一種抗腫瘤中藥復(fù)方制劑及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種抗腫瘤中藥復(fù)方制劑及其制備方法和應(yīng)用，所述的中藥組合物包括下列重量份的原料藥：夏枯草10～40份、生牡蠣30～120份、生地10～40份、蒼術(shù)10～20份、白術(shù)10～20份、莪術(shù)10～40份，還可包括常規(guī)藥用輔料，可制備為湯劑、膠囊劑、顆粒劑、片劑或合劑。本發(fā)明的中藥組合物配伍精當(dāng)，具有扶正祛邪、攻補(bǔ)兼施、化痰軟堅(jiān)等功效，治療肺癌、甲狀腺癌、肝癌等腫瘤效果顯著，且由純中藥制成，無毒副作用，藥味數(shù)少，便于制備，原材料豐富易得，成本低。
【專利說明】一種抗腫瘤中藥復(fù)方制劑及其制備方法和應(yīng)用
[0001]【【技術(shù)領(lǐng)域】】
本發(fā)明涉及中藥組合物【技術(shù)領(lǐng)域】，具體地說，涉及一種抗腫瘤中藥復(fù)方制劑及其制備方法和應(yīng)用。
[0002]【【背景技術(shù)】】
惡性腫瘤又稱癌癥，已成為威脅人類生命的常見病、多發(fā)病，為我國(guó)城市人口死亡十大病因之首。據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)報(bào)告，全世界癌癥的發(fā)病率正以每年3%的速度遞增，每年因癌癥而死亡人數(shù)高達(dá)600多萬人。因此，加強(qiáng)惡性腫瘤治療的研究，提高現(xiàn)有各種手段的治療效果，探索新的治療途徑，改善癌癥患者的生活質(zhì)量，減少?gòu)?fù)發(fā)率，降低死亡率，是目前臨床腫瘤工作者的當(dāng)務(wù)之急。
[0003]目前西醫(yī)治療方法主要有手術(shù)切除、放射療法、化學(xué)療法、免疫療法等。手術(shù)治療把腫瘤整體切除，仍是治療腫瘤的主要手段，但只適合于早中期腫瘤患者，對(duì)晚期和轉(zhuǎn)移腫瘤則無能為力；放射治療是腫瘤治療的第二種主要手段，殺傷局部腫瘤細(xì)胞，特別是對(duì)放射敏感的腫瘤是首選的治療方法，并用于腫瘤骨轉(zhuǎn)移止痛療法，但其不良反應(yīng)也明顯，甚至達(dá)到不能忍受而停止；化學(xué)治療亦是腫瘤治療的重要手段，具有全身作用，對(duì)許多腫瘤有一定療效，能明顯縮小腫瘤，預(yù)防復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移，但化療在殺傷癌細(xì)胞的同時(shí)對(duì)正常組織細(xì)胞也有一定的損傷，且其不良反應(yīng)明顯；免疫方法為腫瘤治療開辟了一條新途徑，但該方法比較局限，目前還只適用于經(jīng)過其他治療方法后殘存的腫瘤，或某些與免疫有關(guān)的腫瘤?？梢?，西醫(yī)治療腫瘤主要是“對(duì)抗療法”，選法得當(dāng)具有一定的作用，但也給人體帶來了傷害。
[0004]中醫(yī)認(rèn)為惡性腫瘤是表現(xiàn)于局部的全身性疾病，它的發(fā)生、發(fā)展、復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移是不同機(jī)體病證在其局部的反應(yīng)，其形成和轉(zhuǎn)化是一個(gè)緩慢、漸進(jìn)的過程。中醫(yī)既注意消除外在的致病因素，更重視調(diào)動(dòng)和提高人體自身的抗癌機(jī)能，即調(diào)整內(nèi)環(huán)境，此外還特別強(qiáng)調(diào)情志在防治癌癥中的作用?？梢姡嗅t(yī)對(duì)癌癥已有相當(dāng)?shù)恼J(rèn)識(shí)，除做了較為細(xì)致的臨床觀察外，還積累了很多治療方藥。因此，從傳統(tǒng)中醫(yī)藥中尋找和開發(fā)組方精煉、療效確切、安全有效的新中藥制劑對(duì)于腫瘤的防治具有重要的臨床和科學(xué)價(jià)值。
[0005]中國(guó)專利文獻(xiàn)CN201310008555.6，
【公開日】2013.01.10，公開了一種具有抗腫瘤作用的中藥組合物及其制備方法和應(yīng)用，該中藥組合物由下列重量份數(shù)的原料組成:半枝蓮15~30份、白花蛇舌草15~30份、冬凌草15~30份、苦參3~15份、莪術(shù)5~15份、炒牛蒡子5~15份、紅參5~15份、黃芪5~30份、白術(shù)6~12份、茯苓10-?5份、白芍6~15份、當(dāng)歸5~15份、炙甘草3~20份。
