一種用于抗氧化延緩衰老的五指毛桃復(fù)方制劑及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種復(fù)方五指毛桃的組方,其特征在于以重量份計,包括以下份數(shù)的物質(zhì):五指毛桃15-50;大棗5-30;茯苓5-30;當(dāng)歸0-20;薏苡仁5-30。五味中藥可以是藥材、藥材粉末、飲片或提取物組合。本發(fā)明提供了這種復(fù)方五指毛桃的提取物稠膏的制備方法和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。制備方法包括五指毛桃95%乙醇提取補骨脂素類成分后,藥渣中再加入茯苓、當(dāng)歸、薏苡仁、大棗,加水提取多糖類成分。該復(fù)方提取物稠膏或粉末,采用薄層色譜法分別對五指毛桃、茯苓、大棗進(jìn)行定性鑒別;采用高效液相色譜法對五指毛桃中的補骨脂素進(jìn)行定量分析。該稠膏亦可用于常用口服劑型的制備,該質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)亦適用于多種劑型的質(zhì)量控制。本發(fā)明提供的這種復(fù)方具有抗氧化延緩衰老的功效。
【專利說明】一種用于抗氧化延緩衰老的五指毛桃復(fù)方制劑及其制備方 法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及以五指毛桃為君藥,大棗、當(dāng)歸、茯苓、薏苡仁五味中藥組成的復(fù)方五 指毛桃處方,以及復(fù)方稠膏的制備工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 五指毛桃(Radix FiciHirtae)為??浦参锎秩~格(Ficus hirta Vahl.)的干燥 根,味辛、甘,性平,具有益氣健脾補肺、利濕舒筋的功效,屬補益類中藥。為嶺南常用中藥, 又名牛奶木、土黃芪、南芪、五爪龍、五爪毛桃等。其藥用始載于清代何克諫《生草藥性備 要》,其后吳其浚的《植物名實圖考》、肖步丹的《嶺南采藥錄》等均有記載。五指毛桃又是一 種被多民族使用的藥食同源的植物,在廣東民間被稱為"廣東人參",也是民間流傳甚廣的 "煲湯料",其應(yīng)用歷史悠久,保健作用廣為認(rèn)可。
[0003] 五指毛桃水提物具有調(diào)節(jié)免疫功能、抗應(yīng)激及補血的作用,水提液含有多糖類成 分。有文獻(xiàn)報道證明補骨脂素為五指毛桃的主要活性成分之一,分離鑒定出的補骨脂素為 呋喃香豆素類化合物,具有抗菌、抗病毒、抗凝血、抑制腫瘤、免疫調(diào)節(jié)等作用,并對紅細(xì)胞 系統(tǒng)的造血有一定的促進(jìn)作用,而乙醇提取法能有效提取補骨脂素和佛手內(nèi)酯等成分。
[0004] 大麥,又名紅麥、干麥、麥子,起源于中國,在中國已有八千多年的種植歷史,自古 以來就被列為"五果"(栗、桃、李、杏、棗)之一。紅棗富含蛋白質(zhì)、脂肪、糖類、胡蘿卜素 、B 族維生素、維生素 C、維生素 P以及鈣、磷、鐵和環(huán)磷酸腺苷等營養(yǎng)成分。其中維生素 C的含 量在果品中名列前茅,有維生素王之美稱,其中,環(huán)磷酸腺苷,更是人體細(xì)胞能量代謝的必 需成分,能夠增強(qiáng)肌力、消除疲勞、擴(kuò)張血管、增加心肌收縮力、改善心肌營養(yǎng),對防治心血 管系統(tǒng)疾病有良好的作用;中醫(yī)中藥理論認(rèn)為,紅棗具有補虛益氣、養(yǎng)血安神、健脾和胃等 作用,紅棗對慢性肝炎、肝硬化、貧血、過敏性紫癜等病癥有較好療效;紅棗含有三萜類化合 物及環(huán)磷酸腺苷,有較強(qiáng)的抗癌、抗過敏作用。大棗能潤心肺、止咳、補五臟、治虛損、除腸胃 癖氣,還能安中養(yǎng)脾、平胃氣、通九竅、助十二經(jīng)等。大棗中含有50多種化學(xué)物質(zhì),內(nèi)含有多 糖、蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物,維生素 A、B、B2、C、E、P,有機(jī)酸和包括硒在內(nèi)36種微量元素。 采用水提工藝,可有效提取多糖類、水溶性維生素等成分。
