一種用于預(yù)防和治療急性放射性肺炎的藥物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種用于預(yù)防和治療急性放射性肺炎的藥物，所述藥物的療效成分為原花青素，所述藥物為濃度為2.5-3.75mg/ml的原花青素溶液，所述原花青素溶液包括純度為95%～99%的原花青素和無菌生理鹽水，所述藥物服用方式為霧化吸入；本發(fā)明對(duì)急性放射性肺損傷具有很好的防治和治療效果，是一種較有發(fā)展前途的植物原料藥，即原花青素可用來預(yù)防和治療急性放射性肺炎，霧化吸入原花青素可有效實(shí)現(xiàn)肺靶向給藥，在直達(dá)作用部位的同時(shí)還避免產(chǎn)生首過效應(yīng)，減少藥物用量，減輕或避免藥物不良反應(yīng)，從而達(dá)到預(yù)防甚至治療急性放射性肺炎的目的。
【專利說明】一種用于預(yù)防和治療急性放射性肺炎的藥物
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物藥學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種用于預(yù)防和治療急性放射性肺炎的藥物。
【背景技術(shù)】
[0002]放射性肺炎是肺癌、食管癌等胸部惡性腫瘤患者放療過程中部分肺組織接受一定劑量的電離輻射后由炎性因子介導(dǎo)的急性自發(fā)性免疫樣反應(yīng)，是患者接受放射治療后出現(xiàn)的重要并發(fā)癥。肺是輻射中度敏感器官，放射治療可使腫瘤附近的肺組織因受到的放射劑量超過其發(fā)生生物效應(yīng)的閾值而產(chǎn)生不同程度的肺損傷。[0003]放射性肺炎隨著放療的持續(xù)進(jìn)行，患者白細(xì)胞、紅細(xì)胞出現(xiàn)不同程度血液毒性，出現(xiàn)乏力、惡心、腹瀉、脫發(fā)等現(xiàn)象，治療部位皮膚發(fā)紅、干燥，逐漸形成色素沉著。在放療開始后I個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)急性放射性肺炎癥狀；放射性肺炎晚期可出現(xiàn)咳嗽和肺功能減退等癥狀，常因呼吸道感染而誘發(fā)，甚至導(dǎo)致死亡。放射性肺損傷嚴(yán)重限制了胸部腫瘤放療的劑量，從而直接影響了腫瘤局部控制率、患者的預(yù)后及放療后的生存質(zhì)量，如何降低放射性肺損傷的發(fā)生率，是臨床上亟待解決的問題。
[0004]放射性肺損傷的發(fā)病機(jī)制至今尚沒有被完全認(rèn)識(shí)?，F(xiàn)在一般認(rèn)為放射性肺炎是一種淋巴細(xì)胞性肺泡炎，是肺組織受射線照射后，由組織內(nèi)多種細(xì)胞及細(xì)胞因子共同參與的作用結(jié)果。通過細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞間的信息傳遞和信號(hào)放大，從而啟動(dòng)一系列動(dòng)態(tài)的病理生理過程。
[0005]如上所述，放射性肺炎是一種淋巴細(xì)胞性肺泡炎，肺泡是主要損傷部位，基本病變?yōu)榉纬溲?、水腫、肺間質(zhì)增厚、肺泡間隔內(nèi)血管充血和增厚、肺泡腔萎陷變小，肺泡壁及腔內(nèi)見中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，毛細(xì)血管內(nèi)皮腫脹，動(dòng)脈壁透明變硬。后期肺組織由纖維結(jié)締組織所替代，肺泡腔逐漸萎縮閉合，細(xì)胞數(shù)目減少(參見曹珍山.大鼠胸部受到20GyY線胸放射后肺組織的形態(tài)計(jì)量學(xué)改變[J].中華放射醫(yī)學(xué)與防護(hù)雜志.1996，16 (3).167.)。
[0006]目前認(rèn)為放射性肺炎的發(fā)生與肺泡II型細(xì)胞的損傷和血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷關(guān)系密切。肺放射損傷有四種靶細(xì)胞:肺泡巨噬細(xì)胞，成纖維細(xì)胞，內(nèi)皮細(xì)胞，肺泡II型細(xì)胞。當(dāng)肺II型細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞受照射后誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞釋放促纖維化因子TGF-β 1、H)GF，繼而通過一系列自分泌和旁分泌過程刺激成纖維細(xì)胞增生和合成細(xì)胞基質(zhì)蛋白。TGF-βΙ由血小板、巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等產(chǎn)生，能趨化炎性細(xì)胞及單核巨細(xì)胞，合成釋放H)GF、TNF、IL-U IL-6等細(xì)胞因子，擴(kuò)大生物效應(yīng)；還能促進(jìn)成纖維細(xì)胞趨化，產(chǎn)生膠原和纖維連接蛋白，抑制膠原降解。