[0006]中國(guó)專利文獻(xiàn)CN201310391313.X，
【公開日】2014.02.12，公開了一種用于消除腫瘤的中藥組合物，由以下重量配比的原料配伍組成:云苓50份、文術(shù)35份、內(nèi)金30份、三棱草30份、大貝35份、貓爪草35份、桂枝35份、郁金30份、砂仁6份、人參25份、無花果50份、甘草9份、三七35份、建梅35份、炒小茴香30份、炮山甲25份、牙皂12份、腫節(jié)風(fēng)12份、血竭9份、全蝎12份、丹皮酌.9份。
[0007]但是上述治療腫瘤的中藥存在藥味數(shù)較多、不便于制備、成本較高、療效有限的缺陷，因此亟需提供一種藥味數(shù)較少、便于制備、原材料豐富易得且抗腫瘤效果明顯的中藥組合物。
[0008]【
【發(fā)明內(nèi)容】
】
本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供一種抗腫瘤中藥組合物。
[0009]本發(fā)明的再一的目的是，提供所述的抗腫瘤中藥組合物的制備方法。
[0010]本發(fā)明的另一的目的是，提供所述的抗腫瘤中藥組合物的用途。
[0011]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案是:
一種抗腫瘤中藥組合物，它包括下列重量份的原料藥:夏枯草10~40份、生牡蠣30~120份、生地10~40份、蒼術(shù)10~20份、白術(shù)10~20份、莪術(shù)10~40份。
[0012]所述的中藥組合物包括下列重量份的原料藥:夏枯草20~30份、生牡蠣60~90份、生地20~30份、蒼術(shù)15~20份、白術(shù)15~20份、莪術(shù)20~30份。[0013]所述的中藥組合物包括下列重量份的原料藥:夏枯草25份、生牡蠣75份、生地25份、蒼術(shù)15份、白術(shù)15份、莪術(shù)25份。
[0014]所述的中藥組合物還包括常規(guī)藥用輔料。
[0015]所述的中藥組合物的藥劑是湯劑、膠囊劑、顆粒劑、片劑或合劑。
[0016]為實(shí)現(xiàn)上述第二個(gè)目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案是:
一種抗腫瘤中藥組合物的制備方法，包括以下步驟:
(O中藥提取:按如上所述的重量份配比取蒼術(shù)、白術(shù)及莪術(shù)，適當(dāng)粉碎后置提取容器中，加入3味藥材總重量6~10倍量的蒸餾水，采用水蒸氣蒸餾法回流提取4~8小時(shí)，收集揮發(fā)油；然后將已經(jīng)過適當(dāng)粉碎處理的夏枯草、牡蠣、生地加入上述提取容器中，再加入該3味藥材總重量6~10倍量的蒸餾水，攪拌均勻；煎煮2~3次，每次加水量均為藥材總重量的6~10倍，每次0.5~1.5小時(shí)，合并煎煮液，濃縮，干燥，稱重；
(2)揮發(fā)油包合物制備:取相當(dāng)于揮發(fā)油重量6~10倍量的羥丙基-β-環(huán)糊精或β -環(huán)糊精，加入適量蒸餾水，在40~60°C下配制成飽和水溶液，不斷攪拌下緩慢加入揮發(fā)油的無水乙醇稀釋液，攪拌I~3小時(shí)，放置于2~8°C冰箱12~24小時(shí)，取出抽濾，用30~60°C石油醚洗滌沉淀，干燥，稱重；
(3)取浸膏、揮發(fā)油包合物，加入常規(guī)藥用輔料，制備成膠囊劑、顆粒劑、片劑或合劑。
[0017]為實(shí)現(xiàn)上述第三個(gè)目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案是:
如上任一所述的抗腫瘤中藥組合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
[0018]所述的腫瘤是肺癌、甲狀腺癌或肝癌。
