皮膚共生益生元劑和包含其的組合物的局部使用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了用于改善皮膚微生物組的健康狀態(tài)、從而潛在地改善皮膚的狀況和/或外觀的皮膚共生益生元的局部使用，以及包含該皮膚共生益生元的局部化妝品組合物。所述局部化妝品組合物可包含皮膚病學(xué)可接受的載體和有效量的益生元，并且可與一種或多種口服的或局部的益生元、益生菌和/或益生菌裂解物一起使用。
【專利說明】皮膚共生益生元劑和包含其的組合物的局部使用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本文的組合物和方法一般地涉及針對皮膚共生微生物的益生元劑的使用。更具體 地，本文的組合物和方法涉及局部施用的益生元劑。

【背景技術(shù)】
[0002] 大多數(shù)人的皮膚和胃腸道（"GI"）定植著大量各種不同類的微生物。定植一般開 始于出生后不久，當(dāng)嬰兒暴露于母親的微生物區(qū)系和通常導(dǎo)致向先前無菌的人類胎兒的定 植的其他環(huán)境事件時(shí)。從初始的定植時(shí)起，人類的微生物組保持不斷變化的狀態(tài)，其中常駐 微生物區(qū)系的組成響應(yīng)于對宿主而言內(nèi)在和外在的因素而隨著時(shí)間變化。一般來講，定植 于人類宿主的微生物可被劃分為三個不同的類別。（1)零星駐留并通常不增殖的那些，（2) 可增殖并與宿主在一起（例如，在皮膚上或在胃腸道中）相對短時(shí)期的那些，和（3)可永久 性地定植于宿主的那些。
[0003] 已經(jīng)認(rèn)識到，宿主的健康狀態(tài)至少部分地依賴于宿主的微生物組的健康狀態(tài)。例 如，通常存在于人類胃腸道的某些微生物提供的健康有益效果已被很好地研究。相似地，不 健康的或不平衡的胃腸道微生物組的不可取的效應(yīng)也是為人們所熟知的。有關(guān)宿主的健康 狀態(tài)和宿主的胃腸道微生物組的健康狀態(tài)之間關(guān)系的知識，已產(chǎn)生了市場定位于改善或維 持人類胃腸道微生物組中的一個或多個成員的健康狀態(tài)的多種可商購獲得的產(chǎn)品。這些可 商購獲得的產(chǎn)品一般被分類為益生菌、益生元或合生元。益生菌是所謂的"好"微生物（通 常為細(xì)菌），其活著被人攝入，使得所引入的微生物能夠定植在此人的胃腸道中。常規(guī)的益 生元是可攝取的成分，其選擇性地支持有利地存在于胃腸道中的"好"微生物的生長或生 存。常規(guī)的益生元通常是能夠被胃腸道微生物組中的一個或多個成員吸收、但不能被人類 宿主消化的營養(yǎng)物質(zhì)來源（例如，低聚果糖或低聚半乳糖）。合生元是益生元和益生菌的混 合物。合生元的益生元部分向合生元的益生菌部分提供合適的營養(yǎng)物質(zhì)來源，這據(jù)信提高 了益生菌存活和定植的可能性。
[0004] 不久前，關(guān)注轉(zhuǎn)向了存在于人類皮膚上的微生物區(qū)系，以更好地了解駐留的微生 物區(qū)系的健康狀態(tài)和宿主的健康狀態(tài)之間的關(guān)系。不出意料地，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)健康平衡的皮膚 微生物組能夠向人類宿主提供健康和/或美容有益效果，例如，通過刺激人類的免疫系統(tǒng) 和/或產(chǎn)生定向減少不希望的微生物的定植的抗微生物物質(zhì)。另一方面，破壞皮膚微生物 區(qū)系的微妙平衡的擾動可以為宿主和/或微生物區(qū)系帶來不可取的后果。例如，與痤瘡丙 酸桿菌的增殖相關(guān)聯(lián)的游離脂肪酸副產(chǎn)物的增產(chǎn)可促進(jìn)粉刺的發(fā)展。就所存在的微生物 的類型和多樣性兩者而言，人類皮膚微生物組的組成與胃腸道微生物組的組成是顯著不同 的。因此，毫無意外的是，至少部分地由于兩種微生物組存在于其中的顯著不同的環(huán)境和可 供用作食物的底物，胃腸道和皮膚微生物組的成員可利用不同的營養(yǎng)物質(zhì)來源。
[0005] 為人們所熟知的是，微生物的飲食需求從一個物種到另一個可顯著地不同，并且 對于在特定微生物上表現(xiàn)出益生元活性的試劑，在不同的微生物上表現(xiàn)出無益生元活性是 并不稀奇的。例如，被設(shè)計(jì)用于胃腸道微生物區(qū)的益生元?dú)v史上是基于碳水化合物的材料， 其作為食物用于駐留的糖分解驅(qū)動的微生物。但存在于人的皮膚上的微生物區(qū)系能夠包括 親脂的生物，其不一定能被預(yù)期吸收碳水化合物。甚至可存在于皮膚上的糖分解的微生物 也可能不利用與胃腸道微生物相同種類的碳水化合物，因?yàn)榇嬖谟谄つw上的微生物一般不 暴露于與胃腸道中的微生物相同種類的碳水化合物。
[0006] 盡管可能毫無意外的是，人類的胃腸道和皮膚微生物組的組成可顯著地不同，也 許更加令人意外的是相同微生物組的組成在個體之間也能夠存在顯著的變異度這一發(fā)現(xiàn)。 提供健康、平衡的皮膚微生物組的健康和美容有益效果直到最近才被較好地了解。因此，僅 鑒定了有限數(shù)量的合適的益生元劑用于皮膚上的使用。此外，常規(guī)的益生元劑通常是口服 施用的，例如，作為營養(yǎng)補(bǔ)充劑方案的部分。雖然口服攝取可能適于向胃腸道遞送益生元 齊IJ，它可能不是向存在于皮膚上的微生物區(qū)遞送益生元的最佳途徑。
[0007] 因此，存在通過提供在一種或多種皮膚共生微生物上表現(xiàn)出益生元活性的試劑來 改善人類皮膚的健康狀態(tài)和/或外觀的需求。還存在對于向皮膚共生微生物遞送益生元劑 的改善的機(jī)制的需求。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 為了提供對上述問題中的一個或多個的解決，本文公開了用于改善皮膚的狀況和 /或外觀的方法。所述方法包括向皮膚局部施用化妝品組合物。所述化妝品組合物包含皮 膚病學(xué)可接受的載體和低聚半乳糖。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0009] 圖1示出了示例性的微生物組群體分布。
