一種適用于水溶性蒽醌類藥物的脂質(zhì)體制備方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】。提供了一種適合大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)的水溶性蒽醌類藥物脂質(zhì)體及其制備方法。將經(jīng)過(guò)微粉化處理的水溶性脂質(zhì)體支撐載體分散在溶解了脂質(zhì)體膜材的有機(jī)溶媒或超臨界流體溶媒中，在不同壓力條件下進(jìn)行溶媒回收處理后，脂質(zhì)體膜材將吸附在微粉化水溶性支撐載體上，得到微粉狀的磷脂——載體復(fù)合物。選擇合適的水化介質(zhì)將前述的磷脂——載體復(fù)合物在適宜溫度和壓力下進(jìn)行水化，水溶性載體迅速溶解而脂質(zhì)發(fā)生溶脹形成液態(tài)的多層脂質(zhì)體。本發(fā)明采用磷脂——載體復(fù)合技術(shù)，利用適宜的離子介質(zhì)，使用脂質(zhì)體對(duì)水溶性蒽醌類藥物進(jìn)行裝載，得到了粒徑均一、載藥及相關(guān)性狀穩(wěn)定的脂質(zhì)體。
【專利說(shuō)明】一種適用于水溶性蒽醌類藥物的脂質(zhì)體制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及藥物新劑型的設(shè)計(jì)與制備工藝領(lǐng)域，提供了一種適用于水溶性蒽醌類藥物的脂質(zhì)體制備方法，具體涉及一種能夠高效裝載水溶性蒽醌類藥物的脂質(zhì)體制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]蒽醌類化合物在天然藥物中存在廣泛且有重要的藥理功效，如中藥黃精、紫草、丹參、大黃、雷公藤等植物中都含有大量蒽醌類化合物，具有抗菌、抗腫瘤、抗氧化等功效，特別是在心血管疾病、癌癥、老年癡呆、愛(ài)滋病等重大疾病防治上應(yīng)用廣泛，研究成果眾多，受到全球科學(xué)家和醫(yī)藥人士的普遍關(guān)注。然而，蒽醌類物質(zhì)在發(fā)揮其強(qiáng)大而廣泛的藥理作用的同時(shí)，又不得不面對(duì)大部分蒽醌類物質(zhì)具有較強(qiáng)毒性的現(xiàn)實(shí)。
[0003]自脂質(zhì)體被發(fā)現(xiàn)以來(lái)，由于其可在生物體內(nèi)被降解且無(wú)毒性，并在藥物載體方向表現(xiàn)出了的良好應(yīng)用前景；又由于脂質(zhì)體能夠通過(guò)各類基團(tuán)的修飾而具有靶向性，并能降低藥物的在機(jī)體內(nèi)的毒副作用，受到了世界各國(guó)學(xué)者以及各大制藥企業(yè)的重視。然而，國(guó)外脂質(zhì)體制劑的上市產(chǎn)品迄今仍屈指可數(shù)；在國(guó)內(nèi)，除了個(gè)別外用制劑的基質(zhì)，脂質(zhì)體研究基本處于實(shí)驗(yàn)室階段。這種現(xiàn)狀主要是由于脂質(zhì)體混懸液在貯存期間易發(fā)生聚集、融合及藥物滲漏，尤其水溶性藥物的滲漏更顯著；同時(shí)，天然磷脂易氧化、水解，難以滿足藥物制劑穩(wěn)定性的要求，同時(shí)脂質(zhì)體制劑的制備工藝較復(fù)雜，不易擴(kuò)大生產(chǎn)。常用的脂質(zhì)體制備方法有薄膜分散法和乙醇注入法，前者難以擴(kuò)大生產(chǎn)，后者有嚴(yán)重的溶劑殘留問(wèn)題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明提供了一種高效裝載水溶性蒽醌類藥物的脂質(zhì)體的制備方法，解決了現(xiàn)有方法不易放大、成本高、難以保證生產(chǎn)重現(xiàn)性、藥物包封率低、粒徑較大、脂質(zhì)體粒徑容易發(fā)生聚集等難題。