[0005] 當(dāng)歸味甘而重,故專能補血,其氣輕而辛,故又能行血,補中有動,行中有補,為血 中之要藥。因而,它既能補血,又能活血,既可通經(jīng),又能活絡(luò)?,F(xiàn)代研究表明:當(dāng)歸具有清 除自由基的作用,當(dāng)歸中阿魏酸具有抗脂質(zhì)過氧化作用,能直接消除自由基,抑制氧化反應(yīng) 和自由基反應(yīng),并能與生物膜磷脂結(jié)合,保護(hù)膜脂質(zhì)拮抗自由基對組織的損害。當(dāng)歸抗老化 作用,當(dāng)歸煎劑對小鼠學(xué)習(xí)記憶具有明顯的影響,用迷宮法測定,當(dāng)歸能改善三氯化鋁所致 的癡呆,降低癡呆小鼠腦的過氧化酯質(zhì)水準(zhǔn),和B型單胺氧化的活性,能治療老年癡呆癥。
[0006] 茯苓,為多孔菌科真菌茯苓的菌核,出自《神農(nóng)本草經(jīng)》,俗稱云苓、松苓、茯靈。產(chǎn) 于云南、安徽、湖北、河南、四川等地。古人稱茯苓為"四時神藥",因為它的功效非常廣泛,不 分四季,將它與各種藥物配伍,不管寒、溫、風(fēng)、濕諸疾,都能發(fā)揮其獨特功效。茯苓味甘、淡、 性平,入藥具有利水滲濕、益脾和胃、寧心安神之功用。
[0007] 茯苓能增強(qiáng)機(jī)體免疫功能,茯苓多糖有明顯的抗腫瘤及保肝臟作用。也可作為食 材用,有茯苓餅,茯苓粥,很有營養(yǎng),口味平和。與瓊珍靈芝配合煮水,有助于治療糖尿病,腫 瘤等慢性病。
[0008] 薏該仁為禾本科植物薏該(Coix lacryma-jobi L. var. mayuen. (Roman. ) Stapf 的 干燥成熟種仁。主產(chǎn)湖南、河北、江蘇、福建等省。味甘、淡,性微寒。有健脾利濕、清熱排膿 功能。用于脾虛泄瀉水腫腳氣、白帶、濕、關(guān)節(jié)疼痛、腸癰、肺痿等癥。薏苡種仁是我國傳統(tǒng) 的食品資源之一,可做成粥、飯、各種面食供人們食用。尤其對老弱病者更為適宜。其主要 成分包括脂類、不飽和脂肪酸、糖類等成分,薏苡仁糖類含有鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、半 乳糖和葡萄糖。其水提物對小鼠有降血糖作用,其活性成分為三種多糖。
[0009] 因此,本處方中以藥食同源的五味中藥組成,五指毛桃為君藥,益氣健脾補肺,益 氣作用明顯,大棗、當(dāng)歸為臣藥,具有補虛益氣、養(yǎng)血安神、健脾和胃的功效,補血功效顯著; 茯苓、薏苡仁,為佐藥,共達(dá)補氣燥濕健脾之效,適用于氣血不足、脾失營運、濕氣阻滯所致 的病癥。
[0010] 本發(fā)明比較了單味五指毛桃與復(fù)方在抗氧化、延緩衰老方面的作用,結(jié)果表明復(fù) 方作用優(yōu)于單味藥材,提示中藥復(fù)方制劑的協(xié)同作用。
[0011] 本發(fā)明采用醇提法對五指毛桃中的補骨脂素類成分進(jìn)行了提取,藥渣再與其他幾 味藥材采用水提工藝提取多糖類成分,更好的發(fā)揮多糖類成分的補益作用。本發(fā)明對復(fù)方 中的三味藥材采用薄層色譜法進(jìn)行定性鑒別,采用高效液相色譜法對君藥五指毛桃的香豆 素類成分進(jìn)行含量測定,從而保證了大生產(chǎn)工藝的可控性,成品質(zhì)量的穩(wěn)定性。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0012] 本發(fā)明的首要目的在于提供一種由五味中藥組成的中藥組合物,其具有抗氧化延 緩衰老的作用。
[0013] 本發(fā)明的另一目的在于提供一種復(fù)方五指毛桃組合物稠膏的制備方法和質(zhì)量標(biāo) 準(zhǔn),及其在口服制劑中的應(yīng)用。
[0014] 本發(fā)明的目的通過以下方式實現(xiàn):
[0015] 1、復(fù)方五指毛桃處方
[0016] 五指毛桃:15-50 ;大棗:5-30 ;茯苓:5-30 ;當(dāng)歸:0-20 ;薏苡仁:5-30。
[0017] 2、復(fù)方五指毛桃稠膏的制備方法
[0018] 步驟一、處方中的五味藥材按《中國藥典》2010年版一部各藥項下有關(guān)規(guī)定凈選或 炮制,備用。五指毛桃凈選。
[0019] 步驟二、取五指毛桃干燥藥材粉碎成粗粉,用10倍量95%乙醇浸泡lh后,冷凝回 流2h,趁熱濾取藥液;再加8倍量95%乙醇回流提取lh,合并兩次濾液,減壓濃縮至稠膏備 用。保留藥渣,用于與另外四味藥材一起煎煮。
[0020] 步驟三、將除大棗外的三味藥材粉碎成粗粉,大棗直接加入,與上一步保留的藥渣 合并,加水煎煮二次,第一次3小時,12倍量水;第二次2小時,10倍量水。
[0021] 步驟四、合并煎液,濾過,濾液減壓濃縮至相對密度為1. 30?1. 35 (80°C )的稠膏。
