一種治療大腸桿菌病的組合物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開一種治療大腸桿菌病的組合物，其特征是：由下列藥物組成，按重量份數(shù)計地錦草20～30份、穿心蓮20～30份、十大功勞15～25份、虎杖10～20份、黃芩10～20份。將上述藥材混合均勻，每次加入10倍量水煎煮1.5h，煎煮3次，合并煎液過濾，濾液濃縮至每毫升含生藥0.8g，加入山梨酸鉀0.25份、苯甲酸鈉0.25份、丙二醇10體積份，及95％乙醇5體積份，混勻，4℃冷藏24h，濾過，濾液加水調(diào)整至每1毫升含生藥0.5g，灌裝，即得。該藥臨床使用方便，無耐藥性，對雞大腸桿菌病有良好的治療效果，可在養(yǎng)禽業(yè)廣泛應(yīng)用。
【專利說明】一種治療大腸桿菌病的組合物
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及大腸桿菌病的防治【技術(shù)領(lǐng)域】，特別涉及一種用于治療雞大腸桿菌病的藥物。
【背景技術(shù)】
[0002]雞大腸桿菌病是我國臨床常見的雞病之一，具有發(fā)病快、死亡率高、病程長的特點，給養(yǎng)雞業(yè)造成了極大的危害。目前對于大腸桿菌病多采用抗菌藥物治療，但由于此類藥物的過量使用，已導致大腸桿菌的耐藥譜不斷擴大，防治效果下降，同時抗菌藥物在機體內(nèi)的殘留，降低了肉蛋產(chǎn)品品質(zhì)，影響了人類健康和公共衛(wèi)生安全?？闺u大腸桿菌病的疫苗盡管不斷研制并投放市場，但致病性大腸桿菌血清型種類繁多，造成預防效果地下。臨床實踐表明，中藥對雞大腸桿菌病有較好的防治效果，并具有低殘留、低毒性、治愈率高、不易產(chǎn)生耐藥性等特點，符合當今社會倡導的綠色養(yǎng)殖的行業(yè)要求，有著廣闊的發(fā)展前景。然而，目前養(yǎng)殖業(yè)中使用的治療雞大腸桿菌病的中藥制劑，存在處方組成不科學、用藥劑量過大、給藥方式不合理、治療效果不明顯等弊端。因此，迫切需要依據(jù)傳統(tǒng)中獸醫(yī)理論基礎(chǔ)，結(jié)合當前雞大腸桿菌病的發(fā)病特征，篩選出療效顯著、使用方便的治療雞大腸桿菌病中藥方劑。
[0003]本方劑以復方黃芩片的處方為基礎(chǔ)，采用復方優(yōu)化及拆方方法學的設(shè)計思路，發(fā)明人對大量具有清熱解毒、抑菌消炎作用的中藥進行篩選，通過考察不同中藥組方及配比對禽大腸桿菌O78菌株致肉雞大腸桿菌病病理模型的治療效果，最終篩選出最佳中藥組合物。該中藥組合物經(jīng)提取、濃縮等工藝制備成中藥合劑，經(jīng)對雞大腸桿菌病自然病例的治療效果研究，發(fā)現(xiàn)臨床應(yīng)用時有效率、治愈率高，效果顯著，故可考慮將其用于雞大腸桿菌病的治療應(yīng)用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種療效顯著的治療大腸桿菌病的組合物。
[0005]為實現(xiàn)上述目的，發(fā)明人以中獸藥理論為基礎(chǔ)，經(jīng)過長期研究，篩選出本發(fā)明配方，主要采用如下實施方式:
[0006]一種治療大腸桿菌病的組合物，其特征在于，由以下重量份數(shù)的原料藥制成:地錦草20~30份、穿心蓮20~30份、十大功勞15~25份、虎杖10~20份、黃芩10~20份。
[0007]所述的原料藥以重量份數(shù)表示時，地錦草與穿心蓮的重量份數(shù)相等，虎杖與黃芩的重量份數(shù)相等，經(jīng)方劑篩選試驗研究發(fā)現(xiàn)，該組合比例具有治療大腸桿菌病的最佳功效。
[0008]優(yōu)選為:地錦草25份、穿心蓮25份、十大功勞20份、虎杖15份、黃芩15份。