[0005]本發(fā)明提供的這種高效裝載水溶性蒽醌類藥物的脂質(zhì)體制備方法是通過(guò)以下技術(shù)方案進(jìn)行的具體實(shí)施:
[0006]A.將經(jīng)過(guò)微粉化處理的水溶性脂質(zhì)體支撐載體分散在溶解了脂質(zhì)體膜材的有機(jī)溶媒中，在減壓條件下進(jìn)行有機(jī)溶劑回收處理后，脂質(zhì)體膜材將吸附在微粉化水溶性支撐載體上，得到微粉狀的磷脂——載體復(fù)合物
[0007]或?qū)⒔?jīng)過(guò)微粉化處理的水溶性脂質(zhì)體支撐載體加入微量乙醇(20mL)混合后置于超臨界孵育罐中，在15MPa條件下通入CO2進(jìn)行超臨界孵育25min，迅速排空CO2，脂質(zhì)體膜材吸附在微粉化水溶性脂質(zhì)體支撐載體上，得到微粉狀的磷脂——載體復(fù)合物。
[0008]B.選擇合適的水化介質(zhì)將前述的磷脂一載體復(fù)合物在適宜溫度和壓力下進(jìn)行水化，水溶性載體迅速溶解而脂質(zhì)發(fā)生溶脹形成液態(tài)的多層脂質(zhì)體。將此多層脂質(zhì)體進(jìn)行聞效的超聲處理后，粒徑大幅度減小，脂質(zhì)體溶液轉(zhuǎn)變?yōu)榘胪该魅榘咨后w。
[0009]C.選擇適宜的離子介質(zhì)在15~85°C溫度下與主藥、前述脂質(zhì)體溶液攪拌混合，利用雙層磷脂分子層內(nèi)外的離子電勢(shì)差的不同進(jìn)行脂質(zhì)體裝載，使藥物從外水相進(jìn)入脂質(zhì)體內(nèi)水相并達(dá)到穩(wěn)定。形成具有藍(lán)色乳光的澄清載藥脂質(zhì)體。
[0010]D.在得到脂質(zhì)體溶液后，加入凍干保護(hù)劑對(duì)脂質(zhì)體在-80°c~-15°c條件下進(jìn)行真空冷凍干燥處理。或在進(jìn)風(fēng)溫度15~70°C，進(jìn)料速度10~150mL min'旋風(fēng)分離器壓差20~150mm H2O,霧化盤轉(zhuǎn)速500~2500r ^min-1條件下進(jìn)行噴霧干燥處理,得到干燥且復(fù)溶性良好的脂質(zhì)體粉末。
[0011]E.可對(duì)此種裝載了水溶性蒽醌類藥物的脂質(zhì)體干燥粉末進(jìn)一步制備成水溶性蒽醌類藥物的脂質(zhì)體注射液、口服液、噴霧劑等液體制劑；也可以加工成片劑、膜劑、栓劑等固體或半固體制劑。
[0012]所述的微粉化水溶性支撐載體既可以是對(duì)磷脂形成脂質(zhì)體具有支撐作用的水溶性載體物質(zhì)，包括水溶性鹽類、葡萄糖、果糖等水溶性糖類物質(zhì)、水溶性較高的晶體蛋白等物質(zhì)，也可以利用水溶性蒽醌類藥物自身進(jìn)行微粉化后，作為制備過(guò)程中的載體。該載體可以是上述物質(zhì)中的一種或幾種。尤其選自氯化鈉、果糖、葡萄糖、水溶性蒽醌類藥物，如米托蒽醌、蘆薈大黃素。載體的生產(chǎn)用量與磷脂質(zhì)量比為0.2:1~15:1，優(yōu)選后其質(zhì)量比為3:
1
[0013]根據(jù)裝載藥物的不同，制備過(guò)程中使用的水化介質(zhì)可以包括純水、各種類型的磷酸鹽緩沖溶液以及不同濃度的氯化鈉、氯化鉀、硫酸鈉、硫酸鉀等溶液。用量為脂質(zhì)體干燥體積的I~250倍，水化介質(zhì)用量達(dá)到脂質(zhì)體干燥體積的45倍左右時(shí)，即可達(dá)到較好的水化效果。
[0014]根據(jù)所采用的磷脂原料的不同，水化過(guò)程應(yīng)當(dāng)在0.05~40MPa、5~100°C條件下進(jìn)行。
[0015]所述的離子介質(zhì) 為:能夠產(chǎn)生脂質(zhì)體內(nèi)外水相電勢(shì)差的離子溶液，包括不同濃度的硫酸鹽、磷酸鹽、硝酸鹽、鹽酸鹽等溶液。其濃度在生產(chǎn)過(guò)程中應(yīng)低于3mol/L。
