使用seh抑制劑來治療神經(jīng)性疼痛的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了用于治療、減輕、緩解和/或抑制神經(jīng)性疼痛的方法，所述方法是通過向有需要的患者口服、靜脈內(nèi)或鞘內(nèi)施用有效量的可溶性環(huán)氧化物水解酶(“sEH”)的抑制劑來實(shí)現(xiàn)的。所治療的神經(jīng)性疼痛選自由以下組成的組：帶狀皰疹后神經(jīng)痛，三叉神經(jīng)痛，局灶性周圍神經(jīng)損傷，和痛性感覺缺失，由于中風(fēng)或腫塊、脊髓損傷或多發(fā)性硬化引起的中樞性疼痛，和由于糖尿病、HIV或化療引起的周圍神經(jīng)病變。
【專利說明】使用SEH抑制劑來治療神經(jīng)性疼痛
[0001]相關(guān)申請的交叉引用
[0002]本申請要求2012年2月I日提交的美國臨時(shí)申請?zhí)?1/593，811的優(yōu)先權(quán)，所述美國臨時(shí)申請出于所有目的整體并入本文中。
[0003]關(guān)于在聯(lián)邦贊助的研究或開發(fā)下作出的對發(fā)明的權(quán)利的聲明
[0004]本發(fā)明是根據(jù)由環(huán)境健康科學(xué)研究所授予的批準(zhǔn)號ES002710下通過政府支持來產(chǎn)生。政府享有本發(fā)明中的某些權(quán)利。
[0005]發(fā)明背景
[0006]疼痛一般分為傷害性疼痛和神經(jīng)性疼痛。傷害性疼痛響應(yīng)于組織損傷或潛在的組織損傷信號來源于神經(jīng)途徑，并且包括炎癥性疼痛。神經(jīng)性疼痛往往與神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的功能障礙有關(guān)。不幸的是，治療一種疼痛的藥物不一定治療其它疼痛。例如，抗炎癥劑不能減輕被截肢者感受到的“幻肢”疼痛。
[0007]在哺乳動物中，炎癥性疼痛主要由花生四烯酸(有時(shí)簡稱為“AA”)驅(qū)動。炎癥性疼痛由于組織損傷，如切傷或細(xì)菌感染而發(fā)生，在所述組織損傷后，大量AA通過磷脂酶的作用而在損傷部位釋放。與這個(gè)事件同時(shí)發(fā)生的是環(huán)氧合酶-2 (C0X-2)的上調(diào)，所述環(huán)氧合酶-2是將所釋放的AA轉(zhuǎn)化為前列腺素的酶，所述前列腺素是有效的疼痛產(chǎn)生分子。所釋放的AA通過環(huán)氧合酶(“C0X”)、脂氧合酶(“L0X”)和細(xì)胞色素P450表氧化酶來代謝以分別產(chǎn)生前列腺素、白三烯和環(huán)氧二十碳三烯酸(“EET”)。這些材料可進(jìn)一步代謝，例如它們可被轉(zhuǎn)化成生物活性酰胺和偶聯(lián)物。炎癥性疼痛與AA的Cox-2代謝物的產(chǎn)生有很好的相關(guān)性，這些代謝物是前列腺素系列分子。因此，疼痛的完全減輕在抑制可誘導(dǎo)的Cox-2后發(fā)生，而疼痛的完全減輕往往歸因于一種關(guān)鍵調(diào)節(jié)劑PGE2的減少。
[0008]與此相反，在神經(jīng)性疼痛中，幾乎沒有由花生四烯酸、環(huán)氧合酶和前列腺素介導(dǎo)的炎癥過程的跡象。神經(jīng)性疼痛是由顯示感覺癥狀和體征的周圍或中樞神經(jīng)系統(tǒng)(或兩者)的病變引起的。根本原因包括感染、外傷、代謝異常、化療、手術(shù)、放射、神經(jīng)毒素、遺傳神經(jīng)退行性病變、神經(jīng)壓迫和腫瘤浸潤。神經(jīng)性疼痛的機(jī)制例如在Zhuo，MolecularPain(2007)3:14 ；Campbell 和 Meyer, Neuron(2006)52(I):77-92 ；Dworkin 等人,ArchNeurol (2003) 60:1524-34 中進(jìn)行了描述。
[0009]最常被證明有效阻斷神經(jīng)性疼痛的藥物制劑是三環(huán)類抗抑郁藥(TCA)。然而，這些藥物在一些患者中完全無效，并且在其它患者中只是部分有效的。因此，神經(jīng)性疼痛的治療是一種未滿足的和不斷增長的臨床需要。TCA具有本領(lǐng)域中眾所周知的許多缺點(diǎn)。然而，因?yàn)樯窠?jīng)性疼痛是一種使人衰弱和難以治療的病狀，所以在缺乏具有較少有害作用的藥劑的情況下，TCA盡管有缺點(diǎn)，但是一直被使用。
[0010]所需要的是可以治療神經(jīng)性疼痛的化合物。意外地，本發(fā)明滿足了這種和其它需要。
[0011]發(fā)明簡述
[0012]本發(fā)明提供了用于通過向有需要的患者施用可溶性環(huán)氧化物水解酶(“sEH”)的抑制劑來治療、減輕、緩解和/或抑制神經(jīng)性疼痛的方法。
[0013]因此，在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了用于緩解有需要的受試者的神經(jīng)性疼痛的方法，所述方法包括對所述受試者施用有效量的可溶性環(huán)氧化物水解酶(“sEH”)的抑制劑，從而減輕所述受試者的所述神經(jīng)性疼痛。
[0014]在一些實(shí)施方案中，神經(jīng)性疼痛選自由以下組成的組:帶狀皰疹后神經(jīng)痛，三叉神經(jīng)痛，局灶性周圍神經(jīng)損傷，和痛性感覺缺失，由于中風(fēng)或腫塊、脊髓損傷或多發(fā)性硬化引起的中樞性疼痛，和由于糖尿病、HIV或化療引起的周圍神經(jīng)病變。
[0015]在一些實(shí)施方案中，神經(jīng)性疼痛是慢性的。在一些實(shí)施方案中，所述受試者正經(jīng)歷神經(jīng)性疼痛。
