一種膽木水溶性多糖及其制備方法與應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種膽木水溶性多糖及其制備方法與應(yīng)用。本發(fā)明通過用醇或醇溶液處理膽木碎屑,接著固液分離,得到醇提取液和經(jīng)過酒精處理的膽木;將經(jīng)過酒精處理的膽木中的醇去除;接著加入水,提取,固液分離,得到水提取液和藥渣;將水提取液進(jìn)行濃縮,固液分離,取溶液;在溶液中加入醇或醇溶液,固液分離,取沉淀,用水溶解沉淀,得到水溶解液;使用截留分子量至少為5000Da的透析袋透析水溶解液,得到含有膽木水溶性多糖的水溶液。本發(fā)明首次分離得到膽木多糖成分,并證實(shí)其在抗炎和免疫上有藥理活性,可用其制備免疫調(diào)節(jié)藥物或/和抗炎藥物。
【專利說明】一種膽木水溶性多糖及其制備方法與應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種膽木中的大分子物質(zhì)及其制備方法,特別涉及一種膽木水溶性多糖及其制備方法與應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]膽木是茜草科植物,膽木的藥用部位是莖、枝、樹皮和根部,膽木的水提物有清熱解毒,消腫止痛的功效。
[0003]迄今為止,人們普遍認(rèn)為,在膽木中發(fā)揮作用的是生物堿、酚酸等小分子物質(zhì)。廣州部隊(duì)《常用中草藥手冊》中記載膽木的化學(xué)成分為“莖含黃酮甙、酚類”;《中華本草》中記載膽木的化學(xué)成分為膽木莖中主要含生物堿類和生物堿甙類,其中生物堿有:烏檀費(fèi)新堿(naucleficine),烏檀費(fèi)丁堿(mauclefidine),烏檀福林堿(nauclefline), 1-乙?;沁?l-acetyl-carboline),烏擅費(fèi)林喊(naucIefiline)和烏擅醒喊(naucleid1-nal);生物堿式有膽木堿庚(nauclecoside),膽木堿辛(naucle-cosidine)和長春花式內(nèi)酰胺(vincoside lactam);另外含有奎諾酸(quinov (a) ic acid)和 β -谷留醇(β-sitosterol)以及香草酸(vanillic acid)。
[0004]人們已經(jīng)從中藥膽木的莖、枝、葉和根等部位分離和鑒定了上百種小分子化學(xué)物質(zhì),對其中含量相對較多的吲哚類生物堿、生物堿糖苷和酚酸等進(jìn)行了抑菌、抗炎和抗病毒試驗(yàn)。市面上銷售的膽木中成藥是膽木注射液和膽木浸膏片,膽木浸膏片由膽木水提取物加輔料制備而成,成分復(fù) 雜,可以說包含了膽木中幾乎所有成分;膽木注射液主要是膽木中的溶于水又溶于醇的小分子物質(zhì)。
[0005]在獲取生物堿、生物堿糖苷和酚酸等物質(zhì)的過程中,通常將膽木中的大分子物質(zhì)以藥渣的形式丟棄。因此,膽木中的大分子物質(zhì),如多糖等的提取和功效均未見研究和報(bào)道。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0006]本發(fā)明的首要目的在于從膽木中發(fā)現(xiàn)和純化出一種水溶性的大分子物質(zhì),提供一種膽木水溶性多糖的制備方法。
[0007]本發(fā)明的另一目的在于提供通過所述制備方法得到的膽木水溶性多糖。
[0008]本發(fā)明的再一目的在于提供所述的膽木水溶性多糖的應(yīng)用。
[0009]本發(fā)明的目的通過下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn):一種膽木水溶性多糖的制備方法,包括如下步驟:
[0010](I)醇處理:將膽木藥材粉碎,得到膽木碎屑;用醇或醇溶液處理膽木碎屑,接著固液分離,得到醇提取液和經(jīng)過酒精處理的膽木;經(jīng)過酒精處理的膽木已除去醇溶性的各類小分子物質(zhì)和油脂類物質(zhì),便于后面的水提;
