一種作用于FGF受體的4,6-二甲基-噁唑并[5,4-d]嘧啶-5,7（4H,6H）-二酮衍生物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種作用于FGF受體的4,6-二甲基-噁唑并[5,4-d]嘧啶-5,7(4H,6H)-二酮衍生物，本發(fā)明以1，3-二甲基嘧啶-2，4，6(1H，3H，5H)-三酮為起始原料，用NaNO2進(jìn)行亞硝化，然后用Na2S2O4還原，再與芳香醛進(jìn)行Schiff堿反應(yīng)，最后用SOCl2環(huán)合得目標(biāo)化合物。本發(fā)明的4,6-二甲基-噁唑并[5,4-d]嘧啶-5,7(4H,6H)-二酮衍生物對(duì)實(shí)驗(yàn)用細(xì)胞有一定抑制作用，表現(xiàn)出一定的抗腫瘤活性。對(duì)于H460細(xì)胞，化合物N5a、N5g和N5k的IC50值均小于陽(yáng)性對(duì)照藥；對(duì)于B16F10細(xì)胞，化合物N5f、N5h、N5i和N5k的IC50值小于陽(yáng)性對(duì)照藥；對(duì)于A549細(xì)胞，陽(yáng)性對(duì)照的IC50值偏高，化合物N5f、N5g、N5h和N5l的IC50值均小于該陽(yáng)性對(duì)照藥。
【專利說(shuō)明】—種作用于FGF受體的4, 6- 二甲基-噁唑并[5, 4-d]嘧啶-5, 7 (4H, 6H)-二酮衍生物
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及醫(yī)藥化學(xué)【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其涉及一種作用于FGF受體的4，6- 二甲基-噁唑并[5，4-d]嘧啶-5，7 (4H, 6H) - 二酮衍生物。
【背景技術(shù)】
[0002]惡性腫瘤是一種嚴(yán)重威脅人類健康的常見及多發(fā)病，人類因惡性腫瘤而引起的死亡率僅次于心腦血管疾病而高居于第二位。目前其治療方法雖有多種，但仍主要以化療為主。傳統(tǒng)的抗腫瘤藥物作用雖強(qiáng)，但缺乏選擇性，毒副作用也比較大，限制了其臨床應(yīng)用，因此人們一直希望能通過基于腫瘤信號(hào)的傳導(dǎo)機(jī)制來(lái)研發(fā)藥物。
[0003]蛋白激酶是一種磷酸轉(zhuǎn)移酶，通過催化磷酸基團(tuán)從ATP轉(zhuǎn)移到底物蛋白的受體上而在調(diào)節(jié)代謝、基因表達(dá)、細(xì)胞生長(zhǎng)、細(xì)胞分裂和細(xì)胞分化等方面起關(guān)鍵作用。在蛋白激酶家族的抗腫瘤研究中，以受體酪氨酸激酶(RTKs)為靶點(diǎn)的分子靶向抗腫瘤藥物研發(fā)已成為當(dāng)今生命科學(xué)和藥物科學(xué)的熱點(diǎn)和前沿領(lǐng)域。近年來(lái)通過研究人員的不斷探索研究證實(shí)，抑制酪氨酸蛋白激酶可達(dá)到治療腫瘤的目的，RTKs抑制劑的研究逐漸成為抗腫瘤藥物研究的一個(gè)熱點(diǎn)。目前，已有將近120種RTKs抑制劑藥物陸續(xù)上市或進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段，其中大多數(shù)的抑制劑是針對(duì)表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)、人血小板衍生生長(zhǎng)因子受體(PDGFR)、人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體(VEGFR )等絡(luò)氨酸激酶，而針對(duì)FGFR的抑制劑研究相對(duì)較少，且該類抑制劑多為多靶點(diǎn)的絡(luò)氨酸激酶抑制劑。鑒于越來(lái)越多的報(bào)道FGFR信號(hào)通路在誘發(fā)腫瘤生長(zhǎng)和血管增生中的作用，開展FGFR抑制劑的研究顯得尤為迫切。
[0004]成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(FGFRs)是一類跨膜的酪氨酸激酶型受體，它與成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGFs)結(jié)合所構(gòu)成的FGF/FGFR信號(hào)傳遞能夠介導(dǎo)多條信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，對(duì)正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的增殖、分化以及腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移等方面均發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用。