N-[5-（1，2，4-三唑-1-基）噻唑-2-基]脂肪酰胺的醫(yī)藥用途
【專利摘要】本發(fā)明涉及化學結(jié)構(gòu)式I所示的N-[5-（1，2，4-三唑-1-基）噻唑-2-基]脂肪酰胺在制備流感病毒神經(jīng)氨酸酶抑制劑中的應用：Ⅰ式中R選自：C1~C2烷基、C3~C4直鏈或支鏈烷基；R1選自：C1~C2烷基、C3~C11直鏈或支鏈烷基、C12~C17直鏈或支鏈烷基、乙烯基、丙烯基、含雙鍵或三鍵的C4~C17烴基。
【專利說明】/I/-[5- (1，2，4-三唑-1-基)噻唑-2-基]脂肪酰胺的醫(yī)藥用途
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及化合物的制備方法，具體是#-[5- (1，2，4-三唑-I-基)噻唑-2-基]脂肪酰胺的制備方法及其在制備流感病毒神經(jīng)氨酸酶抑制劑中的應用。
【背景技術】
[0002]流感病毒表面有兩種糖蛋白：血凝素（HA)和神經(jīng)氨酸酶（NA)。由于NA在流感病毒的變異過程中具有相對保守性，使其成為設計、合成抗流感藥物非常好的靶標。NA可催化裂解宿主細胞表面糖蛋白末端的N-乙酰氨基神經(jīng)氨酸酶，釋放出成熟的流感病毒體，并阻止新病毒體的聚集。此外，NA通過改變表面糖蛋白HA的碳水化合物部分，增強毒性，促進病毒從受感染的宿主細胞中釋放， 引起或加重流感癥狀。因此，NA抑制劑可通過抑制NA活性來抑制流感病毒復制和毒性。
[0003]人感染禽流感，是由禽流感病毒引起的人類疾病。流感病毒一般可分為A型、B型和C型，其中A型即通常所說的禽流感，對人及多種動物有致病力。A型流感病毒的抗原變異性最強，常根據(jù)HA和NA抗原性的不同將其分為16個HA亞型（H廣H16)和9個NA亞型(Ν1~Ν9)ο至今發(fā)現(xiàn)能直接感染人的禽流感病毒亞型有=H5Np H7N1、H7N2、H7N3、H7N7、H9N2、H7N9和HltlN8亞型。其中，高致病性H5N1亞型于1997年在香港首次發(fā)現(xiàn)能直接感染人類，2003年7月之后，H5N1禽流感疫情呈現(xiàn)前所未有的暴發(fā)，波及亞洲、北美洲、歐洲和非洲17個國家和地區(qū)，造成數(shù)百人感染及死亡，直接經(jīng)濟損失高達100億美元。2003年3月，荷蘭發(fā)生H7N7型禽流感并波及整個歐洲，人類感染者達83例，不僅造成了人類的傷亡，同時重創(chuàng)了家禽養(yǎng)殖業(yè)。2009年3月底，墨西哥暴發(fā)人感染H1N1型豬流感疫情并擴散到世界各地，據(jù)世界衛(wèi)生組織于2010年2月26日發(fā)布的甲型H1N1流感全球情況報告，至少有213個國家和地區(qū)的16226例病人死于這場大流感。經(jīng)過基因序列分析，H1N1型病毒包含人流感病毒、北美禽流感病毒和北美、歐、亞豬流感病毒基因片段，為幾種不同物種流感病毒的混合毒株，而非單獨一種豬流感或禽流感病毒。2013年3月，我國首次發(fā)現(xiàn)人感染H7N9禽流感病例，截止2013年12月26日，世界衛(wèi)生組織公布的H7N9禽流感確診148人，死亡43人，該疫情造成經(jīng)濟損失達65億美元左右。
[0004]隨著流感病毒的加速變異及不同亞型病毒在物種間重組概率的增加，流感作為世界范圍的季節(jié)性流行性傳染疾病，對人類健康的威脅正日益增加和嚴峻。神經(jīng)氨酸酶(NA)抑制劑是抗A型流感病毒的第一線藥物。神經(jīng)氨酸酶（NA)抑制劑有Zanamivir、Oseltamivir和Peramivir等類型化合物,其中Oseltamivir應用廣泛。但研究已發(fā)現(xiàn)一些病毒株對Oseltamivir產(chǎn)生了耐藥性，因此迫切需要研究新型抗A型流感病毒藥。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]以下實施例旨在說明本發(fā)明而不是對本發(fā)明的進一步限定。
[0006]實施例I#-[4-叔丁基-5- (1，2，4-三唑-I-基）噻唑-2-基]乙酰胺的制備2 mmol 4-叔丁基_5_( I，2，4-三唑-I-基)噻唑-2-胺，6. O mL乙酸酐，50°C反應I. 5h，冷卻后倒入冰水中攪拌，得到ΛΗ4-叔丁基-5- (1,2,4-三唑-I-基)噻唑-2-基]乙酰胺，收率 90.6%，m. p. 190~191。〇。1H NMR (400 MHz，CDCl3) δ :1.13 (s, 9H, 3 X CH3), 2. 29(s,3H, CH3),8. 12 (s，1H，C2N3H2 3_H)，8.28 (s，lH，C2N3H2 5_Η)，9· 16 (s，lH，NH)。
