一種托盤根對四氧嘧啶誘導(dǎo)的糖尿病大鼠的降糖方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種托盤根對四氧嘧啶誘導(dǎo)的糖尿病大鼠的降糖方法，該具體過程為：將托盤根洗凈，烘干，切片，并粉碎過40目篩；用電子天平稱取托盤根粉末50g置于3000ml燒杯中，加水至2000ml，放置電熱套中煎煮，沸后50min取出藥液，抽濾，用過濾后的藥渣繼續(xù)二次煎煮，如此反復(fù)煎煮5次；將抽濾所得的藥液置于電熱套中濃縮到200ml左右，最后定容至250ml；向體重為180～220g的糖尿病大鼠尾靜脈注射40mg/kg用生理鹽水配制的1.5％四氧嘧啶注射液；用1.35g/kg托盤根水煎劑對大鼠灌胃。本發(fā)明托盤根水煎劑對糖尿病大鼠具有良好的降糖作用。
【專利說明】一種托盤根對四氧嘧啶誘導(dǎo)的糖尿病大鼠的降糖方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及藥劑實驗領(lǐng)域，尤其涉及一種托盤根對四氧嘧啶誘導(dǎo)的糖尿病大鼠的降糖方法。
【背景技術(shù)】
[0002]托盤(Rubuscrataegiflolius Bunge)為薔薇科(Rosaceae)懸鉤子屬(Rubus)植物，又名牛迭肚，主要生長于東北、內(nèi)蒙古、河北、山東等地。其根可用于治療肝炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)等。經(jīng)民間秘方中藥抗癌靈(主要成分為托盤根提取物)的實驗研究證明抗癌靈對S180，HepA, EAC均有明顯抗腫瘤活性。托盤根味苦、澀，性微寒，具有清熱涼血、散結(jié)、止痛、利尿、消腫之功效。許多具有降糖作用的中藥，如:人參、黃芪、枸杞等，其有效成分主要為多糖。
[0003]由于托盤根中的多糖成分有抗炎、抗衰老、抗腫瘤作用。托盤根體外實驗?zāi)芊浅ｏ@著抑制小鼠肝、心、腦、腎過氧化脂質(zhì)的生成；體內(nèi)實驗已顯著抑制小鼠血漿、肝、腦過氧化脂質(zhì)的生成。托盤根含有某些抗氧化物質(zhì)。
[0004]托盤根提取物 可直接殺傷腫瘤細(xì)胞，對淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化有促進(jìn)作用，機理尚不明確，可能與下列因素有關(guān):(1)腫瘤細(xì)胞與正常細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的不同。細(xì)胞膜是細(xì)胞外部信息傳入的第一關(guān)口，細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)影響信息傳遞過程，托盤根提取物與腫瘤細(xì)胞膜接觸后可能抑制細(xì)胞生長信息傳遞；與淋巴細(xì)胞接觸后促進(jìn)細(xì)胞生長信息傳遞。(2)腫瘤細(xì)胞與正常細(xì)胞內(nèi)成分的不同。細(xì)胞內(nèi)成分的差異決定細(xì)胞生長的快慢，托盤根提取物作用于腫瘤細(xì)胞可能抑制細(xì)胞生長，促進(jìn)細(xì)胞分裂。(3)托盤根提取物作用于腫瘤細(xì)胞核內(nèi)可能抑制刺激細(xì)胞生長酶系的產(chǎn)物表達(dá)，而于淋巴細(xì)胞內(nèi)則促進(jìn)細(xì)胞生長酶系產(chǎn)物的表達(dá)。
[0005]現(xiàn)有技術(shù)中托盤根對四氧嘧啶誘導(dǎo)的糖尿病大鼠的降糖方法還未出現(xiàn)。