[0016]在一些實(shí)施方案中，所述藥劑是通過口服施用。在一些實(shí)施方案中，所述藥劑是靜脈內(nèi)施用。在一些實(shí)施方案中，所述藥劑是鞘內(nèi)施用。在一些實(shí)施方案中，所述藥劑被直接輸送到受損的神經(jīng)。
[0017]在一些實(shí)施方案中，神經(jīng)性疼痛是中樞神經(jīng)性疼痛。在一些實(shí)施方案中,神經(jīng)性疼痛是周圍神經(jīng)性疼痛。
[0018]在一些實(shí)施方案中，受試者或患者是人。
[0019]附圖簡述
[0020]圖1顯示了作用于大鼠神經(jīng)性疼痛的鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)I型糖尿病模型的UCl 153 (APAU)的劑量(0、l、3、10、30、100mg/kg(mpk))和時(shí)間依賴效應(yīng)，其中低于基線的60%是疼痛狀態(tài)并且基線的100%是未檢測到疼痛增加。(結(jié)果是6只大鼠的平均值。)
[0021]圖2顯示了在3小時(shí)后作用于大鼠神經(jīng)性疼痛的鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)I型糖尿病模型的UC1153的劑量反應(yīng)曲線(基線反應(yīng)的％)，其中低于基線的60%是疼痛狀態(tài)并且基線的100%是未檢測到疼痛增加。(結(jié)果是6只大鼠的平均值。)
[0022]圖3顯示了作用于大鼠神經(jīng)性疼痛的鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)I型糖尿病模型大鼠神經(jīng)性疼痛的鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)I型糖尿病模型的UC1153(10mpk)和塞來昔布(1mpk)的劑量和時(shí)間依賴，其中低于基線的60%是疼痛狀態(tài)并且基線的100%是未檢測到疼痛增加。(結(jié)果是6只大鼠的平均值)。與1mpk塞來昔布相比，1mpk UC1153可以顯著減輕神經(jīng)性疼痛的鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)I型糖尿病大鼠模型的疼痛反應(yīng)。
[0023]圖4顯示了從針對人sEH的放射測定法(tDPPO)獲得的抑制劑的抑制常數(shù)(Ki)和IC5tl (上表)；下表顯示了來自針對大鼠SEH和人SEH的LC/MS-MS測定法(EET)的抑制劑的IC500
[0024]圖5顯示了大鼠的1mpk下的UC1153(APAU)的藥代動力學(xué)曲線。大鼠通過灌胃以UC1153治療。UC1153溶于富含油酸的甘油三酯的20% PEG中。結(jié)果是6只大鼠的平均值。
[0025]圖6顯示了大鼠的UC2383 (KLA)的藥代動力學(xué)曲線。大鼠通過灌胃以UC2383治療。UC2383溶于富含油酸的甘油三酯的20% PEG中。結(jié)果是6只大鼠的平均值。
[0026]圖7顯示了大鼠的UC2414(KLB)的藥代動力學(xué)曲線。大鼠通過灌胃以UC2414治療。UC2414溶于富含油酸的甘油三酯的20% PEG中。結(jié)果是6只大鼠的平均值。
[0027]圖8顯示了作用于大鼠神經(jīng)性疼痛的鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)I型糖尿病模型的UC2414的劑量(Impk)和時(shí)間依賴效應(yīng)，其中低于基線的60%是疼痛狀態(tài)并且基線的100%是未檢測到疼痛增加。大鼠通過灌胃以UC2414治療。UC2414溶于純PEG400。(結(jié)果是6只大鼠的平均值)。
[0028]圖9顯示了作用于大鼠神經(jīng)性疼痛的鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)I型糖尿病模型的UC2389的劑量(Impk)和時(shí)間依賴效應(yīng)，其中低于基線的60%是疼痛狀態(tài)并且基線的100%是未檢測到疼痛增加。大鼠通過灌胃以UC2389治療。UC2389溶于純PEG400。(結(jié)果是6只大鼠的平均值)
[0029]圖10示出了小鼠不同sEH抑制劑的藥代動力學(xué)曲線。小鼠通過灌胃用三種抑制劑盒治療。抑制劑溶于富含油酸的甘油三酯的20% PEG中。結(jié)果是6只小鼠的平均值。
[0030]圖11顯示了大鼠的UC2695 (KLC)和UC2383 (KLA)的藥代動力學(xué)曲線。大鼠通過灌胃用 UC2695 (KLC)和 UC2383 (KLA)治療。UC2695 (KLC)和 UC2383 (KLA)溶于富含油酸的甘油三酯的20% PEG中。結(jié)果是6只大鼠的平均值。
[0031]圖12顯示了作用于大鼠神經(jīng)性疼痛的鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)I型糖尿病模型的UC2414、UC2372和UC 2389的劑量(Impk)和時(shí)間依賴效應(yīng)，其中低于基線的60%是疼痛狀態(tài)并且基線的100%是未檢測到疼痛增加。大鼠通過灌胃用藥物治療。藥物溶于純PEG400。(結(jié)果是6只大鼠的平均值。)
[0032]圖13示出來自使用14，15-EET作為人和大鼠sEH的底物的LC/MS-MS測定的抑制劑的IC5Q。
[0033]圖14顯示了作用于大鼠神經(jīng)性疼痛的鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)I型糖尿病模型的UC2389的劑量(0.1mpk)和時(shí)間依賴效應(yīng)，其中低于基線的60%是疼痛狀態(tài)并且基線的100%是未檢測到疼痛增加。大鼠通過灌胃用UC2389治療。UC2389溶于富含油酸的甘油三酯的20% PEG中。(結(jié)果是6只大鼠的平均值。)
