酶組合物及其用于創(chuàng)傷愈合的用途
【專利摘要】本發(fā)明提供了用于創(chuàng)傷愈合的組合物和使用該組合物的方法。該組合物包含一種或多種消化酶，例如，一種或多種蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶。該組合物可以被配制為局部藥物組合物，并且可用于在不存在瘢痕形成的情況下通過(guò)刺激表皮細(xì)胞而快速愈合。該組合物可沉積短期纖維化并幫助防止創(chuàng)傷重新裂開(kāi)。該組合物可改善白細(xì)胞的募集，從而通過(guò)酶的抗生效應(yīng)誘導(dǎo)或增強(qiáng)生長(zhǎng)因子和免疫系統(tǒng)的激活。該組合物可增強(qiáng)超出正常生理學(xué)修復(fù)過(guò)程之外的表皮完整性。該組合物的施用可導(dǎo)致用酶治療的創(chuàng)傷區(qū)域上更強(qiáng)的毛發(fā)再生長(zhǎng)以及減少的脫發(fā)。該組合物的施用可以不引起變態(tài)反應(yīng)并且不引起生物損傷或燒傷。
【專利說(shuō)明】酶組合物及其用于創(chuàng)傷愈合的用途
[0001] 奪叉引用
[0002] 本申請(qǐng)要求于2012年2月2日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)No. 61/594,015的權(quán)益，該臨 時(shí)申請(qǐng)通過(guò)引用整體并入本文。

【背景技術(shù)】
[0003] 組織中的創(chuàng)傷愈合是一個(gè)復(fù)雜的修復(fù)過(guò)程。如果創(chuàng)傷沒(méi)有以有序或及時(shí)的順序愈 合，或者如果愈合過(guò)程沒(méi)有產(chǎn)生結(jié)構(gòu)完整性，則認(rèn)為該創(chuàng)傷是慢性的。盡管在重組生長(zhǎng)因子 和生物工程皮膚方面取得了進(jìn)展，但是多達(dá)50%的已存在超過(guò)一年的慢性創(chuàng)傷對(duì)于治療仍 具有抗性。
[0004] 皮膚潰瘍可能是最常見(jiàn)的慢性創(chuàng)傷類型。這些創(chuàng)傷可因多種因素而產(chǎn)生或延續(xù)， 這些因素包括血管功能不全（靜脈的或動(dòng)脈的）、長(zhǎng)期炎癥、壓迫性壞死、物理因素、感染和 癌癥。然而，70%的皮膚創(chuàng)傷起因于壓力性潰瘍、糖尿病足潰瘍和靜脈性潰瘍。通常，向創(chuàng) 傷區(qū)域施加諸如莫匹羅星、甲硝唑、多粘菌素 B、新孢霉素（Neosporin)或桿菌肽這樣的抗 生素，以避免在其存在時(shí)可進(jìn)一步惡化病況的細(xì)菌感染。然而，這種做法可能能夠清除細(xì)菌 感染，但不一定能導(dǎo)致創(chuàng)傷的愈合。此外，這些化學(xué)合成的藥物常常對(duì)使用者造成耐受性或 副作用。慢性創(chuàng)傷及其治療在所需醫(yī)護(hù)的成本、時(shí)間及關(guān)注方面是醫(yī)療保健系統(tǒng)的巨大負(fù) 擔(dān)。生產(chǎn)力的損失以及生活質(zhì)量的下降是不可估量的。
[0005] 在正常情況下，急性創(chuàng)傷愈合的過(guò)程可分為三個(gè)階段。最初的炎癥階段，而后是強(qiáng) 健組織重塑和增生（增生階段），之后為成熟階段，其中相繼發(fā)生上皮重新形成、皮膚血管 生成和創(chuàng)傷閉合。上皮重新形成涉及上皮組織（主要是角質(zhì)形成細(xì)胞）的遷移和增殖。血 管生成是從已有血管生長(zhǎng)成新血管，并受包括生長(zhǎng)因子多肽在內(nèi)的多種可溶性細(xì)胞因子以 及細(xì)胞-細(xì)胞和細(xì)胞-基質(zhì)相互作用的調(diào)節(jié)。慢性創(chuàng)傷表現(xiàn)出不同于正常急性創(chuàng)傷的愈合 特征，因?yàn)樗鼈兺ǔＴ谳^長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)保持發(fā)炎狀態(tài)。最常在患有糖尿病、靜脈瘀滯疾病的人 以及難以行動(dòng)的患者中觀察到無(wú)法愈合的創(chuàng)傷。
[0006] 發(fā)明背景中的任何內(nèi)容均不應(yīng)理解為對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的承認(rèn)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明涉及使用藥物組合物對(duì)創(chuàng)傷的治療，該藥物組合物包含一種或多種分解食 物組分的消化酶，例如胰酶或其他消化道酶（例如，豬胰酶）或者源自植物、真菌或微生物 的酶。如本文所使用的，藥物組合物可用于人或獸醫(yī)學(xué)適應(yīng)癥。因此，該藥物組合物可用于 人或其他哺乳動(dòng)物群體（例如，豬、馬、牛、綿羊、山羊、猴子、大鼠、小鼠、貓、狗、美洲駝、大 熊貓、獅、虎、河馬、犀牛、長(zhǎng)頸鹿、倉(cāng)鼠、沙鼠等）或禽類群體（例如，鴨、鵝、雞、火雞、鴕鳥(niǎo) 等）的治療性治療。待治療的哺乳動(dòng)物還可以包括所有獸亞綱動(dòng)物（胎生哺乳動(dòng)物）和單 孔類動(dòng)物（卵生哺乳動(dòng)物）。此外，本方法還可用于所有其他形式的脊椎動(dòng)物和無(wú)脊椎動(dòng) 物，包括但不限于魚(yú)、爬行動(dòng)物和兩棲動(dòng)物。
[0008] 該藥物組合物可以獨(dú)立使用和/或與其他創(chuàng)傷愈合劑聯(lián)合使用。因此，本發(fā)明的 一個(gè)目的是提供一種治療禽類或哺乳動(dòng)物的創(chuàng)傷的方法，該方法包括向禽類或哺乳動(dòng)物施 用治療有效量的藥物組合物，該藥物組合物包含一種或多種消化酶和一種或多種藥學(xué)上可 接受的賦形劑。在一些實(shí)施方案中，所述一種或多種消化酶包含一種或多種酶，例如蛋白 酶、淀粉酶、纖維素酶、蔗糖酶、麥芽糖酶、木瓜蛋白酶、脂肪酶及其組合。在一些實(shí)施方案 中，所述一種或多種消化酶包含一種或多種胰酶。所述一種或多種消化酶可源自動(dòng)物來(lái)源、 微生物來(lái)源、植物來(lái)源、真菌來(lái)源，或?yàn)楹铣芍苽涞摹Ｔ谀承?shí)施方案中，該酶為源自豬的 酶。在一些實(shí)施方案中，動(dòng)物來(lái)源為豬胰臟。
[0009] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，該治療組合物可以是胰液素（pancreatin)。
[0010] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，該治療組合物可以是固體形式的胰液素。
[0011] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，該治療組合物可以是結(jié)晶形式的胰液素。
[0012] 在一個(gè)非限制性實(shí)例中，該組合物在白凡士林基質(zhì)中包含蛋白酶、脂肪酶和淀粉 酶。在一些實(shí)施方案中，該藥物組合物包含至少一種淀粉酶、含有胰凝乳蛋白酶和胰蛋白酶 的混合物以及至少一種脂肪酶。在一些實(shí)施方案中，該藥物組合物包含至少一種蛋白酶和 至少一種脂肪酶，且其中總蛋白酶與總脂肪酶（以USP單位計(jì)）之比為約1:1到約20:1。 在一些實(shí)施方案中，該藥物制劑包含單獨(dú)的或組合的蛋白酶、脂肪酶和/或淀粉酶。
[0013] 在一些實(shí)施方案中，該組合物可包含一種或多種其他創(chuàng)傷愈合劑。或者，在其他實(shí) 施方案中，該組合物可與一種或多種其他創(chuàng)傷愈合劑一起施用。在一些實(shí)施方案中，該藥物 組合物是用于局部給藥的劑型，其中該組合物是水溶液、乳劑、乳膏劑、軟膏劑、懸浮液、凝 膠劑、洗劑、脂質(zhì)體懸浮液或其任意組合。
[0014] 還提供了一種在具有創(chuàng)傷的個(gè)體中促進(jìn)創(chuàng)傷愈合和/或減少瘢痕形成的方法，該 方法包括向該個(gè)體施用包含一種或多種消化酶的藥物組合物。所述創(chuàng)傷可以是急性創(chuàng)傷或 慢性創(chuàng)傷（例如，手術(shù)創(chuàng)傷或外傷性創(chuàng)傷）。
[0015] 在一個(gè)實(shí)施方案中，與用安慰劑處理的受試者相比，瘢痕形成至少減少約2倍、約 3倍、約4倍、約5倍、約7. 5倍、約10倍、約15倍、約20倍、約25倍或更多。在另一個(gè)實(shí) 施方案中，與用安慰劑處理的受試者相比，瘢痕形成至少減少約2 %、約3 %、約4%、約5 %、 約 7. 5%、約 10%、約 15%、約 20%、約 25%、約 30%、約 35%、約 40%、約 45%、約 50%、約 55%、約60%、約65%、約70%、約75%或更多。
[0016] 在一個(gè)實(shí)施方案中，與未接受本文所述組合物治療的受試者相比，瘢痕形成至少 減少約2倍、約3倍、約4倍、約5倍、約7. 5倍、約10倍、約15倍、約20倍、約25倍或更多。 在另一個(gè)實(shí)施方案中，與未接受本文所述組合物治療的受試者相比，瘢痕形成至少減少約 2%、約 3%、約 4%、約 5%、約 7. 5%、約 10%、約 15%、約 20%、約 25%、約 30%、約 35%、 約40%、約45%、約50%、約55%、約60%、約65%、約70%、約75%或更多。
[0017] 還提供了將所述組合物施用至創(chuàng)傷上的方法，其中該組合物可用于刺激表皮細(xì) 胞、導(dǎo)致短期纖維化沉積、防止創(chuàng)傷重新裂開(kāi)、募集白細(xì)胞以幫助生長(zhǎng)因子和免疫系統(tǒng)激活 (酶的抗生效應(yīng)）、誘導(dǎo)更強(qiáng)的毛發(fā)再生長(zhǎng)、減少脫發(fā)、增強(qiáng)超出正常修復(fù)過(guò)程之外的表皮 修復(fù)和完整性，或其組合。
[0018] 本文提供了局部創(chuàng)傷愈合藥物組合物，其包含治療有效量的一種或多種消化酶和 一種或多種賦形劑，其中所述消化酶包含約25至約700, 000USP單位的蛋白酶、約2至約 100, 000USP單位的脂肪酶和約25至約400, 000USP單位的淀粉酶，其中所述治療有效量的 所述一種或多種消化酶足以誘導(dǎo)有利的表皮生理反應(yīng)。
[0019] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述表皮生理反應(yīng)包括表皮增生、短期纖維化沉積、白細(xì)胞的 募集和/或免疫系統(tǒng)的激活。
[0020] 在一個(gè)實(shí)施方案中，治療有效量的一種或多種消化酶基本上由蛋白酶、脂肪酶和 淀粉酶組成。
[0021] 在一個(gè)實(shí)施方案中，該組合物不用于治療金黃色葡萄球菌（S. aureus)或大腸桿 菌（E. coli)感染。
[0022] 在一個(gè)實(shí)施方案中，該組合物為胰液素。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述一種或多種消化 酶還包含選自纖維素酶、鹿糖酶、麥芽糖酶和木瓜蛋白酶的一種或多種酶。在一個(gè)實(shí)施方案 中，所述一種或多種消化酶包含一種或多種胰酶。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述一種或多種消化 酶包含源自豬的酶。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述蛋白酶包含胰凝乳蛋白酶和胰蛋白酶。在一個(gè) 實(shí)施方案中，所述一種或多種消化酶獨(dú)立地源自動(dòng)物來(lái)源、微生物來(lái)源、植物來(lái)源、真菌來(lái) 源，或?yàn)楹铣芍苽涞?。在一個(gè)實(shí)施方案中，該組合物包含至少一種淀粉酶、包含胰凝乳蛋白 酶和胰蛋白酶的蛋白酶混合物和至少一種脂肪酶。在一個(gè)實(shí)施方案中，總蛋白酶與總脂肪 酶（以USP單位計(jì)）之比為約1:1至約20:1。在另一個(gè)實(shí)施方案中，蛋白酶與脂肪酶（以 USP單位計(jì)）之比為約4:1至約10:1。在另一個(gè)實(shí)施方案中，蛋白酶與脂肪酶與淀粉酶之 比為7:1:4。
[0023] 在一個(gè)實(shí)施方案中，該組合物在約30克白凡士林的基質(zhì)中包含約122, 130USP單 位的蛋白酶、約17, 110USP單位的脂肪酶和約73, 750USP單位的淀粉酶。