[0009]本發(fā)明采用行業(yè)通用方法制得:將上述藥材混合均勻，每次加入10倍量水煎煮
1.5h，煎煮3次，合并煎液過濾，濾液濃縮至每毫升含生藥0.Sg,加入山梨酸鉀0.25份、苯甲酸鈉0.25份、丙二醇10體積份，及95%乙醇5體積份，混勻，4°C冷藏24h，濾過，濾液加水調(diào)整至每I毫升含生藥0.5g，灌裝，即得。[0010]本發(fā)明所說的組合物的使用方法及用量是:混飲，每100ml兌水8kg，連用5天。
[0011]本發(fā)明的組方及其原理:
[0012]中醫(yī)辯證認為雞大腸桿菌病是屬于外感風熱，熱結(jié)腸間形成濕熱下注，熱結(jié)于上中下三焦，引起三焦實熱，耗損津液。治則以清熱解毒、燥濕止痢、涼血生津為主。本發(fā)明組方中，地錦草、穿心蓮具有清熱解毒，涼血止血的作用，可清三焦實熱，為君藥；十大功勞有清熱燥濕、解毒止痢的功效，輔助有燥濕、止痢的功效，為臣藥；虎杖有祛風利濕，散瘀定痛，止咳化痰的作用，為佐藥；使藥為黃芩，引藥入肺、大腸經(jīng)，奏瀉實火，除濕熱的功效。
【具體實施方式】
[0013]以下實施例旨在說明本發(fā)明而不是對本發(fā)明的進一步限定。
[0014]實施例1:一種治療大腸桿菌病的組合物，由下列藥物組成，每份按IOg計:地錦草250g、穿心蓮250g、十大功勞200g、虎杖150g、黃芩150g。將上述中藥混合均勻，每次加入10倍量水煎煮1.5h，煎煮3次，合并煎液過濾，濾液濃縮至每毫升含生藥0.8g，加入山梨酸鉀2.5g、苯甲酸鈉2.5g、丙二醇100ml及95%乙醇50ml,混勻,4°C冷藏24h,濾過,濾液加水調(diào)整至每I毫升含生藥0.5g，灌裝，即得用于治療雞大腸桿菌病的中藥合劑。
[0015]實施例2:—種治療大腸桿菌病的組合物，由下列藥物組成，每份按IOg計:地錦草300g、穿心蓮300g、十大功勞200g、虎杖100g、黃芩100g。將上述中藥混合均勻，每次加入10倍量水煎煮1.5h，煎煮3次，合并煎液過濾，濾液濃縮至每毫升含生藥0.8g，加入山梨酸鉀2.5g、苯甲酸鈉2.5g、丙二醇100ml及95%乙醇50ml,混勻,4°C冷藏24h,濾過,濾液加水調(diào)整至每I毫升含生藥0.5g，灌裝，即得用于治療雞大腸桿菌病的中藥合劑。
[0016]實施例3:—種治療大腸桿菌病的組合物，由下列藥物組成，每份按IOg計:地錦草250g、穿心蓮200g、十大功勞200g、虎杖150g、黃芩200g。將上述中藥混合均勻，每次加入10倍量水煎煮1.5h，煎煮3次，合并煎液過濾，濾液濃縮至每毫升含生藥0.8g，加入山梨酸鉀2.5g、苯甲酸鈉2.5g、丙二醇100ml及95%乙醇50ml,混勻,4°C冷藏24h,濾過,濾液加水調(diào)整至每I毫升含生藥0.5g，灌裝，即得用于治療雞大腸桿菌病的中藥合劑。
[0017]本發(fā)明組合物對雞大腸桿菌病治療效果的試驗報告:
[0018]1試驗材料
[0019]1.1試驗用藥
[0020]試驗藥物供試組合物分別由實施例1、2、3提供。
[0021]大捕快(4%氧氟沙星溶液)，由愛迪森(北京)生物科技有限公司提供。
[0022]雞源大腸桿菌O78標準菌株，購于中國獸藥監(jiān)察所。
[0023]1.2試驗動物
[0024]350只海蘭褐公雛，I日齡，購于北京峪口禽業(yè)。
[0025]1.3飼養(yǎng)管理
[0026]試驗雞均飼養(yǎng)在標準雞舍，自由采食與飲水，飼喂無抗生素添加的全價飼料。
[0027]2試驗方法
[0028]2.1大腸桿菌O78菌株的培養(yǎng)
[0029]將大腸桿菌O78標準菌株溶液培養(yǎng)成原液濃度為4.6 X 101°個/ml，具體方法如下:
[0030]大腸桿菌計數(shù)，將O78細菌接種于營養(yǎng)肉湯中，培養(yǎng)18h后取出，準確吸取細菌培養(yǎng)液0.1ml，移至含0.9ml無菌生理鹽水的試管內(nèi)，振蕩20min，使細菌分散，靜置片刻即得I X KT1稀釋液；然后用無菌注射器吸取I X KT1稀釋液0.1ml移至裝有0.9ml無菌生理鹽水的試管內(nèi)，充分振蕩搖勻，即得1X10_2稀釋液；再換一支Iml注射器，吸取IX 10_2稀釋液0.1ml移至裝有0.9ml的無菌生理鹽水的試管內(nèi)，即得I X 10_3稀釋液，依次稀釋得稀釋液1X10,稀釋液。
[0031]給無菌培養(yǎng)皿編上不同稀釋度的號碼，每個號碼設(shè)3個重復，先將培養(yǎng)基熔化并趁熱倒入培養(yǎng)皿中制成平板凝固后編號；然后用注射器吸取0.1ml菌液對號接種在不同稀釋度編號的平皿上；再用無菌鏟將菌液均勻涂抹在平板上，在桌上平放，使細菌液滲透于培養(yǎng)基內(nèi)；最后將培養(yǎng)皿倒轉(zhuǎn)培養(yǎng)，于37°C條件下培養(yǎng)，分別按I X 10_8，I X 10_9，I X 10,稀釋。選取菌落數(shù)在30~300個之間的平皿進行菌落總數(shù)的測定，一個稀釋度用3個平皿，取其平均數(shù)，再乘以稀釋倍數(shù)，即得菌落總數(shù)，最終原液濃度為4.6X 10_1(1。
[0032]2.2動物預實驗
[0033]隨機抽取9日齡的雞只40只，平均分為5個劑量組，每組肌肉注射大腸桿菌O78標準菌株培養(yǎng)液，注射劑量分別為0.5,0.6,0.7,0.8,0.9ml/只。統(tǒng)計各劑量組雞的死亡數(shù)，計算LD5tl,正式試驗采用LD5tl劑量攻毒。
[0034]2.3治療試驗
[0035]雞只飼養(yǎng)至11日齡時隨機抽取10只，分別采血并從泄殖腔取排泄物進行細菌分離培養(yǎng)，用抗大腸桿菌O78的標準血清作玻片凝集反應(yīng)，確認試驗用雞群不存在雞大腸桿菌
O78感染。
[0036]將300只12日齡的雞只隨機分6組，每組50只雞。采用胸肌注射菌液的方式攻毒，注射劑量半數(shù)致死量，感染對照組死亡率約60%。試驗動物分組及處理情況見下表。
[0037]表1試驗動物分組及處理
[0038]
【權(quán)利要求】
1.一種治療大腸桿菌病的組合物，其特征在于，由以下重量份數(shù)的原料藥制成: 地錦草20~30份、穿心蓮20~30份、十大功勞15~25份、虎杖10~20份、黃芩10~20份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療大腸桿菌病的組合物，其特征在于，地錦草與穿心蓮的重量份數(shù)相等，虎杖與黃芩的重量份數(shù)相等。
3.根據(jù)權(quán)利要求1、2所述的治療大腸桿菌病的組合物，其特征在于所述的原料藥以重量份數(shù)表示優(yōu)選為:地錦草25份、穿心蓮25份、十大功勞20份、虎杖15份、黃芩15份。
4.根據(jù)權(quán)利要求1、2、3所述的治療大腸桿菌病組合物的制備方法，其特征是按以下步驟進行:將上述藥材混合均勻,每次加入10倍量水煎煮1.5h，煎煮3次，合并煎液過濾，濾液濃縮至每毫升含生藥0.Sg，加入山梨酸鉀0.25份、苯甲酸鈉0.25份、丙二醇10體積份，及95%乙醇5體積份，混勻，4°C冷藏24h，濾過，濾液加水調(diào)整至每I毫升含生藥0.5g，灌裝，即得。
5.權(quán)利要求1-3所述 的組合物在治療禽類大腸桿菌病中的應(yīng)用。
【文檔編號】A61K36/704GK103610768SQ201310628249
【公開日】2014年3月5日 申請日期:2013年12月2日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月2日
【發(fā)明者】江厚生, 王秀敏, 賈召鋒 申請人:北京生泰爾生物科技有限公司