[0019]本發(fā)明的中藥組合物作用機(jī)理為:夏枯草辛苦寒，質(zhì)輕入肝，為清肝火、散郁熱升藥；牡蠣咸澀微寒，質(zhì)重入肝，為斂陰潛陽降藥。兩藥同用，功擅斂陰不致郁結(jié)，升散不耗陰液，有升降既濟(jì)、除邪匡正之妙，共奏平肝潛陽、化痰軟堅(jiān)散結(jié)之效。白術(shù)苦甘溫，《珍珠囊》載〃除濕益氣，和中補(bǔ)陽〃；莪術(shù)苦辛溫，能破血消瘀，消積止痛，《圖經(jīng)本草》載〃治積聚諸氣，為最要之藥〃。兩藥同用，既理氣又補(bǔ)氣，既破血又利濕，具有攻補(bǔ)兼施、通補(bǔ)結(jié)合、扶正祛邪之效。生地甘寒，有滋陰涼血之功，為滋補(bǔ)腎陰要藥；蒼術(shù)苦溫，有燥濕健脾，祛風(fēng)濕之力，《用藥法象》載〃除濕發(fā)汗，健胃安脾，治痿要藥"。兩藥同用，功擅滋陰燥濕，有滋陰不礙濕，燥濕不傷陰之優(yōu)。以上諸藥合用具有扶正祛邪、攻補(bǔ)兼施、化痰軟堅(jiān)等功效，所以對(duì)肺癌、甲狀腺癌、肝癌等腫瘤能起到很好的治療作用。
[0020]本發(fā)明優(yōu)點(diǎn)在于:1、本發(fā)明的中藥組合物配伍精當(dāng)，具有扶正祛邪、攻補(bǔ)兼施、化痰軟堅(jiān)等功效，治療肺癌、甲狀腺癌、肝癌等腫瘤效果顯著；
2、藥味數(shù)少，便于制備，原材料豐富易得，成本低，適于推廣；
3、由純中藥制成，無毒副作用，易于被患者接受。
[0021]【【具體實(shí)施方式】】
下面對(duì)本發(fā)明提供的【具體實(shí)施方式】作詳細(xì)說明。
[0022]實(shí)施例1本發(fā)明中藥組合物湯劑的制備(一)
夏枯草25份、生牡蠣75份、生地25份、蒼術(shù)15份、白術(shù)15份、莪術(shù)25份，常規(guī)方法煎煮。
[0023]實(shí)施例2本發(fā)明中藥組合物湯劑的制備(二)
夏枯草10份、生牡販120份、生地10份、蒼術(shù)20份、白術(shù)10份、莪術(shù)40份,常規(guī)方法煎煮。
[0024]實(shí)施例3本發(fā)明中藥 組合物湯劑的制備(三)
夏枯草40份、生牡販30份、生地40份、蒼術(shù)10份、白術(shù)20份、莪術(shù)10份，常規(guī)方法如煮。
[0025]實(shí)施例4本發(fā)明中藥組合物湯劑的制備(四)
夏枯草10份、生牡販30份、生地40份、蒼術(shù)20份、白術(shù)10份、莪術(shù)10份，常規(guī)方法如煮。
[0026]實(shí)施例5本發(fā)明中藥組合物湯劑的制備(五)
夏枯草40份、生牡販120份、生地10份、蒼術(shù)10份、白術(shù)20份、莪術(shù)40份,常規(guī)方法煎煮。
[0027]實(shí)施例6本發(fā)明中藥組合物湯劑的制備(六)
夏枯草20份、生牡蠣90份、生地20份、蒼術(shù)20份、白術(shù)15份、莪術(shù)30份，常規(guī)方法煎煮。
[0028]實(shí)施例7本發(fā)明中藥組合物湯劑的制備(七)
夏枯草30份、生牡蠣60份、生地30份、蒼術(shù)15份、白術(shù)20份、莪術(shù)20份，常規(guī)方法煎煮。
[0029]實(shí)施例8本發(fā)明中藥組合物湯劑的制備(八)
夏枯草10份、生牡販30份、生地10份、蒼術(shù)20份、白術(shù)20份、莪術(shù)10份，常規(guī)方法如煮。
[0030]需要說明的是，實(shí)施例1-8所述的常規(guī)方法煎煮是中藥湯劑常規(guī)的制作方法，SP將所述的原料藥加水煎煮成湯劑。
[0031]實(shí)施例9本發(fā)明中藥組合物膠囊劑/顆粒劑/合劑/片劑的制備
(4)中藥提取:按實(shí)施例1-8任一所述的重量配比取蒼術(shù)、白術(shù)及莪術(shù)，適當(dāng)粉碎后置提取容器中，加入3味藥材總重量6~10倍量的蒸餾水，采用水蒸氣蒸餾法回流提取4~8小時(shí)，收集揮發(fā)油；然后將已經(jīng)過適當(dāng)粉碎處理的夏枯草、牡蠣、生地按比例加入上述提取容器中，再加入該3味藥材總重量6~10倍量的蒸餾水，攪拌均勻；煎煮2~3次，每次加水量均為藥材總重量的6~10倍，每次0.5~1.5小時(shí)，合并煎煮液，濃縮，干燥，稱重。
[0032](5)揮發(fā)油包合物制備:取相當(dāng)于揮發(fā)油重量6~10倍量的羥丙基-環(huán)糊精或β -環(huán)糊精，加入適量蒸餾水，在40~60°C下配制成飽和水溶液，不斷攪拌下緩慢加入揮發(fā)油的無水乙醇稀釋液，攪拌時(shí)間I~3小時(shí)，放置4°C冰箱24小時(shí)，抽濾，用石油醚(30~600C )洗滌3次沉淀，40°C干燥，稱重。