[0022] 3、復(fù)方五指毛桃稠膏的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
[0023] (1)薄層色譜法鑒別中藥組合物中五指毛桃所含補骨脂素:
[0024] 精密稱取稠膏3g,加醋酸乙酯50mL,超聲25min,濾過,濾液濃縮至干,加醋酸乙酯 2mL于2mL量瓶中,作為供試品溶液。另取五指毛桃對照藥材5g,同法制成對照藥材溶液。 另取補骨脂素對照品,加醋酸乙酯溶解,制成每lmL含2mg的溶液,作為對照品溶液。照薄 層色譜法(中國藥典2010年版一部附錄VIB)試驗,吸取上述三種溶液各3 μ L,分別點于同 一硅膠G薄層板上,正己烷-三氯甲烷-乙酸乙酷-甲酸(20 : 4 : 5 : 0.7)飽和10分 鐘后展開,展開前沿至薄層板邊緣lcm左右時取出,晾干,置紫外光燈(365nm)下檢視。供 試品色譜中,在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的熒光斑點。再噴以10%硫酸乙醇 溶液,置于l〇5°C烘箱中顯色加熱至斑點清晰在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色 的主斑點(見說明書附圖1和附圖2,圖中標(biāo)號1為補骨脂素標(biāo)準(zhǔn)品;2為藥材對照品、3為 稠膏樣品a ;4為稠膏樣品b ;5為稠膏樣品c ;6為陰性對照品)。
[0025] (2)薄層色譜法鑒別中藥組合物中的茯苓:
[0026] 精密稱取稠膏l(xiāng)g,加丙酮100mL回流提取1小時,過濾,取濾液水浴濃縮至約 0. 5mL,作為供試品溶液。另取茯苓對照藥材lg,加丙酮20mL回流提取1小時,過濾,濾液濃 縮至約0.5mL,作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2010年版一部附錄VI B)試 驗,吸取上述兩種溶液各15-20 μ L,分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄 層板上,以石油醚(60-90°C)-乙醚(1 : 1)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%磷鑰酸 乙醇溶液,在l〇〇°C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上, 顯相同顏色的斑點(見說明書附圖3,圖中標(biāo)號1為藥材對照品;2為稠膏樣品a、3為稠膏 樣品b ;4為稠膏樣品c ;6為陰性對照品)。
[0027] (3)薄層色譜法鑒別中藥組合物中的大棗:
[0028] 精密稱取稠膏l(xiāng)g,加水40mL使溶解,過濾,取濾液用水飽和的正丁醇提取2次,每 次20mL,合并正丁醇液,用正丁醇飽和水洗滌2次,每次20mL,分取正丁醇液蒸干,殘渣加 lmL甲醇使溶解,作為供試品溶液。另取大棗對照藥材2g,加水煎煮1小時,濾過,濾液濃縮 至20mL,同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2010年版一部附錄VI B)試 驗,吸取上述兩種溶液各5 μ L,分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板 上,以正丁醇-冰醋酸-水(3 : 1 : 0.5)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%硫酸乙醇 溶液,在l〇〇°C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯一 個相同的褐色斑點(見說明書附圖4,圖中標(biāo)號1為藥材對照品;2為稠膏樣品a、3為稠膏 樣品b ;4為稠膏樣品c ;6為陰性對照品)。
[0029] (4)高效液相色譜法測定中藥組合物中五指毛桃所含補骨脂素的含量:
[0030] 液相色譜條件:采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱,流動相為甲醇與 水(60 : 40),檢測波長為254nm,流速為lmL/min,溫度為30°C,進(jìn)樣量為10yL。
[0031] 對照品溶液的制備:精密稱取補骨脂素對照品2. Omg至10mL容量瓶中,加甲醇約 5mL,微熱溶解,冷卻室溫,加甲醇稀釋刻度,搖勻。精密吸取濃儲備液2mL至10mL容量瓶 中,加甲醇稀釋刻度,搖勻加甲醇稀釋刻度,搖勻,用〇. 25 μ m微孔濾膜過濾,即得對照品溶 液(濃度:〇· 〇4mg/mL)。
