一種對哮喘有治療作用的冬蟲夏草口服液及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及保健品領(lǐng)域，具體而言，涉及一種對哮喘有治療作用的冬蟲夏草口服液及其制備方法。該方法，在潔凈度級別為10萬級的潔凈區(qū)內(nèi)進行如下步驟：將培養(yǎng)至對數(shù)生長期的冬蟲夏草無性型菌的菌液以5～10%體積比加至發(fā)酵液中，并培養(yǎng)至對數(shù)生長期；將在發(fā)酵液中培養(yǎng)至對數(shù)生長期的冬蟲夏草無性型菌的菌體與發(fā)酵液一起碾磨至80%以上的菌體在300目以下；將碾磨后的混合液經(jīng)孔徑300目過濾；將過濾后的混合液在45℃～60℃蒸發(fā)濃縮，至100g濃縮液中腺苷含量≥80mg；將濃縮液與蜂蜜混合均勻，且濃縮液占總重量的85-99%，灌裝得到成品。本發(fā)明提供的方法生產(chǎn)的冬蟲夏草口服液，副作用小，對哮喘具有良好的治療效果。
【專利說明】一種對哮喘有治療作用的冬蟲夏草口服液及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及保健品領(lǐng)域，具體而言，涉及一種對哮喘有治療作用的冬蟲夏草口服液及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]哮喘是一種常見病、多發(fā)病，是影響人們身心健康的重要疾病?？刂撇患训南颊邔θ粘９ぷ骷叭粘Ｉ疃紩l(fā)生影響，可導(dǎo)致誤工、誤學(xué)，導(dǎo)致活動、運動受限，使生命質(zhì)量下降，并帶來經(jīng)濟上的負擔(dān)及對家人的生活發(fā)生負面影響。哮喘反復(fù)發(fā)作可導(dǎo)致慢性阻塞性肺疾病、肺氣腫、肺心病、心功能衰竭、呼吸衰竭等并發(fā)癥。哮喘治療不及時、不規(guī)范，哮喘可能致命。
[0003]目前，治療哮喘的藥物大多為西藥或是噴劑，雖然其見效快，但是只能暫時延緩病情，且產(chǎn)生的副作用大。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于提供一種對哮喘有治療作用的冬蟲夏草口服液及制備方法，以解決上述的問題。
[0005]在本發(fā)明的實施例中提供的一種對哮喘有治療作用的冬蟲夏草口服液的制備方法，在潔凈度級別為10萬級的潔凈區(qū)內(nèi)進行如下步驟:
[0006]將培養(yǎng)至對數(shù)生長期的冬蟲夏草無性型菌的菌液以5~10%體積比加至發(fā)酵液中，并培養(yǎng)至對數(shù)生長期；
[0007]將在發(fā)酵液中培養(yǎng)至對數(shù)生長期的冬蟲夏草無性型菌的菌體與發(fā)酵液一起碾磨至80%以上的菌體在300目以下；
[0008]將碾磨后的混合液經(jīng)孔徑300目過濾；
[0009]將過濾后的混合液在45°C~60°C蒸發(fā)濃縮，至100g濃縮液中腺苷含量≥80mg ；
[0010]將所述濃縮液與所述蜂蜜混合均勻，且所述濃縮液占總重量的85-99%，灌裝得到成品。
[0011]優(yōu)選地，在所述將培養(yǎng)至對數(shù)生長期的冬蟲夏草菌液以5~10%體積比接入至發(fā)酵液中，并培養(yǎng)至對數(shù)生長期的步驟中，所述發(fā)酵液的體積占發(fā)酵罐體積的65-75%。
[0012]優(yōu)選地，在所述將培養(yǎng)至對數(shù)生長期的冬蟲夏草菌液以5~10%體積比接入至發(fā)酵液中，并培養(yǎng)至對數(shù)生長期的步驟中，培養(yǎng)溫度為18~20°C。
[0013]優(yōu)選地，在所述將培養(yǎng)至對數(shù)生長期的冬蟲夏草菌液以5~10%體積比接入至發(fā)酵液中，并培養(yǎng)至對數(shù)生長期的步驟中，培養(yǎng)時間為20-30天。
[0014]優(yōu)選地，在所述將過濾后的混合液在45°C~60°C蒸發(fā)濃縮，至100g濃縮液中腺苷含量> 80mg的步驟中，采用二效動態(tài)循環(huán)中溫濃縮裝置進行濃縮。