[0034]圖15顯示了作用于大鼠神經(jīng)性疼痛的鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)I型糖尿病模型的UC2696的劑量(0.1和0.3mpk)和時(shí)間依賴效應(yīng)，其中低于基線的60%是疼痛狀態(tài)并且基線的100%是未檢測到疼痛增加。大鼠通過灌胃用UC2696治療。UC2696溶于富含油酸的甘油三酯的20% PEG中。(結(jié)果是6只大鼠的平均值。)
[0035]圖16顯示了作用于大鼠神經(jīng)性疼痛的鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)I型糖尿病模型的UC2391和UC2696的劑量(0.1mpk)和時(shí)間依賴效應(yīng)，其中低于基線的60%是疼痛狀態(tài)并且基線的100%是未檢測到疼痛增加。大鼠通過灌胃用UC2391和2696治療。UC2391和2696溶于富含油酸的甘油三酯的20% PEG中。(結(jié)果是6只大鼠的平均值。)
[0036]發(fā)明詳述
[0037]1.概述
[0038]酶“可溶性環(huán)氧化物水解酶”(“sEH”)作用于使抗炎和鎮(zhèn)痛代謝物降解的花生四烯酸途徑的重要分支。順式-環(huán)氧二十碳三烯酸(“EET”)是通過細(xì)胞色素P450表氧化酶合成的生物介體,并通過sHl水解成相應(yīng)的二元醇，這些二元醇是促炎癥性的。EET和sEH的抑制劑(術(shù)語“sEH抑制劑”有時(shí)縮寫為“sEHI ”)以前已發(fā)現(xiàn)可用作抗炎癥藥。
[0039]意外地，我們現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)sEHI也可用于減輕神經(jīng)性疼痛。我們使用了在用于神經(jīng)性疼痛的眾所周知的模型中量化疼痛的行之有效的方法，以闡明抑制sEH，并因此增加EET和/或含有環(huán)氧官能團(tuán)的其它分子的生理濃度對于疼痛感覺的效果。我們證明了 sEH抑制劑意外地通過以前鮮為人知的機(jī)制減少了患有神經(jīng)性疼痛的所治療動物的疼痛感覺。sEH的抑制劑、EET和/或多不飽和脂肪酸像含有環(huán)氧官能團(tuán)的分子和其前體，例如2-花生四烯酸甘油、環(huán)氧脂類的乙醇酰胺和/或它們的組合提供作為單獨(dú)的治療劑在治療、改善、緩解、減少和/或抑制神經(jīng)性疼痛的獨(dú)特優(yōu)勢。我們證明，sEH抑制劑是鎮(zhèn)痛藥并且在治療和控制神經(jīng)性疼痛，包括慢性神經(jīng)性疼痛，包括中樞和周圍神經(jīng)性疼痛中具有廣泛的治療效果。
[0040]所使用的神經(jīng)性疼痛模型通常被認(rèn)為不涉及炎癥過程。這是因?yàn)?，化學(xué)和分子分析不顯示環(huán)氧合酶的上調(diào)，并且眾所周知的抗炎劑，如COX抑制劑不能有效地減少神經(jīng)性疼痛。因?yàn)镾ffi抑制劑非常有效地減少炎癥和傷害性疼痛并且因?yàn)閟EHI減少關(guān)鍵的疼痛產(chǎn)生前列腺素PGE2的釋放，我們推測sHl抑制劑將有效地減少神經(jīng)性疼痛。
[0041]神經(jīng)病變通過向動物注射細(xì)菌毒素(鏈脲佐菌素)來誘導(dǎo)，所述細(xì)菌毒素已知可殺死胰腺β細(xì)胞，從而防止胰島素的產(chǎn)生，所述胰島素是調(diào)節(jié)血糖水平的關(guān)鍵肽。其結(jié)果是，這些動物具有葡萄糖的較高血漿水平，并成為糖尿病，具有伴隨的神經(jīng)性疼痛狀態(tài)。這種神經(jīng)病變與由花生四烯酸釋放和前列腺素和其它炎癥介體產(chǎn)生所驅(qū)動的炎癥性疼痛狀態(tài)無關(guān)。然后，我們使用臨床相關(guān)疼痛定量方法來測量在誘導(dǎo)神經(jīng)病變之前和之后這些動物的疼痛閾值，隨后使用sEH抑制劑來進(jìn)行干預(yù)。
[0042]I1.定義
[0043]單位、前綴和符號以它們的國際單位制(SI)公認(rèn)的形式來表示。數(shù)字范圍包括定義該范圍的數(shù)字。除非另有指明，否則核酸從左至右以5’至3’方向書寫；氨基酸序列從左至右以氨基至羧基方向書寫。本文所提供的標(biāo)題不是對本發(fā)明的各個(gè)方面或?qū)嵤┓桨傅南拗?，這些方面或?qū)嵤┓桨缚梢酝ㄟ^參考整個(gè)說明書來獲得。因此，緊接在下文中定義的術(shù)語通過參考整個(gè)說明書中來更加全面地定義。未在本文中定義的術(shù)語具有本領(lǐng)域技術(shù)人員所理解的其普通含義。
[0044]“烷基”是指具有所指示的碳原子數(shù)目的直鏈或支鏈、飽和、脂族基團(tuán)。烷基可以包括任意數(shù)目的碳原子，例如 Cl-2> C卜3' C卜4' C卜5' C^6-, C^7-, C卜8、C卜9、。卜10、C2_3、C2-4> ^2-5' C2-6->C3_4、C3_5、C3_6、C4_5、C4_6和C5_6。例如，C^6燒基包括，但不限于，甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戍基、異戍基、己基等。燒基也可以是指具有至多20個(gè)碳原子的燒基，例如，但不限于:庚基、羊基、壬基、癸基等。燒基可以是取代的或未取代的。