[0007]實施例2 #-[4-叔丁基-5- (1，2，4-三唑-I-基）噻唑-2-基]丙酰胺的制備按實施例I的方法，4-叔丁基-5- (1，2，4-三唑-I-基)噻唑-2-胺與丙酸酐反應O. 5h，得到#-[4-叔丁基-5- (1，2，4-三唑-I-基）噻唑-2-基]丙酰胺，收率87. 2%，m. p.159~161?。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ :1.13 (s, 9H, 3XCH3), I. 28 (t, J = 7.6 Hz，3H，CH3), 2. 54 (q, J =7.6 Hz，2H，CH2), 8. 15 (s，lH，C2N3H2 3_H)，8.31 (s，lH，C2N3H2 5_H)，
9.49 (s，lH，NH)。
[0008]實施例3
#-[4-叔丁基-5- (1,2,4-三唑-I-基）噻唑-2-基]-2- 丁烯酰胺的制備
2mmol 4-叔丁基-5- (1，2，4-三唑-I-基)噻唑-2-胺溶于20.0 mL 二氯甲烷中，加入 2. 2 mmol 2-丁烯酸，0.03 g 4-二甲氨基吡啶（DMAP)，O. 5 h 后加入 2. 2 mmol N，N’-二環(huán)己基碳二亞胺（DCC)，室溫攪拌，反應6. O h，反應液用碳酸氫鈉水溶液中和，靜置，分層，有機層用無水硫酸鈉干燥，過濾，旋蒸，柱層析得到N-[4-叔丁基-5- (I，2，4-三唑-I-基）噻唑-2-基]-2-丁烯酰胺，收率 35. 8%，m. p. 205~208。。。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ：I. 15 (s，9H，3XCH3)，I. 98 (dd, J = 7.0 Hz, J = I. 6 Hz，3H，CH3), 5. 99 (dd, J = 14. 2Hz,/ = I. 6 Hz, 1H，3’-Η)，7· 13-7. 19 (m，1H，2’_H)，8. 12 (s, IHjC2N3H2 3_H)，8.26 (s，1H，C2N3H2 5-H)，8. 92 (s，lH，NH)。
[0009]實施例4
#-[4-叔丁基-5- (1，2，4-三唑-I-基）噻唑-2-基]己酰胺的制備按實施例3的方法，4-叔丁基-5- (1，2，4-三唑-I-基）噻唑-2-胺與己酸反應7. Oh，得到#-[4-叔丁基-5- (1，2，4-三唑-I-基）噻唑-2-基]己酰胺，收率68. 5%，m. p.173~174 °C。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ :0.92 (t, J =6.8 Hz，3H，CH3), I. 15 (s，9H，3XCH3), I. 35-1. 38 (m，4H，2’，3’_H)，I. 76 (m，2H，4’_H)，2. 48 (t，/= 7.6 Hz，2H，5’_H)，8. 12 (s，lH，C2N3H2 3_H)，8.26 (s，lH，C2N3H2 5_H)，9. 16 (s，lH，NH)。
[0010]實施例5
#-[4-叔丁基-5- (1，2，4-三唑-I-基）噻唑-2-基]辛酰胺的制備按實施例3的方法，4-叔丁基-5- (1，2，4-三唑-I-基）噻唑-2-胺與辛酸反應5. 5h，得到#-[4-叔丁基-5- (1，2，4-三唑-I-基）噻唑-2-基]辛酰胺，收率62. 5%，m. p.138~140 °C。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ :0.87-0.90 (m，3H，CH3), I. 13 (s, 9H, 3 X CH3),
I.29-1. 34 (m，8H，2，，3’，4’，5’ _H)，I. 75—1. 77 (m，2H，6’_H)，2. 47 (t, J =7.6 Hz，2H，7，-H)，8.12 (s，lH，C2N3H2 3_H)，8.27 (s，lH，C2N3H2 5_H)，9.00 (s，lH，NH)。
[0011]實施例6