這些細(xì)胞因子相互制約，相互作用，構(gòu)成復(fù)雜的肺內(nèi)細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)。其中，TGF-β I被認(rèn)為在放射性損傷中發(fā)揮了十分重要的作用，是諸多參與放射性肺損傷因子中頗受關(guān)注的細(xì)胞因子，能夠?qū)⑸镄?yīng)擴(kuò)大，參與放射性肺損傷的發(fā)生與發(fā)展(參考 Franko AJ, Sharplin J, Chahary A, et al.1mmunohistochemical localizationof transforming growth factor beta and tumor necrosis factor alpha in thelungs of fibrosis-prone and ^non-fibrosing’ mice during the latent period andearly phase after irradiation [J].Radiat Res, 1997,147 (2):245-256.)。研究表明，發(fā)生放射性肺損傷患者的血清TGF-β含量也持續(xù)升高(參考Novakova-Jiresova A,Van Gameren MM , Coppes RP, et al.Transforming growth factor-beta plasmadynamics and post-1rradiation lung injury in lung cancer patients [J].RadiotherOncol, 2004, 71 (2):183-189.)，提示血清TGF-β可作為放射性肺損傷的預(yù)測(cè)因子，并且可通過降低血清TGF-β濃度來減輕肺組織的損傷。
[0007]目前治療放射性肺炎的方法有:腎上腺皮質(zhì)激素、抗生素、吸氧和祛痰等對(duì)癥治療。臨床上最常采用腎上腺皮質(zhì)激素聯(lián)合抗生素治療急性放射性肺炎，雖有一定療效但大劑量應(yīng)用激素毒副作用較大，如誘發(fā)二重感染、撤藥綜合征、消化道出血、免疫抑制等，患者往往無法耐受。
[0008]原花青素是迄今為止人類從自然界中發(fā)現(xiàn)的最強(qiáng)有力的天然抗氧化劑之一，具有極強(qiáng)的抗氧化及清除自由基能力活性，以其高效、低毒、高生物利用度而著稱。原花青素清除自由基的能力是VE的50倍、VC的20倍，其作用機(jī)制主要是能夠與自由基交換一個(gè)氫原子或電子，與欲清除的自由基有近似的氧化還原電位，生成的自由基通過離域化而穩(wěn)定。因此原花青素具有超強(qiáng)的延緩衰老和增強(qiáng)免疫力的作用，同時(shí)還具有細(xì)胞保護(hù)、抗動(dòng)脈粥樣硬化、保護(hù)心腦血管系統(tǒng)、預(yù)防白內(nèi)障、抗?jié)?、抗糖尿病、改善免疫抑制、治療視網(wǎng)膜病變、抗腫瘤、抗衰老等一系列優(yōu)良的生物藥理學(xué)作用。近年來，也有相關(guān)采用原花青素在醫(yī)療用途的專利申請(qǐng)，例如，專利CN200510042958.8在制備和治療結(jié)腸炎藥物的新用途，專利CN200910154161.5在治療抗抑郁藥的用途以及專利CN201210502442.7在制備治療糖尿病藥物中的應(yīng)用，但目前尚未見有關(guān)原花青素用于治療急性放射性肺炎的研究報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009]為克服上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種副作用小、治愈率高的用于預(yù)防和治療急性放射性肺炎的藥物。
[0010]為解決以上技術(shù)問題，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案:一種用于預(yù)防和治療急性放射性肺炎的藥物，所述藥物的療效成分為原花青素。
[0011]一種優(yōu)化方案，所述藥物為濃度為2.5-3.75mg/ml的原花青素溶液。
[0012]進(jìn)一步地，所述原花青素溶液包括原花青素和無菌生理鹽水。
[0013]進(jìn)一步地,所述原花青素的純度為95%~99%。
[0014]進(jìn)一步地，所述藥物的服用方式為霧化吸入。
[0015]本發(fā)明采用以上技術(shù)方案后，與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下優(yōu)點(diǎn):經(jīng)過大量動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，原花青素能明顯改善小鼠放射性肺損傷時(shí)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，對(duì)急性放射性肺損傷具有很好的防治和治療效果，是一種較有發(fā)展前途的植物原料藥，即原花青素可用來預(yù)防和治療急性放射性肺炎。