[0011](2)水提取:將步驟(1)得到的經(jīng)過酒精處理的膽木中的醇去除;接著加入水,加熱提??;固液分離,得到水提取液和藥渣;[0012](3)濃縮:將步驟(2)得到的水提取液進(jìn)行濃縮,固液分離;得到溶液;
[0013](4)醇沉:
[0014]①在步驟(3)得到的溶液中加入醇或醇溶液,得到體系I,體系I中醇的濃度為80~85% (w/w);接著固液分離,棄上清(含醇液體),取沉淀;用水溶解沉淀,得到水溶解液;
[0015]②重復(fù)步驟①至固液分離后的含醇液體幾乎不顯顏色,所得的沉淀即為膽木總多糖;
[0016](5)透析:
[0017]使用截留分子量至少為5000Da的透析袋透析步驟(4)得到的膽木總多糖;得到含有膽木水溶性多糖的水溶液。
[0018]所述的膽木水溶性多糖的制備方法,還包含脫色的步驟,脫色的步驟位于步驟(4)醇沉和步驟(5)透析之間;
[0019]脫色的具體步驟如下:用水將膽木總多糖配制成飽和的膽木總多糖水溶液,將pH值調(diào)節(jié)至7.5~8.5,加入吸附劑或氧化劑,進(jìn)行脫色;
[0020]所述的pH值優(yōu)選為通過氨水調(diào)節(jié);
[0021]所述的吸附劑優(yōu)選為活性炭;其質(zhì)量使用量優(yōu)選為膽木總多糖質(zhì)量的5~10% ;
[0022]所述的氧化劑優(yōu)選為過氧化氫;其質(zhì)量使用量優(yōu)選為膽木總多糖質(zhì)量的5~10倍;
[0023]所述的脫色的溫度優(yōu)選為10~45°C ;更優(yōu)選為37~45°C ;
[0024]所述的膽木水溶性多糖還可進(jìn)一步純化,步驟優(yōu)選如下:將含有膽木水溶性多糖的水溶液濃縮、干燥;再用水將膽木水溶性多糖溶解成飽和水溶液,上樣至凝膠柱,上樣完后用水洗脫,硫酸-苯酚檢測,收集含多糖的洗脫液,得到純化后的膽木水溶性多糖;
[0025]所述的水優(yōu)選為純化水;
[0026]所述的濃縮的程度優(yōu)選為濃縮至每克膽木水溶性多糖含15~20毫升水的溶液;必要時(shí)冷凍干燥保存;
[0027]所述的凝膠柱優(yōu)選為葡聚糖凝膠柱或瓊脂糖凝膠柱;更優(yōu)選為s印hadex G_150柱或 Sepharose CL-6B ;
[0028]步驟(1)中所述的膽木藥材在粉碎前最好經(jīng)過用清水沖洗掉灰塵、蛛網(wǎng)等預(yù)處理干凈措施,有利于減少雜質(zhì);
[0029]步驟(1)中所述的膽木藥材是指來自于膽木中任意組織或其組合,如莖、皮、枝和根中的至少一種;
[0030]步驟(1)中所述的粉碎優(yōu)選為粉碎至10~30目;
[0031]本發(fā)明中所述的醇優(yōu)選為甲醇和乙醇中的一種或兩種;更優(yōu)選為乙醇,乙醇的使用較其他醇更為安全;
[0032]步驟⑴中所述的醇溶液優(yōu)選為70~100% (w/w)、且不含100%端點(diǎn)值的醇溶液,從而將醇和醇溶液區(qū)別開;更優(yōu)選為95% (w/w)的藥用酒精;
[0033]步驟(1)中所述的用醇或醇溶液處理膽木碎屑優(yōu)選通過加熱提取方式實(shí)現(xiàn);更優(yōu)選為加熱回流提??;
[0034]所述的加熱的溫度優(yōu)選為70~85°C ;更優(yōu)選為70~80°C ;[0035]所述的加熱回流提取優(yōu)選包含以下具體步驟:回流提取3次,第一次回流提取中醇或醇溶液的使用量按膽木碎屑:醇或醇溶液=Ikg: (7~8) L進(jìn)行計(jì)算;第二次和第三次回流提取中醇或醇溶液的使用量分別按膽木碎屑:醇或醇溶液=質(zhì)量比1:(5~6) L進(jìn)行計(jì)算;
[0036]步驟(1)中所述的固液分離包括通過濾網(wǎng)過濾分離或?yàn)V網(wǎng)抽濾進(jìn)行分離;
[0037]所述的濾網(wǎng)優(yōu)選為100目的不銹鋼濾網(wǎng);