[0010] 圖2示出了基于體外測試，隨著時(shí)間進(jìn)程對測試試劑的微生物ATP響應(yīng)。
[0011] 圖3示出了基于體外測試，隨著時(shí)間進(jìn)程對測試試劑的細(xì)菌計(jì)數(shù)響應(yīng)。
[0012] 圖4示出了基于體外測試，對不同含量的測試試劑的微生物ATP響應(yīng)。
[0013] 圖5示出了基于體外測試，對不同含量的測試試劑的細(xì)菌計(jì)數(shù)響應(yīng)。
[0014] 圖6示出了基于體內(nèi)測試，對測試試劑的需氧微生物的細(xì)菌計(jì)數(shù)響應(yīng)。
[0015] 圖7示出了基于體內(nèi)測試，對測試試劑的厭氧微生物的細(xì)菌計(jì)數(shù)響應(yīng)。
[0016] 圖8示出了對多種組合物的體外的細(xì)菌ATP響應(yīng)。
[0017] 圖9顯示了就體內(nèi)研究而言的測試計(jì)劃表的一部分。
[0018] 圖10示出了測試區(qū)域在人的前臂上的示例性位置。

【具體實(shí)施方式】
[0019] 定義
[0020] "化妝品組合物"是指適于局部施用于哺乳動物皮膚和/或諸如毛發(fā)和指/趾甲的 角質(zhì)組織上的組合物，其旨在改善所述皮膚或角質(zhì)組織的狀況和/或外觀，或以其他方式 提供護(hù)膚有益效果。局部是指皮膚或其他角質(zhì)組織的表面?；瘖y品組合物包括任何有色化 妝品、指/趾甲、或護(hù)膚產(chǎn)品。"護(hù)膚"是指調(diào)節(jié)和/或改善皮膚狀況。護(hù)膚有益效果的一 些非限制性例子包括通過提供更光滑、更均勻的外觀和/或感覺來改善皮膚外觀和/或感 覺；增加皮膚的一個或多個層的厚度；改善皮膚的彈性或回彈力；改善皮膚的緊致度；和減 少皮膚的油性的、有光澤的、和/或無光澤的外觀、改善皮膚的水合狀態(tài)或保濕狀態(tài)、改善 細(xì)紋和/或皺紋的外觀、改善皮膚肌理或光滑性、改善皮膚剝落或脫屑、使皮膚豐滿、改善 皮膚屏障性能、改善皮膚色調(diào)、減少紅色或皮膚斑點(diǎn)的外觀、和/或改善皮膚的亮度、光彩、 或半透明性?；瘖y品組合物的一些非限制性例子包括在面部留下顏色的產(chǎn)品，例如粉底、睫 毛膏、遮瑕膏、眼線膏、眉彩、眼影、腮紅、唇膏、潤唇膏、化妝底粉、固體乳液粉盒等。"護(hù)膚產(chǎn) 品"包括但不限于護(hù)膚霜、保濕劑、洗劑、和沐浴露。
[0021] "皮膚病學(xué)可接受的載體"是指可局部施用于皮膚或角質(zhì)組織的載體。皮膚病學(xué)可 接受的載體可以是很多種形式，例如，簡單溶液（水基或油基的）、固體形式（凝膠或棒狀 物）和乳液（油包水或水包油）。
[0022] "有效量"是指在指定條件下足夠具有指定特性的指定組分的量。例如，益生元的 有效量是指足夠在體外和/或體內(nèi)導(dǎo)致一種或多種所選擇的微生物的代謝物含量和/或細(xì) 菌計(jì)數(shù)的所期望的增加的量。
[0023] "胃腸道微生物"或"GI微生物"是定植（S卩，生活和繁殖）在人類消化道中的原 核生物和/或真核生物。
[0024] "增加"是指高于基礎(chǔ)含量或與對照相比的增加。例如，可以測定基礎(chǔ)含量以用于 體內(nèi)研究，而對照被用于體外測試。
[0025] "代謝"是指在微生物內(nèi)發(fā)生的任何化學(xué)反應(yīng)。代謝包括合成代謝，即生物分子的 合成（例如蛋白質(zhì)合成和DNA復(fù)制），和分解代謝，即生物分子的裂解。
[0026] "微生物裂解物"是指產(chǎn)生自微生物裂解的細(xì)胞組分和試劑的混合物。"裂解"涉 及通過處理（例如，化學(xué)的、生物學(xué)的、機(jī)械的、或熱的處理）使細(xì)胞的細(xì)胞壁和/或細(xì)胞膜 破裂，導(dǎo)致該細(xì)胞的生物學(xué)組分的一些或全部的釋放的動作。
[0027] "微生物體"和"微生物"是同義的，是指細(xì)菌、真菌、和藻類。
[0028] "基本碳培養(yǎng)基"（"MCM"）是指用于支持微生物的有限生長（即，在24小時(shí)期間 菌落形成單位數(shù)（"CFU"）小于0. 2對數(shù)增長）和/或生存的物質(zhì)的混合物，在其中碳是限 制性資源。在某些實(shí)施例中，MCM可以是液體或凝膠的形式。由于在不同微生物之間基本的 碳需求可能有差別，MCM中存在的碳的量也可以有差別。在某些實(shí)施例中，例如，MCM可以完 全不含碳。在某些實(shí)施例中，MCM可以基本上不含碳（即，基于培養(yǎng)基的重量計(jì)，小于0.001 重量％)。在某些實(shí)施例中，MCM可包含0.001%至0.1%的碳。碳的量以存在的碳的摩爾 份數(shù)或分子量％被測定。例如，葡萄糖按重量計(jì)為40%碳。
[0029] "低聚糖"是指包含少量（例如，二至十）的單糖的糖類聚合物。
[0030] "可口服攝取"是指旨在被置于口中并被吞下的組合物。
[0031] "PCR"是指聚合酶鏈反應(yīng)，并且包括實(shí)時(shí)PCR、定量PCR( "QPCR"）、半定量PCR、以 及它們的組合。
[0032] "益生元"是指能夠作為營養(yǎng)物質(zhì)被所選擇的微生物（例如，皮膚共生微生物或胃 腸道微生物）利用、能夠誘導(dǎo)所選擇的微生物的生長和/或活性、能夠誘導(dǎo)所選擇的微生物 的復(fù)制、能夠作為能量源被所選擇的微生物利用、和/或能夠被所選擇的微生物用于生物 分子（即，RNA、DNA、和蛋白質(zhì)）的制備的任何物質(zhì)或多種物質(zhì)的組合。益生元的非限制性 例子包括黏多糖、低聚糖如低聚半乳糖（"G0S"）、多糖、氨基酸、維生素、營養(yǎng)物質(zhì)前體、收 集的生物體的代謝產(chǎn)物、脂類、和蛋白質(zhì)。為了確定測試試劑是否在一種微生物上表現(xiàn)出益 生元活性，可能期望將該測試試劑與惰性緩沖液（例如，鹽水溶液）或溶劑混合。合適的溶 劑的非限制性例子包括二甲基亞砜（DMSO)、諸如甲醇和乙醇的醇類、和諸如水和培養(yǎng)基的 水性溶液。