[0016]經(jīng)過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，霧化吸入原花青素可有效實(shí)現(xiàn)肺靶向給藥，在直達(dá)作用部位的同時(shí)還避免產(chǎn)生首過效應(yīng)，減少藥物用量，減輕或避免藥物不良反應(yīng)，從而達(dá)到預(yù)防甚至治療急性放射性肺炎的目的。
[0017]下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明?！緦＠綀D】

【附圖說明】
[0018]圖1是HE染色病理圖片，其中A為第4周空白對(duì)照組，B為第4周時(shí)的模型組，C為第8周時(shí)的模型組，D為第8周時(shí)原花青素組。
[0019]圖2是TGF-B的免疫組化結(jié)果，其中A為空白對(duì)照組，B為模型組，C為原花青素組，D為地塞米松聯(lián)合頭孢氨芐組。
[0020]圖3是IL-6的免疫組化結(jié)果，其中A為空白對(duì)照組，B為模型組，C為原花青素組，D為地塞米松聯(lián)合頭孢氨芐組。
【具體實(shí)施方式】
[0021]下列實(shí)施例中，原花青素為紅棕色粉末，購置于天津市尖峰天然產(chǎn)物有限公司，批號(hào)2000646，純度95%~99% ;下列實(shí)施例中采用活塞式壓縮機(jī)霧化器(PISTON COMPRESSORZEBULIZER CHU CHU TRAIN.MODEL 3008, Manufactured by San Up S.A, made in Argentina)及自制密閉玻璃裝置。
實(shí)施例[0022]1、實(shí)驗(yàn)方法
1.1分組健康雄性SD大鼠64只，體重(200±20)g，由濰坊醫(yī)學(xué)院動(dòng)物研究中心提供，飼養(yǎng)于SPF級(jí)大鼠飼養(yǎng)室，受試前籠養(yǎng)7天以適應(yīng)環(huán)境。于照射前I周將64只SD雄性大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型組、原花青素(治療)組和地塞米松聯(lián)合頭孢氨芐西藥(陽性對(duì)照)組，每組均為16只。
[0023]1.2藥物配制:準(zhǔn)確稱取適量原花青素加入無菌生理鹽水中溶解，攪拌均勻，濃度為2.5-3.75mg/ml的原花青素溶液?，F(xiàn)配現(xiàn)用，避光保存。原花青素組于照射后第I天開始經(jīng)肺吸入原花青素。陽性對(duì)照藥物:地塞米松聯(lián)合頭孢氨芐，地塞米松購于鄭州市卓峰制藥有限公司，產(chǎn)品批號(hào):13010326。頭孢氨芐購于山東淄博新達(dá)制藥有限公司，產(chǎn)品批號(hào):131076。正常成人用量為5 mg/d，按50kg體重計(jì)算，大鼠用藥相當(dāng)于5倍成人有效劑量，0.05mg/100 g,大鼠每100g體重給藥lml,同時(shí)給予頭孢氨節(jié),正常成人用量為Ig / d ,按50kg體重計(jì)算，大鼠給藥相當(dāng)于10倍成人有效劑量，即20mg / 100go按上述規(guī)格給予大鼠霧化吸入，空白對(duì)照組和模型組給予等量生理鹽水代替。
[0024]霧化步驟如下:霧化前，禁食12h，將大鼠置于密閉玻璃裝置內(nèi)，精確稱取原花青素(0.075g/只)，迅速溶解到20ml無菌生理鹽水中，充分?jǐn)嚢杌靹颍B接好霧化裝置，接通電源，打開壓縮機(jī)開關(guān)，觀察噴霧是否均勻，每日一次，待玻璃裝置中藥物完全散去，將大鼠放回。進(jìn)行清潔前，先關(guān)閉壓縮機(jī)開關(guān)，后拔掉電源插頭，自然晾干。。
[0025]1.3造?？瞻讓?duì)照組佯裝照射，其余各組大鼠進(jìn)行急性放射性肺損傷造模。用戊巴比妥鈉0.12ml / 100g腹腔注射麻醉大鼠，使其平躺于照射臺(tái)上。調(diào)整照射野上至大鼠前肢兩腋窩中點(diǎn)連線，下至劍突水平，照射面積4.5cm*4cm,用6MV-X線全胸單次照射，300cGy/min,總劑量為20Gy，于濰坊市濰坊醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院放療科進(jìn)行，照射前加速器室用紫外線照射消毒，照射完畢將大鼠送回動(dòng)物室，繼續(xù)常規(guī)飼養(yǎng)。