[0024] 在一個(gè)實(shí)施方案中，該組合物在約30克白凡士林的基質(zhì)中包含約238, 050USP單 位的蛋白酶、約33, 350USP單位的脂肪酶和約143, 750USP單位的淀粉酶。
[0025] 在一個(gè)實(shí)施方案中，該組合物在約30克白凡士林的基質(zhì)中包含約459, 540USP單 位的蛋白酶、約64, 380USP單位的脂肪酶和約277, 500USP單位的淀粉酶。
[0026] 在一個(gè)實(shí)施方案中，該組合物刺激表皮細(xì)胞、導(dǎo)致短期纖維化沉積、防止創(chuàng)傷重新 裂開(kāi)、募集白細(xì)胞以幫助生長(zhǎng)因子和免疫系統(tǒng)的激活（酶的抗生效應(yīng)）、誘導(dǎo)更強(qiáng)的毛發(fā)再 生長(zhǎng)、減少脫發(fā)、增強(qiáng)超出正常修復(fù)過(guò)程之外的表皮修復(fù)和完整性，或其組合。
[0027] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，該組合物不會(huì)導(dǎo)致變態(tài)反應(yīng)、瘢痕形成、生物損傷、燒傷或 其組合。
[0028] 該組合物可以是選自乳膏劑、洗劑、乳劑、粉劑、液體劑、凝膠劑及其任意組合的劑 型。
[0029] 所述一種或多種賦形劑可以是水、鹽水、林格溶液、右旋糖溶液以及乙醇、葡萄糖、 蔗糖、葡聚糖、甘露糖、甘露醇、山梨糖醇、聚乙二醇（PEG)、磷酸鹽、醋酸鹽、明膠、膠原蛋白、 Carbopolxu 植物油、白凡士林或其組合的溶液。
[0030] 該組合物還可以包含一種或多種合適的防腐劑、穩(wěn)定劑、抗氧化劑、抗微生物劑、 緩沖劑或其組合。
[0031] 本文提供了一種治愈受試者的創(chuàng)傷的方法，該方法包括向創(chuàng)傷上施加用于創(chuàng)傷愈 合的局部藥物組合物，該局部藥物組合物包含治療有效量的一種或多種消化酶和一種或多 種賦形劑，其中所述消化酶包含約25至約700, 000USP單位的蛋白酶、約2至約100, 000USP 單位的脂肪酶和約25至約400, 000USP單位的淀粉酶，其中所述治療有效量的所述一種或 多種消化酶足以誘導(dǎo)有利的表皮生理反應(yīng)。
[0032] -種治愈受試者的創(chuàng)傷的方法，包括施用用于創(chuàng)傷愈合的局部藥物組合物，該局 部藥物組合物包含治療有效量的一種或多種消化酶和任選的一種或多種賦形劑，其中所述 消化酶包含至少約100, 000USP單位的蛋白酶、至少約15, 000USP單位的脂肪酶和至少約 70, 000USP單位的淀粉酶。
[0033] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述消化酶包含至少約200, 000USP單位的蛋白酶、至少約 30, 000USP單位的脂肪酶和至少約140, 000USP單位的淀粉酶。
[0034] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述消化酶包含至少約450, 000USP單位的蛋白酶、至少約 60, 000USP單位的脂肪酶和至少約270, 000USP單位的淀粉酶。
[0035] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述消化酶包含至少約122, 000USP單位的蛋白酶、至少約 17, 000USP單位的脂肪酶和至少約73, 000USP單位的淀粉酶。
[0036] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述消化酶包含至少約238, 000USP單位的蛋白酶、至少約 33, 000USP單位的脂肪酶和至少約143, 000USP單位的淀粉酶。
[0037] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述消化酶包含至少約459, 000USP單位的蛋白酶、至少約 64, 000USP單位的脂肪酶和至少約277, 000USP單位的淀粉酶。
[0038] 在一個(gè)實(shí)施方案中，治療有效量的所述一種或多種消化酶足以誘導(dǎo)有利的表皮生 理反應(yīng)。
[0039] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物中蛋白酶與脂肪酶與淀粉酶之比為7:1:4。
[0040] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述一種或多種賦形劑包含白凡士林。
[0041] 在一個(gè)實(shí)施方案中，該組合物基本上由蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶組成。在一個(gè)實(shí)施 方案中，該組合物包含胰液素。在一個(gè)實(shí)施方案中，該組合物中的組合物消化酶基本上由蛋 白酶、淀粉酶和脂肪酶組成。
[0042] 在一個(gè)實(shí)施方案中，與用安慰劑處理的受試者相比，受試者在施用所述包含消化 酶的組合物后表現(xiàn)出至少快約2倍的創(chuàng)傷愈合改善。
[0043] 在一個(gè)實(shí)施方案中，與未用所述組合物治療的受試者相比，受試者在施用所述組 合物后表現(xiàn)出至少快約2倍的創(chuàng)傷愈合改善。
[0044] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，由施用此類組合物產(chǎn)生的表皮生理反應(yīng)包括表皮增生、短 期纖維化沉積、白細(xì)胞的募集和/或免疫系統(tǒng)的激活。
[0045] 本文提供了一種在受試者中刺激表皮細(xì)胞、導(dǎo)致短期纖維化沉積、防止創(chuàng)傷重新 裂開(kāi)、募集白細(xì)胞以幫助生長(zhǎng)因子和免疫系統(tǒng)激活（酶的抗生效應(yīng)）、誘導(dǎo)毛發(fā)再生長(zhǎng)、減 少脫發(fā)、增強(qiáng)超出正常修復(fù)過(guò)程之外的表皮修復(fù)和完整性或其組合的方法，該方法包括用 治療有效量的包含一種或多種消化酶和一種或多種賦形劑的組合物接觸創(chuàng)傷，其中所述消 化酶包含約25至約700, 000USP單位的蛋白酶和約2至約100, 000USP單位的脂肪酶和約 25至約400, 000USP單位的淀粉酶。
[0046] 本文提供了一種治愈受試者的創(chuàng)傷的方法，該方法包括施加用于創(chuàng)傷愈合的局部 藥物組合物，該局部藥物組合物包含治療有效量的一種或多種消化酶和任選的一種或多種 賦形劑，其中所述消化酶包含至少約100, 000USP單位的蛋白酶、至少約15, 000USP單位的 脂肪酶和至少約70, 000USP單位的淀粉酶。
[0047] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述消化酶包含至少約200, 000USP單位的蛋白酶、至少約 30, OOOUSP單位的脂肪酶和至少約140, OOOUSP單位的淀粉酶。
[0048] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述消化酶包含至少約450, OOOUSP單位的蛋白酶、至少約 60, OOOUSP單位的脂肪酶和至少約270, OOOUSP單位的淀粉酶。
[0049] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述消化酶包含至少約122, OOOUSP單位的蛋白酶、至少約 17, OOOUSP單位的脂肪酶和至少約73, OOOUSP單位的淀粉酶。
[0050] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述消化酶包含至少約238, OOOUSP單位的蛋白酶、至少約 33, OOOUSP單位的脂肪酶和至少約143, OOOUSP單位的淀粉酶。
[0051] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述消化酶包含至少約459, OOOUSP單位的蛋白酶、至少約 64, OOOUSP單位的脂肪酶和至少約277, OOOUSP單位的淀粉酶。
[0052] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述治療有效量的所述一種或多種消化酶足以誘導(dǎo)有利的 表皮生理反應(yīng)。
[0053] 本文提供了一種通過(guò)向受試者施用基本上由一種或多種消化酶和一種或多種 賦形劑組成的組合物來(lái)促進(jìn)創(chuàng)傷愈合的方法，其中所述消化酶在白凡士林基質(zhì)中包含約 25至約700, OOOUSP單位的蛋白酶和約2至約100, OOOUSP單位的脂肪酶和約25至約 400, OOOUSP單位的淀粉酶，其中與施用安慰劑相比，瘢痕形成至少減少約2倍。
[0054] 在本文所述的任何組合物和方法的一個(gè)方面，組合物中蛋白酶與脂肪酶與淀粉酶 之比可以是7:1:4。
[0055] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述消化酶包含至少約105, OOOUSP單位的蛋白酶、至少約 15, OOOUSP單位的脂肪酶和至少約60, OOOUSP單位的淀粉酶。
[0056] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述消化酶包含至少約210, OOOUSP單位的蛋白酶、至少約 30, OOOUSP單位的脂肪酶和至少約120, OOOUSP單位的淀粉酶。
[0057] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述消化酶包含至少約119, OOOUSP單位的蛋白酶、至少約 17, OOOUSP單位的脂肪酶和至少約68, OOOUSP單位的淀粉酶。
[0058] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述消化酶包含至少約224, OOOUSP單位的蛋白酶、至少約 33, OOOUSP單位的脂肪酶和至少約132, OOOUSP單位的淀粉酶。
[0059] 榜引并入
[0060] 本說(shuō)明書(shū)中提到的所有出版物、專利和專利申請(qǐng)均通過(guò)引用并入本文，其程度等 同于每個(gè)單獨(dú)的出版物、專利或?qū)＠暾?qǐng)被特別地和單獨(dú)地指出通過(guò)引用而并入。

【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0061] 本發(fā)明的新特征在隨附的權(quán)利要求中具體闡述。通過(guò)參考以下對(duì)在其中利用到本 發(fā)明原理的示例說(shuō)明性實(shí)施方案加以闡述的詳細(xì)描述和附圖，將會(huì)獲得對(duì)本發(fā)明的特征和 優(yōu)點(diǎn)的更好的理解，在附圖中：
[0062] 圖1A-B圖示了在動(dòng)物1001A研究第8天對(duì)創(chuàng)傷的治療的代表性結(jié)果。圖1A提供 了對(duì)照動(dòng)物1〇〇1Α(1)在第8天的H&E染色；擦傷的皮膚未觀察到異常所見(jiàn)。圖1B提供了 中劑量動(dòng)物1001A(3)在第8天的H&E染色；擦傷的皮膚觀察到輕度上皮增生。
[0063] 圖2A-B圖示了在動(dòng)物1002A研究第8天對(duì)創(chuàng)傷的治療的代表性結(jié)果。圖2A提供 了低劑量動(dòng)物1002A (2)在第8天的H&E染色；擦傷的皮膚觀察到最低程度的上皮增生。圖 2B提供了高劑量動(dòng)物1002A (4)在第8天的H&E染色；擦傷的皮膚觀察到輕度上皮增生。
[0064] 圖3A-D圖示了在動(dòng)物1003A研究第8天對(duì)創(chuàng)傷的治療的代表性結(jié)果。圖3A提供 了對(duì)照動(dòng)物1003A (5)在第8天的H&E染色；未擦傷的皮膚未觀察到異常所見(jiàn)。圖3B提供 了低劑量動(dòng)物1003A (6)在第8天的H&E染色；未擦傷的皮膚未觀察到異常所見(jiàn)。圖3C提 供了中劑量動(dòng)物1003A(7)在第8天的H&E染色；未擦傷的皮膚未觀察到異常所見(jiàn)。圖3D 提供了高劑量動(dòng)物1003A(8)在第8天的H&E染色；未擦傷的皮膚觀察到輕度上皮增生。