[0033] "復(fù)制"是指微生物向子細(xì)胞的分裂（例如，通過有絲分裂或二分裂）。
[0034] "皮膚"是指表皮、真皮、和下皮（即，皮下組織）、毛囊、毛根、毛球、甲床（爪床）的 腹側(cè)上皮層、皮脂腺和汗腺（外分泌的和頂泌的）中的一種或多種。
[0035] "皮膚共生微生物"是指在體外和/或體內(nèi)可定植（即，在人類皮膚上生活和繁 殖）或暫時(shí)棲息在人類皮膚上的原核生物和真核生物。示例性的皮膚共生微生物包括但 不限于 α 變形菌（Alphaproteobacteria)、β 變形菌（Betaproteobacteria)、γ 變形菌 (Gammaproteobacteria)、丙酸桿菌（Propionibacteria)、棒狀桿菌（Corynebacteria)、 放線菌（Actinobacteria)、梭菌（Clostridiales)、乳桿菌（Lactobacillales)、葡 萄球菌（Staphylococcus)、芽抱桿菌（Bacillus)、微球菌（Micrococcus)、鏈球菌 (Streptococcus)、擬桿菌（Bacteroidales)、黃桿菌（Flavobacteriales)、腸球菌 (Enterococcus)、假單胞菌（Pseudomonas)、馬拉色菌（Malassezia)、Maydida、德巴利酵母 (Debaroyomyces)、和隱球菌（Cryptococcus)。
[0036] "局部的"及其變型是指旨在被直接施用于皮膚或其他角質(zhì)組織的外表面的組合 物。
[0037] 冠詞"一個"和"一種"被理解為指所指稱的和/或描述的對象的一個或多個。
[0038] 靶標(biāo)微牛物的詵擇
[0039] 哺乳動物皮膚的表面通常包含很多種的微生物，其可以是物種與物種不同的、個 體與個體不同的、和甚至是一個個體的位置與位置不同的。總之，這些微生物形成了微生物 組。健康的皮膚微生物組將大體由皮膚共生微生物的平衡的集合組成。人類宿主的皮膚微 生物組可包含幫助提升宿主皮膚的健康狀態(tài)和/或外觀的多種駐留微生物。但在一些情況 下，某些不期望的微生物如病原性細(xì)菌、酵母和真菌可能企圖定植在皮膚上。此類微生物的 定植能夠擾亂健康的微生物組的平衡。幸運(yùn)的是，通常（并且有利地）存在于人類皮膚微 生物組中的駐留微生物已進(jìn)化出多種主動和被動的機(jī)制來抑制和/或防止不期望的微生 物在皮膚上定植。被動機(jī)制的例子包括針對可被不期望的微生物占據(jù)的生態(tài)位的競爭，以 及消耗對于不期望的微生物的生長和增殖至關(guān)重要的營養(yǎng)物質(zhì)。就主動的機(jī)制而言，合乎 期望的微生物可產(chǎn)生抑制不期望的微生物的增殖、或甚至將它們徹底殺滅的代謝物。除了 對不期望的微生物的抑制之外，還有越來越多的證據(jù)表明某些駐留微生物區(qū)系影響先天免 疫。例如，已經(jīng)證明皮膚微生物組的某些成員通過它們對脂類、蛋白質(zhì)和碳水化合物的代謝 產(chǎn)生有助于維持皮膚的"酸性殼層"的酸。
[0040] 使微生物組保持處于健康、平衡的狀態(tài)和/或使微生物組回到健康、平衡的狀態(tài) 的一種方法可以是向某些合乎期望的微生物提供足夠的營養(yǎng)物質(zhì)，以使其興旺發(fā)展，并從 而勝過和/或殺滅不期望的細(xì)菌。例如，可能有利的是在人們在它們的日常護(hù)膚方案中使 用的組合物中包含一種或多種益生元劑。然而，這并不是一件容易的事，因?yàn)槿伺c人之間 微生物的組成的可變性可導(dǎo)致作為有效的益生元適合一個人的皮膚共生微生物的特定的 試劑不適合另一個人。盡管在不同個體的皮膚共生微生物中可觀察到廣泛的可變性，已 發(fā)現(xiàn)的確存在一些共性。例如，已發(fā)現(xiàn)杰氏棒狀桿菌（Corynebacterium jeikeium("C. jeikeium")）、表皮葡萄球菌（Staphylococcus epidermidis( "S.epidermidis")）、和痤瘡 丙酸桿菌（Propionibacterium acnes("P.acnes")）以不同的程度以可測量的量存在于人 類的面部和前臂兩者上。
[0041] 圖1示出了可存在于人的面部和前臂上的類似但不同的微生物群體。圖1中示出 的微生物是通過用磷酸鹽緩沖鹽水（"PBS"）潤濕的無菌拭子對皮膚取樣而分離的。圖1中 示出的QPCR分析利用了從拭子樣品分離的DNA。如圖1所示，葡萄球菌（Staphylococcus)、 棒狀桿菌（Corynebacterium)和丙酸桿菌（Propionibacterium)均存在于所取樣的個 體的面部和前臂上。因此，在益生元篩選方法中包括痤瘡丙酸桿菌（P.acnes)、葡萄球菌 (Staphylococcus)和棒狀桿菌（Corynebacterium)可能對于預(yù)測潛在的益生元劑的體內(nèi) 效應(yīng)是尤其有用的。圖1還示出了丙酸桿菌（Propionibacterium)相較于前臂更常見于面 部，而就棒狀桿菌（Corynebacterium)和葡萄球菌（Staphylococcus)而言似乎正好相反。 因此，由于痤瘡丙酸桿菌（P.acnes)對前臂和面部微生物組的組成的相應(yīng)貢獻(xiàn)，表現(xiàn)出對 痤瘡丙酸桿菌的益生元活性的試劑可能對皮膚健康和/或皮膚微生物組具有顯著的影響。 并且表現(xiàn)出對棒狀桿菌（Corynebacterium)和葡萄球菌（Staphylococcus)的益生元活性 的試劑可被用于提供特定于前臂和/或具有類似微生物組組成的其他身體區(qū)域的靶向皮 膚健康有益效果。