[0016]所述的脂質(zhì)體膜材為天然磷脂、合成磷脂或以PEG進(jìn)行化學(xué)修飾處理過(guò)的衍生化磷脂，其用量可根據(jù)具體所載藥物特性的不同而發(fā)生變化。
[0017]脂質(zhì)體干燥方法包括程序升溫式的真空冷凍干燥，根據(jù)所用磷脂類型及所載藥物特性的不同應(yīng)當(dāng)在-80°C~30°C下進(jìn)行程序設(shè)定并予以干燥；其干燥方法也包括噴霧干燥方法，其干燥條件為進(jìn)風(fēng)溫度15~70°C，進(jìn)料速度10~150mL ? mirT1，旋風(fēng)分離器壓差
20~150mm H2O,霧化盤轉(zhuǎn)速 500 ~2500r ? mirT1。
[0018]本發(fā)明制備過(guò)程中采用磷脂——載體復(fù)合技術(shù)，將經(jīng)過(guò)微粉化處理的水溶性載體與磷脂進(jìn)行分散式復(fù)合，復(fù)合方式包括:借助有機(jī)溶媒進(jìn)行磷脂與載體的包裹式復(fù)合、使用高壓均質(zhì)機(jī)或納米擠出儀等設(shè)備進(jìn)行物理均質(zhì)復(fù)合以及利用超臨界流體技術(shù)進(jìn)行的磷脂與載體的超臨界復(fù)合。按照本發(fā)明方法制備的脂質(zhì)體其包封率在90%以上，粒徑范圍50~200nmo
【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】:
[0019]圖1為透射電子顯微鏡下觀察裝載了水溶性蒽醌類藥物的脂質(zhì)體表觀形態(tài)；
[0020]圖2為處方優(yōu)化過(guò)程中所使用的BOX-Behnken統(tǒng)計(jì)方法的響應(yīng)曲面圖；
[0021]圖3為藥物釋放 曲線；[0022]圖4為與市售注射劑比較的血藥濃度變化；
[0023]【具體實(shí)施方式】:以下為本發(fā)明所提供制備方法的具體實(shí)例:
[0024]實(shí)施例1
[0025]1.將經(jīng)過(guò)微粉化處理的果糖載體2kg分散在溶解了 400g大豆卵磷脂的乙醇中，在減壓條件下進(jìn)行有機(jī)溶劑回收處理，脂質(zhì)體膜材將吸附在微粉化水溶性支撐載體上，得到微粉狀的磷脂——載體復(fù)合物。
[0026]2.以0.01mol磷酸鹽緩沖液作為水化介質(zhì)將前述的磷脂——載體復(fù)合物在40°C和0.SMPa條件下進(jìn)行水化，得到液態(tài)的多層脂質(zhì)體。將此多層脂質(zhì)體進(jìn)行400w探頭超聲處理，脂質(zhì)體溶液轉(zhuǎn)變?yōu)榘胪该魅榘咨后w。
[0027]3.以硫酸銨溶液作為離子介質(zhì)在55°C溫度下與米托蒽醌188g、前述脂質(zhì)體溶液攪拌混合，藥物從外水相進(jìn)入脂質(zhì)體內(nèi)水相并達(dá)到穩(wěn)定。形成具有藍(lán)色乳光的澄清載藥脂質(zhì)體。
[0028]4.在得到脂質(zhì)體溶液后，加入凍干保護(hù)劑對(duì)脂質(zhì)體在-30°C條件下進(jìn)行真空冷凍干燥處理。得到干燥且復(fù)溶性良好的脂質(zhì)體粉末。
[0029]實(shí)施例2
[0030]1.取經(jīng)過(guò)微粉化處理的米托蒽醌188g作為載體分散在溶解了 400g大豆卵磷脂的乙醇中，在減壓條件下進(jìn)行有機(jī)溶劑回收處理，脂質(zhì)體膜材將吸附在微粉化水溶性支撐載體上，得到微粉狀的磷脂——米托蒽醌復(fù)合物。
[0031]2.以0.01M磷酸鹽緩沖液作為水化介質(zhì)將前述的磷脂——米托蒽醌復(fù)合物在55°C和IMPa條件下進(jìn)行水化，得到液態(tài)的多層脂質(zhì)體。將此多層脂質(zhì)體進(jìn)行400w探頭超聲處理，脂質(zhì)體溶液轉(zhuǎn)變?yōu)樗{(lán)色帶乳光液體。