[0032] 樣品溶液的制備:精密稱取稠膏0. 5g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加甲醇 100mL,精密稱定重量,超聲提取40min,放冷,再稱定重量,用甲醇補足減失的重量,搖勻,濾 過,棄去初濾液,取續(xù)濾液,用0. 25 μ m微孔濾膜過濾,作為樣品溶液備用。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0033] 圖1是365nm紫外光下五指毛桃的薄層色譜圖
[0034] 圖2是五指毛桃采用10%硫酸乙醇顯色后的薄層色譜圖
[0035] 圖3是茯苓的薄層色譜圖
[0036] 圖4是大棗的薄層色譜圖
[0037] 圖5是254nm波長下對照品補骨脂素的色譜圖
[0038] 圖6是254nm波長下水提取的五指毛桃藥材稠膏樣品色譜圖
[0039] 圖7是254nm波長下醇提取的五指毛桃藥材稠膏樣品色譜圖
[0040] 圖8是254nm波長下復(fù)方五指毛桃的稠膏樣品色譜圖
【具體實施方式】
[0041] 實施例1 :五指毛桃藥材提取工藝研究
[0042] 1. 1五指毛桃藥材水提稠膏與醇提稠膏的制備
[0043] 五指毛桃水稠膏的制備方法:稱取五指毛桃藥材200g,用10倍量(M/V)蒸餾水浸 泡lh后,加熱煮沸l(wèi)h,趁熱濾取藥液;再加8倍量水,煮沸30min,合并兩次濾液,濃縮至稠 膏備用(相對密度為1. 30?1. 35 (80°C ))。
[0044] 五指毛桃醇稠膏的制備方法:稱取五指毛桃干燥藥材200g,用10倍量95%乙醇浸 泡lh后,加熱回流提取2h,趁熱濾取藥液;藥渣再加8倍量95%乙醇回流提取lh,合并兩 次濾液,用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮至稠膏備用(相對密度為1. 30?1. 35 (80°C ))。
[0045] 1. 2兩種稠膏中補骨脂素的含量測定
[0046] 采用高效液相色譜法測定,色譜條件:采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色 譜柱,流動相為甲醇與水(60 : 40),檢測波長為254nm,流速為lmL/min,溫度為30°C,進(jìn)樣 量為10 μ L。
[0047] 對照品溶液的制備:精密稱取補骨脂素對照品2. Omg至10mL容量瓶中,加甲醇約 5mL,微熱溶解,冷卻室溫,加甲醇稀釋刻度,搖勻。精密吸取濃儲備液2mL至10mL容量瓶 中,加甲醇稀釋刻度,搖勻加甲醇稀釋刻度,搖勻,用〇. 22 μ m微孔濾膜過濾,即得對照品溶 液(濃度:〇· 〇4mg/mL)。
[0048] 樣品溶液的制備:分別精密稱取水提稠膏、醇提稠膏各0. 5g,精密稱定,分別置具 塞錐形瓶中,精密加甲醇l〇〇mL,精密稱定重量,超聲提取40min,放冷,再稱定重量,用甲醇 補足減失的重量,搖勻,濾過,棄去初濾液,取續(xù)濾液,用〇. 22 μ m微孔濾膜過濾,作為樣品 溶液備用。
[0049] 兩種稠膏中補骨脂素的含量測定結(jié)果見表1.采用外標(biāo)一點法計算藥材中補骨脂 素的提取率,結(jié)果表明同一批藥材,采用95%乙醇回流提取,有效成分補骨脂素的提取率高 于水提的稠膏。
[0050] 表1五指毛桃不同提取工藝補骨脂素含量結(jié)果
[0051]
【權(quán)利要求】
1. 一種由五味中藥組成的中藥組合物,其特征在于以重量份計,包括以下份數(shù)的物質(zhì): 五指毛桃:15-50 ;大棗:5-30 ;茯苓:5-30 ;當(dāng)歸:0-20 ;薏苡仁:5-30。
2. 如權(quán)利要求1所述的中藥組合物,其特征在于可以是單味藥材按比例組合、單味藥 材分別粉碎后組合、單味藥材按比例組合后粉碎成粉末、單味藥材分別提取后組合、某一味 或幾味藥材提取后與其他藥材組合。
3. 如權(quán)利要求1所述的中藥組合物,五味中藥可以是藥材、藥材粉末、飲片或提取物。
4. 如權(quán)利要求1所述的中藥組合物,其特征在于提取物的制備包括如下步驟: 稱取處方量的五指毛桃干燥藥材粉碎成粗粉,用10倍量95 %乙醇浸泡lh后,冷凝回流 2h,趁熱濾取藥液;藥渣再加8倍量95%乙醇回流提取lh,合并兩次濾液,減壓濃縮至稠膏 1. 30 ?1. 35(80°C )備用。 五指毛桃藥渣中,再加入處方量之茯苓、當(dāng)歸、薏苡仁,三味藥材(粗粉),再稱取處方 量之大棗于三味藥材粗粉中,加12倍量水(重量與體積比),煎煮3小時,過濾;濾渣再加 入10倍量水(重量與體積比),煎煮2小時,過濾,合并兩次濾液,減壓濃縮至相對密度為 1. 30 ?1. 35(80°C )的稠膏。 將上述兩種稠膏混勻,即得;或?qū)煞N稠膏混勻后干燥后的干粉即得;或?qū)煞N稠膏 分別干燥成干粉后混勻即得。
