抗腫瘤劑的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明的目的在于提供一種具有優(yōu)異的抗腫瘤活性、另外安全性高、副作用小的抗腫瘤劑。本發(fā)明的抗腫瘤劑的特征在于，以纖維二糖作為有效成分。
【專利說(shuō)明】抗腫瘤劑
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ] 本發(fā)明涉及一種抗腫瘤劑。
【背景技術(shù)】
[0002]目前，為了開發(fā)適于癌癥的治療及癥狀減輕的治療方法，一直在進(jìn)行大量研究。作為癌癥的治療方法，適宜地使用化學(xué)療法、放射線療法及外科療法所謂的三大療法。放射線療法具有作為急性反應(yīng)及晚期反應(yīng)的副作用，放射線對(duì)正常細(xì)胞與癌細(xì)胞同時(shí)給予損傷，因此，有可能引起疲倦感、食欲不振、紅斑等皮膚障礙、來(lái)自消化器官的出血、白細(xì)胞等的減少、脫發(fā)等多種多樣的問(wèn)題。另外，外科療法在精神、體力上對(duì)患者的負(fù)擔(dān)大，有可能因手術(shù)而引起后遺癥或并發(fā)癥。另外，也存在如下問(wèn)題:在外科上難以切除的部位產(chǎn)生癌癥的情況下不能適用。
[0003]另一方面，在化學(xué)療法的領(lǐng)域，作為對(duì)癌細(xì)胞有效的抗腫瘤劑發(fā)現(xiàn)了抗生素、代謝拮抗物、烷基化劑、激素劑等。但是，這些抗腫瘤劑不僅攻擊癌細(xì)胞，而且對(duì)正常細(xì)胞也起作用，因此，引起嘔吐、惡心、食欲不振、脫發(fā)等副作用，產(chǎn)生使患者的QOL顯著降低的問(wèn)題。因此，期望安全性更高、副作用小的新型的抗腫瘤劑的開發(fā)。
[0004]作為抗腫瘤劑，在(專利文獻(xiàn)I)中公開有一種抗腫瘤劑，其以在低聚木糖分子中具有糖醒酸殘基的酸性低聚木糖和荷葉離裙傘(LyophylIum decastes)提取物作為有效成分。另外，在(專利文獻(xiàn)2)中公開有一種由單糖或雙糖和脂肪酸的糖酯構(gòu)成的抗腫瘤物質(zhì)。這些抗腫瘤劑的抗腫瘤效果不充分，還存在改良的余地。
[0005]但是，在(專利文獻(xiàn)3)中公開有一種以纖維二糖等的纖維低聚糖作為有效成分的腸內(nèi)細(xì)菌活化劑。根據(jù)該發(fā)明，纖維低聚糖使腸內(nèi)的有用細(xì)菌選擇性地增加，可以抑制有害細(xì)菌的增加。但是，關(guān)于纖維二糖等的纖維低聚糖的抗腫瘤活性，目前沒有進(jìn)行研究。
[0006]另外，在(專利文獻(xiàn)4)中公開`有一種含有纖維二糖的藥品對(duì)于癌細(xì)胞的殺細(xì)胞作用。但是，如后所述，(專利文獻(xiàn)4)中使用的物質(zhì)是作為來(lái)自植物的提取物的含雜質(zhì)的纖維二糖，該內(nèi)容也可以由該(專利文獻(xiàn)4)中記載的NMR數(shù)據(jù)得知。另外，在與(專利文獻(xiàn)4)中記載的癌細(xì)胞的生存率有關(guān)的試驗(yàn)中顯示該提取物具有殺細(xì)胞作用，由此可知，該提取物為含雜質(zhì)的纖維二糖。
[0007]現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)
[0008]專利文獻(xiàn)
[0009]專利文獻(xiàn)1:日本特開2008-208093號(hào)公報(bào)
[0010]專利文獻(xiàn)2:日本特開2002-179577號(hào)公報(bào)
[0011]專利文獻(xiàn)3:日本特開2007-330177號(hào)公報(bào)
[0012]專利文獻(xiàn)4:國(guó)際公開第2011/110190號(hào)

【發(fā)明內(nèi)容】

[0013]發(fā)明所要解決的課題[0014]本發(fā)明的目的在于，鑒于上述現(xiàn)有的狀況，提供一種具有優(yōu)異的抗腫瘤活性、另外安全性高、副作用小的抗腫瘤劑。
[0015]用于解決課題的技術(shù)方案
[0016]為了解決上述課題，本發(fā)明人等進(jìn)行了潛心研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn):作為低聚糖的一種的纖維二糖抑制由致癌性物質(zhì)誘發(fā)的癌癥的產(chǎn)生，完成了本發(fā)明。即，本發(fā)明的要點(diǎn)如下所述。