#-[4-叔丁基-5- (1，2，4-三唑-I-基）噻唑-2-基]-2-乙基己酰胺的制備 按實施例3的方法，4-叔丁基-5- (1，2，4-三唑-I-基)噻唑-2-胺與2-乙基己酸反應6.0 h，得到#-[4-叔丁基-5- (1，2，4-三唑-I-基)噻唑-2-基]-2-乙基己酰胺，收率39. 8%,m. p. 133~135°C。1H NMR (400 MHz，CDC13)5 ：0. 89 (t,3H,/ = 7.0 Ηζ，1’-Η)，0·95(t, J =7.4 Hz，3H，7，-H)，I. 14 (s, 9H, 3XCH3), I. 29-1. 32 (m，4H，2，，3，_H)，I. 57-1. 64(m，2H，4，-H)，I. 71-1. 75 (m，2H，6’_H)，2. 26 (m，1H，5’_H)，8. 12 (s，lH，C2N3H2 3_H)，8.26(s，lH，C2N3H2 5-H),8.96 (s，lH，NH)。
[0012]實施例7
#-[4-叔丁基-5- (1，2，4-三唑-I-基）噻唑-2-基]月桂酰胺的制備按實施例3的方法，4-叔丁基-5- (1，2，4_三唑-I-基）噻唑-2-胺與月桂酸反應6.0 h，得到#-[4-叔丁基-5- (1，2，4-三唑-I-基）噻唑-2-基]月桂酰胺，收率54. 3%，m. p. 103~105°C。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ :0.88 (t, J =6.8 Hz，3H，CH3), I. 13 (s,9H，3XCH3)，I. 26-1. 36 (m, 16H，2’ ~9，_H)，I. 71-1. 75 (m,2H, 10’ _H)，2. 47 Ct,J = 7. 4 Hz,2H，11’-H)，8. 11 (s，lH，C2N3H2 3_H)，8.26 (s，lH，C2N3H2 5-H),8. 98 (s，lH，NH)。
[0013]實施例8
#-[4-叔丁基-5- (1,2,4-三唑-I-基）噻唑-2-基]硬脂酰胺的制備按實施例3的方法，4-叔丁基-5- (1，2，4-三唑-I-基)噻唑-2-胺與硬脂酸反應5. Oh,得到#-[4-叔丁基-5- (1,2,4-三唑-I-基）噻唑-2-基]硬脂酰胺，收率89. 2%，m. p.88~90。。。1H NMR (400 MHz, CDCl3) 5 ：0. 88 (t,/ = 7.0 Hz, 3H，CH3), I. 13 (s，9H，3XCH3),I. 25-1. 33 (m, 28H, 2’ ~15’ -H), I. 70-1. 74 (m, 2H, 16’ -H), 2. 47 (t，/ = 7. 6 Hz, 2H, 17’ -H),
8.12 (s，1H，C2N3H2 3_H)，8.26 (s，lH，C2N3H2 5-H), 9. 42 (s，lH，NH)。
[0014]實施例9
#-[5- (1,2,4-三唑-I-基）噻唑-2-基]脂肪酰胺的抗流感病毒神經(jīng)氨酸酶活性
I.實驗原理
化合物MUNANA是神經(jīng)氨酸酶的特異性底物，在神經(jīng)氨酸酶作用下產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物在360 nm照射激發(fā)下，可以產(chǎn)生450 nm熒光，熒光強度的變化可以靈敏地反應神經(jīng)氨酸酶活性。酶都來自A/PR/8/34 (HlNl)病毒毒株
2.實驗方法
在酶反應體系中，一定濃度樣品與流感病毒神經(jīng)氨酸酶NA懸浮于反應緩沖液中（pH6. 5)，加入熒光底物MUNANA啟動反應體系，37 C孵育40分鐘后，加反應終止液終止反應。在激發(fā)波長360 nm和發(fā)射波長為450 nm的參數(shù)條件下，測定熒光強度值。反應體系的熒光強度可以反映酶的活性。根據(jù)熒光強度的減少量可以計算化合物對NA活性的抑制率
3.檢測樣品:ΛΗ5-(1,2,4-三唑-I-基）噻唑-2-基]脂肪酰胺（I ):
【權利要求】
1.化學結(jié)構(gòu)式I所示的n-[5-(1，2，4-三唑-I-基)噻唑-2-基]脂肪酰胺在制備流感病毒神經(jīng)氨酸酶抑制劑中的應用：

2.如權利要求1所述的應用，其中式I所示的#-[5_(1，2，4-三唑-I-基)噻唑-2-基]脂肪酰胺選自N-[4-叔丁基-5- (1,2,4-三唑-I-基）噻唑-2-基]_2_ 丁烯酰胺。
3.如權利要求1所述的應用，其中式I所示的#-[5_(1，2，4-三唑-I-基)噻唑-2-基]脂肪酰胺選自#-[4-叔丁基-5- (1，2，4-三唑-I-基）噻唑-2-基]月桂酰胺。
【文檔編號】A61K31/427GK103705511SQ201410015478
【公開日】2014年4月9日 申請日期:2014年1月14日 優(yōu)先權日:2014年1月14日
【發(fā)明者】陳平, 孫曉瀟, 陳潔 申請人:長沙理工大學