[0065] 圖4A-D圖示了在動(dòng)物1005A研究第13天對(duì)創(chuàng)傷的治療的代表性結(jié)果。圖4A提 供了對(duì)照動(dòng)物1005A (5)在第13天的H&E染色；未擦傷的皮膚未觀察到異常所見(jiàn)。圖4B提 供了低劑量動(dòng)物1005A(6)在第13天的H&E染色；未擦傷的皮膚未觀察到異常所見(jiàn)。圖4C 提供了中劑量動(dòng)物1005A(7)在第13天的H&E染色；未擦傷的皮膚未觀察到異常所見(jiàn)。圖 4D提供了高劑量動(dòng)物1005A(8)在第13天的H&E染色；未擦傷的皮膚未觀察到異常所見(jiàn)； 200X分辨率。
[0066] 圖5A-D圖示了在動(dòng)物1006A研究第13天對(duì)創(chuàng)傷的治療的代表性結(jié)果。圖5A提 供了對(duì)照動(dòng)物1〇〇6Α(1)在第13天的H&E染色；擦傷的皮膚未觀察到異常所見(jiàn)。圖5B提供 了低劑量動(dòng)物1006A (2)在第13天的H&E染色；擦傷的皮膚未觀察到異常所見(jiàn)。圖5C提供 了中劑量動(dòng)物1006A (1)在第13天的H&E染色；擦傷的皮膚未觀察到異常所見(jiàn)。圖?提供 了高劑量動(dòng)物1006A(4)在第13天的H&E染色；未擦傷的皮膚未觀察到異常所見(jiàn)。

【具體實(shí)施方式】
[0067] 本發(fā)明人第一次發(fā)現(xiàn)本文所述的酶組合物在促進(jìn)創(chuàng)傷愈合中是有效的。此外，該 酶組合物可刺激表皮細(xì)胞、導(dǎo)致短期纖維化沉積、防止創(chuàng)傷重新裂開(kāi)、募集白細(xì)胞以幫助生 長(zhǎng)因子和免疫系統(tǒng)的激活（酶的抗生效應(yīng)）、誘導(dǎo)更強(qiáng)的毛發(fā)再生長(zhǎng)、減少脫發(fā)、增強(qiáng)超出 正常修復(fù)過(guò)程之外的表皮修復(fù)和完整性，或其組合。
[0068] 本文提供了一種藥物組合物，其包含源自豬的蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶，并且具有 一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑或載體。
[0069] 本文還提供了一種創(chuàng)傷愈合方法，該方法包括向有需要的受試者施用治療有效量 的本文所述的組合物。
[0070] 術(shù)語(yǔ)"給藥"或"施用"是指將組合物或藥物組合物的劑量給予受試者或患者的方 法。
[0071 ] 如本文所用的"受試者"或"患者"或"個(gè)體"是指人或非人類哺乳動(dòng)物，例如，狗、 貓、小鼠、大鼠、牛、羊、豬、山羊、非人靈長(zhǎng)類或禽類（例如，雞、火雞、鴕鳥(niǎo)等）以及任何其他 脊椎動(dòng)物或無(wú)脊椎動(dòng)物。術(shù)語(yǔ)"哺乳動(dòng)物"以其通常的生物學(xué)含義使用。因此，其具體地包 括人、牛、馬、狗和貓，但也包括許多其他物種，包括但不限于美洲駝、大熊貓、獅、虎、河馬、 犀牛、長(zhǎng)頸鹿、嚙齒動(dòng)物（例如，小鼠、大鼠、兔等）或靈長(zhǎng)類動(dòng)物（例如，猴子、大猩猩、黑猩 猩等）以及包括獸亞綱動(dòng)物和單孔類動(dòng)物的所有其他形式。在一個(gè)實(shí)施方案中，待治療的 哺乳動(dòng)物為人。
[0072] 本文所用的"治療"、"療治"或"處理"是指出于治療目的施用藥物組合物。術(shù)語(yǔ) "治療性處理"是指向患者施用治療，從而導(dǎo)致治療上有益的效果。
[0073] "治療有效量"或"藥學(xué)有效量"通常是足以獲得期望的效果并可以根據(jù)疾病狀況 的性質(zhì)和嚴(yán)重程度、受試者的性質(zhì)以及組合物的效力而變化的量。該量可進(jìn)一步取決于受 試者的身高、體重、性別、年齡和醫(yī)療史。在一個(gè)實(shí)施方案中，治療有效劑量或治療有效量將 足以刺激或增大上皮和/或內(nèi)皮創(chuàng)傷愈合反應(yīng)，并因此誘導(dǎo)或增強(qiáng)創(chuàng)傷愈合。
[0074] 術(shù)語(yǔ)"藥學(xué)上可接受的"是指可施用于哺乳動(dòng)物而無(wú)異常毒性的化合物和組 合物。合適的賦形劑包括但不限于水、鹽水、林格溶液、右旋糖溶液，和乙醇、葡萄糖、蔗 糖、葡聚糖、甘露糖、甘露醇、山梨糖醇、聚乙二醇（PEG)、磷酸鹽、醋酸鹽、明膠、膠原蛋 白、（..:--Η.)ορ?Ι%.植物油、白凡士林等或其組合的溶液。此外可包括一種或多種合適 的防腐劑、穩(wěn)定劑、抗氧化劑、抗微生物劑和緩沖劑，例如，BHA、ΒΗΤ、檸檬酸、抗壞血酸、 四環(huán)素等，及其組合。此外，可包括本領(lǐng)域常用的眾多佐劑。在文獻(xiàn)中，例如在Merck Index, Merck&Company, Rahway, N. J中描述了這些以及其他此類組合物。例如，在Gilman等 A · (Eds. ) (2006) ;Goodman和 Gilman 的 The Pharmacological Basis of Therapeutics, 第11版，The McGraw-Hill Companies中描述了對(duì)于藥物組合物中包含多種組分的考慮。 [0075] 如本文所用的術(shù)語(yǔ)"創(chuàng)傷愈合"是指增大、改善、增加或誘導(dǎo)創(chuàng)傷的閉合、愈合或修 復(fù)。例如，如果與未治療的創(chuàng)傷或用安慰劑物質(zhì)處理的創(chuàng)傷相比，用本文所述組合物治療的 創(chuàng)傷的愈合時(shí)間縮短了約5%、約10%、約20%、約25%、約30%、約40%、約50%、約75% 或更多，則認(rèn)為促進(jìn)了創(chuàng)傷愈合。相反，瘢痕形成的程度可用于確定是否促進(jìn)了創(chuàng)傷愈合。 如本文所述的創(chuàng)傷愈合還包括刺激表皮細(xì)胞、導(dǎo)致短期纖維化沉積、防止創(chuàng)傷重新裂開(kāi)、募 集白細(xì)胞以幫助生長(zhǎng)因子和免疫系統(tǒng)的激活（酶的抗生效應(yīng)）、誘導(dǎo)更強(qiáng)的毛發(fā)再生長(zhǎng)、減 少脫發(fā)、增強(qiáng)超出正常修復(fù)過(guò)程之外的表皮修復(fù)和完整性，或其組合。
[0076] 創(chuàng)傷可以是在哺乳動(dòng)物的任何部位發(fā)現(xiàn)的內(nèi)部創(chuàng)傷或外部創(chuàng)傷。創(chuàng)傷是一種類型 的物理創(chuàng)傷，其中皮膚或組織的完整性由于例如外力、不良健康狀況、衰老、暴露于陽(yáng)光、熱 或化學(xué)反應(yīng)或由于受到內(nèi)部生理過(guò)程的損害而遭到破壞。如果組織外層受損，則認(rèn)為該創(chuàng) 傷是開(kāi)放性創(chuàng)傷。
[0077] 創(chuàng)傷還可以由諸如開(kāi)放心臟手術(shù)、器官移植、截肢術(shù)和假肢植入（如關(guān)節(jié)和髖關(guān) 節(jié)置換）等外科手術(shù)引起。
[0078] 創(chuàng)傷可以是開(kāi)放性創(chuàng)傷或閉合性創(chuàng)傷。
[0079] 開(kāi)放性創(chuàng)傷是指皮膚破損的創(chuàng)傷。開(kāi)放性創(chuàng)傷包括，例如，切口（ S卩，皮膚由例如 切割工具（例如，小刀、剃刀等）損傷的創(chuàng)傷）、撕裂傷（即，皮膚通常由鈍器或不鋒利的工 具損傷的創(chuàng)傷）、擦傷（例如，通常為刮掉了皮膚最上層的淺創(chuàng)傷）、刺傷（通常是由刺穿皮 膚的物體如釘或針造成的）、貫通性創(chuàng)傷（例如，由諸如小刀等物體造成的）以及槍傷。
[0080] 閉合性創(chuàng)傷通常是皮膚未破損的創(chuàng)傷。閉合性創(chuàng)傷包括例如由損害皮下組織的鈍 力外傷導(dǎo)致的挫傷（或撞傷）、由血管損傷（其進(jìn)而導(dǎo)致血液在皮膚下匯集）導(dǎo)致的血腫、 由長(zhǎng)期施加的較大力或極大力導(dǎo)致的擠壓傷、急性和慢性創(chuàng)傷。
[0081] 創(chuàng)傷的非限制性實(shí)例為：燒傷是由于暴露于熱、電、輻射（例如，曬傷和激光手術(shù)） 或腐蝕性化學(xué)品導(dǎo)致的損傷，由于衰老或環(huán)境導(dǎo)致的皮膚創(chuàng)傷（這包括例如開(kāi)裂、干性皮 膚、皮膚粗糙等），由于損傷組織的外力導(dǎo)致的創(chuàng)傷，潰瘍（皮膚或黏膜表面上的病變）。糖 尿病中的創(chuàng)傷通常為由神經(jīng)損傷導(dǎo)致的麻木（糖尿病神經(jīng)病變）以及腿部和足部的低血流 量而造成的足損傷。最嚴(yán)重的損傷是足潰瘍。糖尿病足潰瘍具有非常高的感染風(fēng)險(xiǎn)，并且 有時(shí)是無(wú)法治愈的。無(wú)法治愈的足潰瘍是糖尿病、臥位創(chuàng)傷、褥瘡（壓瘡）（即，對(duì)身體任何 部分尤其是骨或軟骨區(qū)域上的部分的未減輕壓力所導(dǎo)致的損傷）患者的截肢的常見(jiàn)原因。
[0082] 在一個(gè)實(shí)施方案中，上文所述的藥物組合物用于創(chuàng)傷愈合、刺激表皮細(xì)胞、導(dǎo)致短 期纖維化沉積、防止創(chuàng)傷重新裂開(kāi)、募集白細(xì)胞以幫助生長(zhǎng)因子和免疫系統(tǒng)的激活（酶的 抗生效應(yīng)）、誘導(dǎo)更強(qiáng)的毛發(fā)再生長(zhǎng)、減少脫發(fā)、增強(qiáng)超出正常修復(fù)過(guò)程之外的表皮修復(fù)和 完整性，或其組合。
[0083] 本文所述的組合物不引起變態(tài)反應(yīng)、瘢痕形成、生物損傷、燒傷或其組合。
[0084] 在一個(gè)實(shí)施方案中，該組合物用于治療急性或慢性創(chuàng)傷。
[0085] 急性創(chuàng)傷是由對(duì)完好皮膚的外部損傷導(dǎo)致的，并且可根據(jù)導(dǎo)致創(chuàng)傷的物體而分為 不同的類型：例如，切口或切傷、撕裂傷、擦傷和擦破、燒傷、由刺穿皮膚的物體如釘或針導(dǎo) 致的刺傷、由諸如插入身體的刀等物體導(dǎo)致的貫通傷、由擊入或穿過(guò)身體的子彈或類似射 彈導(dǎo)致的槍傷。急性創(chuàng)傷還可以是閉合性創(chuàng)傷，如挫傷或撞傷、血腫、由長(zhǎng)期施加的較大力 或極大力導(dǎo)致的擠壓傷。其他急性創(chuàng)傷起因于皮膚疾病如銀屑病、痤瘡和濕疹。
[0086] 慢性創(chuàng)傷最常見(jiàn)的是由與最終損害真皮或上皮組織完整性的素因性狀況相關(guān)的 內(nèi)源性機(jī)制所導(dǎo)致的。常見(jiàn)的慢性創(chuàng)傷為：靜脈性饋瘍，其通常發(fā)生在腿部并且主要影響老 年人；糖尿病性潰瘍，其為慢性創(chuàng)傷的另一主要病因；壓力性潰瘍，其通常發(fā)生在患有諸如 約束身體部分運(yùn)動(dòng)的麻痹等病況的患者中，該身體部分經(jīng)常承受壓力，如足跟、肩胛骨和骶 骨；角膜潰瘍，最常見(jiàn)的是由細(xì)菌、病毒、真菌或變形蟲(chóng)感染引起的；以及消化道潰瘍。所有 慢性創(chuàng)傷均愈合緩慢并且以不可預(yù)知的方式愈合。
[0087] 因此，本文所述的組合物可用于激活血管生成，從而促進(jìn)創(chuàng)傷的愈合。
[0088] 該組合物可以是水溶液、乳劑、乳膏、軟膏、洗劑、懸浮液、凝膠、脂質(zhì)體懸浮液等。 用于局部給藥的組合物的其他非限制性實(shí)例包括但不限于洗劑、藥膏、凝膠、乳膏、香膏、酊 齊?、糊劑、酏劑、貼劑、噴霧劑、洗眼劑、滴劑、懸浮液、分散體、水凝膠、軟膏、乳劑或粉劑。其 他局部制劑包括氣霧劑、繃帶、敷料材料、藻酸鹽敷料和其他創(chuàng)傷敷料。
[0089] 組合物
[0090] 如本文所述使用的組合物可包含一種或多種消化酶。不受理論約束，據(jù)認(rèn)為該組 合物中的消化酶可治愈創(chuàng)傷、刺激表皮細(xì)胞、導(dǎo)致短期纖維化沉積、防止創(chuàng)傷重新裂開(kāi)、募 集白細(xì)胞以幫助生長(zhǎng)因子和免疫系統(tǒng)的激活（酶的抗生效應(yīng)）、誘導(dǎo)更強(qiáng)的毛發(fā)再生長(zhǎng)、減 少脫發(fā)、增強(qiáng)超出正常修復(fù)過(guò)程之外的表皮修復(fù)和完整性，或其組合。