[0015]優(yōu)選地，在所述將過濾后的混合液在45°C~60°C蒸發(fā)濃縮，至100g濃縮液中腺苷含量≥80mg的步驟中，所述濃縮至原體積的75~85%。[0016]優(yōu)選地，在所述濃縮液與所述蜂蜜混合均勻，且所述濃縮液占總量的85-99%，灌裝得到成品的步驟中，所述濃縮液占總量的90%。 [0017] 在本發(fā)明的實施例中還提供了一種根據(jù)上述制備方法制備的一種對哮喘有治療作用的冬蟲夏草口服液。
[0018]本發(fā)明實施例提供的冬蟲夏草口服液，主要成分包括冬蟲夏草無性型菌體及其發(fā)酵液和蜂蜜；整個生產(chǎn)過程是在潔凈度級別為10萬級的潔凈區(qū)內(nèi)進行，采用45-60°C蒸發(fā)濃縮，最大程度上保存了其原有的營養(yǎng)成分，生產(chǎn)得到的冬蟲夏草口服液，副作用小，對哮喘具有良好的治療效果。
【具體實施方式】
[0019]下面通過具體的實施例子對本發(fā)明做進一步的詳細描述。
[0020]本發(fā)明所用的冬蟲夏草無性型菌為 申請人:自己分離所得，于2014年I月06日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址:北京市朝陽區(qū)北辰西路I號院3號中國科學(xué)院微生物研究所，郵編:100101，保藏號為:CGMCC N0.9151，分類命名:中國被毛孢(Hirsutella sinensis),保藏名稱為:中國被毛孢F3-02-1。冬蟲夏草無性型菌即為中國被毛孢。
[0021]分離方法:
[0022](一 )試劑
[0023]1、培養(yǎng)基
[0024]牛肉湯500ml、牛奶200ml、葡萄糖30g、瓊脂18g、水解乳蛋白5g、酵母lg、磷酸氫二鉀lg、核糖核酸0.5g、硫酸鎂0.2g、加水定容至1000ml，121°C、0.1MPa條件下滅菌30min
后備用。
[0025]牛肉湯的制備:先將新鮮牛肉去除筋和脂肪，然后取Ikg牛肉加蒸餾水2kg放入容器內(nèi)煮沸，煮沸約40min后將肉渣濾去，肉水經(jīng)121°C、0.1MPa高壓滅菌30min后備用。
[0026]注:①煮沸時應(yīng)邊煮邊攪動；②煮沸前應(yīng)在容器壁上劃一刻度，煮沸時隨時添補蒸餾水。
[0027]2、升汞消毒液
[0028]準確稱取0.1gHgCl2加少許蒸餾水溶解后用蒸餾水定容至100mL。
[0029]( 二)菌體的獲得
[0030]1、在青海省玉樹州雜多縣附近的山上采集蟲體飽滿、子座短小的冬蟲夏草，冬蟲夏草外包裹的土(菌)鞘要完好，放入攜帶便攜式超凈工作箱；
[0031]2、將采收回來的冬蟲夏草外包裹的土(菌)鞘于超凈工作臺內(nèi)剝離，然后用滅菌的毛刷洗凈冬蟲夏草表面的泥土，用滅菌水清洗干凈，放入升汞消毒液滅菌5min后取出，用無菌蒸餾水沖冼三次后備用；
[0032]3、在超凈工作臺內(nèi)取一根冬蟲夏草放置在無菌的培養(yǎng)皿中，用醫(yī)用手術(shù)刀切去冬蟲夏草的外表皮，選取里面的白色菌絲組織塊，將組織塊放入另一個無菌的培養(yǎng)皿內(nèi)切碎至碎粒狀；
[0033]4、將碎粒狀組織塊接種至有培養(yǎng)基的試管中，蓋上棉塞后放入培養(yǎng)箱中18°C恒溫培養(yǎng)。[0034](三)菌體的形態(tài)特征和分子鑒定
[0035] 該菌培養(yǎng)7d后，在接種組織周圍出現(xiàn)輻射狀溝紋突起；培養(yǎng)IOd~15d出現(xiàn)白色細毛狀菌絲；30d后形成灰白色光滑的菌苔，氣生菌絲不發(fā)達，下面菌絲開始伸入培養(yǎng)基中；60d后形成茸狀圓形的菌落；90d菌落直徑可達1.5cm~2.5cm，菌落突起呈饅頭狀，表面不平，灰白色至棕黃色，菌落堅硬，伸入培養(yǎng)基中的菌絲呈棕黑色，同時有棕黑色色素向外圍擴散，菌絲體具鮮香菇氣味；培養(yǎng)120d~150d開始產(chǎn)生分生孢子。
[0036]鏡檢觀察時可見分生孢子頂生、腎形，著生在分生孢子梗頂端，分生孢子顏色為黃褐色。
[0037]根據(jù)該菌體的形態(tài)特征推測該菌體為冬蟲夏草無性型菌，經(jīng)分子鑒定，確認為該菌體為冬蟲夏草無性型菌-中國被毛孢，命名為中國被毛孢F3-02-1。