[0045]“烷氧基”指的是具有氧原子的烷基，所述氧原子將烷基連接到連接點(diǎn):烷基-O-。作為烷基，烷氧基可具有任何合適數(shù)目的碳原子，例如(V6。烷氧基包括，例如，甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、2- 丁氧基、異丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、戍氧基、己氧基等。燒氧基可進(jìn)一步被本文描述的各種取代基取代。燒氧基可以是取代的或者未取代的。
[0046]“齒素”是指氟、氯、溴和碘。
[0047]“鹵代烷基”是指如上定義的烷基，其中一些或全部氫原子被替換成鹵原子。作為烷基，鹵代烷基可以具有任何合適數(shù)目的碳原子，例如Cm。例如，鹵代烷基包括三氟甲基、氟甲基等。在一些實(shí)例中，術(shù)語“全氟”可以用來定義其中所有的氫被氟取代的化合物或基團(tuán)。例如，全氟甲烷是指1，1，1-三氟甲基。
[0048]“鹵代烷氧基”指的是其中一些或全部氫原子被鹵原子取代的烷氧基。作為烷基，鹵代烷氧基可具有任何合適數(shù)目的碳原子，例如CV6。烷氧基可以被1、2、3或更多個(gè)鹵素取代。當(dāng)所有的氫被鹵素，例如氟取代時(shí)，所述化合物是全取代的，例如，全氟化的。鹵代烷氧基包括，但不限于，三氟甲氧基、2，2，2-三氟乙氧基、全氟乙氧基等。
[0049]“雜烷基”指的是任何合適長度并且具有I至3個(gè)雜原子如N、0和S的烷基。另外的雜原子也可能是有用的，包括，但不限于，B、Al、Si和P。雜原子也可被氧化，例如，但不限于，-S(O)-和-S(O)2_。例如，雜烷基可包括醚、硫醚和烷基胺。雜烷基的雜原子部分可以取代烷基的氫以形成羥基、巰基或氨基?；蛘?，雜原子部分可以是連接原子，或者插入于兩個(gè)碳原子之間。
[0050]“環(huán)烷基”是指包含3至12個(gè)環(huán)原子，或所指示的原子數(shù)目的飽和或部分不飽和、單環(huán)、稠合二環(huán)或橋連多環(huán)組件。環(huán)烷基可以包括任意數(shù)目的碳原子，例如C3_6、c4_6、c5_6、C3_8、C4_8、C5_8、C6_8、C3_9、C3_1(l、C3_n和C3_12。飽和單環(huán)環(huán)燒基環(huán)包括，例如，環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基和環(huán)辛基。飽和的二環(huán)和多環(huán)環(huán)烷基環(huán)包括，例如，降冰片烷、[2.2.2] 二環(huán)辛烷、十氫化萘和金剛烷。環(huán)烷基也可以部分不飽和的，在環(huán)中具有一個(gè)或多個(gè)雙鍵或三鍵。部分不飽和的代表性的環(huán)烷基包括，但不限于，環(huán)丁烯、環(huán)戊烯、環(huán)己烯、環(huán)己二烯(1，3-和
I,4-異構(gòu)體)、環(huán)庚烯、環(huán)庚二烯、環(huán)辛烯、環(huán)辛二烯(1，3-、1，4-和1，5-異構(gòu)體)、降冰片烯及降冰片二烯。當(dāng)環(huán)烷基是飽和的單環(huán)C3_8環(huán)烷基時(shí)，示例性基團(tuán)包括但不限于環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基和環(huán)辛基。當(dāng)環(huán)烷基是飽和的單環(huán)C3_6環(huán)烷基時(shí)，示例性基團(tuán)包括但不限于環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基和環(huán)己基。環(huán)烷基可以是取代的或未取代的。
[0051]“亞環(huán)烷基”是指連接至少兩個(gè)其它基團(tuán)的如上所定義的環(huán)烷基，即二價(jià)烴基。與亞環(huán)烷基相連的兩個(gè)基團(tuán)可以連接到亞環(huán)烷基的相同的原子或不同的原子。代表性的亞環(huán)烷基包括，但不限于，環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、和環(huán)辛基。亞環(huán)烷基可以是取代的或未取代的。
[0052]“雜環(huán)烷基”是指具有3至12個(gè)環(huán)成員和I至4個(gè)雜原子N、0和S的飽和環(huán)系統(tǒng)。另外的雜原子也可以是有用的，包括，但不限于，B、Al、Si和P。雜原子也可被氧化，例如，但不限于，-S(O)-和-S(O)2_。雜環(huán)烷基可以包含任何數(shù)目的環(huán)原子，例如，3至6個(gè)、4至6個(gè)、5至6個(gè)、3至8個(gè)、4至8個(gè)、5至8個(gè)、6至8個(gè)、3至9個(gè)、3至10個(gè)、3至11個(gè)或3至12個(gè)環(huán)成員。任何合適數(shù)目的雜原子可以包括在雜環(huán)烷基中，如1、2、3或4個(gè)，或I至2個(gè)、I至3個(gè)、I至4個(gè)、2至3個(gè)、2至4個(gè)，或3至4個(gè)。雜環(huán)烷基可包括基團(tuán)例如氮丙啶、氮雜環(huán)丁烷、吡咯烷、哌啶、氮雜環(huán)庚烷、氮雜環(huán)辛烷、奎寧環(huán)、吡唑烷、咪唑烷、哌嗪(1，2_、1，3-和1，4-異構(gòu)體)、環(huán)氧乙烷、氧雜環(huán)丁烷、四氫呋喃、噁烷(四氫吡喃)、氧雜環(huán)庚烷、硫雜丙環(huán)、硫雜環(huán)丁烷、硫雜環(huán)戊烷(四氫噻吩)、噻烷(四氫噻喃)、噁唑烷、異噁唑烷、噻唑烷、異噻唑烷、二氧雜環(huán)戊烷、二硫戊環(huán)、嗎啉、硫代嗎啉、二噁烷或二噻烷。雜環(huán)烷基也可以稠合到芳族或非芳族環(huán)系統(tǒng)，以形成成員，包括但不限于，二氫吲哚。雜環(huán)烷基可以是未取代的或取代的。例如，雜環(huán)燒基可以被Cu燒基或氧代基(=O)等等取代。