[0091] 本文描述的消化酶是可以分解食物的一種或多種組分（例如，蛋白、脂肪、碳水化 合物）的酶。該消化酶可以是動(dòng)物來(lái)源的酶（例如，胰腺或其他消化道酶），或植物、真菌或 微生物來(lái)源的酶，或者可以是合成制備的。許多消化酶是可商購(gòu)獲得的，或者可通過(guò)本領(lǐng)域 普通技術(shù)人員公知的方法從其他來(lái)源分離及純化。也可使用標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)評(píng)估該酶的酶活性。
[0092] 所述消化酶可以以酶類型的任意組合和酶來(lái)源的任意組合而使用。在一些實(shí)施方 案中，所述一種或多種消化酶包含一種或多種選自下組的酶：蛋白酶、淀粉酶、纖維素酶、蔗 糖酶、麥芽糖酶、木瓜蛋白酶（例如來(lái)自木瓜）、菠蘿蛋白酶（例如來(lái)自菠蘿）、水解酶和脂 肪酶。在一些實(shí)施方案中，所述一種或多種消化酶包含一種或多種胰酶。在一些實(shí)施方案 中，所述組合物包含一種或多種蛋白酶、一種或多種脂肪酶和一種或多種淀粉酶。在一些實(shí) 施方案中，所述一種或多種蛋白酶包含胰凝乳蛋白酶和胰蛋白酶。在一些實(shí)施方案中，本文 描述的組合物由或者基本上由一種或多種消化酶組成。
[0093] 在某些實(shí)施方案中，所述組合物可包含至少一種淀粉酶、至少兩種蛋白酶和至少 一種脂肪酶。在某些實(shí)施方案中，所述組合物還可包含一種或多種水解酶、木瓜蛋白酶、菠 蘿蛋白酶、木瓜（papaya)、纖維素酶、胰液素、鹿糖酶和麥芽糖酶。
[0094] 如所指出的，所述一種或多種消化酶可以源自于動(dòng)物來(lái)源。在一些實(shí)施方案中，該 動(dòng)物來(lái)源是豬，例如豬胰。豬胰酶提取物和制劑是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的，并且可以商 購(gòu)獲得或可使用已知方法制備。例如，胰酶組合物可從Scientific Protein Laboratories 購(gòu)買（稱為PEC)。例如，可以通過(guò)生產(chǎn)和/或加工方法或通過(guò)向組合物中選擇性加入外源 性酶、活化劑或抑制劑來(lái)調(diào)節(jié)胰酶組合物或本文的任何組合物，以改變其中所包含的一種 或多種消化酶的量，例如脂肪酶、淀粉酶或蛋白酶含量。
[0095] 欲在本文所述的組合物和方法中使用的消化酶包括，例如，胰酶。存在兩種類型的 胰酶，它們具有美國(guó)藥典（U.S.P.)命名：胰液素和胰脂肪酶。胰液素是一種含有酶（主要 是淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶）的物質(zhì)，獲自豬Sus scrofa Linne var. domesticus Gray (豬 科（Suidae))或牛Bos Taurus Linne (?？疲˙ocidae))的胰臟。每mg胰液素含有不少于 25USP單位的淀粉酶活性、不少于2USP單位的脂肪酶活性和不少于25USP的蛋白酶活性。 在下文的實(shí)施例1中提供了有關(guān)胰液素的更多信息。與之相比，胰脂肪酶USP是指一種奶 油色的無(wú)定形粉末，具有微弱的、特有的（肉樣的）但不討厭的氣味，其含有不少于24USP 單位/mg的量的脂肪酶；不少于100USP單位/mg的量的蛋白酶；和不少于100USP單位/mg 的量的淀粉酶；具有不超過(guò)5%的脂肪和不超過(guò)5%的干燥損失。
[0096] 在某些情況下，可能希望蛋白酶活性相對(duì)高于脂肪酶。因此，在一些實(shí)施方案中， 所述組合物包含至少一種蛋白酶和至少一種脂肪酶，其中總蛋白酶與總脂肪酶（以USP單 位計(jì)）之比為約1:1到約20:1，包括約1:1、約2:1、約3:1、約4:1、約5:1、約6:1、約7:1、約 8:1、約 9:1、約 10:1、約 11:1、約 12:1、約 13:1、約 14:1、約 15:1、約 16:1、約 17:1、約 18:1、 約19:1和約20:1，以及其間的所有數(shù)值。在一些實(shí)施方案中，蛋白酶與脂肪酶之比為約4:1 到約10:1，包括約4:1、約5:1、約6:1、約7:1、約8:1、約9:1和約10:1，以及其間的所有數(shù) 值。
[0097] 在某些情況下，改變給定組合物中的特定酶活性的量可能是有用的?？赏ㄟ^(guò)技術(shù) 人員已知的多種方法，例如通過(guò)增大特定酶的量，或通過(guò)調(diào)節(jié)組合物的組分，例如，通過(guò)使 用穩(wěn)定劑、抑制劑和活化劑，來(lái)調(diào)節(jié)一種或多種消化酶的活性。在一些實(shí)施方案中，本文描 述的組合物包含一種或多種蛋白酶，該蛋白酶的活性為每mg組合物約0. 05到約400USP單 位，或其間的任意值（例如，每mg約0. 1、約0.2、約0.25、約0.5、約1、約2、約5、約10、約 15、約 20、約 25、約 30、約 35、約 40、約 45、約 50、約 55、約 60、約 65、約 75、100、約 150、約 200、約250、約300、約350USP單位）。在一些實(shí)施方案中，本文描述的組合物包含一種或多 種脂肪酶，該脂肪酶的活性為每mg組合物約0. 005到約80單位，或其間的任意值（例如，每 mg 約 0· 01、約 0· 02、約 0· 025、約 0· 03、約 0· 04、約 0· 05、約 0· 06、約 0· 08、約 0· 1、約 0· 2、約 0. 5、約1、約2、約3、約4、約5、約6、約7、約8、約9、約10、約12、約14、約16、約18、約20、 約22、約25、約28、約30、約35、約38、約40、約45、約48、約50、約52、約55、約58、約60、 約63、約66、約68、約70、約72、約75、約78或約80USP單位）。在一些實(shí)施方案中，本文描 述的組合物包含一種或多種淀粉酶，該淀粉酶的活性為每mg組合物約0. 05到約500USP單 位，或其間的任意值（例如，每mg約0. 1、約0.2、約0.25、約0.5、約1、約2、約5、約10、約 15、約 20、約 25、約 30、約 35、約 40、約 45、約 50、約 55、約 60、約 65、約 75、約 100、約 150、 約200、約250、約300、約350、約400或約450USP單位）。在一些實(shí)施方案中，本文描述的 組合物包含上述活性范圍的一種或多種蛋白酶、上述活性范圍的一種或多種脂肪酶和上述 活性范圍的一種或多種淀粉酶。一個(gè)示例性的實(shí)施方案包括活性在約150-250USP單位/mg 范圍內(nèi)的一種或多種蛋白酶、活性在約20-40USP單位/mg范圍內(nèi)的一種或多種脂肪酶和活 性在約200-300USP單位/mg范圍內(nèi)的一種或多種淀粉酶。
[0098] 在一些實(shí)施方案中，可以配制組合物以穩(wěn)定一種或多種消化酶，例如，保護(hù)所述酶 的酶活性。穩(wěn)定化技術(shù)可限制或阻止組合物中一種或多種酶的自動(dòng)降解并幫助維持酶活 性、延長(zhǎng)保質(zhì)期并有助于組合物活性對(duì)溫度、濕度和儲(chǔ)藏條件變化的耐受性。在其他應(yīng)用 中，可以利用賦形劑、pH、酶抑制劑等的變化來(lái)幫助酶穩(wěn)定。適當(dāng)?shù)姆€(wěn)定化技術(shù)取決于組合 物的預(yù)定應(yīng)用、組合物的形式、預(yù)定的遞送位置/活性及其他因素，并且可由本領(lǐng)域技術(shù)人 員確定。
[0099] 某些有用的酶活性穩(wěn)定劑包括在溶液中提供游離鈣的來(lái)源的化合物，例如鈣鹽； 烷基醇或支鏈醇類，例如乙醇和異丙醇；烷醇胺類，例如三乙醇胺；酸類，例如有機(jī)酸類；以 及石油餾出物的混合物。
[0100] 在某些實(shí)施方案中，酶活性穩(wěn)定劑可以是選自下組的組合物：⑴已知可有效穩(wěn) 定液體水溶液中的酶的組合物，包括酶穩(wěn)定化合物和系統(tǒng)，（2)選擇的"膠束抑制劑"，以及 (1)和（2)的混合物。在一些實(shí)施方案中，活性穩(wěn)定劑是適當(dāng)濃度的硼陰離子。在一些情況 下，活性穩(wěn)定劑在多元醇中被溶劑化，并且可以與形成酶穩(wěn)定系統(tǒng)的酶穩(wěn)定增效劑或輔劑 組合。優(yōu)選的"膠束抑制劑"包括已知改變以及抑制膠束形成的物質(zhì)，并且可選自水可混溶 的溶劑，例如(；-(；烷醇類、二醇類、C 2-C24烷撐二醇醚類、烷撐二醇烷基醚類及其混合 物。特別優(yōu)選的膠束抑制劑是改變膠束形成的二（丙二醇）甲醚（"DPM"）及其類似物。
[0101] "酶穩(wěn)定系統(tǒng)"的一個(gè)例子是硼化合物（例如硼酸），其在過(guò)去已經(jīng)單獨(dú)使用，或者 與選定的其他輔劑和/或增效劑（例如多官能氨基化合物、抗氧化劑等）組合使用，以保護(hù) 儲(chǔ)存中的和多種產(chǎn)品中的蛋白水解酶及其他酶。
[0102] 本文描述的組合物中含有的其他添加劑可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員確定，并且將基于 許多特征，包括預(yù)定應(yīng)用，例如人類應(yīng)用還是獸醫(yī)應(yīng)用；所需的釋放曲線；所需的藥代動(dòng)力 學(xué)；安全性；穩(wěn)定性；和物理特性（氣味、顏色、味道、傾倒性、氣霧化）。適當(dāng)?shù)闹苿┏煞?、賦 形劑、粘合劑、填充劑、調(diào)味劑、著色劑等可通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法來(lái)確定和評(píng)價(jià)。
[0103] 本文提供了一種用于創(chuàng)傷愈合的組合物，其包含：在白凡士林基質(zhì)中的約25至 700, 000USP單位的蛋白酶和2至100, 000USP單位的脂肪酶和25至400, 000USP單位的淀 粉酶。
[0104] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，本文提供了一種用于創(chuàng)傷愈合的組合物，其包含：在30克 白凡士林基質(zhì)中的122, 130USP單位的蛋白酶、17, 110USP單位的脂肪酶和73, 750USP單位 的淀粉酶。
[0105] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，本文提供了一種用于創(chuàng)傷愈合的組合物，其包含：在30克 白凡士林基質(zhì)中的238, 050USP單位的蛋白酶、33, 350USP單位的脂肪酶和143, 750USP單位 的淀粉酶。
[0106] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，本文提供了一種用于創(chuàng)傷愈合的組合物，其包含：在30克 白凡士林基質(zhì)中的459, 540USP單位的蛋白酶、64, 380USP單位的脂肪酶和277, 500USP單位 的淀粉酶。
[0107] 用于人類或獸醫(yī)用途的組合物
[0108] 本文描述的組合物可以配制成藥物組合物，例如，可以包括用一種或多種藥學(xué)上 可接受的載體或賦形劑配制的如前所述的組合物。該藥物組合物可用于人和其他動(dòng)物如哺 乳動(dòng)物和禽類的創(chuàng)傷愈合。
[0109] 本文的藥物組合物的施用可以是局部的。
[0110] 在藥物組合物中，有效濃度的一種或多種消化酶與合適的藥用賦形劑或載體混 合。該組合物中消化酶的濃度對(duì)于在施用后遞送一定的量是有效的，該量在創(chuàng)傷愈合和刺 激表皮細(xì)胞、導(dǎo)致短期纖維化沉積、防止創(chuàng)傷重新裂開(kāi)、募集白細(xì)胞以幫助生長(zhǎng)因子和免疫 系統(tǒng)的激活（酶的抗生效應(yīng)）、誘導(dǎo)更強(qiáng)的毛發(fā)再生長(zhǎng)、減少脫發(fā)、增強(qiáng)超出正常修復(fù)過(guò)程 之外的表皮修復(fù)和完整性或其組合中有用的。在一個(gè)非限制性實(shí)例中，組合物在白凡士林 基質(zhì)中包含蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶。
[0111] 消化酶以一定的量包含在藥學(xué)上可接受的載體中，該量足以對(duì)所治療的患者發(fā)揮 治療上有效的作用，而沒(méi)有不良副作用。治療上有效的濃度可通過(guò)在體外和體內(nèi)測(cè)試消化 酶，然后由其推算到人用劑量來(lái)根據(jù)經(jīng)驗(yàn)確定。
[0112] 藥物組合物中的消化酶濃度取決于酶的吸收、失活和排泄速率、酶的物理化學(xué)特 性、劑量日程表、劑型和施用量以及本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其他因素。
