制備方法相比，流程簡單，粒徑及包封率易于控制；3，在現(xiàn)行藥品生產(chǎn)管理規(guī)范(CGMP)條件下有可能實現(xiàn)脂質(zhì)體的工業(yè)化；4，制備過程條件溫和，避免了在常規(guī)制備過程中的某些脂質(zhì)和藥物的降解。因此，采用超臨界二氧化碳法制備熊果苷脂質(zhì)體，制備過程不使用有毒有機(jī)溶劑，所制備的熊果苷脂質(zhì)體粒徑均一，穩(wěn)定性好，增加了熊果苷的透皮效率，提高了美白效果，確保了脂質(zhì)體的安全性，具有技術(shù)與應(yīng)用的新穎性和創(chuàng)造性。
[0012]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的特點和優(yōu)點在于:
(1)制備過程不使用有毒有機(jī)溶劑，對環(huán)境無污染，且最終產(chǎn)物中無有毒溶劑殘留；
(2)制備的熊果苷脂質(zhì)體粒徑分布均勻，單分散性好。包封率高，包封效果好，穩(wěn)定性
聞;
(3)可以很方便的通過調(diào)節(jié)制備過程中的壓力、溫度等制備參數(shù)來控制熊果苷脂質(zhì)體的粒徑、包封率以及穩(wěn)定性；
(4)工藝簡單，成本低廉，在現(xiàn)行藥品生產(chǎn)管理規(guī)范(CGMP)條件下有可能實現(xiàn)熊果苷脂質(zhì)體的工業(yè)化。
【具體實施方式】
[0013]下面通過實施例進(jìn)一步說明本發(fā)明，而不是限制本發(fā)明的范圍。
[0014]實施例1:
按照配方精確稱取0.060g磷脂和0.006g膽固醇(磷脂與膽固醇質(zhì)量比為10:1)，將其加入770 μ I無水乙醇中(磷脂與無水乙醇質(zhì)量比為1:10)，制備成溶液，放入超聲波震蕩器中超聲5分鐘，混合均勻后放入冰箱中待用。精確稱取0.012g熊果苷，溶于IOml去離子水中配置成熊果苷溶液(磷脂與熊果苷質(zhì)量比為5:1)。將熊果苷溶液與脂質(zhì)體膜材乙醇溶液混合均勻后置入超臨界反應(yīng)釜中，打開二氧化碳鋼瓶，二氧化碳?xì)怏w經(jīng)冷機(jī)冷卻成液體后，由高壓泵加壓后進(jìn)入反應(yīng)爸中。在20MPa、50°C的條件下保壓40min后,釋放二氧化碳?xì)怏w將體系壓力降至常壓，即得熊果苷脂質(zhì)體混懸液。該條件下制得的熊果苷脂質(zhì)體平均粒徑為198nm，包封率為31%。
[0015]實施例2:
按照配方精確稱取0.060g磷脂和0.012g膽固醇(磷脂與膽固醇質(zhì)量比為5:1)，將其加入1.53ml無水乙醇中(磷脂與無水乙醇質(zhì)量比為1:20)，制備成溶液，放入超聲波震蕩器中超聲5分鐘，混合均勻后放入冰箱中待用。精確稱取0.030g熊果苷，溶于IOml去離子水中配置成熊果苷溶液(磷脂與熊果苷質(zhì)量比為2:1)。將熊果苷溶液與脂質(zhì)體膜材乙醇溶液混合均勻后置入超臨界反應(yīng)釜中，打開二氧化碳鋼瓶，二氧化碳?xì)怏w經(jīng)冷機(jī)冷卻成液體后，由高壓泵加壓后進(jìn)入反應(yīng)釜中。在30MPa、35°C的條件下保壓45min后，釋放二氧化碳?xì)怏w將體系壓力降至常壓，即得熊果苷脂質(zhì)體混懸液。該條件下制得的熊果苷脂質(zhì)體平均粒徑為232nm，包封率為28%。
[0016]實施例3:
按照配方精確稱取0.060g磷脂和0.020g膽固醇(磷脂與膽固醇質(zhì)量比為3:1)，將其加入380 μ I無水乙醇中(磷脂與無水乙醇質(zhì)量比為1:5)，制備成溶液，放入超聲波震蕩器中超聲5分鐘，混合均勻后放入冰箱中待用。精確稱取0.003g熊果苷，溶于IOml去離子水中配置成熊果苷溶液 (磷脂與熊果苷質(zhì)量比為20:1)。將熊果苷溶液與脂質(zhì)體膜材乙醇溶液混合均勻后置入超臨界反應(yīng)釜中，打開二氧化碳鋼瓶，二氧化碳?xì)怏w經(jīng)冷機(jī)冷卻成液體后，由高壓泵加壓后進(jìn)入反應(yīng)釜中。在25MPa、40°C的條件下保壓30min后，釋放二氧化碳?xì)怏w將體系壓力降至常壓，即得熊果苷脂質(zhì)體混懸液。該條件下制得的熊果苷脂質(zhì)體平均粒徑為320nm，包封率為35%。
[0017]實施例4:
按照配方精確稱取0.060g磷脂和0.009g膽固醇(磷脂與膽固醇質(zhì)量比為7:1)，將其加入2.3ml無水乙醇中(磷脂與無水乙醇質(zhì)量比為1:30)，制備成溶液，放入超聲波震蕩器中超聲5分鐘，混合均勻后放入冰箱中待用。精確稱取0.006g熊果苷，溶于IOml去離子水中配置成熊果苷溶液(磷脂與熊果苷質(zhì)量比為10:1)。將熊果苷溶液與脂質(zhì)體膜材乙醇溶液混合均勻后置入超臨界反應(yīng)釜中，打開二氧化碳鋼瓶，二氧化碳?xì)怏w經(jīng)冷機(jī)冷卻成液體后，由高壓泵加壓后進(jìn)入反應(yīng)釜中。在15MPa、40°C的條件下保壓50min后，釋放二氧化碳?xì)怏w將體系壓力降至常壓，即得熊果苷脂質(zhì)體混懸液。該條件下制得的熊果苷脂質(zhì)體平均粒徑為211nm，包封率為33%。
【權(quán)利要求】
1.一種超臨界二氧化碳制備納米熊果苷脂質(zhì)體的方法，其特征在于，具體步驟如下: (1)按照配方精確稱取磷脂和膽固醇，將其加入無水乙醇中，制備成溶液，放入超聲波震蕩器中5分鐘，混合均勻后放入冰箱中待用；精確稱取熊果苷，溶于去離子水中配置成熊果苷溶液； (2)將熊果苷溶液與脂質(zhì)體膜材乙醇溶液混合均勻后置入超臨界反應(yīng)釜中，打開二氧化碳鋼瓶，二氧化碳?xì)怏w經(jīng)冷機(jī)冷卻成液體后，由高壓泵加壓后進(jìn)入反應(yīng)釜中；控制壓力和溫度，保壓； (3)孵化結(jié)束后，釋放二氧化碳?xì)怏w將體系壓力降至常壓，即得產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種超臨界二氧化碳制備納米熊果苷脂質(zhì)體的方法，其特征在于，所述膽固醇與磷脂的質(zhì)量比為1:3-1:20。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種超臨界二氧化碳制備納米熊果苷脂質(zhì)體的方法，其特征在于，所述熊果苷與磷脂的質(zhì)量比為1:2-1:30 ;其中熊果苷溶液濃度為0.2mg/ml-3mg/ml。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種超臨界二氧化碳制備納米熊果苷脂質(zhì)體的方法，其特征在于，所述溶劑無水乙醇與磷脂的質(zhì)量比為1:5-1:30。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種超臨界二氧化碳制備納米熊果苷脂質(zhì)體的方法，其特征在于，所述孵化溫度為30-60°C ;孵化壓強(qiáng)為15-30MPa ;孵化時間為30-50分鐘。
【文檔編號】A61P17/00GK103655219SQ201310607897
【公開日】2014年3月26日 申請日期:2013年11月27日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月27日
【發(fā)明者】徐少洪, 趙斌, 陳超, 何丹農(nóng) 申請人:上海納米技術(shù)及應(yīng)用國家工程研究中心有限公司