[0053]雜環(huán)烷基可以通過環(huán)上的任意位置進(jìn)行連接。例如，氮丙啶可為1-或2-氮丙啶、氮雜環(huán)丁烷可以是1-或2-氮雜環(huán)丁烷、吡咯烷可以是1-、2_或3-吡咯烷、哌啶可以是1-、
2-,3-或4-哌啶、吡唑烷可以是1-、2_、3-或4-吡唑烷、咪唑烷可以是1-、2_、3-或4-咪唑烷、哌嗪可以是1-、2_、3-或4-哌嗪、四氫呋喃可以是1-或2-四氫呋喃、噁唑烷可以是2_、
3-,4-或5-噁唑烷、異噁唑烷可以是2-、3-、4_或5-異噁唑烷、噻唑烷可以是2-、3_、4_或5-噻唑烷、異噻唑烷可以是2-、3-、4_或5-異噻唑烷，并且嗎啉可以是2-、3_或4-嗎啉。
[0054]當(dāng)雜環(huán)烷基包括3-8個(gè)環(huán)成員和I至3個(gè)雜原子時(shí)，代表性成員包括，但不限于，吡咯烷、哌啶、四氫呋喃、噁烷、四氫噻吩、噻烷、吡唑烷、咪唑烷、哌嗪、噁唑烷、異噁唑烷、噻唑烷、異噻唑烷、嗎啉、硫代嗎啉、二噁烷和二噻烷。雜環(huán)烷基也可以形成具有5至6個(gè)環(huán)成員和I至2個(gè)雜原子的環(huán)，其中代表性的成員包括，但不限于，吡咯烷、哌啶、四氫呋喃、四氫噻吩、吡唑烷、咪唑烷、哌嗪、噁唑烷、異噁唑烷、噻唑烷、異噻唑烷和嗎啉。
[0055]“芳基”是指具有任何合適數(shù)量的環(huán)原子與任何合適數(shù)量的環(huán)的芳族環(huán)系統(tǒng)。芳基可以包括任意合適數(shù)目的環(huán)原子，例如，6個(gè)、7個(gè)、8個(gè)、9個(gè)、10個(gè)、11個(gè)、12個(gè)、13個(gè)、14個(gè)、15個(gè)或16個(gè)環(huán)原子，以及6至10個(gè)、6至12個(gè)，或6至14個(gè)環(huán)成員。芳基可以是單環(huán)、稠合以形成二環(huán)或三環(huán)基團(tuán)，或由一個(gè)鍵連接以形成聯(lián)芳基。代表性芳基包括苯基、萘基和聯(lián)苯基。其它芳基包括芐基，其具有亞甲基連接基團(tuán)。一些芳基具有6至12個(gè)環(huán)成員，如苯基、萘基或聯(lián)苯基。其它芳基具有6至10個(gè)環(huán)成員，例如苯基或萘基。一些其它芳基具有6個(gè)環(huán)成員，例如苯基。芳基可為取代的或未取代的。
[0056]“鹽”是指在本發(fā)明的方法中使用的化合物的酸或堿式鹽。藥學(xué)上可接受的鹽的代表性例子是無機(jī)酸(鹽酸、氫溴酸、磷酸等)鹽，有機(jī)酸(乙酸、丙酸、谷氨酸，檸檬酸等)鹽，季銨(甲基碘，乙基碘等)鹽。應(yīng)理解藥學(xué)上可接受的鹽是無毒的。合適的藥學(xué)上可接受的鹽的其它信息可以在Remington’s Pharmaceutical Sciences,第 17版，Mack PublishingCompany, Easton, Pa., 1985中找到,它通過引用并入本文。
[0057]本發(fā)明的酸性化合物的藥學(xué)上可接受的鹽是用堿形成的鹽，即陽離子鹽諸如堿金屬鹽和堿土金屬鹽，如鈉、鋰、鉀、鈣、鎂以及銨鹽，如銨、三甲基銨、二乙基銨和三_(羥甲基)_甲基-銨鹽。
[0058]類似酸加成鹽，如無機(jī)酸、有機(jī)羧酸和有機(jī)磺酸，如鹽酸、甲磺酸、馬來酸的酸加成鹽也是可能的，只要堿性基團(tuán)如吡啶基構(gòu)成結(jié)構(gòu)的一部分。
[0059]所述化合物的中性形式可以通過用堿或酸接觸所述鹽，并按照常規(guī)方式分離母體化合物來再生?；衔锏哪阁w形式在某些物理性質(zhì)方面不同于各種鹽形式，例如在極性溶劑中的溶解度，但在其它方面，對于本發(fā)明目的，鹽等同于化合物的母體形式。
[0060]本發(fā)明的某些化合物具有不對稱碳原子(光學(xué)中心)或雙鍵；外消旋體、非對映體、幾何異構(gòu)體和單獨(dú)的異構(gòu)體均意欲包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
[0061]“水合物”是指復(fù)合到至少一個(gè)水分子的化合物。本發(fā)明的化合物可以與I至10個(gè)水分子復(fù)合。
[0062]“順式-環(huán)氧二十碳三烯酸”(“EET”)是通過細(xì)胞色素P450表氧化酶合成的生物介體。如下面進(jìn)一步論述的，雖然使用未修飾的EET是最優(yōu)選的，但是EET衍生物，如酰胺和酯(天然的和合成的)、EET類似物和EET光學(xué)異構(gòu)體都可以在本發(fā)明的方法中使用，無論是在純的形式和這些形式的混合物。為了便于參考，如本文使用的術(shù)語“EET”指的是所有的這些形式，除非上下文另有要求。
[0063]“環(huán)氧化物水解酶” ("EH ； ”EC 3.3.2.3)是在α β折疊水解酶家族中的酶，其添加水到被稱為環(huán)氧化物的3員環(huán)醚。水添加到環(huán)氧化物產(chǎn)生相應(yīng)的1，2-二醇(Hammock，B.D.等人，于 Comprehensive Toxicology:B1transformat1n (Elsevier, New York),第283-305 頁(1997) ；0esch, F.Xenob1tica 3:305-340(1972))。四個(gè)主要 EH 是已知的:白三烯環(huán)氧化物水解酶、膽固醇環(huán)氧化物水解酶、微粒體EH( “mEH”)，和可溶性EH( "sEH",以前稱為胞漿EH)。白三烯作用于白三烯A4，而膽固醇EH使與膽固醇的5，6-環(huán)氧化物相關(guān)的化合物水合。微粒體環(huán)氧化物水解酶將單取代的、1，1-二取代的、順式-1，2-二取代的環(huán)氧化物和環(huán)狀系統(tǒng)上的環(huán)氧化物代謝成其相應(yīng)的二醇。由于其廣泛的底物特異性，這種酶被認(rèn)為在改善環(huán)氧化物的毒性中發(fā)揮顯著作用。解毒反應(yīng)通常降低化合物的疏水性，從而得到更具極性，從而可分泌的物質(zhì)。