[0032]3.在得到脂質(zhì)體溶液后，加入凍干保護(hù)劑對(duì)脂質(zhì)體在_3(TC條件下進(jìn)行真空冷凍干燥處理。得到干燥且復(fù)溶性良好的脂質(zhì)體粉末。
[0033]實(shí)施例3
[0034]1.將經(jīng)過(guò)微粉化處理的葡萄糖載體1230g與400g大豆卵磷脂加入微量乙醇(20mL)混合后置于超臨界孵育罐中，在13MPa條件下通入CO2進(jìn)行超臨界孵育27min，迅速排空CO2,脂質(zhì)體膜材將吸附在微粉化水溶性支撐載體上，得到微粉狀的磷脂——載體復(fù)合物。
[0035]2.以0.01mol磷酸鹽緩沖液作為水化介質(zhì)將前述的磷脂——載體復(fù)合物在40°C和0.SMPa條件下進(jìn)行水化，得到液態(tài)半透明乳白色液體。
[0036]3.以濃度為IM的氯化鈉溶液作為離子介質(zhì)在37°C溫度下與米托蒽醌177g、前述脂質(zhì)體溶液攪拌混合，藥物從外水相進(jìn)入脂質(zhì)體內(nèi)水相并達(dá)到穩(wěn)定。形成具有藍(lán)色乳光的澄清載藥脂質(zhì)體。
[0037]4.在得到脂質(zhì)體溶液后，加入凍干保護(hù)劑對(duì)脂質(zhì)體在-30°C條件下進(jìn)行真空冷凍干燥處理。得到干燥且復(fù)溶性良好的脂質(zhì)體粉末。
[0038]實(shí)施例4
[0039]1.將經(jīng)過(guò)微粉化處理的氯化鈉載體Ikg分散在溶解了 400g大豆卵磷脂的乙醇中，在減壓條件下進(jìn)行有機(jī)溶劑回收處理，脂質(zhì)體膜材將吸附在微粉化水溶性支撐載體上，得到微粉狀的磷脂——載體復(fù)合物。[0040]2.以純水作為水化介質(zhì)將前述的磷脂——載體復(fù)合物在60°C和0.8MPa條件下進(jìn)行水化，得到液態(tài)的多層脂質(zhì)體。將此多層脂質(zhì)體進(jìn)行400w探頭超聲處理，脂質(zhì)體溶液轉(zhuǎn)變?yōu)榘胪该魅榘咨后w。
[0041]3.以IM硫酸鈉溶液作為離子介質(zhì)在55°C溫度下與蘆薈大黃素164g、前述脂質(zhì)體溶液攪拌混合，藥物從外水相進(jìn)入脂質(zhì)體內(nèi)水相并達(dá)到穩(wěn)定。形成具有黃色乳光的澄清載藥脂質(zhì)體。
[0042]4.在得到脂質(zhì)體溶液后，加入凍干保護(hù)劑對(duì)脂質(zhì)體在-30°C條件下進(jìn)行真空冷凍干燥處理。得到干燥且復(fù)溶性良好的脂質(zhì)體粉末。
[0043]實(shí)施例5
[0044]1.將經(jīng)過(guò)微粉化處理的164g蘆薈大黃素與400g大豆卵磷脂加入微量乙醇(20mL)混合后置于超臨界孵育罐中，在15MPa條件下通入CO2進(jìn)行超臨界孵育25min，迅速排空CO2，脂質(zhì)體膜材將吸附在微粉化蘆薈大黃素上，得到微粉狀的磷脂——蘆薈大黃素復(fù)合物。
[0045]2.以0.01mol磷酸鹽緩沖液作為水化介質(zhì)將前述的磷脂——載體復(fù)合物在40°C和0.SMPa條件下進(jìn)行水化，得到具有黃色乳光的澄清載藥脂質(zhì)體。
[0046]3.在得到脂質(zhì)體溶液后，加入凍干保護(hù)劑對(duì)脂質(zhì)體在-30°C條件下進(jìn)行真空冷凍干燥處理。得到干燥且復(fù)溶性良好的脂質(zhì)體粉末。
[0047]按上述實(shí)施例方法制得的各類藥物脂質(zhì)體凍干粉針劑，任取其中合格的六份，測(cè)定包封率，藥脂比，粒徑，細(xì)菌檢查，和熱源檢查，均符合標(biāo)準(zhǔn)。見(jiàn)表1。
[0048]表1各實(shí)施例產(chǎn)品參數(shù)
【權(quán)利要求】