[0042] 就可有利地影響皮膚微生物組和/或皮膚健康的皮膚共生微生物而言，據(jù)信杰氏 棒狀桿菌（C. jeikeium)、表皮葡萄球菌（S. epidermidis)、和痤瘡丙酸桿菌（P. acnes)提供 皮膚健康和/或期望的微生物組有益效果，通過向這些微生物提供具有益生元潛能的化合 物可使它們增加。具體地，已經(jīng)證明杰氏棒狀桿菌（C. jeikeium)產(chǎn)生螯合鐵的鐵載體。杰 氏棒狀桿菌（C. jeikeium)還采用特化的機(jī)制來捕集錳，二者均是某些不期望的微生物的 生長所必需的。
[0043] 表皮葡萄球菌（S.印idermidis)據(jù)信在刺激皮膚的免疫系統(tǒng)中起著積極作用，例 如，通過影響經(jīng)Toll樣受體("TLR"）信號的角質(zhì)細(xì)胞的先天免疫應(yīng)答。此外，表皮葡萄球菌 (S. epidermidis)據(jù)信占據(jù)了宿主細(xì)胞上的、還被諸如金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus)的更具毒性的微生物識別的受體。另外，表皮葡萄球菌（S. epidermidis)產(chǎn)生包含 羊毛硫氨酸的抗菌肽（有時(shí)被稱為細(xì)菌素），已知其表現(xiàn)出對某些有害細(xì)菌物種的抗菌特 性。此類肽的例子包括：表皮素（epidermin)、epilancin K7、epilancin 15X Pep5、和葡萄 球菌素（staphylococcin) 1580。由表皮葡萄球菌（S. epidermidis)產(chǎn)生的其他肽反作用于 種內(nèi)和種間的競爭者。上述肽有效地抗金黃色葡萄球菌（Streptococcus aureus)、A組鏈 球菌（streptococcus)、和釀胺鏈球菌（Streptococcus pyogenes)。
[0044] 痤瘡丙酸桿菌（P. acnes)是共生的、非孢子的、桿狀的（棒狀的）、革蘭氏陽性的細(xì) 菌，存在于人體的多種位置，包括皮膚、口、泌尿道和大腸的區(qū)域。痤瘡丙酸桿菌（P.acnes) 能夠消耗皮膚的油并產(chǎn)生諸如短鏈脂肪酸和丙酸的副產(chǎn)物，這些副產(chǎn)物已知有助于維持健 康的皮膚pH和屏障性能。諸如痤瘡丙酸桿菌（P.acnes)的丙酸桿菌還產(chǎn)生細(xì)菌素和細(xì)菌 素樣的化合物（例如，propionicin P1G-1、jenseniin G、propionicins SMI、SM2 T1、和 acnecin)，這些化合物對不期望的產(chǎn)乳酸細(xì)菌、革蘭氏陰性細(xì)菌、酵母、和霉菌是抑制性的。
[0045] 考慮到據(jù)信由杰氏棒狀桿菌（C. jeikeium)、表皮葡萄球菌（S. epidermidis)、和 痤瘡丙酸桿菌（P.acnes)提供的有益的功能，以及它們似乎存在于人的前臂和面部上，對 這些皮膚共生微生物中的一種、兩種、或甚至全部提供表現(xiàn)出適當(dāng)?shù)捏w內(nèi)益生元活性的試 劑將是合乎期望的。并且由于至少一些化妝品組合物通常被施用于人的面部、手和/或前 臂，可能有利的是向這些化妝品組合物中摻入促進(jìn)杰氏棒狀桿菌（c. jeikeium)、表皮葡萄 球菌（S. epidermidis)、和/或痤瘡丙酸桿菌（P. acnes)的健康狀態(tài)和/或生存的成分。當(dāng) 然，應(yīng)當(dāng)理解本文所述的益生元活性不限于前述微生物，而是可同樣表現(xiàn)出對其他皮膚共 生微生物的適當(dāng)?shù)囊嫔钚浴?br> [0046] 益牛元劑
[0047] 微生物，以及實(shí)際上全部的生命形式，已進(jìn)化為在它們的環(huán)境中是成功的。生物體 的進(jìn)化的一個方面是適于利用通常存在于該生物的棲息地的可用的食物源。因此，皮膚共 生微生物傾向于利用通常存在于皮膚上和/或在其內(nèi)的營養(yǎng)物質(zhì)來源，而棲息在胃腸道的 微生物傾向于利用通常存在于胃腸道的食物源。例如，存在于大多數(shù)人的皮膚上的痤瘡丙 酸桿菌（P. acnes)已知消耗皮脂腺中的脂肪酸或由毛囊分泌的皮脂。另一方面，通常存在 于人類胃腸道的雙歧雙歧桿菌（Bifidobacterium bifidum)能夠利用低聚半乳糖（"G0S"） 作為食物源。由于胃腸道中的環(huán)境和皮膚上的環(huán)境之間的實(shí)質(zhì)差異以及通常存在于各自環(huán) 境中的可用的營養(yǎng)物質(zhì)的實(shí)質(zhì)差異，皮膚共生微生物和胃腸道微生物預(yù)期不利用相同的食 物源。
[0048] 諸如G0S的可攝取形式的益生元劑用于改善胃腸道微生物組的健康狀態(tài)是為人 們所熟知的。如前文所指出的，一般被認(rèn)為是存在于人類胃腸道中的有益菌種的雙歧雙歧 桿菌（Bifidobacterium bifidum)已知利用G0S作為食物源。G0S是利用β-半乳糖苷酶的 半乳糖基轉(zhuǎn)移酶活性通常從乳糖產(chǎn)生的包含半乳糖的低聚糖。根據(jù)下式，取決于用于制備 其的方法，G0S可包括二、三、四、五、或六糖或這些中的兩種或更多種的混合物：
[0049] Glc al-4[P-Gal l-6]n
[0050] 其中 η = 2-5，
[0051] Gal表示半乳糖殘基而
[0052] Glc表示葡萄糖殘基。
[0053] 在尤其合適的實(shí)施例中，G0S可以是混合物的形式，其包含20至35% w/v的二糖、 20至35% w/v的三糖、約15至約25% w/v的四糖、和10至20% w/v的五糖。授予Gibson 等人的美國專利7, 883, 874和授予Tzortzis等人的美國專利8, 030, 049和8, 058, 047各 自公開了 G0S和制備G0S的方法的例子。