[0038]步驟(2)中所述的將步驟(1)得到的酒精處理的膽木中的醇去除通過如下方式實(shí)現(xiàn):于45~50°C的環(huán)境中放置至醇揮發(fā)完全或室溫晾干;
[0039]步驟⑵中所述的水為飲用水;
[0040]步驟⑵中所述的加熱提取的溫度優(yōu)選為85~100°C ;
[0041]步驟(2)中所述的加熱提取優(yōu)選包含以下具體步驟:煮沸提取3次,第一次使用的水的量按如下配比計(jì)算:膽木碎屑:水=Ikg:7~8L ;第二次和第三次使用的水的量分別按如下配比計(jì)算:膽木碎屑:水=Ikg:5~7L ;
[0042]步驟(2)中所述的固液分離的方式優(yōu)選為過濾或離心;
[0043]所述的離心的轉(zhuǎn)速優(yōu)選為7000rpm以上,更優(yōu)選為8000~IlOOOrpm ;
[0044]步驟(3)中所述的濃縮的程度優(yōu)選為濃縮后的濃度為每毫升溶液至少含1.0g生藥;
[0045]步驟(4)中所述的醇溶液優(yōu)選為95~100% (w/w)、且不含100%端點(diǎn)值的醇溶液,從而將醇和醇溶液區(qū)別開;更優(yōu)選為95% (w/w)的藥用酒精;
[0046]步驟⑷①中所述的體系I中醇的濃度優(yōu)選為85% (w/w);
[0047]步驟⑷②中所述的重復(fù)的次數(shù)優(yōu)選為5~8次;
[0048]步驟(4)中所述的固液分離的方式優(yōu)選為過濾或離心;
[0049]所述的離心的轉(zhuǎn)速優(yōu)選為7000rpm以上,更優(yōu)選為8000~1000Orpm ;
[0050]步驟(4)和步驟(5)中所述的水優(yōu)選為純化水;
[0051]步驟(5)中所述的透析袋的截留分子量優(yōu)選為5000~14000Da,更優(yōu)選為8000~14000Da ;
[0052]步驟(5)中所述的透析的條件優(yōu)選為:20~35°C、使用至少相當(dāng)于膽木總多糖溶液體積400倍的水進(jìn)行透析;透析時(shí)間可以是24~72h ;可以采用中間換水?dāng)?shù)次或平衡水位流動換水的方式透析;
[0053]一種膽木水溶性多糖,通過上述制備方法得到;
[0054]所述的膽木水溶性多糖是均一多糖,重均分子量為208000~210000Da ;
[0055]所述的膽木水溶性多糖在制備免疫調(diào)節(jié)藥物或/和抗炎藥物中的應(yīng)用。
[0056]本發(fā)明相對于現(xiàn)有技術(shù)具有如下的優(yōu)點(diǎn)及效果:
[0057](I)本發(fā)明首次從膽木的水溶性成分中發(fā)現(xiàn)并分離純化出膽木多糖成分,并證實(shí)了該膽木多糖成分在抗炎和免疫上有藥理活性,為膽木制劑的有效性提供了進(jìn)一步的支持,為進(jìn)一步的膽木活性成分和藥理活性研究開辟了一條通路。
[0058](2)本發(fā)明提供的膽木水溶性多糖的制備方法提純程度高,無需額外的除蛋白步驟?!緦@綀D】
【附圖說明】
[0059]圖1是實(shí)施例1制備的膽木水溶性多糖的紅外光譜圖。
[0060]圖2是實(shí)施例1中純化后的膽木水溶性多糖的凝膠色譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[0061]下面結(jié)合實(shí)施例和附圖對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的描述,但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于此。
[0062]實(shí)施例1
[0063](一 )制備膽木水溶性多糖