[0033](6)顆粒劑制備:取浸膏粉碎，加入揮發(fā)油包合物及糊精、蔗糖等常用輔料，充分混合均勻，直接分裝；或加乙醇適量制軟材，干燥，整粒，分裝，即得。
[0034](7)膠囊劑制備:取浸膏粉碎，加入揮發(fā)油包合物及乳糖、硬脂酸鎂等常用輔料，充分混合均勻，直接分裝；或加乙醇適量制軟材，干燥，整粒，分裝，即得。
[0035](8)合劑制備:取干浸膏、揮發(fā)油包合物，加入適量蒸餾水，在40~60°C下攪拌
0.5~I小時(shí)，加入防腐劑羥苯乙酯或苯甲酸鈉的乙醇溶液適量，分裝，即得。
[0036](9)片劑制備:取浸膏粉碎，加入揮發(fā)油包合物及乳糖、硬脂酸鎂等常用輔料，粉碎制粒，壓制成片劑。
[0037]實(shí)施例10本發(fā)明中藥組合物治療肺癌的臨床實(shí)驗(yàn)
采用隨機(jī)對(duì)照單盲試驗(yàn)研究了本發(fā)明中藥組合物的湯劑和顆粒劑配合介入化療治療晚期肺癌的有效性和安全性。
[0038]1、一般資 料 1.1病例分布
本試驗(yàn)共入組195例，其中試驗(yàn)組一入組65例，完成61例，脫落2例，剔除2例；試驗(yàn)組二入組65例，完成60例，脫落4例，剔除I例；對(duì)照組入組65例，完成60例，脫落4例，剔除I例。
[0039]1.2診斷標(biāo)準(zhǔn)
中醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn):肺癌診斷及證候標(biāo)準(zhǔn)參照2008年12月I日中華中醫(yī)藥協(xié)會(huì)發(fā)布實(shí)施的《中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)——腫瘤中醫(yī)診療指南》ZYYXH/T142-2008肺癌章節(jié)。主癥:咳嗽、胸悶癥狀、咳血、咳痰、胸痛等；次癥:貧血、消瘦、發(fā)熱、乏力等。
[0040]西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn):有明確病理診斷者。
[0041]1.3入選標(biāo)準(zhǔn)
符合以上診斷標(biāo)準(zhǔn)；年齡:18~80歲；體能狀態(tài)卡氏評(píng)分> 70分；預(yù)計(jì)生存期大于3個(gè)月；根據(jù)RECIST標(biāo)準(zhǔn)，至少有一個(gè)可測(cè)量病灶，即可精確測(cè)量至少I條直徑的病灶，且其最長(zhǎng)徑用傳統(tǒng)技術(shù)檢查≥20mm或螺旋CT檢查≥IOmm ;造血功能及心、肝、腎功能正常，血紅蛋白≥90g/L，ANC ^ 2.0 X 109/L，血小板≥100X 109/L，總膽紅素≤1.5X正常值上限，ASAT / ALAT≤2.5 X正常值上限，AKP≤5.0 X正常值上限，肝轉(zhuǎn)移者ASAT/ALAT ( 5 X正常值上；初始影像學(xué)檢查應(yīng)在首次用藥前14天內(nèi)完成，初始臨床評(píng)估和生化檢查在首次用藥前7天內(nèi)完成，包括血常規(guī)、肝腎功能、CEA、CA199、ECG和初始影像學(xué)檢查；患者知情同意并愿接受隨訪。
[0042]1.4排除標(biāo)準(zhǔn)
對(duì)紫杉類、鉬類或氟尿嘧啶類制劑有過敏史者；既往接受過紫杉類、鉬類制劑化療者；腫瘤過大:胸腔內(nèi)者> 10cm，肝轉(zhuǎn)移占肝總面積>50%，肺轉(zhuǎn)移>25% ;只有體腔積液(如胸，腹水)，無具體可測(cè)病灶；有嚴(yán)重并發(fā)癥，如活動(dòng)性消化道大出血、胃腸穿孔、梗阻、黃疸、非癌性發(fā)熱>38°C ;孕期或哺乳期病人，以及未采取合適避孕措施的育齡病人(男/女);已知有腦或軟腦膜轉(zhuǎn)移的患者；其它嚴(yán)重疾病或狀況:冠心病及心電圖異常者，進(jìn)入研究前6個(gè)月之內(nèi)的心肌梗塞，重要的神經(jīng)或精神病史(包括癡呆或癲癇)，活動(dòng)性的、未控制的感染，活動(dòng)性的播散性血管內(nèi)凝血；同時(shí)或在4周內(nèi)用過其它任何抗癌試驗(yàn)藥物；同時(shí)進(jìn)行其它抗癌治療(必要的骨轉(zhuǎn)移外放射治療例外)。