[0026]1.4取材分別于照射開始1、4、6、8周末，每組隨機(jī)取4只大鼠腹腔注射2%戊巴比妥鈉0.12 ml / 100g，將大鼠麻醉后，作氣管插管，行支氣管肺泡灌洗。支氣管肺泡灌洗液(BALF, Bronchoalveolar lavage fluid,直接取自肺泡，能夠比較直接地反映肺實(shí)質(zhì)的變化，因而是放射性肺損傷研究的重要手段之一)。檢測(cè)支氣管肺泡灌洗液中白細(xì)胞、TGF-β UIL-6的含量。經(jīng)腹主動(dòng)脈取血Iml和4ml，分別用作血常規(guī)和血清細(xì)胞因子檢測(cè)。后者4°C，4000r/min離心，取上清液，-20°C保存，用于檢測(cè)細(xì)胞因子。分別取右肺中葉置于甲醛溶液中，固定24h，常規(guī)石蠟包埋、切片，HE染色，光鏡觀察病理改變。用免疫組化法檢測(cè)肺組織TGF-β UIL-6的表達(dá)。TGF-β 1、IL_6的檢測(cè)按照ELISA檢測(cè)試劑盒說明書進(jìn)行。選取右肺下葉組織，切取3塊組織大小為0.lcm*0.lcm*0.1cm，戊二醛固定，制成電鏡超薄切片，透視鏡觀察組織超微結(jié)構(gòu)改變。
[0027]1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。常規(guī)進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)、正態(tài)性檢驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果以均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差(? 土 s)表示，P < 0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
[0028]2、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.1 一般情況空白對(duì)照組:大鼠皮毛細(xì)密光滑，行為活躍，飲食如常，無呼吸急促。全胸照射I周后，大鼠開始出現(xiàn)拱背、豎毛和活動(dòng)減少等癥狀，其中，模型組:后頸背部毛發(fā)稀疏出現(xiàn)掉毛現(xiàn)象，地塞米松聯(lián)合頭孢氨芐組發(fā)現(xiàn)拱背、豎毛及活動(dòng)減少現(xiàn)象。照射后2-4周，原花青素組:皮毛細(xì)密和光滑程度較模型組有所改善，其余各照射組均相繼出現(xiàn)胸背部脫毛現(xiàn)象，攝食及活動(dòng)相對(duì)較少，在實(shí)驗(yàn)觀察期間發(fā)生非取材死亡現(xiàn)象，解剖時(shí)發(fā)現(xiàn)雙肺充血、腫脹明顯，全 肺呈現(xiàn)暗紅色并有少量胸腔積液。
[0029]2.2肺組織外觀形態(tài)空白對(duì)照:肺組織呈粉紅色，表面紅潤(rùn)、光滑。照射后4周發(fā)現(xiàn)，模型組:部分肺組織呈現(xiàn)暗紅色，與正常肺組織對(duì)比，整個(gè)肺臟可見明顯出血、充血水腫，胸腔可見淡黃色液體。原花青素組較地塞米松聯(lián)合頭孢氨芐組差異不大，較模型組改善明顯。
[0030]2.3血常規(guī)結(jié)果顯示:
模型組血液中白細(xì)胞、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯低于其它三組，而治療組差異不大。而BALF中白細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著升高，紅細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯低于其他三組，而治療組差異不大，見表1-4。
[0031]表1放射性損傷對(duì)不同時(shí)期大鼠血液中白細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響(X109/L)(%，? 土S)
【權(quán)利要求】
1.一種用于預(yù)防和治療急性放射性肺炎的藥物，其特征在于:所述藥物的療效成分為原花青素。
2.如權(quán)利要求1所述的一種用于預(yù)防和治療急性放射性肺炎的藥物，其特征在于:所述藥物為濃度為2.5-3.75mg/ml的原花青素溶液。
3.如權(quán)利要求2所述的一種用于預(yù)防和治療急性放射性肺炎的藥物，其特征在于:所述原花青素溶液包括原花青素和無菌生理鹽水。
4.如權(quán)利要求1，2或3所述之一的一種用于預(yù)防和治療急性放射性肺炎的藥物，其特征在于:所述原花青素的純度為95%~99%。
5.如權(quán)利要求1所述的一種用于預(yù)防和治療急性放射性肺炎的藥物，其特征在于:所述藥物的服用方式為 霧化吸入。
【文檔編號(hào)】A61K31/353GK103933028SQ201410146569
【公開日】2014年7月23日 申請(qǐng)日期:2014年4月14日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月14日
【發(fā)明者】張維芬, 馮占芹, 黃雪萍, 鄭增娟 申請(qǐng)人:張維芬