[0054] G0S是可以諸如粉末和糖漿的多種形式商購獲得的。G0S還可作為成分存在于供 人類和/或動物消耗的銷售的食物產(chǎn)品中。G0S的可商購獲得的來源的尤其合適的例子是 BIMUN0,可購自Clasado, Inc. (Panama)。據(jù)信BIMUN0是G0S、膳食纖維和其他填充成分的 混合物。授予Gibson等人的美國專利7, 883, 874公開了通過雙歧雙歧桿菌（B. bifidum)的 菌株產(chǎn)生的G0S的合適的例子，該菌株通過半乳糖苷酶活性將乳糖轉(zhuǎn)化為前述的G0S的混 合物。以這種方式產(chǎn)生的G0S被描述為包含至少一種二糖、至少一種三糖、至少一種四糖和 至少一種五糖。盡管G0S是已知的針對胃腸道微生物的益生元劑，G0S通常不以顯著量存在 于人類皮膚上。因此，G0S先前尚未被考慮用作針對皮膚共生微生物的益生元。然而，已出 人意料地發(fā)現(xiàn)，G0S表現(xiàn)出對至少一些皮膚共生微生物的可取水平的益生元活性。具體地， GOS表現(xiàn)出對杰氏棒狀桿菌（C. jeikeium)、表皮葡萄球菌（S.印idermidis)、和痤瘡丙酸桿 菌（P.acnes)的益生元活性。
[0055] 盡管前述例子描述了 G0S作為合適的皮膚共生益生元劑，需要理解的是，其他胃 腸道益生元（但不是所有的胃腸道益生元），如下文所詳細(xì)討論的，可能適用作皮膚共生益 生元劑?？赡苓m用作皮膚共生益生元的胃腸道益生元的一些非限制性例子包括羥基異亮氨 酸；小麥糊精；阿拉伯半乳聚糖（例如，松木多糖（larch arabinogalactin));柑橘纖維； 豌豆纖維；麥芽糖糊精；低聚果糖（即，果寡糖或"F0S"）；菊粉；菊粉低聚纖維；甘露聚糖水 解產(chǎn)物；葡甘露聚糖水解產(chǎn)物；半乳甘露聚糖；低聚龍膽糖；異麥芽低聚糖；獼猴桃和獼猴 桃衍生化合物（例如，來源于獼猴桃并可購自Vital Foods的ZYACTINASE 45品牌酶復(fù)合 物）；甜菜漿；和米糠。
[0056] 要適用作針對皮膚共生微生物的益生元，該組合物或試劑應(yīng)當(dāng)促進(jìn)所述微生物的 生存和/或生長。為了測定測試試劑的益生元潛能，可能有利的是測定因使皮膚共生微生 物暴露于該測試試劑而形成的代謝物。合適的微生物輸出包括但不限于細(xì)胞裂解時(shí)被釋放 的諸如ATP、NAD、NADP、NADH、NADPH、cAMP、cGMP、和/或ADP的代謝物的含量。在一些情況 下，可使用可商購獲得的基于酶的測定來測量代謝指標(biāo)。除此之外或作為另外一種選擇，可 能有利的是測量微生物的數(shù)量和/或濃度的變化（即，增殖），以確定是否表現(xiàn)出益生元活 性。例如，細(xì)菌計(jì)數(shù)（例如，當(dāng)用適當(dāng)?shù)钠桨逵?jì)數(shù)測試測量時(shí)）的增加可能足以表明益生元 活性。
[0057] 對于測定益生元活性，體內(nèi)測試一般是優(yōu)選的。但此類測試可能是耗時(shí)的和高成 本的。常規(guī)的體外測試（例如，ATP測定或平板計(jì)數(shù)）盡管通常比體內(nèi)測試更快和成本更低， 卻可能不提供對體內(nèi)活性的適當(dāng)預(yù)測。因此，可能有利的是使用復(fù)合方法，在其中一種或多 種類型的體外測試被用于預(yù)測G0S是否在體內(nèi)表現(xiàn)出益生元活性，任選地隨后是用以確認(rèn) 此類活性的體內(nèi)測試。用于確定益生元活性的復(fù)合篩選測定和方法的尤其合適的例子公開 于共同待決的美國專利13/672, 163 ;13/672, 192 ;和13/672, 211中，全部由Lanzalaco等 人提交。
[0058] 圖2和3示出了基于測試樣品的體積計(jì)，當(dāng)以0. 5重量％的量存在時(shí)G0S對時(shí)間 的體外益生元效應(yīng)。圖2示出了在24小時(shí)和48小時(shí)相對于水對照組，三種皮膚共生微 生物的ATP產(chǎn)生的百分比變化。圖2和3中示出的三種皮膚共生微生物是表皮葡萄球菌 (S.epidermidis)(顯示為"Sepi"）、杰氏棒狀桿菌（C. jeikeium)(顯示為"Cj"）和痤瘡丙 酸桿菌（P. acnes)(顯示為"Pacnes"）。如圖2所示，在24和48小時(shí)，相對于水對照組，全 部三種皮膚共生微生物的ATP產(chǎn)生增加了。ATP含量是按照下文所詳述的ATP測試測定的。 圖3示出了當(dāng)在24小時(shí)和48小時(shí)測量時(shí)，相對于水對照組，三種皮膚共生微生物的細(xì)菌計(jì) 數(shù)的百分比變化。細(xì)菌計(jì)數(shù)是通過下文所詳述的平板計(jì)數(shù)測試測量的。如圖3所示，相對 于水對照組，細(xì)菌計(jì)數(shù)在24和48小時(shí)增加。換句話講，對于所測試的微生物，G0S在體外 在24和48小時(shí)表現(xiàn)出益生元活性。用于產(chǎn)生圖2和3所示的數(shù)據(jù)的測試樣品是按照下文 關(guān)于起始培養(yǎng)物、工作培養(yǎng)物和測試樣品的建立所描述的方法制備的。測試樣品是BIMUN0 品牌G0S、基本碳培養(yǎng)基、和所選擇的微生物的混合物。
[0059] 圖4和5示出了基于測試樣品的體積計(jì)，0. 05重量％和0. 5重量％的G0S的比較 性體外益生元效應(yīng)。如圖4所示，相對于水對照組，在0. 05%和0. 5%兩者含量上，全部三 種皮膚共生微生物的ATP產(chǎn)生均增加。圖5示出了在0. 05%和0. 5%的含量，細(xì)菌計(jì)數(shù)的增 力口。因此，當(dāng)以0.05%和0.5%存在時(shí)，GOS在體外表現(xiàn)出益生元活性。用于產(chǎn)生圖4和5 所示的數(shù)據(jù)的測試樣品是按照下文關(guān)于起始培養(yǎng)物、工作培養(yǎng)物和測試樣品的建立所描述 的方法制備的。測試樣品是BIMUNO品牌GOS、基本碳培養(yǎng)基、和所選擇的微生物的混合物。