[0043]1.5可比性分析
治療前除中醫(yī)單項(xiàng)癥狀氣短外，各組在年齡、體重、性別、婚姻、民族、病程、過敏史、治療史、疾病史、體檢、生命體征及中醫(yī)癥狀總分、中醫(yī)癥狀各指標(biāo)及總積分、心電圖、胸部X光片等均具可比性(p>0.05)。
[0044]1.6依從性分析
除脫落、剔除病例外，各組病例依從性均較好；兩兩組間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
[0045]2、治療方法
對(duì)照組僅給予GP方案動(dòng)脈灌注化療(即吉西他濱1000mg/m2，動(dòng)脈灌注，第I天；順鉬40mg/m2,動(dòng)脈灌注，第I天);試驗(yàn)組一在給予GP方案動(dòng)脈灌注化療的基礎(chǔ)上，再給予實(shí)施例1制備的湯劑，服藥量為180g生藥/天，分三次服用，療程8周。試驗(yàn)組二在給予GP方案動(dòng)脈灌注化療的基礎(chǔ)上，再給予按照以下方法制備的顆粒劑(①顆粒劑組方:夏枯草300g，生牡蠣600g，莪術(shù)300g，白術(shù)150g，蒼術(shù)150g，生地300g，羥丙基-β -環(huán)糊精60g，糊精、蔗糖及無水乙醇適量。②顆粒劑制備工藝:按組方取蒼術(shù)、白術(shù)及莪術(shù)，適當(dāng)粉碎后置提取容器中，加入3600g蒸餾水，采用水蒸氣蒸餾法回流提取6小時(shí)，收集揮發(fā)油，揮發(fā)油得率約
1.2% ;然后將已經(jīng)過適當(dāng)粉碎處理的夏枯草、生牡蠣、生地按組方加入上述提取容器中，再加入7200g的蒸餾水，攪拌均勻，煎煮2次，每次加水量均為藥材總重量的6倍，每次I小時(shí)，合并煎煮液，濃縮，干燥，浸膏得率約16% ;取羥丙基-β -環(huán)糊精，加入適量蒸餾水，在40°C下配制成飽和水溶液，不斷攪拌下緩慢加入揮發(fā)油的無水乙醇稀釋液，攪拌時(shí)間3小時(shí)，放置4°C冰箱24小時(shí)，抽濾，用石油醚(30~60°C)洗滌3次沉淀，40°C干燥，即得揮發(fā)油包合物；取干浸膏粉碎，加入揮發(fā)油包合物及糊精、蔗糖等常用輔料，充分混合均勻，直接分裝，每袋20g，共制得30袋。)，每日3次，每次I袋，療程8周。
[0046]3、療效觀察和安全性分析
3.1療效觀察
療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn):完全有效(CR)，所有病灶完全消失，無新發(fā)病灶；部分有效(PR)，可測(cè)量病灶LD的總和縮小至30%以上，無新發(fā)病灶；疾病穩(wěn)定(SD)，未達(dá)到PR(縮小至30%)又未增大到HX>20%)的標(biāo)準(zhǔn)，無新發(fā)病灶；疾病進(jìn)展(PD)，病灶LD總和至少增大20%以上，或出現(xiàn)一個(gè)或一個(gè)以上的新發(fā)病灶；對(duì)于評(píng)定為CR、PR者，不少于4周后進(jìn)行病灶測(cè)量變化的確認(rèn)，方法與判效時(shí)相同，未確認(rèn)者不能認(rèn)作有效病例，應(yīng)予剔除。有效率=[(CR+PR) /η] X 100%,臨床受益率=[(CR+PR+SD) /η] X 100%。
[0047]中醫(yī)癥狀評(píng)分標(biāo)準(zhǔn):根據(jù)中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)一腫瘤中醫(yī)診療指南，肺癌中醫(yī)癥狀包括咳嗽、咳痰、胸悶、胸痛、乏力、消瘦、貧血等，每項(xiàng)癥狀按嚴(yán)重程度打分，分值范圍O~6分。
[0048]3.2安全性分析
所有病例每個(gè)周期治療前后均檢查血常規(guī)及肝、腎功能，問詢患者有無不良反應(yīng)。安全性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn):1級(jí)，安全，無任何不良反應(yīng)；2級(jí)，比較安全,如有不良反應(yīng),不需做任何處理可繼續(xù)給藥；3級(jí)，有安全性問題，有中等程度的不良反應(yīng)，做處理后可繼續(xù)給藥；4級(jí)，因不良反應(yīng)中止試驗(yàn)。
[0049]4、療效分析