[0017](I) 一種抗腫瘤劑，該抗腫瘤劑以纖維二糖作為有效成分。
[0018](2) 一種藥品，該藥品含有上述(I)所述的抗腫瘤劑。
[0019](3) 一種食品，該食品含有上述(I)所述的抗腫瘤劑。
[0020]發(fā)明效果
[0021]根據(jù)本發(fā)明，可以得到具有優(yōu)異的抗腫瘤活性、且安全性高的抗腫瘤劑以及利用其的藥品以及食品。
【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0022]圖1是表示實(shí)施例中的各組的體重推移的坐標(biāo)圖。
[0023]圖2是表示實(shí)施例中的各組的腫瘤產(chǎn)生個(gè)體數(shù)推移的坐標(biāo)圖。
[0024]圖3是表示實(shí)施例中的各組的推定腫瘤體積推移的坐標(biāo)圖。
[0025]圖4是表示實(shí)施例`中的各組的腫瘤濕重的坐標(biāo)圖。
[0026]圖5是參考例中的試驗(yàn)物質(zhì)(纖維二糖)的13C NMR光譜。
[0027]圖6是參考例中的試驗(yàn)物質(zhì)(纖維二糖)的IH NMR光譜。
[0028]圖7是參考例中的試驗(yàn)物質(zhì)(纖維二糖)的紅外吸收光譜。
[0029]圖8是表示相對(duì)于HeLa的試驗(yàn)物質(zhì)(纖維二糖)的殺細(xì)胞活性的坐標(biāo)圖。
[0030]圖9是表示相對(duì)于HaCaT的試驗(yàn)物質(zhì)(纖維二糖)的殺細(xì)胞活性的坐標(biāo)圖。
[0031]圖10是表示相對(duì)于Hep_G2的試驗(yàn)物質(zhì)(纖維二糖)的殺細(xì)胞活性的坐標(biāo)圖。
[0032]圖11是表示相對(duì)于地塞米松濃度的生存率的變化的坐標(biāo)圖。
【具體實(shí)施方式】
[0033]下面，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。
[0034]本發(fā)明的抗腫瘤劑的特征在于，以纖維二糖作為有效成分。纖維二糖為由β?，4鍵連接的2個(gè)葡萄糖分子的二糖，化學(xué)式為C12H22O1115纖維二糖可以通過(guò)用纖維素酶分解纖維素類物質(zhì)的方法、使葡萄糖的單糖或其衍生物縮合或糖轉(zhuǎn)移的方法、由蔗糖合成的方法等適當(dāng)?shù)刂圃臁?br> [0035]作為利用纖維素酶分解的纖維素類物質(zhì)，植物性及動(dòng)物性的任一種均可以適用。具體而言，可以使用來(lái)自棉花、木材、竹、洋麻、小麥、水稻、細(xì)菌纖維素等中含有的天然物的纖維質(zhì)物質(zhì)、或使這些物質(zhì)溶解于溶劑后并再生的再生纖維素、或?qū)嵤┻@些化學(xué)處理并制成纖維素衍生物的物質(zhì)等。這些纖維素類物質(zhì)可以使用任一種，也可以并用2種以上。特別是沒有經(jīng)過(guò)溶解或化學(xué)處理的天然的纖維素類物質(zhì)，由于在得到的纖維二糖中不含有對(duì)人體有害的溶劑或化學(xué)物質(zhì)而優(yōu)選。
[0036]作為纖維素酶，只要具有對(duì)于纖維素的分解活性就可以適用。作為纖維素酶酶源，可列舉:纖維素酶產(chǎn)生菌體本身、將纖維素酶產(chǎn)生菌分泌的酶精制成的物質(zhì)、或?qū)⒕泼概c賦形劑、穩(wěn)定化劑等添加劑同時(shí)進(jìn)行了制劑化的物質(zhì)等。對(duì)制劑中的添加劑的種類沒有特別限制，其劑型可以為粉末、顆粒、液體等任一種。
[0037]作為纖維素酶的酶分解方法，可以列舉例如使纖維素類物質(zhì)懸浮于水性介質(zhì)中、在其懸浮液中添加纖維素酶、一邊攪拌或振蕩、一邊加熱而進(jìn)行糖化反應(yīng)的方法等。從纖維二糖的產(chǎn)率等觀點(diǎn)出發(fā)，此時(shí)的懸浮方法、攪拌方法、纖維素類物質(zhì)及纖維素酶的添加方法及添加順序、這些物質(zhì)的濃度等反應(yīng)條件可以適當(dāng)?shù)卦O(shè)定。另外，就反應(yīng)液的PH以及溫度等條件而言，只要是不使纖維素酶失活的條件即可，具體而言，在常壓下進(jìn)行反應(yīng)時(shí)，溫度可以設(shè)定為5~95°C，pH可以設(shè)定為I~11的范圍。