[0060] 圖6示出了當(dāng)微生物暴露于基于測試樣品的體積計(jì)1重量％的G0S測試樣品時(shí)， G0S對皮膚微生物組中的至少一些需氧微生物的體內(nèi)益生元效應(yīng)。圖表10示出了對應(yīng)于取 自詳述于下文的體內(nèi)臨床實(shí)驗(yàn)中的人類受試者的樣品的需氧細(xì)菌計(jì)數(shù)。圖表10中顯示為 TPS 1和TPS 2的樣品對應(yīng)于取自該研究的處理階段的微生物樣品，在其中1 % G0S測試樣 品存在于受試者的前臂上。圖表10中顯示為RGS 1的樣品對應(yīng)于取自該研究的復(fù)原階段 的第一微生物樣品，在其中G0S不存在于前臂上。如圖6所示，相對于在詳述于下文的初始 的條件化階段測量的基線水平，需氧細(xì)菌計(jì)數(shù)在處理階段增加，并且相對于處理階段，需氧 細(xì)菌計(jì)數(shù)在復(fù)原階段減少。基于圖6顯示的數(shù)據(jù)，據(jù)信在處理階段G0S的存在導(dǎo)致了需氧 細(xì)菌計(jì)數(shù)的增加，并且隨后在復(fù)原階段G0S的缺乏導(dǎo)致了需氧細(xì)菌計(jì)數(shù)的減少。換句話講， 當(dāng)以1%存在時(shí)，G0S在體內(nèi)表現(xiàn)出對至少一些需氧的皮膚共生微生物的益生元活性。用于 產(chǎn)生圖6所示的數(shù)據(jù)的測試樣品是1% BIMUNO品牌G0S的水性溶液。
[0061] 圖7示出了當(dāng)微生物暴露于1%的G0S測試樣品時(shí)，G0S對皮膚微生物組中的至少 一些厭氧微生物的體內(nèi)益生元效應(yīng)。TPS 1、TPS 2、和RGS1對應(yīng)于就圖6而言所描述的相 同的取樣時(shí)間。RGS2對應(yīng)于取自復(fù)原階段的第二微生物樣品。如可見于圖7中，相對于在 條件化階段測量的基線水平，厭氧細(xì)菌計(jì)數(shù)在處理階段增加，并且相對于處理階段，厭氧細(xì) 菌計(jì)數(shù)在復(fù)原階段減少。另外，圖7示出了相對于RGS1，厭氧細(xì)菌計(jì)數(shù)在RGS2中的繼續(xù)減 少?；趫D7的圖表20所顯示的數(shù)據(jù)，據(jù)信在處理階段G0S的存在導(dǎo)致了厭氧細(xì)菌計(jì)數(shù)的 增加，并且隨后在復(fù)原階段G0S的缺乏導(dǎo)致了厭氧細(xì)菌計(jì)數(shù)的減少。換句話講，當(dāng)以1 %存 在時(shí)，G0S在體內(nèi)表現(xiàn)出對至少一些厭氧的皮膚共生微生物的益生元活性。用于產(chǎn)生圖7所 示的數(shù)據(jù)的測試樣品是1% BIMUNO品牌G0S的水性溶液。
[0062] 盡管已出人意料地發(fā)現(xiàn)，某些胃腸道益生元表現(xiàn)出對皮膚共生微生物的適當(dāng)?shù)囊?生元潛能，但這并不是對所有的通常已知的胃腸道益生元都成立，即使是在組成上與G0S 相似（即，基于碳水化合物）的那些。圖8示出了通過測量相對于水對照組的細(xì)菌ATP含 量變化，多種基于碳水化合物的胃腸道益生元對表皮葡萄球菌（S.印idermidis)、杰氏棒狀 桿菌（C. jeikeium)和痤瘡丙酸桿菌（P. acnes)的益生元潛能。如可見于圖8中的，并非所 有的胃腸道益生元均表現(xiàn)出對這三種皮膚共生微生物的所期望的益生元潛能。用于產(chǎn)生圖 8所示的數(shù)據(jù)的測試樣品是按照下文關(guān)于起始培養(yǎng)物、工作培養(yǎng)物和測試樣品的建立所描 述的方法制備的。測試樣品包括基于該測試樣品的體積計(jì)，以1重量％存在的圖8中顯示 的測試試劑中的一種。測試樣品是測試試劑、基本碳培養(yǎng)基、和所選擇的微生物的混合物。
[0063] 美容纟目合物
[0064] 不受理論的約束，據(jù)信皮膚微生物組的健康狀態(tài)可能與期望的皮膚功能或外觀相 關(guān)和/或可在其他方面提供一種或多種護(hù)膚有益效果。例如，有可能通過維持或改善皮膚 微生物組中的一個或多個成員的健康狀態(tài)來維持或改善皮膚的外觀、屏障功能、保濕性和 /或其他特性。在一些情況下，如果皮膚的特定的某個區(qū)域或某些區(qū)域表現(xiàn)出不期望的功 能和/或外觀，可能有利的是將皮膚的該特定的某個區(qū)域或某些區(qū)域作為維持或改善的靶 標(biāo)。例如，可能有利的是將諸如面部（例如，前額、臉頰、和面部的眶周部分）、手和/或前臂 上的皮膚的特定區(qū)域作為靶標(biāo)，上述區(qū)域趨于比皮膚的某些其他區(qū)域更多地因暴露于環(huán)境 (例如，紫外線輻射、風(fēng)、污染、氧化、刺激物）而受損和/或可能發(fā)生內(nèi)在老化的可見跡象。 用于改善皮膚的健康狀態(tài)和/或外觀的局部施用的化妝品組合物是為人們所熟知的（例 如，洗劑、保濕調(diào)理霜、油、粉底（液體和粉末）、唇膏、遮瑕物、剃刮準(zhǔn)備組合物、液體或固體 的潔膚皂）。因此，可能有利的是將諸如GOS的益生元劑摻入到局部化妝品組合物中，以利 用可由健康的、平衡的皮膚微生物組提供的健康和/或外觀有益效果。
[0065] 本文的化妝品組合物可包含有效量的皮膚共生益生元劑。該益生元劑可以按所 述組合物的重量計(jì)大于0. 〇〇l%、〇. 〇l%、〇. 05%、0. 1%、0. 5%、1%、2%、3%、4%或甚至大 于5%的量存在?？赡苡欣氖菍⒈景l(fā)明的化妝品組合物中益生元劑的量限制在按所述組 合物的重量計(jì)小于25 %、20 %、15 %、或甚至10 %的量，以避免美容上不期望的特性（例如， 黏性或不良的鋪展性）。在某些實(shí)施例中，所述益生元劑可以足夠使至少一種皮膚共生微 生物的ATP含量在體外增加了至少80% (例如80 - 1000%或更多，或該范圍內(nèi)的任何值） 的量存在。另外或作為另外一種選擇，所述益生元劑可以足夠使至少兩種皮膚共生微生物 的ATP含量在體外增加了至少50% (例如50 - 1000%或更多，或該范圍內(nèi)的任何值）的量 存在。此外，所述益生元劑可以足夠使至少三種皮膚共生微生物的ATP含量在體外增加了 至少25% (例如25 - 1000%或更多，或該范圍內(nèi)的任何值）的量存在。應(yīng)當(dāng)理解的是，所 述益生元劑可以在體外提供ATP含量的上述增加中的一種或多種的量存在于所述組合物 中。例如，所述益生元劑可以足夠使第一皮膚共生微生物的ATP含量計(jì)數(shù)在體外增加至少 了 80%，并且第二皮膚共生微生物的ATP含量在體外增加了至少50%的量存在。繼續(xù)這個 例子，所述益生元劑還可以足夠使第三皮膚共生微生物的ATP含量在體外增加了至少25% 的量存在。ATP含量可按照下文所詳述的ATP測試在體外測定。