[0113] 藥物組合物可立刻施用，或者可以分成若干較小的劑量以便分時(shí)段施用。應(yīng)理解， 治療的精確劑量和持續(xù)時(shí)間隨創(chuàng)傷而變化，并且可以通過(guò)使用已知的測(cè)試方案或通過(guò)從體 內(nèi)或體外試驗(yàn)數(shù)據(jù)外推來(lái)根據(jù)經(jīng)驗(yàn)確定。需注意，濃度和劑量值也可以隨創(chuàng)傷的嚴(yán)重程度 而變化。還應(yīng)理解，對(duì)于任何特定受試者而言，應(yīng)該隨時(shí)間的推移根據(jù)個(gè)人需要和施用組 合物或監(jiān)督組合物施用的人的專業(yè)判斷來(lái)調(diào)整具體的劑量方案，并且應(yīng)理解，本文所列的 濃度范圍僅是示例性的而非意在限制所請(qǐng)求保護(hù)的組合物的范圍或?qū)嵺`。在一些實(shí)施方案 中，提供了適合于精確劑量的單次給藥或多劑量給藥的單位劑型形式的組合物。
[0114] 一旦混合或加入消化酶，所得混合物就可以是適合于局部給藥的形式。所得混合 物的形式取決于許多因素，包括預(yù)定的給藥方式和消化酶在選定的載體或介質(zhì)中的溶解 度。
[0115] 所述組合物可以單獨(dú)施用，或更普遍地，與常規(guī)藥物載體、賦形劑等組合施用。術(shù) 語(yǔ)"賦形劑"在本文中用來(lái)描述除了在本文所述的和本領(lǐng)域已知的組合物中使用的化合物 (酶）以外的任何成分。
[0116] 對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，制備此類劑型的方法是已知的或?qū)⑹秋@而易見(jiàn)的； 例如，參見(jiàn) Remington:The Science and Practice of Pharmacy,第 21 版（Lippincott Williams&Wilkins. 2005)。
[0117] 用于創(chuàng)傷愈合的適當(dāng)劑量取決于患者（物種、年齡、體重、健康狀態(tài)）、創(chuàng)傷的嚴(yán)重 程度、制劑的類型以及本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的其他因素。應(yīng)注意，濃度和劑量值可隨著 創(chuàng)傷的嚴(yán)重程度而改變。還應(yīng)理解，對(duì)于任何特定患者而言，應(yīng)該隨時(shí)間的推移根據(jù)個(gè)人需 要和施用組合物或監(jiān)督組合物施用的人的專業(yè)判斷來(lái)調(diào)整具體的劑量方案。
[0118] 在一些實(shí)施方案中，每劑藥物組合物包含：約10, 000至約400, 000USP單位的淀 粉酶，包括約 10, 〇〇〇、約 15, 000、約 20, 000、約 25, 000、約 30, 000、約 35, 000、約 40, 000、 約 45, 000、約 50, 000、約 55, 000、約 60, 000、約 70, 000、約 75, 000、約 80, 000、約 85, 000、 約 90, 000、約 100, 000、約 150, 000、約 200, 000、約 250, 000、約 300, 000、約 350, 000 和 約400, 000USP單位以及其間的所有值；約10, 000至約700, 000USP單位的蛋白酶，包括 約 10, 000、約 15, 000、約 20, 000、約 25, 000、約 30, 000、約 35, 000、約 40, 000、約 45, 000、 約 50, 000、約 55, 000、約 60, 000、約 65, 000、約 70, 000、約 75, 000、約 80, 000、約 85, 000、 約 90,000、約 95,000、約 100,000、約 105,000、約 110,000、約 115,000、約 120,000、 約 125, 000、約 130, 000、約 135, 000、約 140, 000、約 145, 000、約 150, 000、約 155, 000、 約 160, 000、約 165, 000、約 170, 000、約 200, 000、約 250, 000、約 300, 000、約 350, 000、約 400, 000、約 450, 000、約 500, 000、約 550, 000、約 600, 000、約 650, 000 和約 700, 000USP 單位以及其間的所有值；和約4, 000至約100, 000USP單位的脂肪酶，包括4, 000、5, 000、 10, 000、15, 000、20, 000、25, 000、30, 000、35, 000、45, 000、55, 000、60, 000、70, 000、80, 000、 90, 000、95, 000和100, 000USP單位以及其間的所有值。藥物組合物可以包含以下的一種 或多種：約2至約20mg的胰凝乳蛋白酶，包括約2. 0、約2. 5、約3. 0、約3. 5、約4. 0、約4. 5、 約5.0、約6、約7、約8、約9、約10、約11、約12、約13、約14、約15、約16、約17、約18、約19 和約20mg以及其間的所有值；約30至約100mg的胰蛋白酶，包括約30、約35、約40、約45、 約50、約65、約70、約75、約80、約85、約90、約95和約100mg，包括其間的所有值；約3, 000 至約10, 000USP單位的木瓜蛋白酶，包括約3, 000、約4, 000、約5, 000、約6, 000、約7, 000、 約8, 000、約9, 000和約10, 000USP，以及其間的所有值；和約30至約60mg的木瓜，包括約 30、約35、約40、約45、約50、約55和約60mg，以及其間的所有值。
[0119] 關(guān)于組合物的特定劑型的其他信息提供于下。
[0120] 可以如針對(duì)局部（local)給藥所述制備局部（topical)混合物。所得混合物可以 是溶液、懸浮液、乳劑等，并且可以配制成乳膏劑、凝膠劑、軟膏劑、乳劑、粉劑、溶液、酏劑、 洗齊U、懸浮液、酊劑、糊劑、泡沫、氣霧劑、沖洗劑、噴霧劑、栓劑、繃帶、皮膚貼劑或適于局部 給藥的任何其他制劑。
[0121] 消化酶可配制用于局部應(yīng)用，如以凝膠劑、乳膏劑和洗劑的形式局部應(yīng)用于皮膚 和黏膜。局部給藥預(yù)期用于透皮遞送，并且還用于向眼睛或黏膜給藥。
[0122] 可以借助于任何適當(dāng)?shù)姆勰┗|(zhì)例如滑石、乳糖、淀粉等形成粉劑。溶液可以用水 性或非水性基質(zhì)配制，也可包含一種或多種分散劑、懸浮劑、增溶劑等。使用分子量和濃度 水平能有效形成消化酶的水性或非水性溶液或懸浮液的粘稠溶液或膠態(tài)凝膠的聚合物制 備局部凝膠?？梢灾苽渚植磕z的聚合物包括聚磷酸酯類、聚乙二醇類、高分子量聚乳酸 類、羥丙基纖維素類、殼聚糖、聚苯乙烯磺酸鹽類等。
[0123] 例如，通過(guò)在水性或油性基質(zhì)中加入適當(dāng)?shù)脑龀韯?、膠凝劑、穩(wěn)定劑、乳化劑、分散 齊IJ、懸浮劑或稠度調(diào)節(jié)劑等來(lái)配制軟膏劑、乳膏劑和洗劑?；|(zhì)包括水、醇或油，例如液體石 蠟、礦物油或植物油，例如花生油或蓖麻油?？筛鶕?jù)基質(zhì)的性質(zhì)使用的增稠劑包括軟石蠟、 硬脂酸鋁、鯨蠟硬脂醇、丙二醇、聚乙二醇類、聚磷酸酯類、聚乳酸類、羥乙基纖維素類、羥基 丙基纖維素類、纖維素膠、丙烯酸酯聚合物類、親水性膠凝劑、殼聚糖、聚苯乙烯磺酸鹽、礦 月旨、羊毛脂、氫化羊毛脂、蜂蠟等。
[0124] 軟膏劑、糊劑、乳膏劑、凝膠劑和洗劑還可包含賦形劑，例如動(dòng)物和植物脂肪、油、 蠟、石蠟、淀粉、黃蓍膠、纖維素衍生物、聚乙二醇、硅氧烷、膨潤(rùn)土、硅酸、滑石、氧化鋅及其 混合物。粉劑和噴霧劑還可包含賦形劑，例如硅酸、氫氧化鋁、硅酸鈣和聚酰胺粉末或這些 物質(zhì)的混合物。溶液、懸浮液或分散體可以通過(guò)常規(guī)用于制備局部施用氣霧劑的任何已知 方法轉(zhuǎn)變?yōu)闅忪F劑或噴霧劑。通常，這樣的方法包括加壓或提供通常用惰性載氣給溶液、懸 浮液或分散體的容器加壓的手段，并使壓縮氣體通過(guò)小孔。噴霧劑和氣霧劑還可以含有常 用推進(jìn)劑，例如，氯氟烴或揮發(fā)性未取代烴，例如丁烷和丙烷。
[0125] 在本文所述組合物中使用的賦形劑包括在可用于治療目的的組合物中使用的任 何賦形劑。一種或多種賦形劑可包含，例如，水、鹽水、林格溶液、右旋糖、乙醇、葡萄糖、蔗 糖、葡聚糖、甘露糖、甘露醇、山梨糖醇、聚乙二醇（PEG)、磷酸鹽、醋酸鹽、明膠、膠原蛋白、 Carbopol?、植物油、白凡士林或其組合。
[0126] 其他賦形劑包括但不限于以可達(dá)制劑總重量的約10wt%的水平存在的促進(jìn)皮膚 吸收的化合物，例如二甲亞砜（DMS0)、脂肪酸偏甘油酯等。脂肪酸偏甘油酯的例子包括但不 限于可從 SASOL North America, Inc.，Houston, Texas 獲得的 IMWIT0R 742 和 IMWIT0R308。 局部制劑還可以任選地包含改善美容可接受性的非活性成分，包括但不限于濕潤(rùn)劑、表面 活性劑、香料、著色劑、潤(rùn)滑劑、填充劑等。
[0127] 在一些情況下，組合物還可以進(jìn)一步包含一種或多種合適的防腐劑、穩(wěn)定劑、抗氧 化劑、抗微生物劑、緩沖劑或其組合。
[0128] 合適的防腐劑包括但不限于酸、醇、二醇、對(duì)羥基苯甲酸酯、含有四價(jià)氮的 化合物、異噻唑啉酮、釋放乙醛的化合物和鹵代化合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，本文使 用的防腐劑包括但不限于咪唑烷基脲、重氮烷基脲、苯氧乙醇、對(duì)羥基苯甲酸甲酯、 對(duì)羥基苯甲酸乙酯、對(duì)羥基苯甲酸丙酯或其組合。對(duì)于本發(fā)明的目的有用的防腐劑 的其他實(shí)例可見(jiàn)于3七6；[1^6找，0."？代911611。70；1^11860€?代861'￥31：；[￥68 2007，'· Cosmet.Toilet. 117,41-44 (2002)和"Preservative Encyclopedia"Cosmet. Toilet. 117, 80-96(2002)。
[0129] 可利用多種酸、堿和緩沖液來(lái)調(diào)節(jié)和/或維持在本發(fā)明方法中有用的組合物的 pH?？捎糜谡{(diào)節(jié)和/或維持pH的材料的實(shí)例包括但不限于磷酸鹽、檸檬酸鹽和其他有機(jī)酸； 氨、碳酸鈉、氫氧化鈉、三乙醇胺、鹽酸、磷酸、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、檸檬酸等。
[0130] 本文中使用的合適的抗氧化劑包括但不限于抗壞血酸和甲硫氨酸。
[0131] 這些成分以安全有效的量存在于局部美容可接受的載體中，其可以是多種不同的 形式。
[0132] 藥學(xué)上可接受的局部載體以重量計(jì)通?？偣舱忌鲜霾襟E一的組合物的約0. 1%至 約95%、約70%至約91 %或約80%至約90%。
[0133] 本文使用的合適的表面活性劑包括但不限于丁WEEN? (例如，T胃EEN⑩ 20或Τ\￥ΕΕΝ? 80)、聚山梨醇酯（例如，聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80)、 PLURONICS? (例如，Ρ丨uronic? F68)、聚乙二醇（peg)等。
[0134] 可通過(guò)撒布粉末、噴射氣霧劑或通過(guò)用患者或保健提供者的指尖或其他常規(guī)施用 工具如藥簽或藥擦將軟膏劑、乳膏劑、洗劑、溶液或凝膠薄膜涂抹在皮膚的所需區(qū)域上來(lái)直 接施用局部組合物。產(chǎn)品可以首先施加到皮膚上然后用指尖或敷藥器涂抹，或施加到指尖 上然后涂抹在皮膚上。組合物也可以任選地首先涂在局部施藥工具（例如繃帶、藥簽、潮濕 的織造或非織造藥擦等）的表面上，然后將其施加于皮膚的部分，以接受該組合物。
[0135] 可利用在使用的成分、其量以及制備方法方面對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)基本 上為常規(guī)手段的基礎(chǔ)制劑來(lái)制備局部組合物，所有這些方面不需要進(jìn)一步描述?？苫诔?良好的皮膚相容性之外還具有迄今尚未認(rèn)識(shí)到的創(chuàng)傷愈合活性的乳劑制劑將局部組合物 制備成乳膏劑或洗劑。