[0038]作為優(yōu)選的實(shí)例，本發(fā)明中的纖維二糖可以將棉花(脫脂棉)進(jìn)行酶分解而得到。與以木質(zhì)類作為原料的方法相比，該方法在工藝時(shí)間非常短的方面是有利的。根據(jù)HPLC測(cè)定確認(rèn):由棉花的酶分解得到的生成物含有大約75%的纖維二糖、22%的葡萄糖及3%的纖
維二糖。
[0039]制造的纖維二糖可以根據(jù)需要實(shí)施酶除去、脫鹽、脫色等精制處理。精制方法可以沒有特別限制地使用公知的方法，可以列舉例如色譜處理、精密過(guò)濾、超濾、逆浸透膜過(guò)濾等過(guò)濾處理、晶析處理、利用離子交換樹脂的處理、活性炭處理等，可以單獨(dú)進(jìn)行這些處理的任一種，或組合多種處理而進(jìn)行。
[0040]如上得到的纖維二糖對(duì)于乳腺癌等各種癌癥抑制腫瘤的產(chǎn)生，或具有抑制腫瘤的生長(zhǎng)的抗腫瘤活性，可以作為藥品利用。將纖維二糖的抗腫瘤劑用作藥品時(shí)，其形態(tài)沒有特別限制，可以根據(jù)給藥方法或適用的腫瘤的種類、形狀及存在部位等條件，從藥片、膠囊、散劑、顆粒劑、功能性飲料(卜^ >々剤)等各種形態(tài)中適當(dāng)?shù)剡x擇。即，可以將纖維二糖的抗腫瘤劑直接用作藥品，或者可以根據(jù)需要與載體、稀釋劑或賦形劑等通常的添加物組合而做成藥品。
[0041]本發(fā)明的抗腫瘤劑的攝取或給藥量為治療上有效的量，由于腫瘤的種類等不能一概而論，體重60kg的成人的情況，作為每天的上述纖維二糖的量，通常為240mg以上，優(yōu)選2400mg以上。給藥量的上限沒有特別限定，但優(yōu)選設(shè)定為低于4800mg。另外，本發(fā)明的抗腫瘤劑也可以與公知的抗腫瘤劑或其它治療劑并用。
[0042]而且，一般在食品中含有與本發(fā)明相關(guān)的纖維二糖的抗腫瘤劑，可以作為具有抗腫瘤活性的功能性食品進(jìn)行利用。另外，可以將纖維二糖使用明膠等進(jìn)行膠囊化，將該膠囊用作保健食品、或混合于飲料、糕點(diǎn)、口香糖、糖果等中。
[0043]【實(shí)施例】
[0044]下面，基于實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步詳細(xì)地進(jìn)行說(shuō)明。但是，僅例示以下的實(shí)施例，本發(fā)明并不受這些實(shí)施例的任何限定。
[0045](實(shí)施例)
[0046]1.試驗(yàn)?zāi)康?br> [0047]使用大鼠DMBA誘發(fā)乳腺癌模型研究纖維二糖的抗腫瘤作用。
[0048]2.適用的基準(zhǔn)
[0049]本試驗(yàn)準(zhǔn)用以下的法律、基準(zhǔn)及指南。
[0050]?與動(dòng)物的愛護(hù)以及管理有關(guān)的法律[法律第105號(hào)、昭和48年10月I日(平成23年8月30日最終改正:法律第105號(hào))]
[0051].與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)及保管以及痛苦的減輕有關(guān)的基準(zhǔn)(環(huán)境省告示第88號(hào)、平成I8年4月28日)
[0052].與動(dòng)物的殺處置方法有關(guān)的指南[總理府告示第40號(hào)、平成7年7月4日(平成19年11月12日一部分改正:環(huán)境省告不第105號(hào))]
[0053]予以說(shuō)明，本試驗(yàn)是得到試驗(yàn)實(shí)施設(shè)施內(nèi)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)委員會(huì)規(guī)定的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)計(jì)劃書的審議、承認(rèn)后實(shí)施的。
[0054]3.試驗(yàn)的概要
[0055]使用大鼠DMBA誘發(fā)乳腺癌模型研究纖維二糖的抗腫瘤作用。具體而言，將7周齡的雌性大鼠以體重為指標(biāo)分組后，以20mg/mL/只將7，12- 二甲基苯并[a]蒽(DMBA)進(jìn)行強(qiáng)制經(jīng)口給藥。而且，以4mg/kg/日及40mg/kg/日的兩種劑量，從分組日的第二天起I天I次連續(xù)12周強(qiáng)制經(jīng)口給藥試驗(yàn)物質(zhì)。