[0066] 在某些實(shí)施例中，所述益生元劑可以足夠使至少一種皮膚共生微生物的細(xì)菌計(jì)數(shù) 在體外增加了至少10% (例如10 - 200%或更多、50 - 175%、100_ 150%、或這些范圍內(nèi) 的任何值）的量存在。除此之外或作為另外一種選擇，所述益生元劑可以足夠使至少兩種 皮膚共生微生物的細(xì)菌計(jì)數(shù)在體外增加了至少10% (例如10 - 200%或更多、20 - 180%、 30 - 160%、40 - 150%、50 - 120%、或這些范圍內(nèi)的任何值）的量存在。此外，所述益生元 劑可以足夠使至少三種皮膚共生微生物的細(xì)菌計(jì)數(shù)在體外增加了至少10% (例如10-200%或更多，或該范圍內(nèi)的任何值）的量存在。應(yīng)當(dāng)理解的是，所述益生元可以在體外提 供細(xì)菌計(jì)數(shù)的上述增加中的一種或多種的量被包含在本發(fā)明的組合物中。例如，所述益生 元劑可以足夠使第一皮膚共生微生物的細(xì)菌計(jì)數(shù)在體外增加了至少50%并且第二皮膚共 生微生物的細(xì)菌計(jì)數(shù)在體外增加了至少20%的量存在。繼續(xù)這個例子，所述益生元劑還可 以足夠使第三皮膚共生微生物的細(xì)菌計(jì)數(shù)在體外增加了至少10%的量存在。體外的細(xì)菌計(jì) 數(shù)可以按照下文所詳述的平板計(jì)數(shù)測試測定。
[0067] 本發(fā)明的化妝品組合物有利地以足夠使至少一種需氧的和/或厭氧的皮膚共生 微生物（例如，上文所述的皮膚共生微生物中的一種或多種）的體內(nèi)細(xì)菌計(jì)數(shù)增加的量包 含益生元劑。在某些實(shí)施例中，所述益生元劑可以使需氧的和/或厭氧的體內(nèi)細(xì)菌計(jì)數(shù)增 加了至少 10% (例如，至少 20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%、110%、 120%、130%或更多，或這些范圍內(nèi)的任何值）、但小于ΙΟΟχ的增加（例如，小于90x、80x、 7(^、6(^、50、4(^、30、2(^、1(^、或51)的量存在。本發(fā)明的化妝品組合物有利地以足夠提供 護(hù)膚有益效果的量包含所述益生元劑。
[0068] 在某些實(shí)施例中，所述化妝品組合物可包含皮膚病學(xué)可接受的載體、有效量的皮 膚共生益生元、和通常包含在所提供的特定化妝品組合物中的類型的一種或多種任選成 分。
[0069] 皮膚病學(xué)可接夸的載體
[0070] 在某些實(shí)施例中，本文的化妝品組合物可包含一種或多種水和/或水混溶性溶劑 形式的合適載體。載體可以基于所述組合物的重量按重量計(jì)1%至99%的量存在（例如， 1 %,3%,5 % U0 % >15 %,20 %,25%,30 %,35 %,40 %,45 %,50%,55 %,60 %,65 %,70%, 75%、80%、或85%至90%、85%、80%、75%、70%、65%、60%、55%、50%、45%、40%、 35 %、30 %、25 %、20 %、15 %、10 %、或5 % )。合適的水混溶性溶劑包括一元醇、二元醇、多 元醇、甘油、二醇、聚亞烷基二醇如聚乙二醇、以及它們的混合物。當(dāng)化妝品組合物是乳液的 形式時(shí)，水和/或水混溶性溶劑通常與該乳液的水相相關(guān)聯(lián)。
[0071] 本文的化妝品組合物可包含一種或多種合適的油。該油可以是揮發(fā)性的或非揮發(fā) 性的油。適用于本文的揮發(fā)性油可具有在25°C下0.5至5厘沲（cSt)范圍的粘度。揮發(fā)性 油可被用于促進(jìn)護(hù)膚組合物在其被施用于皮膚后更快地干燥?？砂菗]發(fā)性油以向皮膚 提供潤滑和防護(hù)有益效果。
[0072] 在某些實(shí)施例中，所述化妝品組合物可包含一種或多種合適的硅油，例如，一種或 多種聚硅氧烷。適用于本文的聚硅氧烷可具有在25°C下0. 5至1，000, 000厘沲的粘度，并 且能夠以下列化學(xué)通式表示：
[0073] R3SiO[R2SiO]xSiR3
[0074] 其中R獨(dú)立地選自氫或直鏈或支鏈的、飽和或不飽和的烷基、苯基或芳基、三 烷基甲硅烷氧基；并且X是0至10, 〇〇〇的整數(shù)，被選擇為實(shí)現(xiàn)所需的分子量。在某些實(shí)施 例中，R是氫、甲基、或乙基。可商購獲得的聚硅氧烷包括聚二甲基硅氧烷，其也被稱為聚二 甲基娃氧燒（dimethicones)，其例子包括來自Shin-Etsu的DM-Fluid系列、由Momentive Performance Materials Inc.銷售的 Vicasil」'系列、和由 Dow Corning Corporation 銷售 的Dow Corning'1'' 200系列。合適的聚二甲基硅氧烷的具體例子包括具有0. 65、1. 5、50、 100、350、10,000、12,500100,000、和 300,000。5七的粘度的0(^€：〇1'11丨1^1<200 打111(1(還 作為 XiameterK PMX-200Silic〇ne Fluids 銷售）。
[0075] 合適的聚二甲基硅氧烷包括以下列化學(xué)通式表示的那些：
[0076] R3Si0[R2Si0]x[RR，Si0]ySiR 3