許多研究報(bào)道指出，腫瘤的發(fā)生、生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移都與FGF/FGFR表達(dá)異常及其信號(hào)通路激活密切相關(guān)，具體表現(xiàn)為:1.在膀胱癌、胃癌、結(jié)腸癌、子宮內(nèi)膜癌、前列腺癌、纖維瘤、橫紋肌肉瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤和黑色素瘤等多種腫瘤細(xì)胞中，均發(fā)現(xiàn)了 FGF/FGFR的突變或高水平的表達(dá)，最高可以超出正常值100倍以上。2.FGFR通路是促增殖信號(hào)，可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的異常增殖。3.FGFR信號(hào)通路的激活還可以刺激血管生長(zhǎng)。血管新生不但為腫瘤細(xì)胞提供養(yǎng)分和氧氣，促進(jìn)其生長(zhǎng)，還為腫瘤細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移和擴(kuò)散提供了物質(zhì)基礎(chǔ)。(4) FGFR還可介導(dǎo)廣譜的抗腫瘤藥物耐藥性，而腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物的抗藥性和在轉(zhuǎn)移性腫瘤治療中化療的有限療效是臨床上最主要的兩個(gè)挑戰(zhàn)。因此，F(xiàn)GFR被視為腫瘤治療靶標(biāo)之一而備受關(guān)注。
[0005]FGF作為細(xì)胞外刺激信號(hào)，通過HSPG結(jié)合到RTK胞外區(qū)，使受體蛋白形成二聚體，激活胞內(nèi)區(qū)的RTK活性區(qū)發(fā)生自身磷酸化，然后誘發(fā)PLC-gamma途徑、P-1-3K-AKT-PKB途徑、Ras2/Raf/MAPK途徑發(fā)揮一系列生理病理作用。其中Ras2/Raf/MAPK途徑中活化的MAP激酶(包括ERKs、p38和JNKs)進(jìn)入細(xì)胞核，使多種基因調(diào)節(jié)蛋白磷酸化，從而影響基因的合成、轉(zhuǎn)錄等過程。對(duì)于腫瘤細(xì)胞主要是使細(xì)胞周期素的基因轉(zhuǎn)錄增加，細(xì)胞周期素依賴性蛋白激酶被激活，激活后的細(xì)胞周期素依賴性蛋白激酶再激活細(xì)胞周期前進(jìn)基因，導(dǎo)致細(xì)胞周期縮短、增殖加速，從而誘發(fā)腫瘤的形成。
[0006]基于FGFR為靶點(diǎn)的抑制劑大體可以分為兩類:即胞外阻斷FGF與FGFR結(jié)合的抑制劑和胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑。其中胞外抑制劑主要分為多陰離子抑制劑，糖類抑制劑和肽類抑制劑。胞內(nèi)抑制劑的研究中，基于活性區(qū)域的ATP磷酸化靶點(diǎn)研究尤為活躍。目前已有多種重要的小分子FGFR-1抑制劑:如吲哚類的如SU4984和SU5402;吡啶類如HH73074以及吲哚酮類的Sunitinib。SU4984和SU5402抑制FGFRl激酶活性的IC5tl值為10-20 μ Μ。TO173074是目前唯一合成的選擇性FGFR抑制劑，其對(duì)FGFRl抑制的IC5tl值為納摩爾級(jí)。另外，輝瑞公司研發(fā)的吲哚酮類FGFR抑制劑Sunitinib以獲得FDA批準(zhǔn)上市，該藥物也是一
種多靶點(diǎn)的絡(luò)氨酸激酶抑制劑。
[0007]
【權(quán)利要求】
1.一種作用于FGF受體的4，6- 二甲基-噁唑并[5，4-d]嘧啶-5，7 (4H, 6H)- 二酮衍生物，其特征在于:所述衍生物的化學(xué)結(jié)構(gòu)如下:
2.如權(quán)利要求1所述的4，6-二甲基-噁唑并[5，4-d]嘧啶-5，7 (4H, 6H)- 二酮衍生物，其特征在于:所述衍生物是2-[4-(芐氧基)-苯基]-4，6- 二甲基-噁唑并[5，4-d]嘧啶-5，7 (4H，6H)_ 二酮，化學(xué)結(jié)構(gòu)如下:
3.如權(quán)利要求1所述的4，6-二甲基-噁唑并[5，4-d]嘧啶-5，7 (4H, 6H)- 二酮衍生物，其特征在于:所述衍生物是2-(3-1Η-吲哚基)-4，6- 二甲基-噁唑并[5，4-d]嘧啶-5，7 (4H，6H)_ 二酮，化學(xué)結(jié)構(gòu)如下:
4.如權(quán)利要求1所述的4，6-二甲基-噁唑并[5，4-d]嘧啶-5，7 (4H, 6H)- 二酮衍生物，其特征在于:所述衍生物是2-[1- (2-羥基)萘基)]-4，6_ 二甲基-噁唑并[5，4-d]嘧啶-5，7 (4H，6H)_ 二酮，化學(xué)結(jié)構(gòu)如下:
5.一種制備如權(quán)利要求2所述的4，6- 二甲基-噁唑并[5，4-d]嘧啶-5，7(4H, 6H)- 二酮衍生物的方法，其特征在于:所述方法的具體步驟如下: (1)以每5gl，3-二甲基嘧啶-2，4，6(1H，3H，5H)_三酮加入140ml乙酸和水的混合液的比例，在75°C下加熱30min至反應(yīng)混合物勻質(zhì)，將溫度降低到50°C，分批加入NaN024.0g,加入完畢后，冷卻至室溫，并攪拌lh，得到沉淀物，過濾，水洗，抽濾，干燥，得1，3- 二甲基-5-亞硝基嘧啶-2,4,6 (1H，3H，5H)-三酮； (2)將每0.01moll，3-二甲基-5-亞硝基嘧啶-2，4，6(1H，3H，5H)-三酮加入40ml 14.5%NH40H的比例，在70°C下攪拌30min，直至混合物勻質(zhì)，將溫度將至50°C，分批加Λ 1，3-二甲基-5-亞硝基嘧啶-2，4，6 (1Η，3Η，5Η)-三酮物質(zhì)的量2倍的Na2S2O4,并繼續(xù)攪拌30min，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)旋出氨水，析出固體，冰箱冷卻，抽干，即得I，3- 二甲基-5-氨基嘧啶-2，4，6 (1H，3H，5H)_ 三酮； (3)將1，3_二甲基-5-氨基嘧啶-2，4，6 (1H，3H，5H)_三酮和4-芐氧基苯甲醛以1:1的比例，每毫摩爾加入15ml無(wú)水乙醇中，在80°C下攪拌反應(yīng)3h后于冰箱冷卻，抽濾，水洗，干燥即得中間體I，3-二甲基-5-亞胺基嘧啶-2，4，6 (1H，3H，5H)_三酮； (4)每毫摩爾1，3_二甲基-5-亞胺基嘧啶-2，4，6(1札3!1，5!0-三酮加入1.5ml重蒸后二氯亞砜，于60°C攪拌lh，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)旋出二氯亞砜，加少許水溶解，用氨水調(diào)PH至7，靜置，抽濾，即得2-[4_ (芐氧基)_苯基]-4，6-二甲基-噁唑并[5，4-d]嘧啶-5，7 (4H，6H)_ 二酮。
6.如權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于:步驟(1)中，乙酸和水的混合液中乙酸與水的體積比為1:1。
7.一種制備如權(quán)利要求3所述的4，6- 二甲基-噁唑并[5，4-d]嘧啶-5，7(4H, 6H)- 二酮衍生物的方法，其特征在于:所述方法的具體步驟如下: (1)以每5gl，3-二甲基嘧啶-2，4，6(1H，3H，5H)_三酮加入140ml乙酸和水的混合液的比例，在75°C下加熱30min至反應(yīng)混合物勻質(zhì)，將溫度降低到50°C，分批加入NaN024.0g,加入完畢后，冷卻至室溫，并攪拌lh，得到沉淀物，過濾，水洗，抽濾，干燥，得1，3- 二甲基-5-亞硝基嘧啶-2,4,6 (1H，3H，5H)-三酮； (2)將 每0.01moll，3-二甲基-5-亞硝基嘧啶-2，4，6(1H，3H，5H)-三酮加入40ml 14.5%NH40H的比例，在70°C下攪拌30min，直至混合物勻質(zhì)，將溫度將至50°C，分批加入I，3-二甲基-5-亞硝基嘧啶-2，4，6 (1H，3H，5H)_三酮物質(zhì)的量2倍Na2S2O4,并繼續(xù)攪拌30min，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)旋出氨水，析出固體，冰箱冷卻，抽干，即得1，3-二甲基-5-氨基嘧啶-2，4，6 (1H，3H，5H)_ 三酮； (3)將1，3_二甲基-5-氨基嘧啶-2，4，6 (1H，3H，5H)_三酮和4-芐氧基苯甲醛以1:1的比例，每毫摩爾加入15ml無(wú)水乙醇中，在80°C下攪拌反應(yīng)3h后于冰箱冷卻，抽濾，水洗，干燥即得中間體I，3-二甲基-5-亞胺基嘧啶-2，4，6 (1H，3H，5H)_三酮； (4)每毫摩爾1，3_二甲基-5-亞胺基嘧啶-2，4，6(1札3!1，5!0-三酮加入1.5ml重蒸后二氯亞砜，于60°C攪拌lh，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)旋出二氯亞砜，加少許水溶解，用氨水調(diào)PH至7，靜置，抽濾，即得2-[4_ (芐氧基)_苯基]-4，6-二甲基-噁唑并[5，4-d]嘧啶-5，7 (4H，6H)_ 二酮。
8.如權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征在于:步驟(1)中，乙酸和水的混合液中乙酸與水的體積比為1:1。
9.如權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的4，6-二甲基-噁唑并[5，4-d]嘧啶-5，7(4H, 6H)- 二酮衍生物在治療腫瘤中的用途。
【文檔編號(hào)】A61P35/00GK103880861SQ201410060513
【公開日】2014年6月25日 申請(qǐng)日期:2014年2月21日 優(yōu)先權(quán)日:2014年2月21日
【發(fā)明者】葉發(fā)青, 郭平, 謝自新, 劉劍敏, 王躍武, 宋曉琴, 陳梁芳 申請(qǐng)人:溫州醫(yī)科大學(xué)