4.1近期療效分析
治療兩個(gè)周期后評(píng)價(jià)療效，試驗(yàn)組一有效率為24.1%，臨床收益率為58.0%(N = 61)；試驗(yàn)組二有效率為25.0%，臨床收益率為58.3% (N = 60);對(duì)照組顯效率為23.3%，臨床收益率為58.2% (N = 60);試驗(yàn)組與對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
[0050]4.2中醫(yī)證侯療效分析
治療56天后，試驗(yàn)組一顯效率為36.5%，總有效率80.5% (N = 61);試驗(yàn)組二顯效率為36.7%，總有效率82.1% (N = 60);對(duì)照組顯效率為35.0%，總有效率為75% (N = 60)；試驗(yàn)組與對(duì)照組綜合比較，顯效率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);總有效率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Ρ〈0.05)。
[0051 ] 4.3中醫(yī)癥狀總分變化值分析
治療56天后，中醫(yī)癥狀總分試驗(yàn)組一下降80 (N = 61);試驗(yàn)組二下降82 (N = 60)；對(duì)照組下降75 (N = 60);兩組下降幅度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Ρ〈0.05)，試驗(yàn)組下降幅度大于對(duì)照組。
[0052]4.4生存率分析
試驗(yàn)組一 I年生存率為35%，試驗(yàn)組二 I年生存率為36%，對(duì)照組為20%，表明試驗(yàn)組較對(duì)照組有延長(zhǎng)I年生存期的趨勢(shì)，但兩者之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(Ρ>0.05)。
[0053]4.5安全性分析
治療28天后，試驗(yàn)組一試驗(yàn)期間共發(fā)生O件不良事件，不良事件發(fā)生率為0%，I例屬于不良反應(yīng)，不良反應(yīng)發(fā)生率為1.67% ;試驗(yàn)組二試驗(yàn)期間共發(fā)生O件不良事件，不良事件發(fā)生率為0%，I例屬于不良反應(yīng)，不良反應(yīng)發(fā)生率為1.67% ;對(duì)照組I例，不良反應(yīng)發(fā)生率為1.67%，不良事件和不良反應(yīng)發(fā)生率兩組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Ρ>0.05)。
[0054]實(shí)施例11本發(fā)明中藥組合物對(duì)人甲狀腺癌細(xì)胞系SW579的增殖抑制作用
(O藥物溶液配制:取實(shí)施例7制備的湯劑，過濾除渣，濾液濃度調(diào)整為相當(dāng)于藥材量lg/ml，經(jīng)120°C 30分鐘高壓滅菌后，用0.22 μ m微孔濾膜過濾，使用時(shí)用DMEM培養(yǎng)液(美國(guó)Gbico公司)稀釋至所需濃度。
[0055](2)人甲狀腺癌細(xì)胞系SW579的培養(yǎng):SW579細(xì)胞系購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院上海細(xì)胞所，并按其提供的方法進(jìn)行培養(yǎng)。
[0056](3)MTT測(cè)定細(xì)胞存活率:取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，傾出其培養(yǎng)液，用PBS (pH7.40磷酸鹽緩沖液)洗細(xì)胞3次，加適量的胰蛋白酶消化并細(xì)胞計(jì)數(shù)后，將細(xì)胞按6 X IO3/孔加入96孔培養(yǎng)板。按藥物濃度分6組(2、20、40、80、200和400mg/ml)，同時(shí)設(shè)①陰性對(duì)照組(培養(yǎng)液中只有細(xì)胞，無藥物)，②空白對(duì)照組(培養(yǎng)液中只有藥物，無細(xì)胞)，③中藥對(duì)照組:夏枯草30份、生牡蠣60份、生地30份、蒼術(shù)15份、白術(shù)20份，制備湯劑，過濾除渣，濾液濃度調(diào)整為相當(dāng)于藥材量l g/ml，經(jīng)120°C 30分鐘高壓滅菌后，用0.22 μ m微孔濾膜過濾，使用時(shí)用DMEM培養(yǎng)液(美國(guó)Gbico公司)稀釋至所需濃度(2、20、40、80、200和400mg/ml)。