[0064](I)提取:取膽木莖(含皮、大枝和根)常溫下用粉碎機(jī)粉碎至10目,取5kg裝入提取罐中(中試提取濃縮機(jī)組),再加入40L95% (w/w)藥用酒精,開通蒸汽于70~80°C回流提取2h ;停止加熱,將乙醇溶液通過100目的不銹鋼濾網(wǎng)抽濾到濃縮罐中,與此類似第二次和第三次分別用30L95% (w/w)藥用酒精回流提取2h后,將乙醇溶液抽濾到濃縮罐中。將酒精提取完成的藥材取出于45°C烘干,目的是為了將藥材中的酒精揮發(fā)完全。再加入提取罐中接著加飲用水煮沸提取3次,第一次加40L水,煮沸提取2h后,經(jīng)濾網(wǎng)將水溶液抽濾到濃縮罐中;與此類似第2次和第3次分別加入35L的水煮沸提取1.5小時(shí)。合并三次水提取液,濃縮至每毫升溶液含1.0克生藥的濃度,8000rpm離心15min。收集上清液,往其中加入95% (w/w)藥用酒精,調(diào)至酒精含量為85% (w/w) ;8000rpm離心10min,收集得到的沉淀,用純化水溶解后再 用95% (w/w)藥用酒精沉出,反復(fù)此步驟(酒精沉淀、離心收集沉淀、純化水溶解)5~8次至洗出的酒精液幾無顏色為止,收集沉淀得到膽木總多糖80g。
[0065](2)脫色:取5g膽木總多糖,用純化水溶解得到飽和的膽木總多糖水溶液;室溫?cái)嚢柘录訚獍彼?25% w/w)調(diào)節(jié)溶液的pH值至8,37°C攪拌下加30克過氧化氫(30% w/w),攪拌脫色至溶液近無色。
[0066](3)透析:首先處理透析袋,在NaHCO3-EDTA處理液(NaHCO3的終濃度為2 % (w/v) ;EDTA的終濃度為lmmol/L、pH值為8.0)中煮沸IOmin后用純化水徹底清洗干凈,然后在EDTA處理液(lmm0l/L、pH值為8.0)煮沸IOmin后用純化水洗凈。接著處理上一步得到的膽木總多糖水溶液:將脫色后的膽木總多糖溶液制成120ml溶液,置入截留分子量范圍為8000~14000Da的透析袋中,室溫下用50升純化水透析24h,中間換水2次,透析完成后得到膽木水溶性多糖。接著減壓濃縮至25毫升的水溶液,冷凍干燥得2.1g膽木水溶性多糖。
[0067]( 二)檢測:
[0068](I)多糖的分析鑒定
[0069]①菲林試劑反應(yīng)陰性,表明不含還原性單糖;MoliSch (莫立許)反應(yīng)陽性,表明被測定物質(zhì)酸水解后出現(xiàn)還原性單糖,表明多糖的定性鑒別反應(yīng)為陽性。
[0070]②含量測定,硫酸-蒽酮法,以充分干燥后的單糖葡萄糖為對照品制作標(biāo)準(zhǔn)曲線測得總還原糖的含量為76.8%。
[0071]③紫外-可見光譜測定,在200~700nm掃描,幾無吸收峰,說明幾乎不含有文獻(xiàn)報(bào)道的最常見、含量較多的吲哚類生物堿、生物堿糖苷、酚酸、黃酮等小分子物質(zhì)。
[0072]④紅外光譜如圖1所示。圖1表明3397CHT1處的峰是氫鍵影響的醇羥基的吸收,2933cm-1處的吸收峰是C-H的2個(gè)伸縮振動,1616cm-1處的吸收峰為C = O振動,1413cm-1處的吸收峰為-CH2X-O的變形、C-H彎曲振動,llllcm_1U045cm_1處的吸收峰是糖環(huán)上碳氧(C-O)伸縮振動,616cm—1處的吸收峰是C-H面外彎曲;圖中各特征吸收峰均屬于多糖的特征吸收峰。
[0073](2)組成分析和分子量測定
[0074]①純化:取膽木水溶性多糖0.2g,用純化水溶解成飽和水溶液,全部上到Sephadex G-150柱中(把15克凝膠用水充分溶脹后,裝入20 X 500mm柱子中,用純化水平衡5個(gè)柱體積),用純化水洗脫,流速5ml/min,分步收集,每份20ml,經(jīng)硫酸-苯酹顯色法進(jìn)行定性鑒定第6~8份為多糖,經(jīng)凝膠色譜進(jìn)行純度分析為單一對稱峰(如圖2所示),分離得到0.12g均一多糖DMDTl。
[0075]②組成分析:先將多糖水解,步驟如下:稱取15mg冷凍干燥的均一多糖DMDTl,加入2mL濃度為2mol/L的三氟乙酸,封管后于120°C烘箱中水解4h,冷卻后濾膜過濾除去不溶物,減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去三氟乙酸,加少量水洗滌,再次旋轉(zhuǎn)蒸發(fā),如此重復(fù)減壓旋蒸3次,以徹底除去殘留的三氟乙酸。最后加2mL蒸餾水溶解,轉(zhuǎn)移至具磨口塞的玻璃試管中,將此溶液置于減壓干燥箱中70°C干燥一夜,除去其中的水分。用離子色譜法測定其中的單糖組成為:鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖和葡萄糖。