1.一種適用于水溶性蒽醌類藥物的脂質(zhì)體制備方法，其特征在于， A.將經(jīng)過(guò)微粉化處理的水溶性脂質(zhì)體支撐載體分散在溶解了脂質(zhì)體膜材的有機(jī)溶媒中，在減壓條件下進(jìn)行有機(jī)溶劑回收處理后，得到微粉狀的磷脂——載體復(fù)合物； B.或?qū)⒔?jīng)過(guò)微粉化處理的水溶性脂質(zhì)體支撐載體加入微量乙醇混合后置于超臨界孵育罐中，通入CO2進(jìn)行超臨界孵育，迅速排空CO2，得到微粉狀的磷脂一載體復(fù)合物； C.選擇水化介質(zhì)將前述的磷脂一載體復(fù)合物在進(jìn)行水化，形成液態(tài)的多層脂質(zhì)體，將此多層脂質(zhì)體進(jìn)行超聲處理后，脂質(zhì)體溶液轉(zhuǎn)變?yōu)榘胪该魅榘咨后w； 選擇離子介質(zhì)在15~85°C溫度下與藥物、B所得溶液攪拌混合，形成具有藍(lán)色乳光的澄清載藥脂質(zhì)體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，將步驟C所得的脂質(zhì)體溶液，加入凍干保護(hù)劑在-80°C~_15°C條件下進(jìn)行真空冷凍干燥或噴霧干燥處理，得脂質(zhì)體干燥粉末。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述的水化介質(zhì)為純水、各種類型的磷酸鹽緩沖溶液以及不同濃度的氯化鈉、氯化鉀、硫酸鈉、硫酸鉀，用量為脂質(zhì)體干燥體積的I~250倍。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述的離子介質(zhì)是能夠產(chǎn)生脂質(zhì)體內(nèi)外水相電勢(shì)差的離子溶 液，選自不同濃度的硫酸鹽、磷酸鹽、硝酸鹽或鹽酸鹽溶液，濃度低于 3mol/L。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述的水溶性脂質(zhì)體支撐載體為水溶性鹽類、葡萄糖、果糖、水溶性較高的晶體蛋白或水溶性蒽醌類藥物。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述的水水溶性蒽醌類藥物為米托蒽醌或蘆薈大黃素。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于，水溶性脂質(zhì)體支撐載體與磷脂的質(zhì)量比為0.2:1~25:1。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，水化過(guò)程應(yīng)當(dāng)在0.05~40MPa、5~100°C條件下進(jìn)行。
9.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述的真空冷凍干燥在_80°C~30°C下進(jìn)行程序設(shè)定并予以干燥；所述噴霧干燥方法的干燥條件為進(jìn)風(fēng)溫度15~70°C，進(jìn)料速度10~150mL.Hiin-1，旋風(fēng)分離器壓差20~150mm H20,霧化盤轉(zhuǎn)速500~2500r *min-l。
10.根據(jù)權(quán)利要求2任何一項(xiàng)所述的制備方法，其特征在于，所制備的脂質(zhì)體干燥粉末與藥學(xué)上可接受的載體制成液體制劑、固體或半固體制劑，所述的液體制劑為脂質(zhì)體注射液、口服液、噴霧劑，所述的固體或半固體制劑為片劑、膜劑、栓劑或乳膏。
【文檔編號(hào)】A61P35/00GK103610643SQ201310670509
【公開(kāi)日】2014年3月5日 申請(qǐng)日期:2013年12月10日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月10日
【發(fā)明者】王淑君, 王楠 申請(qǐng)人:沈陽(yáng)藥科大學(xué)