[0038]將得到的冬蟲夏草無性型菌用于生產(chǎn)冬蟲夏草口服液。
[0039]一種對哮喘有治療作用的冬蟲夏草口服液的制備方法，在潔凈度級別為10萬級的潔凈區(qū)內(nèi)進行如下步驟:
[0040]a.將培養(yǎng)至對數(shù)生長期的冬蟲夏草無性型菌的菌液以5~10%體積比加至發(fā)酵液中，并培養(yǎng)至對數(shù)生長期；
[0041]b.將在發(fā)酵液中培養(yǎng)至對數(shù)生長期的冬蟲夏草無性型菌的菌體與發(fā)酵液一起碾磨至80%以上的菌體在300目以下；
[0042]c.將碾磨后的混合液經(jīng)孔徑300目過濾；
[0043]d.將過濾后的混合液在45°C~60°C蒸發(fā)濃縮，至100g濃縮液中腺苷含量^ 80mg ；
[0044]e.將所述濃縮液與所述蜂蜜混合均勻，且所述濃縮液占總重量的85-99%，灌裝得到成品。
[0045]對數(shù)生長期是冬蟲夏草無性型菌體生長最旺盛的時期，此時發(fā)酵液中的菌體為絮狀的混濁體，便于碾磨工藝的實施。若是培養(yǎng)時間過短，則菌絲生長不充分；若培養(yǎng)時間過長，則菌絲容易繞成球形，繞成球形后球體中間的菌絲易死亡，而影響最后得到的冬蟲夏草口服液的效果。
[0046]冬蟲夏草菌液以5~10%體積比進行接種，既保證了菌體生長的初始菌量，又保證了菌體生長的速度。
[0047]在a步驟中，所述發(fā)酵液的體積占發(fā)酵罐體積的65-75 %。發(fā)酵液的體積占發(fā)酵罐體積的65-75%，保留了發(fā)酵罐一定的空間，利于貯存一定的氧氣量，從而利于菌體的生長。
[0048]具體地，在a步驟中，培養(yǎng)采用18~20°C培養(yǎng)。經(jīng)驗證，18~20°C為冬蟲夏草菌體培養(yǎng)的適宜溫度。
[0049]進一步地，在a步驟中，培養(yǎng)時間為20-30天。此時，發(fā)酵液中的菌絲體為絮狀的混濁體，便于碾磨。此時，100mL菌液中菌絲體干重為5~7克。
[0050]具體地，在d步驟中，采用二效動態(tài)循環(huán)中溫濃縮裝置進行蒸發(fā)濃縮。本發(fā)明中所用的二效動態(tài)循環(huán)中溫濃縮裝置購至濟寧金百特工程機械有限公司，由兩套一效設(shè)備構(gòu)成，該套設(shè)備一效加熱的溫度在55V~60°C，二效蒸發(fā)的溫度在40V~45°C。設(shè)備由二套蒸發(fā)罐、二套換熱器、一套冷凝器、二套回收儲罐、二套蒸發(fā)循環(huán)泵等組成，配備熱源和冷源。系統(tǒng)的熱源采用蒸汽，然后用汽水換熱器轉(zhuǎn)換為熱水循環(huán)加熱蒸發(fā)，冷卻采用冷卻塔循環(huán)。這樣，保證了在60°C以下進行濃縮混合液，60°C以下時還可以保留混合液中絕大部分的有效成分。
[0051]進一步地，在d步驟中，腺苷含量是檢測濃縮液是否達到生產(chǎn)冬蟲夏草口服液的標準，100g濃縮液中腺苷含量> SOmg即達到標準，經(jīng)驗證，濃縮至原體積的75~85%即可。
[0052]優(yōu)選地，在e步驟中，濃縮液以百分比為90%與所述蜂蜜混合均勻。此時，所得到的口服液味覺效果最好。
[0053]在本發(fā)明的實施例中提供的一種對哮喘有輔助治療作用的冬蟲夏草口服液，主要成分包括:冬蟲夏草無性型菌體及其發(fā)酵液和蜂蜜。
[0054]冬蟲夏草性平味甘，具有平喘、祛痰、補肺腎、益虛損、養(yǎng)精氣的功效，是年老體弱、病后體衰、產(chǎn)后體虛者的最佳補品。現(xiàn)代藥理學(xué)表明，冬蟲夏草對支氣管有明顯擴張作用，擴張支氣管后無疑能減小呼吸道的阻力，緩解呼吸困難等癥狀。
[0055]蜂蜜味甘，具有抗菌消炎、促進組織再生、提高免疫力、潤肺止咳等功效，它含多種微量元素，是一種營養(yǎng)豐富的天然滋養(yǎng)食品。