[0136] 供本文所述使用的組合物不限于局部乳膏劑或洗劑制劑。局部制劑還可配制為粉 劑、噴霧劑、洗劑、乳膏劑、水性和非水性溶液、液體、油劑、凝膠劑、軟膏劑、糊劑、藥膏、乳劑 和懸浮液；這樣的組合物將含有一定量的消化酶和任選的一種或多種其他創(chuàng)傷愈合劑，總 濃度為約〇. 125%至約25% (重量）或更多，從而再次意識(shí)到最優(yōu)劑量可能僅相差0. 05% (重量），使得代表性乳膏劑和洗劑實(shí)施方案將包括在該范圍內(nèi)的每個(gè)〇. 05 % (重量）濃度 的增量。
[0137] 局部組合物可用于治療皮膚感染和創(chuàng)傷感染，如表面創(chuàng)傷和貫通性創(chuàng)傷。適于治 療的創(chuàng)傷包括急性和慢性創(chuàng)傷，例如，皮膚擦傷、皮膚或表面切傷、褥瘡、燒傷和手術(shù)創(chuàng)傷。
[0138] 本文同樣感興趣的還有凍干粉，可將其進(jìn)行重構(gòu)以作為溶液、乳劑和其他混合物 進(jìn)行給藥。還可將它們重構(gòu)并配制為凝膠劑。
[0139] 通過(guò)將本文所提供的消化酶溶解在合適的溶劑中來(lái)制備無(wú)菌凍干粉。該溶劑可含 有改善穩(wěn)定性的賦形劑或該粉劑或由該粉劑制備的重構(gòu)溶液的其他藥理成分?？墒褂玫馁x 形劑包括但不限于右旋糖、山梨糖醇、果糖、玉米糖漿、木糖醇、甘油、葡萄糖、蔗糖或其他合 適的試劑。溶劑還可含有緩沖液，如檸檬酸鹽、磷酸鈉或磷酸鉀或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的 (在一個(gè)實(shí)施方案中）處于大約中性pH的其他此類緩沖液。在對(duì)溶液的后續(xù)無(wú)菌過(guò)濾后于 本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的標(biāo)準(zhǔn)條件下進(jìn)行凍干提供了期望的制劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，將所 得溶液分配至小瓶中進(jìn)行凍干。每個(gè)小瓶將含有單劑量或多劑量的消化酶。凍干粉可儲(chǔ)存 在合適的條件下，如約4°C至室溫下。
[0140] 為了重構(gòu)，將凍干粉加至無(wú)菌水或其他合適的載體中。精確的量取決于所選擇的 消化酶。這樣的量可根據(jù)經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行確定。
[0141] 聯(lián)合治療
[0142] 本文所述的組合物可進(jìn)一步包含一種或多種其他創(chuàng)傷愈合劑。或者，本文所述的 組合物可與一種或多種其他創(chuàng)傷愈合劑聯(lián)合使用。
[0143] 這樣的其他創(chuàng)傷愈合劑包括但不限于生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子、酶和細(xì)胞外基質(zhì)成分。 例如，對(duì)內(nèi)皮下細(xì)胞外基質(zhì)的膠原酶處理聯(lián)合使用酶可協(xié)同加速內(nèi)皮遷移和增殖,達(dá)到高 于在不存在酶的情況下進(jìn)行膠原酶處理的誘導(dǎo)影響的水平。
[0144] 在這樣的組合物中還可包含實(shí)現(xiàn)創(chuàng)傷修復(fù)的藥劑以增強(qiáng)創(chuàng)傷愈合過(guò)程。此類藥劑 包括生長(zhǎng)因子家族的成員，如胰島素樣生長(zhǎng)因子（IGF-1)、血小板衍生的生長(zhǎng)因子（PDGF)、 表皮生長(zhǎng)因子（EGF)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β (TGF-β)、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（bFGF)、胸腺 素 α 1(Τα 1)和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF)。在一個(gè)實(shí)施方案中，該藥劑為轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子 β (TGF-β)或TGF-β超家族的其他成員。在另一個(gè)實(shí)施方案中，組合物還包含止血物質(zhì)、 生長(zhǎng)因子、抗感染物質(zhì)、止痛物質(zhì)、抗炎物質(zhì)或其組合。
[0145] 治療方法
[0146] 本文所述的藥物組合物可用于治療任何具有急性或慢性創(chuàng)傷的患者。該藥物組合 物可以是如先前所述的任何合適的劑型（即，單劑量或多劑量）。
[0147] 本文所述的藥物組合物可在具有感染性創(chuàng)傷的患者中減少瘢痕形成并促進(jìn)創(chuàng)傷 愈合。此外，本文所述的藥物組合物可用于刺激表皮細(xì)胞、導(dǎo)致短期纖維化沉積、防止創(chuàng)傷 重新裂開(kāi)、募集白細(xì)胞以幫助生長(zhǎng)因子和免疫系統(tǒng)的激活（酶的抗生效應(yīng)）、誘導(dǎo)更強(qiáng)的 毛發(fā)再生長(zhǎng)、減少脫發(fā)、增強(qiáng)超出正常修復(fù)過(guò)程之外的表皮修復(fù)和完整性，或其組合。在其 他實(shí)施方案中，本文所述的藥物組合物可單獨(dú)使用和/或與其他治療性創(chuàng)傷愈合劑聯(lián)合使 用。
[0148] 在一個(gè)實(shí)施方案中，與用安慰劑處理的受試者相比，瘢痕形成至少減少約2倍、約 3倍、約4倍、約5倍、約7. 5倍、約10倍、約15倍、約20倍、約25倍或更多。在另一個(gè)實(shí) 施方案中，與用安慰劑處理的受試者相比，瘢痕形成至少減少約2 %、約3 %、約4%、約5 %、 約 7. 5%、約 10%、約 15%、約 20%、約 25%、約 30%、約 35%、約 40%、約 45%、約 50%、約 55%、約60%、約65%、約70%、約75%或更多。
[0149] 在一個(gè)實(shí)施方案中，與未接受本文所述組合物治療的受試者相比，瘢痕形成至少 減少約2倍、約3倍、約4倍、約5倍、約7. 5倍、約10倍、約15倍、約20倍、約25倍或更多。 在另一個(gè)實(shí)施方案中，與未接受本文所述組合物治療的受試者相比，瘢痕形成至少減少約 2%、約 3%、約 4%、約 5%、約 7. 5%、約 10%、約 15%、約 20%、約 25%、約 30%、約 35%、 約40%、約45%、約50%、約55%、約60%、約65%、約70%、約75%或更多。
[0150] 在一個(gè)實(shí)施方案中，與用安慰劑處理的受試者相比，創(chuàng)傷愈合至少增加約2倍、約 3倍、約4倍、約5倍、約7. 5倍、約10倍、約15倍、約20倍、約25倍或更多。在另一個(gè)實(shí) 施方案中，與用安慰劑處理的受試者相比，創(chuàng)傷愈合至少增加約2 %、約3 %、約4%、約5 %、 約 7. 5%、約 10%、約 15%、約 20%、約 25%、約 30%、約 35%、約 40%、約 45%、約 50%、約 55%、約60%、約65%、約70%、約75%或更多。
[0151] 在一個(gè)實(shí)施方案中，與未接受本文所述組合物治療的受試者相比，創(chuàng)傷愈合至少 增加約2倍、約3倍、約4倍、約5倍、約7. 5倍、約10倍、約15倍、約20倍、約25倍或更多。 在另一個(gè)實(shí)施方案中，與未接受本文所述組合物治療的受試者相比，創(chuàng)傷愈合至少增加約 2%、約 3%、約 4%、約 5%、約 7. 5%、約 10%、約 15%、約 20%、約 25%、約 30%、約 35%、 約40%、約45%、約50%、約55%、約60%、約65%、約70%、約75%或更多。
[0152] 在一個(gè)實(shí)施方案中，與用安慰劑處理的受試者相比，上皮細(xì)胞被刺激至少約2倍、 約3倍、約4倍、約5倍、約7. 5倍、約10倍、約15倍、約20倍、約25倍或更多。在另一個(gè) 實(shí)施方案中，與用安慰劑處理的受試者相比，上皮細(xì)胞被刺激至少約2%、約3%、約4%、 約 5%、約 7. 5%、約 10%、約 15%、約 20%、約 25%、約 30%、約 35%、約 40%、約 45%、約 50%、約55%、約60%、約65%、約70%、約75%或更多。
[0153] 在一個(gè)實(shí)施方案中，與未接受本文所述組合物治療的受試者相比，上皮細(xì)胞被刺 激至少約2倍、約3倍、約4倍、約5倍、約7. 5倍、約10倍、約15倍、約20倍、約25倍或更 多。在另一個(gè)實(shí)施方案中，與未接受本文所述組合物治療的受試者相比，上皮細(xì)胞被刺激至 少約 2%、約 3%、約 4%、約 5%、約 7. 5%、約 10%、約 15%、約 20%、約 25%、約 30%、約 35%、約 40%、約 45%、約 50%、約 55%、約 60%、約 65%、約 70%、約 75% 或更多。
[0154] 在一個(gè)實(shí)施方案中，與用安慰劑處理的受試者相比，短期纖維化沉積至少增加約2 倍、約3倍、約4倍、約5倍、約7. 5倍、約10倍、約15倍、約20倍、約25倍或更多。在另一 個(gè)實(shí)施方案中，與用安慰劑處理的受試者相比，短期纖維化沉積至少增加約2%、約3%、約 4%、約 5%、約 7. 5%、約 10%、約 15%、約 20%、約 25%、約 30%、約 35%、約 40%、約 45%、 約50%、約55%、約60%、約65%、約70%、約75%或更多。
[0155] 在一個(gè)實(shí)施方案中，與未接受本文所述組合物治療的受試者相比，短期纖維化沉 積至少增加約2倍、約3倍、約4倍、約5倍、約7. 5倍、約10倍、約15倍、約20倍、約25倍 或更多。在另一個(gè)實(shí)施方案中，與未接受本文所述組合物治療的受試者相比，短期纖維化沉 積至少增加約2%、約3%、約4%、約5%、約7. 5%、約10%、約15%、約20%、約25%、約 30%、約 35%、約 40%、約 45%、約 50%、約 55%、約 60%、約 65%、約 70%、約 75% 或更多。
[0156] 在一個(gè)實(shí)施方案中，與用安慰劑處理的受試者相比，毛發(fā)再生長(zhǎng)至少增加約2倍、 約3倍、約4倍、約5倍、約7. 5倍、約10倍、約15倍、約20倍、約25倍或更多。在另一個(gè) 實(shí)施方案中，與用安慰劑處理的受試者相比，毛發(fā)再生長(zhǎng)至少增加約2%、約3%、約4%、 約 5%、約 7. 5%、約 10%、約 15%、約 20%、約 25%、約 30%、約 35%、約 40%、約 45%、約 50%、約55%、約60%、約65%、約70%、約75%或更多。
[0157] 在一個(gè)實(shí)施方案中，與未接受本文所述組合物治療的受試者相比，毛發(fā)再生長(zhǎng)至 少增加約2倍、約3倍、約4倍、約5倍、約7. 5倍、約10倍、約15倍、約20倍、約25倍或更 多。在另一個(gè)實(shí)施方案中，與未接受本文所述組合物治療的受試者相比，毛發(fā)再生長(zhǎng)至少增 加約 2%、約 3%、約 4%、約 5%、約 7. 5%、約 10%、約 15%、約 20%、約 25%、約 30%、約 35%、約 40%、約 45%、約 50%、約 55%、約 60%、約 65%、約 70%、約 75% 或更多。
[0158] 在一個(gè)實(shí)施方案中，與用安慰劑處理的受試者相比，脫發(fā)至少減少約2倍、約3倍、 約4倍、約5倍、約7. 5倍、約10倍、約15倍、約20倍、約25倍或更多。在另一個(gè)實(shí)施方案 中，與用安慰劑處理的受試者相比，脫發(fā)至少減少約2%、約3%、約4%、約5%、約7. 5%、 約 10%、約 15%、約 20%、約 25%、約 30%、約 35%、約 40%、約 45%、約 50%、約 55%、約 60%、約65%、約70%、約75%或更多。
[0159] 在一個(gè)實(shí)施方案中，與未接受本文所述組合物治療的受試者相比，脫發(fā)至少減少 約2倍、約3倍、約4倍、約5倍、約7. 5倍、約10倍、約15倍、約20倍、約25倍或更多。在 另一個(gè)實(shí)施方案中，與未接受本文所述組合物治療的受試者相比，脫發(fā)至少減少約2%、約 3%、約 4%、約 5%、約 7. 5%、約 10%、約 15%、約 20%、約 25%、約 30%、約 35%、約 40%、 約45%、約50%、約55%、約60%、約65%、約70%、約75%或更多。