[0064]“可溶性環(huán)氧化物水解酶”(“sffi”)是一種環(huán)氧化物水解酶，其在許多細(xì)胞類型中將EET轉(zhuǎn)化成稱為二羥基二十碳三烯酸(“DHET”)的二羥基衍生物。鼠科sEH的克隆和序列闡明于 Grant 等人，J.B1l.Chem.268(23):17628-17633(1993)。人 sEH 序列的克隆、序列和登錄號闡明于 Beetham 等人,Arch.B1chem.B1phys.305 (I): 197-201 (1993)。NCBI Entrez核苷酸登錄號L05779闡明編碼所述蛋白質(zhì)的核酸序列，以及5’非翻譯區(qū)和3’非翻譯區(qū)。所述基因的進(jìn)化和命名在Beetham等人，DNACell B1l.14 (I):61-71 (1995)論述?？扇苄原h(huán)氧化物水解酶代表示在嚙齒動物與人類(Arand等人，F(xiàn)EBSLett.,338:251-256(1994))之間在超過90%同源性的單一高度保守的基因產(chǎn)物?？扇苄訣H與mEH只具有非常遠(yuǎn)的關(guān)系，并且使不在循環(huán)系統(tǒng)上的廣泛環(huán)氧化物水合。與由π￡Η在潛在有毒的環(huán)氧化物的降解中發(fā)揮的作用相反，Sffi被認(rèn)為在內(nèi)源性化學(xué)介體的形成或降解中發(fā)揮作用。除非另外指明，否則如本文所用，術(shù)語“可溶的環(huán)氧化物水解酶”和“sEH”是指人的sHL
[0065]除非另外指明，否則如本文所用，術(shù)語“sEH抑制劑”(也簡稱為“sEHI”)或“sffi的抑制劑”指的是人sHl的抑制劑。優(yōu)選地，所述抑制劑在所述抑制劑抑制sHl至少50 %的濃度下還不抑制微粒體環(huán)氧化物水解酶的活性超過25 %，并且更優(yōu)選地在所述濃度下不抑制mEH超過10 %。為了便于參考，除非上下文另有要求，否則如本文所用，術(shù)語“ sEH抑制齊U”包括被代謝為sEH的活性抑制劑的前藥。為進(jìn)一步方便參考，并且除上下文另有要求，否則本文提及一種化合物作為sEH的抑制劑包括提及保留作為sEH抑制劑的活性的所述化合物的衍生物(如所述化合物的酯)。
[0066]“生理?xiàng)l件”是指具有允許所感興趣的細(xì)胞的營養(yǎng)或生長的條件(如溫度、pH和滲透壓摩爾濃度)的細(xì)胞外環(huán)境。
[0067]“微RNA” ( “miRNA”)是指許多真核生物中的在轉(zhuǎn)錄后水平下負(fù)調(diào)節(jié)其互補(bǔ)mRNA的18-25個(gè)核苷酸長度的小的、非編碼RNA。參見例如Kurihara和Watanabe, Proc NatlAcad Sci USA 101 (34): 12753-12758 (2004)。微 RNA 在 20 世紀(jì) 90 年代早期首次在蛔蟲線蟲(C.elegans)中發(fā)現(xiàn)，并且目前在許多物種，包括人類中是已知的。如本文所用，它是指外源施用的miRNA，除非特別說明，或上下文另有要求。
[0068]術(shù)語“共同施用”是指在血液中同時(shí)存在兩種活性劑。被共同施用的活性制劑可以同時(shí)(即，同時(shí))或順序輸送。
[0069]術(shù)語“患者”、“受試者”或“個(gè)體”可互換地指哺乳動物，例如，人類或非人類哺乳動物，包括靈長類動物(例如，猴、泛類人猿、猩猩)、家養(yǎng)哺乳動物(例如，貓科動物、犬科動物)、農(nóng)業(yè)哺乳動物(例如，牛、羊、豬、馬)和實(shí)驗(yàn)室哺乳動物或嚙齒動物(例如，鼠屬、鼠科、兔形目、倉鼠)。
[0070]術(shù)語“減少”、“抑制”、“減輕”、“緩解”是指在神經(jīng)性疼痛的癥狀的可檢測的降低，如由受過訓(xùn)練的臨床觀察者來確定。神經(jīng)性疼痛的減少可以通過自我評估(例如，通過所述患者的報(bào)告)、通過采用在本領(lǐng)域中公知的疼痛測量試驗(yàn)(例如，痛覺過敏和/或異常性疼痛的測試)和/或客觀地(例如，使用功能性磁共振成像或f-MRI)來測量。神經(jīng)性疼痛減少的確定可以通過在治療前后進(jìn)行患者狀況的比較來作出。
[0071]“治療有效量或劑量”或“治療足夠量或劑量”或“有效或足夠量或劑量”指的是產(chǎn)生針對其來施用的治療效果的劑量。精確劑量將取決于治療目的并且由本領(lǐng)域技術(shù)人員使用已知技術(shù)來確定(參見例如Lieberman, Pharmaceutical DosageForms (第 1-3 卷，1992) ；Lloyd, The Art, Science and Technology of PharmaceuticalCompounding(1999) ；Pickar, Dosage Calculat1ns (1999)；和 Remington:The Scienceand Practice of Pharmacy,第 20版，2003，Gennaro編，Lippincott, Williams&Wilkins)。在致敏細(xì)胞中，治療有效劑量通?？梢员确侵旅艏?xì)胞的常規(guī)治療有效劑量低。
[0072]II1.減輕神經(jīng)性疼痛的方法