每組設(shè)5個(gè)復(fù)孔。細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)24小時(shí)后，將培養(yǎng)液換成含不同濃度藥物的培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)48小時(shí)；然后取出培養(yǎng)板，每孔加入MTT (四甲基偶氮唑鹽)溶液(5g/L)20l.! 1，再繼續(xù)培養(yǎng)4小時(shí)，小心吸出培養(yǎng)液，每孔加入150 μ I 二甲亞砜，振蕩10分鐘，使沉淀完全溶解，用酶標(biāo)儀在490nm波長(zhǎng)下測(cè)定光密度，計(jì)算腫瘤細(xì)胞存活率。計(jì)算公式為:細(xì)胞存活率=[(實(shí)驗(yàn)組光密度值-空白組光密度值)/ (陰性對(duì)照組光密度值-空白組光密度值)]X 100%。
[0057]結(jié)果表明，實(shí)施例7湯劑的濾液能抑制甲狀腺癌細(xì)胞SW579的生長(zhǎng)，其IC50(半數(shù)抑制濃度)為42mg/ml，中藥對(duì)照組的中藥IC50為185mg/ml。
[0058]實(shí)施例12本發(fā)明中藥組合物對(duì)人肝癌細(xì)胞株H印G2的增殖抑制作用
(O藥物溶液配制:取實(shí)施例8制備的湯劑，過濾除渣，濾液濃度調(diào)整為相當(dāng)于藥材量lg/ml，經(jīng)120°C 30分鐘高壓滅菌后，用0.22 μ m微孔濾膜過濾，使用時(shí)用1640培養(yǎng)液(美國(guó)Gbico公司)稀釋至所需濃度。
[0059](2)人肝癌細(xì)胞株H印G2的培養(yǎng):!fepG2細(xì)胞株購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院上海細(xì)胞所，并按其提供的方法進(jìn)行培養(yǎng)。
[0060](3)MTT測(cè)定細(xì)胞存活率:取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，傾出其培養(yǎng)液，用PBS (pH7.40磷酸鹽緩沖液)洗細(xì)胞3次，加適量的胰蛋白酶消化并細(xì)胞計(jì)數(shù)后，將細(xì)胞按5 X IO3/孔加入96孔培養(yǎng)板。按藥物濃度分6組(2、20、40、80、200和400mg/ml)，同時(shí)設(shè)①陰性對(duì)照組(培養(yǎng)液中只有細(xì)胞，無藥物)，②空白對(duì)照組(培養(yǎng)液中只有藥物，無細(xì)胞)，③中藥對(duì)照組:夏枯草10份、生牡蠣30份、蒼術(shù)20份、白術(shù)20份、莪術(shù)10份，制備湯劑，過濾除渣，濾液濃度調(diào)整為相當(dāng)于藥材量lg/ml，經(jīng)120°C 30分鐘高壓滅菌后，用0.22 μ m微孔濾膜過濾，使用時(shí)用1640培養(yǎng)液(美國(guó)Gbico公司)稀釋至所需濃度(2、20、40、80、200和400mg/ml)。每組設(shè)5個(gè)復(fù)孔。細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)24小時(shí)后，將培養(yǎng)液換成含不同濃度藥物的培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)48小時(shí)；然后取出培 養(yǎng)板，每孔加入MTT (四氮唑溴鹽)溶液(5g/L)10l.! 1，再繼續(xù)培養(yǎng)4小時(shí)，小心吸出培養(yǎng)液，每孔加入100μ I 二甲亞砜，振蕩10分鐘，使沉淀完全溶解，用酶標(biāo)儀在490nm波長(zhǎng)下測(cè)定光密度，計(jì)算腫瘤細(xì)胞存活率。計(jì)算公式為:細(xì)胞存活率=[(實(shí)驗(yàn)組光密度值-空白組光密度值)/ (陰性對(duì)照組光密度值-空白組光密度值)]X 100%。