[0160] 在一個(gè)實(shí)施方案中，與用安慰劑處理的受試者相比，白細(xì)胞募集至少增加約2倍、 約3倍、約4倍、約5倍、約7. 5倍、約10倍、約15倍、約20倍、約25倍或更多。在另一個(gè) 實(shí)施方案中，與用安慰劑處理的受試者相比，白細(xì)胞募集至少增加約2%、約3%、約4%、 約 5%、約 7. 5%、約 10%、約 15%、約 20%、約 25%、約 30%、約 35%、約 40%、約 45%、約 50%、約55%、約60%、約65%、約70%、約75%或更多。
[0161] 在一個(gè)實(shí)施方案中，與未接受本文所述組合物治療的受試者相比，白細(xì)胞募集至 少增加約2倍、約3倍、約4倍、約5倍、約7. 5倍、約10倍、約15倍、約20倍、約25倍或更 多。在另一個(gè)實(shí)施方案中，與未接受本文所述組合物治療的受試者相比，白細(xì)胞募集至少增 加約 2%、約 3%、約 4%、約 5%、約 7. 5%、約 10%、約 15%、約 20%、約 25%、約 30%、約 35%、約 40%、約 45%、約 50%、約 55%、約 60%、約 65%、約 70%、約 75% 或更多。
[0162] 可通過(guò)本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的方法評(píng)估本文所述的組合物的多種活性。例 如，可以使用標(biāo)準(zhǔn)酶測(cè)定法來(lái)評(píng)估酶活性。在下面的實(shí)施例中描述了其他測(cè)定法。
[0163] 實(shí)施例
[0164] 為了使本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠更好地實(shí)施本文所述的組合物和方法，出于說(shuō)明目的 提供以下實(shí)施例。
[0165] 進(jìn)行以下研究來(lái)確定在白凡士林等基質(zhì)中低、中和高劑量濃度的胰酶復(fù)合物中的 測(cè)試物CMihOOl的毒性和毒代動(dòng)力學(xué)曲線：局部施用至兔背部的每一側(cè)（左側(cè)擦傷，右側(cè) 未擦傷）5天，隨后是允許評(píng)估愈合和任何變化的可逆性的觀察期。三（3)只動(dòng)物（1001A、 1002A和1003A)在最后一次治療2天后送去尸檢。剩余的3只兔（1004A、1005A和1006A) 在最后一次治療七（7)天后送去尸檢。對(duì)每個(gè)測(cè)試部位進(jìn)行評(píng)估。
[0166] 本研究按照ITR加拿大標(biāo)準(zhǔn)操作程序（S0P)進(jìn)行。
[0167] 選擇局部給藥作為給藥途徑，因?yàn)檫@是在人類中用于治療創(chuàng)傷并評(píng)估其治愈情況 的治療途徑。
[0168] 選擇兔是因?yàn)樗鼈兪嵌嗉冶O(jiān)管機(jī)構(gòu)為此種類型研究推薦的非嚙齒類物種，并且其 背景數(shù)據(jù)可以獲得。
[0169]

【權(quán)利要求】
1. 一種局部創(chuàng)傷愈合藥物組合物，其包含治療有效量的一種或多種消化酶和一種或多 種賦形劑，其中所述消化酶包含約25至約700, OOOUSP單位的蛋白酶、約2至約100, OOOUSP 單位的脂肪酶和約25至約400, 000USP單位的淀粉酶，其中所述治療有效量的所述一種或 多種消化酶足以誘導(dǎo)有利的表皮生理反應(yīng)。
2. -種局部創(chuàng)傷愈合藥物組合物，其包含治療有效量的一種或多種消化酶和任選 的一種或多種賦形劑，其中所述消化酶包含至少約1 〇 〇，〇 〇 〇USP單位的蛋白酶、至少約 15, OOOUSP單位的脂肪酶和至少約70, OOOUSP單位的淀粉酶。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的組合物，其中所述消化酶包含至少約200, OOOUSP單位的蛋白 酶、至少約30, OOOUSP單位的脂肪酶和至少約140, OOOUSP單位的淀粉酶。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的組合物，其中所述消化酶包含至少約450, OOOUSP單位的蛋白 酶、至少約60, OOOUSP單位的脂肪酶和至少約270, OOOUSP單位的淀粉酶。
5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的組合物，其中所述消化酶包含至少約122, OOOUSP單位的蛋白 酶、至少約17, OOOUSP單位的脂肪酶和至少約73, OOOUSP單位的淀粉酶。
6. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的組合物，其中所述消化酶包含至少約238, OOOUSP單位的蛋白 酶、至少約33, OOOUSP單位的脂肪酶和至少約143, OOOUSP單位的淀粉酶。
7. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的組合物，其中所述消化酶包含至少約459, OOOUSP單位的蛋白 酶、至少約64, OOOUSP單位的脂肪酶和至少約277, OOOUSP單位的淀粉酶。
8. 根據(jù)權(quán)利要求2-7所述的組合物，其中所述治療有效量的所述一種或多種消化酶足 以誘導(dǎo)有利的表皮生理反應(yīng)。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述治療有效量的一種或多種消化 酶基本上由蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶組成。
10. 根據(jù)權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述一種或多種消化酶還包含選 自纖維素酶、蔗糖酶、麥芽糖酶和木瓜蛋白酶的一種或多種酶。
11. 根據(jù)權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述組合物不用于治療金黃色葡 萄球菌或大腸桿菌感染。
12. 根據(jù)權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述組合物為胰液素。
13. 根據(jù)權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述一種或多種消化酶包含一種 或多種胰酶。
14. 根據(jù)權(quán)利要求1-13中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述一種或多種消化酶包含源自 豬的酶。
15. 根據(jù)權(quán)利要求1-14中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述蛋白酶包含胰凝乳蛋白酶和 膜蛋白酶。
16. 根據(jù)權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述一種或多種消化酶獨(dú)立地源 自動(dòng)物來(lái)源、微生物來(lái)源、植物來(lái)源、真菌來(lái)源或?yàn)楹铣芍苽涞摹?br> 17. 根據(jù)權(quán)利要求1-16中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述組合物刺激表皮細(xì)胞，導(dǎo)致 短期纖維化沉積，防止創(chuàng)傷重新裂開(kāi)，募集白細(xì)胞以幫助生長(zhǎng)因子和免疫系統(tǒng)的激活（酶 的抗生效應(yīng)），誘導(dǎo)更強(qiáng)的毛發(fā)再生長(zhǎng)，減少脫發(fā)，增強(qiáng)超出正常修復(fù)過(guò)程之外的表皮修復(fù) 和完整性，或其組合。
18. 根據(jù)權(quán)利要求1-17中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述表皮生理反應(yīng)包括表皮增 生、短期纖維化沉積、白細(xì)胞的募集和/或免疫系統(tǒng)的激活。
19. 根據(jù)權(quán)利要求1-18中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述組合物不引起變態(tài)反應(yīng)、瘢 痕形成、生物損傷、燒傷或其組合。
20. 根據(jù)權(quán)利要求1-19中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述創(chuàng)傷是哺乳動(dòng)物的創(chuàng)傷。
21. 根據(jù)權(quán)利要求20所述的組合物，其中所述哺乳動(dòng)物為人、豬、馬、牛、狗、貓、猴子、 大猩猩、黑猩猩、大鼠、小鼠、兔、綿羊、山羊、美洲駝、大熊貓、獅、虎、鴕鳥(niǎo)、河馬、犀牛、長(zhǎng)頸 鹿、倉(cāng)鼠或沙鼠。
22. 根據(jù)權(quán)利要求1-21中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述創(chuàng)傷是禽類的創(chuàng)傷。
23. 根據(jù)權(quán)利要求22所述的組合物，其中所述禽類為雞、鴨、火雞、鴕鳥(niǎo)或鵝。
24. 根據(jù)權(quán)利要求1-23中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述組合物包含至少一種淀粉 酶、包含胰凝乳蛋白酶和胰蛋白酶的蛋白酶混合物和至少一種脂肪酶。
25. 根據(jù)權(quán)利要求1-24中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述藥物組合物包含至少一種蛋 白酶和至少一種脂肪酶，并且其中總蛋白酶與總脂肪酶（以USP單位計(jì)）之比為約1:1至 約 20:1。
26. 根據(jù)權(quán)利要求25所述的組合物，其中蛋白酶與脂肪酶（以USP單位計(jì)）之比為約 4:1 至約 10:1。
27. 根據(jù)權(quán)利要求1-24中任一項(xiàng)所述的組合物，其中蛋白酶與脂肪酶與淀粉酶之比為 7:1:4。
28. 根據(jù)權(quán)利要求27所述的組合物，其中所述消化酶包含至少約105, 000USP單位的蛋 白酶、至少約15, 000USP單位的脂肪酶和至少約60, 000USP單位的淀粉酶。
29. 根據(jù)權(quán)利要求27所述的組合物，其中所述消化酶包含至少約210, 000USP單位的蛋 白酶、至少約30, 000USP單位的脂肪酶和至少約120, 000USP單位的淀粉酶。
30. 根據(jù)權(quán)利要求27所述的組合物，其中所述消化酶包含至少約119, 000USP單位的蛋 白酶、至少約17, 000USP單位的脂肪酶和至少約68, 000USP單位的淀粉酶。
31. 根據(jù)權(quán)利要求27所述的組合物，其中所述消化酶包含至少約224, 000USP單位的蛋 白酶、至少約33, 000USP單位的脂肪酶和至少約132, 000USP單位的淀粉酶。
32. 根據(jù)權(quán)利要求1-31中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述組合物為選自乳膏劑、洗劑、 乳劑、粉劑、液體劑、凝膠劑及其任意組合的劑量制劑。
33. 根據(jù)權(quán)利要求1-32中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述一種或多種賦形劑包含水、 鹽水、林格溶液、右旋糖、乙醇、葡萄糖、蔗糖、葡聚糖、甘露糖、甘露醇、山梨糖醇、聚乙二醇 (PEG)、磷酸鹽、醋酸鹽、明膠、膠原蛋白、Carbopol?、植物油、白凡士林，或其組合。
34. 根據(jù)權(quán)利要求1-33中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述組合物還包含一種或多種合 適的防腐劑、穩(wěn)定劑、抗氧化劑、抗微生物劑、緩沖劑或其組合。
35. -種局部創(chuàng)傷愈合組合物，其包含：在白凡士林基質(zhì)中的約25至約700, 000USP單 位的蛋白酶、約2至約100, 000USP單位的脂肪酶和約25至約400, 000USP單位的淀粉酶。
36. -種局部創(chuàng)傷愈合組合物，其包含：在約30克白凡士林基質(zhì)中的約122, 130USP單 位的蛋白酶、約17, 110USP單位的脂肪酶和約73, 750USP單位的淀粉酶。
37. -種局部創(chuàng)傷愈合組合物，其包含：在約30克白凡士林基質(zhì)中的約238, 050USP單 位的蛋白酶、約33, 350USP單位的脂肪酶和約143, 750USP單位的淀粉酶。