[0076]③多糖的分子量測定:按“中華人民共和國藥典2010版”二部附錄中大分子物質(zhì)分子量測定法,用不同分子量的葡聚糖為標(biāo)準(zhǔn)品,經(jīng)凝膠滲透色譜法測定多糖DMDTl的重均分子量為21000ODa。
[0077](2)膽木水溶性多糖的抗炎作用:
[0078]將經(jīng)透析干燥后得到的膽木水溶性多糖以50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg三個(gè)劑量灌胃給予昆明種小鼠(即昆明小鼠,17.3~22.5g,雌雄各半,每個(gè)劑量組10只小鼠,由長沙市天勤生物技術(shù)有限公司提供,許可證號SCXK(湘)2009-0012),每天一次,每次
0.2ml,連續(xù)6天;同時(shí)設(shè)置膽木注射液(海南制藥廠有限公司,批號:130501)組、膽木浸膏片(海南制藥廠有限公司,批號:140402)組、空白對照組和阿司匹林對照組,每個(gè)組別的小鼠數(shù)目、重量、性別比均與給藥組一致,膽木注射液組以5g/kg的劑量每天灌胃一次膽木注射液,膽木浸膏片組以0.13g/kg的劑量每天灌胃給予膽木浸膏片的水懸液,空白對照組每天灌胃一次生理鹽水(0.2ml/只),阿司匹林組是每天灌胃一次200mg/kg的阿司匹林懸液,連續(xù)6天。第6天給藥后Ih用二甲苯40 μ I涂抹每只小鼠的左耳廓引起小鼠耳腫脹(用標(biāo)記筆給小鼠的右耳中部劃線做好標(biāo)記),40min后脫頸處死小鼠,稱量體重,迅速剪下雙耳,對齊耳邊緣后用打孔器打孔,快速稱量左右耳片的質(zhì)量,計(jì)算耳腫脹度。結(jié)果如表1所示,與空白對照組比較,給予膽木水溶性多糖100mg/kg以上濃度時(shí)有明顯的抗炎作用,和使用200mg/kg阿司匹林的效果接近,膽木多糖組的抗炎效果明顯好于膽木浸膏片組,膽木水溶性多糖的中劑量組抗炎效果與膽木注射液組接近。
[0079]表1膽木水溶性多糖對小鼠耳腫脹的抑制作用:
[0080]
【權(quán)利要求】
1.一種膽木水溶性多糖的制備方法,其特征在于包括如下步驟: (1)醇處理:將膽木藥材粉碎,得到膽木碎屑;用醇或醇溶液處理膽木碎屑,接著固液分離,得到醇提取液和經(jīng)過酒精處理的膽木; (2)水提取:將步驟(1)得到的經(jīng)過酒精處理的膽木中的醇去除;接著加入水,加熱提??;固液分離,得到水提取液和藥渣; (3)濃縮:將步驟(2)得到的水提取液進(jìn)行濃縮,固液分離;得到溶液; (4)醇沉: ①在步驟(3)得到的溶液中加入醇或醇溶液,得到體系I,體系I中醇的濃度為質(zhì)量百分比80~85% ;接著固液分離,棄上清,取沉淀;用水溶解沉淀,得到水溶解液; ②重復(fù)步驟①至固液分離后的含醇液體幾乎不顯顏色,所得的沉淀即為膽木總多糖; (5)透析: 使用截留分子量至少為5000Da的透析袋透析步驟(4)得到的膽木總多糖;得到含有膽木水溶性多糖的水溶液。
2.根據(jù)權(quán)利 要求1所述的膽木水溶性多糖的制備方法,其特征在于:還包含脫色的步驟,脫色的步驟位于步驟(4)醇沉和步驟(5)透析之間; 脫色的步驟如下:用水將膽木總多糖配制成飽和的膽木總多糖水溶液,將PH值調(diào)節(jié)至7.5~8,加入吸附劑或氧化劑,進(jìn)行脫色。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的膽木水溶性多糖的制備方法,其特征在于:還包含純化的步驟,具體如下:將含有膽木水溶性多糖的水溶液濃縮、干燥;再用水將膽木水溶性多糖溶解成飽和水溶液,上樣至凝膠柱,上樣完后用水洗脫,硫酸-苯酚檢測,收集含多糖的洗脫液,得到純化后的膽木水溶性多糖。