[0006]鑒于上述缺陷，本發(fā)明創(chuàng)作者經(jīng)過長時間的研究和實踐終于獲得了本創(chuàng)作。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明的目的在于提供一種托盤根對四氧嘧啶誘導(dǎo)的糖尿病大鼠的降糖方法，用以克服上述技術(shù)缺陷。
[0008]為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供一種托盤根對四氧嘧啶誘導(dǎo)的糖尿病大鼠的降糖方法，該具體過程為:
[0009]步驟a，將托盤根洗凈，置于干燥箱中60°C烘烤2d，烘干，切片，并粉碎過40目篩；
[0010]用電子天平稱取托盤根粉末50g置于3000ml燒杯中，加水至2000ml，放置電熱套中煎煮，沸后50min取出藥液，抽濾，用過濾后的藥渣繼續(xù)二次煎煮，如此反復(fù)煎煮5次；將抽濾所得的藥液置于電熱套中濃縮到200ml左右，最后定容至250ml ；
[0011]步驟b,向體重為180~220g的糖尿病大鼠尾靜脈注射40mg/kg用生理鹽水配制的1.5%四氧嘧啶注射液:
[0012]步驟c，用1.35g/kg托盤根水煎劑對大鼠灌胃。[0013]在上述步驟c中，每天下午3點左右向大鼠灌胃給藥一次。
[0014]進(jìn)一步，在上述步驟c中，每天下午3點左右向大鼠灌胃給藥一次。
[0015]進(jìn)一步，在上述步驟a中，切片厚度為0.5~1.0cm0
[0016]與現(xiàn)有技術(shù)相比較本發(fā)明的有益效果在于:本發(fā)明方法中，糖尿病大鼠經(jīng)托盤根治療后，中劑量托盤根水煎劑具有良好的降糖作用，可緩解糖尿病大鼠典型的“三多一少”癥狀，對所取臟器皆有修復(fù)作用，說明托盤根水煎劑具有良好治療糖尿病的效果。
【具體實施方式】
[0017]以下，對本發(fā)明上述的和另外的技術(shù)特征和優(yōu)點作更詳細(xì)的說明。
[0018]本發(fā)明托盤根對四氧嘧啶誘導(dǎo) 的糖尿病大鼠的降糖方法，該具體過程為:
[0019]步驟一，將托盤根洗凈，置于干燥箱中60°C烘烤2d，烘干，切片厚度為0.5~
1.0cm,并粉碎過40目篩；
[0020]用電子天平稱取托盤根粉末50g置于3000ml燒杯中，加水至2000ml，放置電熱套中煎煮，沸后50min取出藥液，抽濾，用過濾后的藥渣繼續(xù)二次煎煮，如此反復(fù)煎煮5次；將抽濾所得的藥液置于電熱套中濃縮到200ml左右，最后定容至250ml ；
[0021]步驟二，向體重為180~220g的糖尿病大鼠尾靜脈注射40mg/kg用生理鹽水配制的1.5%四氧嘧啶注射液；
[0022]步驟三，用1.35g/kg托盤根水煎劑對大鼠灌胃。
[0023]下面通過實驗進(jìn)行驗證:
[0024]采用的實驗材料為:托盤根；健康的Wistar大鼠，雌雄各半，體重180~220g ；鹽酸二甲雙胍；四氧嘧啶；一氧化氮(NO)試劑盒，丙二醛(MDA)試劑盒，過氧化物歧化酶(SOD)試劑盒，谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)試劑盒；葡萄糖測定試劑盒。
[0025]本發(fā)明采用的實驗儀器包括:202-00A臺式電熱干燥箱；SHZ-DIII予華牌循環(huán)水真空泵；LX-10手掌型離心機；DIRUI DR-7000D半自動生化分析儀；大龍微量移液器1ml，IOul，IOOul ;AK-1000A搖擺式中藥粉碎機；JD400_3b電子天平；98_1_Β型電子調(diào)溫電熱套；TD25-WS多管架自動平衡離心機；722可見分光光度計；XW_80A旋渦混合器；AWH-6_SA電子天平。
[0026]本實驗方法的具體過程為:
[0027]步驟a，選取動物模型；選取健康的Wistar大鼠80只，雌雄各半，體重180~220g，適應(yīng)性飼養(yǎng)2W，隨機選取5只雌鼠，5只雄鼠作為空白對照組，其余大鼠尾靜脈注射四氧嘧啶建立糖尿病模型；
[0028]造模前剪尾采血測定大鼠空腹血糖(FBG)；
[0029]向各組大鼠中，尾靜脈注射40mg/kg用生理鹽水配制的1.5%四氧嘧啶注射液，正常對照組同時注射2.67ml/kg生理鹽水；
[0030]注射后第四天剪尾采血測定FBG，選取FBG大于15.0OmmoI/L的大鼠40只作為實驗組，用配伍隨機分組法隨機分為模型組、陽性對照組、中劑量組、高劑量組，每組雌雄各5只，F(xiàn)BG未達(dá)標(biāo)的動物剔除；
[0031]空白對照組、模型組灌胃13.5ml/kg的蒸餾水，陽性對照組灌胃210mg/kg的鹽酸二甲雙胍水溶液，中、高劑量組分別灌胃1.35g/kg、2.70g/kg托盤根水煎劑。[0032]步驟b，體重稱量；使用電子天平稱量大鼠體重，從造模前一天開始，每天稱一次，共18d,并記錄。
[0033]步驟c，藥物提?。粚⑼斜P根洗凈，置于干燥箱中60°C烘烤2d，烘干后，切片(0.5~1.0cm)，并粉碎過40目篩;
[0034]用電子天平稱取托盤根粉末50g置于3000ml燒杯中，加水至2000ml，放置電熱套中煎煮，沸后50min取出藥液，抽濾，用過濾后的藥渣繼續(xù)二次煎煮，如此反復(fù)煎煮5次；將抽濾所得的藥液置于電熱套中濃縮到200ml左右，最后定容至250ml。
[0035]步驟d，標(biāo)本采集；實驗結(jié)束后，各組動物禁食不禁水12h，次日清晨剪尾采血檢測FBG水平，第二天將大鼠處死，腹主動脈采血，離心，取血清后置于冰箱中冷凍(_80°C )，并摘取胸腺、脾臟、胰腺、肝、腎等臟器。
[0036]步驟e,指標(biāo)測量；
[0037]步驟el，臟器系數(shù)測量；
[0038]將所摘取的臟器于生理鹽水中洗凈，濾紙吸干，稱質(zhì)量，并計算胸腺、脾臟、胰腺、肝、腎等臟器的系數(shù)；
[0039]
【權(quán)利要求】
1.一種托盤根對四氧嘧啶誘導(dǎo)的糖尿病大鼠的降糖方法，其特征在于，該具體過程為: 步驟a，將托盤根洗凈，置于干燥箱中60°C烘烤2d，烘干，切片，并粉碎過40目篩；用電子天平稱取托盤根粉末50g置于3000ml燒杯中，加水至2000ml，放置電熱套中煎煮，沸后50min取出藥液，抽濾，用過濾后的藥渣繼續(xù)二次煎煮，如此反復(fù)煎煮5次；將抽濾所得的藥液置于電熱套中濃縮到200ml左右，最后定容至250ml ； 步驟b,向體重為180~220g的糖尿病大鼠尾靜脈注射40mg/kg用生理鹽水配制的1.5%四氧嘧啶注射液；
步驟C，用1.35g/kg-2.70g/kg托盤根水煎劑對大鼠灌胃。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的托盤根對四氧嘧啶誘導(dǎo)的糖尿病大鼠的降糖方法，其特征在于，在上述步驟c中，每天下午3點左右向大鼠灌胃給藥一次。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的托盤根對四氧嘧啶誘導(dǎo)的糖尿病大鼠的降糖方法，其特征在于，在上述步驟a中，切片厚度為0.5~1.0cm。
【文檔編號】A61K36/73GK103961426SQ201410204374
【公開日】2014年8月6日 申請日期:2014年5月12日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月12日
【發(fā)明者】雷鈞濤, 姜艷霞, 李春卉, 陳爽, 劉哲 申請人:吉林醫(yī)藥學(xué)院