38. -種局部創(chuàng)傷愈合組合物，其包含：在約30克白凡士林基質(zhì)中的約459, 540USP單 位的蛋白酶、約64, 380USP單位的脂肪酶和約277, 500USP單位的淀粉酶。
39. 如權(quán)利要求1-38中任一項(xiàng)所述的組合物在配制用于創(chuàng)傷愈合的藥物中的用途。
40. -種治愈受試者的創(chuàng)傷的方法，該方法包括將用于創(chuàng)傷愈合的局部藥物組合物施 加于創(chuàng)傷，該局部藥物組合物包含治療有效量的一種或多種消化酶和一種或多種賦形劑， 其中所述消化酶包含約25至約700, 000USP單位的蛋白酶、約2至約100, 000USP單位的脂 肪酶和約25至約400, 000USP單位的淀粉酶，其中所述治療有效量的所述一種或多種消化 酶足以誘導(dǎo)有利的表皮生理反應(yīng)。
41. 一種治愈受試者的創(chuàng)傷的方法，該方法包括施加用于創(chuàng)傷愈合的局部藥物組合物， 該局部藥物組合物包含治療有效量的一種或多種消化酶和任選的一種或多種賦形劑，其中 所述消化酶包含至少約100, 000USP單位的蛋白酶，至少約15, 000USP單位的脂肪酶和至少 約70, 000USP單位的淀粉酶。
42. 根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中所述消化酶包含至少約200, 000USP單位的蛋白 酶、至少約30, 000USP單位的脂肪酶和至少約140, 000USP單位的淀粉酶。
43. 根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中所述消化酶包含至少約450, 000USP單位的蛋白 酶、至少約60, 000USP單位的脂肪酶和至少約270, 000USP單位的淀粉酶。
44. 根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中所述消化酶包含至少約122, 000USP單位的蛋白 酶、至少約17, 000USP單位的脂肪酶和至少約73, 000USP單位的淀粉酶。
45. 根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中所述消化酶包含至少約238, 000USP單位的蛋白 酶、至少約33, 000USP單位的脂肪酶和至少約143, 000USP單位的淀粉酶。
46. 根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中所述消化酶包含至少約459, 000USP單位的蛋白 酶、至少約64, 000USP單位的脂肪酶和至少約277, 000USP單位的淀粉酶。
47. 根據(jù)權(quán)利要求40-46中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述治療有效量的所述一種或多 種消化酶足以誘導(dǎo)有利的表皮生理反應(yīng)。
48. 根據(jù)權(quán)利要求40或41所述的方法，其中所述組合物中蛋白酶與脂肪酶與淀粉酶之 比為7:1:4。
49. 根據(jù)權(quán)利要求48所述的方法，其中所述消化酶包含至少約105, 000USP單位的蛋白 酶、至少約15, 000USP單位的脂肪酶和至少約60, 000USP單位的淀粉酶。
50. 根據(jù)權(quán)利要求48所述的方法，其中所述消化酶包含至少約210, 000USP單位的蛋白 酶、至少約30, 000USP單位的脂肪酶和至少約120, 000USP單位的淀粉酶。
51. 根據(jù)權(quán)利要求48所述的方法，其中所述消化酶包含至少約119, 000USP單位的蛋白 酶、至少約17, 000USP單位的脂肪酶和至少約68, 000USP單位的淀粉酶。
52. 根據(jù)權(quán)利要求48所述的方法，其中所述消化酶包含至少約224, 000USP單位的蛋白 酶、至少約33, 000USP單位的脂肪酶和至少約132, 000USP單位的淀粉酶。
53. 根據(jù)權(quán)利要求40-52中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述一種或多種賦形劑包含水、 鹽水、林格溶液、右旋糖、乙醇、葡萄糖、蔗糖、葡聚糖、甘露糖、甘露醇、山梨糖醇、聚乙二醇 (PEG)、磷酸鹽、醋酸鹽、明膠、膠原蛋白、Qirbopol·?、植物油、白凡士林，或其組合。
54. 根據(jù)權(quán)利要求40或41所述的方法，其中所述組合物包含胰液素。
55. 根據(jù)權(quán)利要求40-54中任一項(xiàng)所述的方法，其中與用安慰劑處理的受試者相比，所 述受試者在施用所述包含消化酶的組合物之后表現(xiàn)出至少快約2倍的創(chuàng)傷愈合改善。
56. 根據(jù)權(quán)利要求40或41所述的方法，其中所述組合物基本上由胰液素組成。
57. 根據(jù)權(quán)利要求40-56中任一項(xiàng)所述的方法，其中與未用所述組合物治療的受試者 相比，所述受試者在施用所述組合物之后表現(xiàn)出至少快約2倍的創(chuàng)傷愈合改善。
58. 根據(jù)權(quán)利要求40-57中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述組合物基本上由消化酶組成。
59. 根據(jù)權(quán)利要求40-58中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述組合物包含：在白凡士林基質(zhì) 中的蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶。
60. 根據(jù)權(quán)利要求40-58中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述賦形劑為白凡士林。
61. 根據(jù)權(quán)利要求40-560中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述創(chuàng)傷為外科創(chuàng)傷。
62. 根據(jù)權(quán)利要求40-61中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述表皮生理反應(yīng)包括表皮增生、 短期纖維化沉積、白細(xì)胞的募集和/或免疫系統(tǒng)的激活。
63. -種用于在受試者中刺激表皮細(xì)胞、導(dǎo)致短期纖維化沉積、防止創(chuàng)傷重新裂開(kāi)、募 集白細(xì)胞以幫助生長(zhǎng)因子和免疫系統(tǒng)的激活（酶的抗生效應(yīng)）、誘導(dǎo)毛發(fā)再生長(zhǎng)、減少脫 發(fā)、增強(qiáng)超出正常修復(fù)過(guò)程之外的表皮修復(fù)和完整性或其組合的方法，該方法包括用治療 有效量的包含一種或多種消化酶和一種或多種賦形劑的組合物接觸創(chuàng)傷，其中所述消化酶 包含約25至約700, 000USP單位的蛋白酶、約2至約100, 000USP單位的脂肪酶和約25至 約400, 000USP單位的淀粉酶。
64. -種治愈受試者的創(chuàng)傷的方法，該方法包括施加用于創(chuàng)傷愈合的局部藥物組合物， 該局部藥物組合物包含治療有效量的一種或多種消化酶和任選的一種或多種賦形劑，其中 所述消化酶包含至少約100, 000USP單位的蛋白酶、至少約15, 000USP單位的脂肪酶和至少 約70, 000USP單位的淀粉酶。
65. 根據(jù)權(quán)利要求64所述的方法，其中所述消化酶包含至少約200, 000USP單位的蛋白 酶、至少約30, 000USP單位的脂肪酶和至少約140, 000USP單位的淀粉酶。
66. 根據(jù)權(quán)利要求64所述的方法，其中所述消化酶包含至少約450, 000USP單位的蛋白 酶、至少約60, 000USP單位的脂肪酶和至少約270, 000USP單位的淀粉酶。
67. 根據(jù)權(quán)利要求64所述的方法，其中所述消化酶包含至少約122, 000USP單位的蛋白 酶、至少約17, 000USP單位的脂肪酶和至少約73, 000USP單位的淀粉酶。
68. 根據(jù)權(quán)利要求64所述的方法，其中所述消化酶包含至少約238, 000USP單位的蛋白 酶、至少約33, 000USP單位的脂肪酶和至少約143, 000USP單位的淀粉酶。
69. 根據(jù)權(quán)利要求64所述的方法，其中所述消化酶包含至少約459, 000USP單位的蛋白 酶、至少約64, 000USP單位的脂肪酶和至少約277, 000USP單位的淀粉酶。
70. 根據(jù)權(quán)利要求63-61中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述治療有效量的所述一種或多 種消化酶足以誘導(dǎo)有利的表皮生理反應(yīng)。
71. 根據(jù)權(quán)利要求63-70中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述組合物包含：蛋白酶、脂肪酶 和淀粉酶。
72. 根據(jù)權(quán)利要求63或4所述的方法，其中所述組合物包含：在白凡士林基質(zhì)中的 約25至約700,000USP單位的蛋白酶、約2至約100,000USP單位的脂肪酶和約25至約 400, 000USP單位的淀粉酶。
73. 根據(jù)權(quán)利要求63或64所述的方法，其中所述創(chuàng)傷是外科創(chuàng)傷。
74. 根據(jù)權(quán)利要求63或64所述的方法，其中所述受試者是哺乳動(dòng)物。
75. 根據(jù)權(quán)利要求74所述的方法，其中所述哺乳動(dòng)物是人。
76. 根據(jù)權(quán)利要求63或64所述的方法，其中所述組合物在約30克白凡士林的基質(zhì)中 包含約122, 130USP單位的蛋白酶、約17, 110USP單位的脂肪酶和約73, 750USP單位的淀粉 酶。
77. 根據(jù)權(quán)利要求63或64所述的方法，其中所述組合物在約30克白凡士林的基質(zhì)中 包含約238, 050USP單位的蛋白酶、約33, 350USP單位的脂肪酶和約143, 750USP單位的淀 粉酶。
78. 根據(jù)權(quán)利要求63或64所述的方法，其中所述組合物在約30克白凡士林的基質(zhì)中 包含約459, 540USP單位的蛋白酶、約64, 380USP單位的脂肪酶和約277, 500USP單位的淀 粉酶。
79. 根據(jù)權(quán)利要求63-78中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述一種或多種賦形劑包含水、 鹽水、林格溶液、右旋糖、乙醇、葡萄糖、蔗糖、葡聚糖、甘露糖、甘露醇、山梨糖醇、聚乙二醇 (PEG)、磷酸鹽、醋酸鹽、明膠、膠原蛋白、（..'arhopoUu植物油、白凡士林，或其組合。
80. 根據(jù)權(quán)利要求63或64所述的方法，其中所述組合物包含胰液素。
81. 根據(jù)權(quán)利要求63或64所述的方法，其中所述組合物基本上由胰液素組成。
82. 根據(jù)權(quán)利要求63或64所述的方法，其中所述組合物中蛋白酶與脂肪酶與淀粉酶之 比為7:1:4。
83. 根據(jù)權(quán)利要求82所述的方法，其中所述消化酶包含至少約105, 000USP單位的蛋白 酶、至少約15, 000USP單位的脂肪酶和至少約60, 000USP單位的淀粉酶。
84. 根據(jù)權(quán)利要求82所述的方法，其中所述消化酶包含至少約210, 000USP單位的蛋白 酶、至少約30, 000USP單位的脂肪酶和至少約120, 000USP單位的淀粉酶。
85. 根據(jù)權(quán)利要求82所述的方法，其中所述消化酶包含至少約119, 000USP單位的蛋白 酶、至少約17, 000USP單位的脂肪酶和至少約68, 000USP單位的淀粉酶。
86. 根據(jù)權(quán)利要求82所述的方法，其中所述消化酶包含至少約224, 000USP單位的蛋白 酶、至少約33, 000USP單位的脂肪酶和至少約132, 000USP單位的淀粉酶。
【文檔編號(hào)】A61K38/43GK104220088SQ201380018617
【公開(kāi)日】2014年12月17日 申請(qǐng)日期:2013年2月1日 優(yōu)先權(quán)日:2012年2月2日
【發(fā)明者】J·M·法倫, M·F·海爾, J·斯茲格西, J·法倫 申請(qǐng)人:柯?tīng)柪识饔邢挢?zé)任公司