[0056]本發(fā)明提供的冬蟲夏草口服液除了包括冬蟲夏草無性型菌體外，還包括其發(fā)酵液，研究發(fā)現(xiàn)，菌體在發(fā)酵過程中，菌體會分泌一些有效藥理成分至發(fā)酵液中，如:核苷類物質(zhì)等。研究還發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵液有很強的抑菌能力。因此，雖然發(fā)酵液中含有一定的藥理成分。 [0057]本實施例中，所有的操作在潔凈度級別為10萬級的潔凈區(qū)內(nèi)進行，混合液采用45°C~60°C蒸發(fā)濃縮。相對于采用高溫滅菌，本發(fā)明提供的方法不易破壞菌體及發(fā)酵液中的有效營養(yǎng)成分，從而避免了對療效、藥性的影響。
[0058]將得到的冬蟲夏草口服液符合如下的檢驗標準。
[0059]
【權(quán)利要求】
1.一種對哮喘有治療作用的冬蟲夏草口服液的制備方法，其特征在于，在潔凈度級別為10萬級的潔凈區(qū)內(nèi)進行如下步驟: 將培養(yǎng)至對數(shù)生長期的冬蟲夏草無性型菌的菌液以5~10%體積比加至發(fā)酵液中，并培養(yǎng)至對數(shù)生長期； 將在發(fā)酵液中培養(yǎng)至對數(shù)生長期的冬蟲夏草無性型菌的菌體與發(fā)酵液一起碾磨至80%以上的菌體在300目以下； 將碾磨后的混合液經(jīng)孔徑300目過濾； 將過濾后的混合液在45°C~60°C蒸發(fā)濃縮，至100g濃縮液中腺苷含量≥80mg ； 將所述濃縮液與蜂蜜混合均勻，且所述濃縮液占總重量的85-99%，灌裝得到成品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1述的一種對哮喘有治療作用的冬蟲夏草口服液的制備方法，其特征在于，在所述將培養(yǎng)至對數(shù)生長期的冬蟲夏草菌液以5~10%體積比接入至發(fā)酵液中，并培養(yǎng)至對數(shù)生長期的步驟中，所述發(fā)酵液的體積占發(fā)酵罐體積的65-75%。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種對哮喘有治療作用的冬蟲夏草口服液的制備方法，其特征在于，在所述將培養(yǎng)至對數(shù)生長期的冬蟲夏草菌液以5~10%體積比接入至發(fā)酵液中，并培養(yǎng)至對數(shù)生長期的步驟中，培養(yǎng)溫度為18~20°C。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種對哮喘有治療作用的冬蟲夏草口服液的制備方法，其特征在于，在所述將培養(yǎng)至對數(shù)生長期的冬蟲夏草菌液以5~10%體積比接入至發(fā)酵液中，并培養(yǎng)至對數(shù)生長期的步驟中，培養(yǎng)時間為20-30天。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種對哮喘有治療作用的冬蟲夏草口服液的制備方法，其特征在于，在所述將過濾后的混合液在45°C~60°C蒸發(fā)濃縮，至100g濃縮液中腺苷含量^ 80mg的步驟中，采用二效動態(tài)循環(huán)中溫濃縮裝置進行濃縮。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種對哮喘有治療作用的冬蟲夏草口服液的制備方法，其特征在于，在所述將過濾后的混合液在45°C~60°C蒸發(fā)濃縮，至100g濃縮液中腺苷含量≥80mg的步驟中，所述濃縮至原體積的75~85%。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種對哮喘有治療作用的冬蟲夏草口服液的制備方法，其特征在于，在所述濃縮液與所述蜂蜜混合均勻，且所述濃縮液占總量的85-99%，灌裝得到成品的步驟中，所述濃縮 液占總量的90%。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7任一項所述的制備方法制備的一種對哮喘有治療作用的冬蟲夏草口服液。
【文檔編號】A61P11/06GK103933079SQ201410013614
【公開日】2014年7月23日 申請日期:2014年1月10日 優(yōu)先權(quán)日:2014年1月10日
【發(fā)明者】劉欣, 李玉玲, 馬少麗, 徐海峰, 張宗豪 申請人:青海省畜牧獸醫(yī)科學(xué)院