[0056]其結(jié)果，在低劑量以及高劑量組中，均與對(duì)照組相比，腫瘤的產(chǎn)生時(shí)期慢，對(duì)于腫瘤重量，高劑量組與對(duì)照組相比差異不顯著，但顯示了較低的值。由此暗示:對(duì)于由作為致癌性物質(zhì)的DMBA誘發(fā)的乳腺癌，作為試驗(yàn)物質(zhì)的纖維二糖抑制其產(chǎn)生。
[0057]4.試驗(yàn)材料及器材
[0058](I)試驗(yàn)物質(zhì)及介質(zhì)
[0059]a)試驗(yàn)物質(zhì)
`[0060]名稱:纖維二糖
[0061]性狀:粉末
[0062]保存條件:低溫保存
[0063]使用上的注意事項(xiàng):由于吸濕性高，所以使用后密閉并注意濕氣。
[0064]b)蒸餾水
[0065]名稱:注射用水
[0066]保存條件:室溫
[0067]制造商:大冢制藥工場(chǎng)(株)
[0068]使用上的注意事項(xiàng):沒有特別。
[0069]c) CMC
[0070]名稱:羧甲基纖維素鈉
[0071]保存條件:室溫
[0072]制造商:關(guān)東化學(xué)(株)
[0073]使用上的注意事項(xiàng):沒有特別。
[0074](2)使用試劑
[0075]作為致癌劑，使用以下的試劑。
[0076]a)DMBA
[0077]名稱:7，12- 二甲基苯并[a]蒽
[0078]保存條件:室溫
[0079]制造商:SIGMA
[0080]使用上的注意事項(xiàng):為了避免吸入以及附著于皮膚，戴上口罩、安全眼鏡以及手套。
[0081]b)芝麻油
[0082]名稱:芝麻油
[0083]保存條件:室溫
[0084]制造商:SIGMA
[0085]使用上的注意事項(xiàng):沒有特別。
[0086](3)使用動(dòng)物
[0087]6周齡的大鼠、Crl AD(SD) (SPF)、由日本查爾斯河(株)在2012年3月28日購(gòu)入52只雌性(發(fā)注數(shù):50只)。
[0088]對(duì)動(dòng)物在進(jìn)貨日利用耳穿孔法進(jìn)行個(gè)體識(shí)別，從進(jìn)貨至分組日進(jìn)行馴化。每天進(jìn)行一般狀態(tài)觀察，選擇在一般狀態(tài)以及體重推移上沒有看到異常的動(dòng)物進(jìn)行使用。在各籠中，在分組前附加記入試驗(yàn)編號(hào)、性別及個(gè)體識(shí)別編號(hào)(耳穿孔編號(hào))的卡片，在分組后追記組及動(dòng)物編號(hào)。
[0089](4)飼育方法
[0090]通過(guò)馴化飼育及實(shí)驗(yàn)期間，在溫度22±3°C、濕度50±20%、照明12小時(shí)(8:00~20:00)、換氣次數(shù)13~17次/小時(shí)的環(huán)境下、分別地收容在設(shè)置于不銹鋼制可動(dòng)飼草架(1790WX470DX1650H、mm)的不銹鋼制金屬網(wǎng)2連籠的I區(qū)域(255WX 18OTX 200H、mm)中。飼料是使用不銹鋼制固體飼料給餌器自由地供給固體飼料CRF-1 (東方酵母工業(yè)(株))。水是利用聚砜制給水器(先管不銹鋼制)自由地供給自來(lái)水。
[0091]5.試驗(yàn)方法
[0092](I)分組
[0093]選擇在檢疫、馴化期間的一般狀態(tài)觀察中沒有看到異常的動(dòng)物，以體重為指標(biāo)，利用分層連續(xù)隨機(jī)化法、基于下述組構(gòu)成表(表1)進(jìn)行分組。對(duì)于殘余動(dòng)物，在分組實(shí)施日從試驗(yàn)組排除，利用乙醚的過(guò)量麻醉使其安樂(lè)死并處置。
[0094]【表1】
【權(quán)利要求】
1.一種抗腫瘤劑，該抗腫瘤劑以纖維二糖作為有效成分。
2.一種藥品，該藥品含有權(quán)利要求1所述的抗腫瘤劑。
3.一種食品，該食 品含有權(quán)利要求1所述的抗腫瘤劑。
【文檔編號(hào)】A61P35/00GK103764152SQ201380002486
【公開日】2014年4月30日 申請(qǐng)日期:2013年8月26日 優(yōu)先權(quán)日:2012年8月24日
【發(fā)明者】巖元正孝 申請(qǐng)人:可克意株式會(huì)社