[0073]本發(fā)明提供了緩解神經(jīng)性疼痛的方法，通過向有需要的受試者施用治療有效量的sEH抑制劑，從而緩解神經(jīng)性疼痛。
[0074]在一些實(shí)施方案中，正用she抑制劑治療的個(gè)人不是接受以下疾病的治療:動脈粥樣硬化、其它炎性病癥，或需要抑制特別是在內(nèi)皮細(xì)胞上的粘附分子表達(dá)的其它病狀。
[0075]A.sEH的抑制劑
[0076]在本發(fā)明的方法中有用的Sffi抑制劑包括任何合適的Sffi抑制劑。在一些實(shí)施方案中，sHl抑制劑可以是式I的化合物:
[0077]
(R1<XWR2
H H(I)
[0078]其中每個(gè)R1可獨(dú)立地為H、齒素、C^6燒基、Cp6燒氧基、CV6齒代燒基、C1^齒代燒氧基、-O-芳基、具有5-6個(gè)環(huán)成員和至少I個(gè)N雜原子和I個(gè)O雜原子作為環(huán)成員的雜環(huán)烷基、-OH、-NO2或-C (0) 0R3，其中至少I個(gè)R1不是H ;X可為-C (0)-或-S (0) 2_ ;R2可為C2_6烷基、C1^6鹵代烷基、具有3-6個(gè)環(huán)成員的環(huán)烷基、具有5-6個(gè)環(huán)成員和至少2個(gè)N雜原子作為環(huán)成員并且被可為芐基或-C (0) -C1^6烷基的成員取代的CV6烷基-雜環(huán)烷基、任選地被OH取代的苯基，或具有5-6個(gè)環(huán)成員和至少I個(gè)N雜原子作為環(huán)成員并且任選地被鹵素取代的Cch6烷基-雜芳基；R3可為H或C^6烷基；下標(biāo)η可為I至5的整數(shù)；這樣使得當(dāng)R1是
4-0CF3時(shí)，則R2可為C2_6烷基、C2_6鹵代烷基、具有3-6個(gè)環(huán)成員的環(huán)烷基、具有5-6個(gè)環(huán)成員和至少2個(gè)N雜原子作為環(huán)成員并且被可為芐基或-C(O)-Ch烷基的成員取代的Cu烷基-雜環(huán)烷基、任選地被OH取代的苯基，或具有5-6個(gè)環(huán)成員和至少I個(gè)N雜原子作為環(huán)成員并且任選地被鹵素取代的Cch6烷基-雜芳基；或其鹽和異構(gòu)體。
[0079]在一些實(shí)施方案中，每個(gè)R1可為鹵素、C2_6鹵代烷基，或CV6鹵代烷氧基。在其它實(shí)施方案中，每個(gè) R1 可為 F、Cl、Br、1、CF3> CF2CF3^ CF (CF3) 2、CH (CF3) 2 或 0CF3。在一些其它實(shí)施方案中，每個(gè)R1可為C1、CF3*0CF3。在其它實(shí)施方案中，每個(gè)R1可為CF3，或0CF3。
[0080]在一些實(shí)施方案中，R2可為C2_6烷基、Ch6鹵代烷基，或具有3-6個(gè)環(huán)成員的環(huán)烷基。在其它實(shí)施方案中，R2可為乙基、丙基、異丙基、丁基、仲-丁基、異-丁基、叔丁基、戊基、戊-2-基、戊-3-基、異戊基、新戊基、己基、CF3、CH2CF3、(CH2) 2CF3、環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基或環(huán)己基。在一些其它實(shí)施方案中，R2可為異丙基、仲-丁基、(S)-仲-丁基、戊-3-基或環(huán)丙基。在其它實(shí)施方案中，R2可為異丙基或(S)-仲丁基。
[0081]在一些實(shí)施方案中，X可為-C(O)-。在其它實(shí)施方案中，X可為-S(O)2_。
[0082]在一些實(shí)施方案中，化合物可為下式任何一個(gè):
[0083]
【權(quán)利要求】
1.一種緩解有需要的受試者的神經(jīng)性疼痛的方法，所述方法包括向所述受試者施用治療有效量的式I化合物:
其中 每個(gè)R1獨(dú)立地選自由以下組成的組:H、鹵素、C^6烷基、Cp6烷氧基、Cu鹵代烷基、C^6鹵代烷氧基、-O-芳基、具有5-6個(gè)環(huán)成員和至少I個(gè)N雜原子和I個(gè)O雜原子作為環(huán)成員的雜環(huán)烷基、-OH、-NO2和-C (O) 0R3，其中至少I個(gè)R1不是H ; X選自由_C (O)-和-S (O) 2-組成的組； R2選自由以下組成的組:C2_6烷基、CV6鹵代烷基、具有3-6個(gè)環(huán)成員的環(huán)烷基、具有5-6個(gè)環(huán)成員和至少2個(gè)N雜原子作為環(huán)成員并且被選自由芐基和-C (O) -C1^6烷基組成的組的成員取代的C^6烷基-雜環(huán)烷基、任選地被OH取代的苯基，以及具有5-6個(gè)環(huán)成員和至少I個(gè)N雜原子作為環(huán)成員并且任選地被鹵素取代的Cch6烷基-雜芳基； R3選自由H和CV6烷基組成的組； 下標(biāo)η是I至5的整數(shù)； 這樣使得當(dāng)R1是4-0CF3時(shí)，則R2選自由以下組成的組:C2_6烷基、C2_6鹵代烷基、具有3-6個(gè)環(huán)成員的環(huán)烷基、具有5-6個(gè)環(huán)成員和至少2個(gè)N雜原子作為環(huán)成員并且被選自由芐基和-C (O) -C1^6烷基組成的組的成員取代的Cu烷基-雜環(huán)烷基、任選地被OH取代的苯基，以及具有5-6個(gè)環(huán)成員和至少I個(gè)N雜原子作為環(huán)成員并且任選地被鹵素取代的^?烷基-雜芳基； 或其鹽和異構(gòu)體，從而緩解所述受試者的所述神經(jīng)性疼痛。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中每個(gè)R1選自由以下組成的組:鹵素、C2_6鹵代烷基和C1-S鹵代烷氧基。