[0061]結(jié)果表明，實(shí)施例8湯劑的濾液能抑制肝癌細(xì)胞HepG2的生長(zhǎng)，其IC50(半數(shù)抑制濃度)為50mg/ml，中藥對(duì)照組的中藥IC50為154mg/ml。
[0062]以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本【技術(shù)領(lǐng)域】的普通技術(shù)人員，在不脫離本發(fā)明方法的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和補(bǔ)充，這些改進(jìn)和補(bǔ)充也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【權(quán)利要求】
1.一種抗腫瘤中藥組合物，其特征在于，它包括下列重量份的原料藥:夏枯草10~40份、生牡蠣30~120份、生地10~40份、蒼術(shù)10~20份、白術(shù)10~20份、莪術(shù)10~40份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗腫瘤中藥組合物，其特征在于，它包括下列重量份的原料藥:夏枯草20~30份、生牡蠣60~90份、生地20~30份、蒼術(shù)15~20份、白術(shù)15~20份、莪術(shù)20~30份。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的抗腫瘤中藥組合物，其特征在于，它包括下列重量份的原料藥:夏枯草25份、生牡蠣75份、生地25份、蒼術(shù)15份、白術(shù)15份、莪術(shù)25份。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗腫瘤中藥組合物，其特征在于，它還包括常規(guī)藥用輔料。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗腫瘤中藥組合物，其特征在于，所述的中藥組合物的藥劑是湯劑、膠囊劑、顆粒劑、片劑或合劑。
6.一種抗腫瘤中藥組合物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟: 中藥提取:按權(quán)利要求1所述的重量份配比取蒼術(shù)、白術(shù)及莪術(shù)，適當(dāng)粉碎后置提取容器中，加入3味藥材總重量6~10倍量的蒸餾水，采用水蒸氣蒸餾法回流提取4~8小時(shí)，收集揮發(fā)油；然后將已經(jīng)過適當(dāng)粉碎處理的夏枯草、牡蠣、生地加入上述提取容器中，再加入該3味藥材總重量6 ~10倍量的蒸餾水，攪拌均勻；煎煮2~3次，每次加水量均為藥材總重量的6~10倍，每次0.5~1.5小時(shí)，合并煎煮液，濃縮，干燥，稱重； 揮發(fā)油包合物制備:取相當(dāng)于揮發(fā)油重量6~10倍量的羥丙基-β -環(huán)糊精或β -環(huán)糊精，加入適量蒸餾水，在40~60°C下配制成飽和水溶液，不斷攪拌下緩慢加入揮發(fā)油的無水乙醇稀釋液，攪拌I~3小時(shí)，放置于2~8°C冰箱12~24小時(shí)，取出抽濾，用30~60°C石油醚洗滌沉淀，干燥，稱重； 取浸膏、揮發(fā)油包合物，加入常規(guī)藥用輔料，制備成膠囊劑、顆粒劑、片劑或合劑。
7.權(quán)利要求1-5任一所述的抗腫瘤中藥組合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的腫瘤是肺癌、甲狀腺癌或肝癌。
【文檔編號(hào)】A61K35/56GK103948859SQ201410167382
【公開日】2014年7月30日 申請(qǐng)日期:2014年4月24日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月24日
【發(fā)明者】朱全剛, 韓克起, 年華, 賀天臨, 韓慧, 顧小燕 申請(qǐng)人:上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬岳陽中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院