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的膽木水溶性多糖的制備方法,其特征在于: 所述的水為純化水; 所述的濃縮的程度為濃縮至每克膽木水溶性多糖含15~20毫升水的溶液; 所述的凝膠柱為葡聚糖凝膠柱或瓊脂糖凝膠柱。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的膽木水溶性多糖的制備方法,其特征在于: 所述的醇為甲醇和乙醇中的一種或兩種; 步驟(1)中所述的醇溶液為質(zhì)量百分比70~100%、且不含100%端點(diǎn)值的醇溶液; 步驟(1)中所述的用醇或醇溶液處理膽木碎屑是通過加熱提取方式實(shí)現(xiàn); 步驟⑵中所述的加熱提取的溫度為85~100°C ; 步驟(3)中所述的濃縮的程度為濃縮后的濃度為每毫升溶液至少含1.0g生藥; 步驟(5)中所述的透析袋的截留分子量為5000~14000Da。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的膽木水溶性多糖的制備方法,其特征在于: 步驟(1)中所述的醇溶液為質(zhì)量百分比95%的藥用酒精; 步驟(1)中所述的用醇或醇溶液處理膽木碎屑為加熱回流提取,具體如下:溫度為70~85°C;回流提取3次,第一次回流提取中醇或醇溶液的使用量按膽木碎屑:醇或醇溶液=Ikg: (7~8) L進(jìn)行計(jì)算;第二次和第三次回流提取中醇或醇溶液的使用量分別按膽木碎屑:醇或醇溶液=質(zhì)量比1:(5~6) L進(jìn)行計(jì)算; 步驟(2)中所述的加熱提取含以下具體步驟:煮沸提取3次,第一次使用的水的量按如下配比計(jì)算:膽木碎屑:水=Ikg:7~8L ;第二次和第三次使用的水的量分別按如下配比計(jì)算:膽木碎屑冰=Ikg:5~7L ; 步驟(5)中所述的透析袋的截留分子量為8000~14000Da。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的膽木水溶性多糖的制備方法,其特征在于: 步驟⑴中: 所述的膽木藥材在粉碎前進(jìn)行預(yù)處理:清水洗干凈再晾干; 所述的粉碎為粉碎至10~30目; 所述的固液分離為通過濾網(wǎng)分離; 步驟⑵中: 所述的將步驟(1)得到的酒精處理的膽木中的醇去除通過如下方式實(shí)現(xiàn):于45~50°C的環(huán)境中放置至醇揮發(fā)完全或室溫晾干; 步驟(2)中所述的水為飲用水; 步驟(2)中所述的固液分離的方式為離心; 步驟(4)中所述的醇溶液為質(zhì)量百分比95~100%、且不含100%端點(diǎn)值的醇溶液; 步驟(4)②中所述的重復(fù)的次數(shù)為5~8次; 步驟(4)和步驟(5)中所述的水為純化水; 步驟(5)中所述的透析的條件為:20~35°C、使用至少是膽木總多糖溶液體積的400倍的水進(jìn)行透析;透析時(shí)間可以是24~72h ;可以采用中間換水?dāng)?shù)次或平衡水位流動換水的方式透析。
8.一種膽木水溶性多糖,其特征在于:通過權(quán)利要求1~8任一項(xiàng)所述的制備方法得到。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的膽木水溶性多糖,其特征在于:重均分子量為208000~210000Da。
10.權(quán)利要求8或9所述的膽木水溶性多糖在制備免疫調(diào)節(jié)藥物或/和抗炎藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號】A61P37/02GK104017103SQ201410284523
【公開日】2014年9月3日 申請日期:2014年6月20日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月20日
【發(fā)明者】蒲含林, 李秀峰, 賴潛 申請人:海南制藥廠有限公司