3.如權(quán)利要求1所述的方法,其中每個(gè)R1選自由以下組成的組:F、Cl、Br、1、CF3>CF2CF3' CF (CF3) 2 > CH (CF3) 2 和 OCF3。
4.如權(quán)利要求1所述的方法，其中每個(gè)R1選自由以下組成的組:(:1、0&和0CF3。
5.如權(quán)利要求1所述的方法，其中每個(gè)R1選自由以下組成的組=CF3和0CF3。
6.如權(quán)利要求1所述的方法，其中R2選自由以下組成的組:C2_6烷基、C^6鹵代烷基，和具有3-6個(gè)環(huán)成員的環(huán)烷基。
7.如權(quán)利要求1所述的方法，其中R2選自由以下組成的組:乙基、丙基、異丙基、丁基、仲-丁基、異-丁基、叔丁基、戍基、戍_2_基、戍-3_基、異-戍基、新戍基、己基、CF3、CH2CF3、(CH2) 2CF3、環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基和環(huán)己基。
8.如權(quán)利要求1所述的方法，其中R2選自由以下組成的組:異丙基、仲-丁基、(S)_仲-丁基、戍-3-基和環(huán)丙基。
9.如權(quán)利要求1所述的方法，其中R2選自由以下組成的組:異丙基和(S)-仲-丁基。
10.如權(quán)利要求1所述的方法，其中X是-C(O)-。
11.如權(quán)利要求1所述的方法，其中X是-S(O) 2-。
12.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述化合物具有式Ia:
13.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述化合物具有式Ib:
14.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述化合物具有式Ic:
15.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述化合物具有式Id:
16.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述化合物具有式Ie:
17.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述化合物具有式If:
18.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述化合物具有式Ig:
19.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述化合物具有式Ih:
20.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述化合物選自由以下組成的組: 1-(1-異丁酰基哌啶-4-基)-3-(4-(三氟甲基)苯基)脲、 (S)-1-(1-(2-甲基丁?；?哌啶-4-基)-3-(4-(三氟甲基)苯基)脲、 1-(1-( 丁基磺?；?哌啶-4-基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)脲，和 (S)-1-(1-(2-甲基丁?；?哌啶-4-基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)脲。
21.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述化合物選自由以下組成的組: 1-(1-異丁?；哙?4-基)-3-(4-(三氟甲基)苯基)脲、 (S)-1-(1-(2-甲基丁?；?哌啶-4-基)-3-(4-(三氟甲基)苯基)脲，和 (S)-1-(1-(2-甲基丁?；?哌啶-4-基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)脲。
22.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述藥劑口服施用。
23.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述藥劑靜脈內(nèi)施用。
24.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述藥劑鞘內(nèi)施用。
25.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述神經(jīng)性疼痛是中樞神經(jīng)性疼痛。
26.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述神經(jīng)性疼痛是周圍神經(jīng)性疼痛。
27.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述神經(jīng)性疼痛選自由以下組成的組:帶狀皰疹后神經(jīng)痛，三叉神經(jīng)痛，局灶性周圍神經(jīng)損傷，和痛性感覺缺失，由于中風(fēng)或腫塊、脊髓損傷或多發(fā)性硬化引起的中樞性疼痛，和由于糖尿病、HIV或化療引起的周圍神經(jīng)病變。
28.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述受試者在施用時(shí)正經(jīng)歷神經(jīng)性疼痛。
【文檔編號】A61K31/17GK104136022SQ201380010112
【公開日】2014年11月5日 申請日期:2013年2月1日 優(yōu)先權(quán)日:2012年2月1日
【發(fā)明者】B·D·哈莫克, K·S·李, B·因杰奧盧, K·瓦格納 申請人:加利福尼亞大學(xué)董事會