[0077] 其中R和R'各自獨(dú)立地為氫或直鏈或支鏈的、飽和或不飽和的烷基、芳基、或 三烷基甲硅烷氧基；并且X和y各自是1至1，〇〇〇, 〇〇〇的整數(shù)，被選擇為實(shí)現(xiàn)所需的分子量。 合適的聚二甲基娃氧燒包括苯基聚二甲基娃氧燒（來自Botanigenics, Inc.的Botansil? Η)-151)、二苯基聚二甲基硅氧烷（來自Shin-Etsu的KF-53和KF-54)、苯基聚三甲基硅氧 燒（來自Dow Corning的556 Cosmetic Grade Fluid)、或三甲基娃燒氧苯基聚二甲基娃 氧烷（來自Wacker-Belsil的PDM-20、PDM-200、或PDM-1000)。其他例子包括烷基聚二甲 基硅氧烷，其中至少R'是脂肪烷基（例如，C12_22)。一種合適的烷基聚二甲基硅氧烷是鯨 蠟基聚二甲硅氧烷，其中R'是直鏈C16鏈并且R是甲基。鯨蠟基聚二甲硅氧烷可以2502 Cosmetic Fluid 購自 Dow Corning 或以 Abil Wax 9801 或 9814 購自 Evonik Goldschmidt GmbH 〇
[0078] 可適用于本文的化妝品組合物的其他硅油包括具有下列通式的環(huán)狀硅氧烷：
[0079]

【權(quán)利要求】
1. 一種增加皮膚上的厭氧的和/或需氧的皮膚共生微生物的數(shù)量的方法，包括： 向靶標(biāo)皮膚表面局部施用化妝品組合物一段足夠的時(shí)間以增加所述厭氧的和需氧的 皮膚共生微生物中的至少一種的數(shù)量，其中所述化妝品組合物包含皮膚病學(xué)可接受的載體 和有效量的皮膚共生益生元。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，還包括將所述靶標(biāo)皮膚表面鑒定為需要處理，所述處 理提供皮膚有益效果。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中所述皮膚有益效果選自改善皮膚外觀、改善皮膚 感覺、增加皮膚的一個或多個層的厚度、增加皮膚的彈性、增加皮膚的回彈力、增加皮膚的 緊致度、減少皮膚的油性外觀、減少皮膚的有光澤的外觀、減少皮膚的無光澤的外觀、增加 皮膚的水合狀態(tài)、增加皮膚的保濕狀態(tài)、減少細(xì)紋的外觀、減少皺紋的外觀、改善皮膚肌理、 改善皮膚光滑性、改善皮膚剝落、改善皮膚脫屑、使皮膚豐滿、改善皮膚屏障性能、改善皮膚 色調(diào)、減少紅色的外觀、減少皮膚斑點(diǎn)的外觀、改善皮膚的亮度、改善皮膚的光彩、改善皮膚 的半透明性。
4. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，還包括每天至少一次向所述靶標(biāo)皮膚表面 施用所述化妝品組合物。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其中所述化妝品組合物被連續(xù)施用兩天或更多天。
6. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中根據(jù)平板計(jì)數(shù)測試，所述皮膚共生微 生物的數(shù)量在體內(nèi)增加了至少10%。
7. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述益生元以約0. 001%至約25%的 量存在。
8. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述益生元以足夠使所述至少一種皮 膚共生微生物的細(xì)菌ATP含量根據(jù)ATP測試在體外增加了至少80%的量存在。
9. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述益生元以足夠使所述至少兩種皮 膚共生微生物的細(xì)菌ATP含量根據(jù)ATP測試在體外增加了至少50%的量存在。
10. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述益生元以足夠使所述至少三種 皮膚共生微生物的細(xì)菌ATP含量根據(jù)ATP測試在體外增加了至少25%的量存在。
11. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述益生元選自低聚半乳糖、羥基異 亮氨酸、小麥糊精、阿拉伯半乳聚糖、柑橘纖維、豌豆纖維、麥芽糖糊精、低聚果糖、菊粉、菊 粉低聚纖維、甘露聚糖水解產(chǎn)物、葡甘露聚糖水解產(chǎn)物、半乳甘露聚糖、低聚龍膽糖、異麥芽 低聚糖、獼猴桃衍生化合物、甜菜漿、和米糠。
12. 根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中所述低聚半乳糖選自二糖、三糖、四糖、五糖、六 糖以及這些的混合物。
13. 根據(jù)權(quán)利要求12所述的方法，其中所述低聚半乳糖為約20至約35% w/v的所述 二糖、約20至約35% w/v的所述三糖、約15至約25% w/v的所述四糖、和約10至約20% w/v的所述五糖的混合物。
14. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述皮膚共生微生物為選自葡萄球 菌屬、棒狀桿菌屬、丙酸桿菌屬的物種。
15. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，還包括結(jié)合所述第一化妝品組合物使用 第二化妝品組合物，其中所述第二化妝品組合物包含選自胃腸道益生菌、胃腸道益生菌裂 解物、胃腸道益生元和營養(yǎng)補(bǔ)充劑的材料。
【文檔編號】A61K8/97GK104105471SQ201380008776
【公開日】2014年10月15日 申請日期:2013年2月12日 優(yōu)先權(quán)日:2012年2月14日
【發(fā)明者】A·C·蘭扎拉科, D·L·查博尼奧, B·W·霍華德 申請人:寶潔公司