5. 如權(quán)利要求4所述的提取物,用于制備顆粒、膠囊、片劑、粉劑、滴丸劑、湯劑等常用 口服劑型。
6. 如權(quán)利要求1所述的中藥組合物,其特征在于采用薄層色譜法對五指毛桃、茯苓和 大棗進(jìn)行定性鑒別。采用高效液相色譜法對五指毛桃中所含的補骨脂素進(jìn)行含量測定。
7. 如權(quán)利要求1-4所述的提取物,其中五指毛桃的定性鑒別方法如下進(jìn)行: 如權(quán)利要求4所制備的提取物稠膏,精密稱取稠膏3g,加醋酸乙酯50mL,超聲25min,濾 過,濾液濃縮至干,加醋酸乙酯2mL于2mL量瓶中,作為供試品溶液。另取五指毛桃對照藥 材5g,同法制成對照藥材溶液。另取補骨脂素對照品,加醋酸乙酯溶解,制成每lmL含2mg 的溶液,作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2010年版一部附錄VIB)試驗,吸取上 述三種溶液各3 μ L,分別點于同一硅膠G薄層板上,正己烷-三氯甲烷-乙酸乙酷-甲酸 (20 : 4 : 5 : 0.7)飽和10分鐘后展開,展開前沿至薄層板邊緣lcm左右時取出,晾干,置 紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中,在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的熒 光斑點。再噴以10%硫酸乙醇溶液,置于l〇5°C烘箱中顯色加熱至斑點清晰在與對照藥材 色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的主斑點。
8. 如權(quán)利要求1-4所述的提取物,其中茯苓的定性鑒別方法如下進(jìn)行: 如權(quán)利要求4所制備的提取物稠膏,精密稱取稠膏l(xiāng)g,加丙酮100mL回流提取1小時, 過濾,取濾液水浴濃縮至約〇. 5mL,作為供試品溶液。另取茯苓對照藥材lg,加丙酮20mL回 流提取1小時,過濾,濾液濃縮至約〇. 5mL,作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典 2010年版一部附錄VI B)試驗,吸取上述兩種溶液各15-20yL,分別點于同一以羧甲基纖 維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上,以石油醚(60-90°C)-乙醚(1 : 1)為展開劑,展開,取 出,晾干,噴以10%磷鑰酸乙醇溶液,在l〇〇°C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中,在與對 照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點。
9. 如權(quán)利要求1-4所述的提取物,其中大棗的定性鑒別方法如下進(jìn)行: 如權(quán)利要求4所制備的提取物稠膏,精密稱取稠膏l(xiāng)g,加水40mL使溶解,過濾,取濾 液用水飽和的正丁醇提取2次,每次20mL,合并正丁醇液,用正丁醇飽和水洗滌2次,每次 20mL,分取正丁醇液蒸干,殘渣加 lmL甲醇使溶解,作為供試品溶液。另取大棗對照藥材2g, 加水煎煮1小時,濾過,濾液濃縮至20mL,同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥 典2010年版一部附錄VI B)試驗,吸取上述兩種溶液各5 μ L,分別點于同一以羧甲基纖維 素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上,以正丁醇-冰醋酸-水(3 : 1 : 0.5)為展開劑,展開, 取出,晾干,噴以10%硫酸乙醇溶液,在l〇〇°C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中,在與對 照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯一個相同的褐色斑點。
10. 如權(quán)利要求1-4所述的提取物,稠膏中五指毛桃中補骨脂素的含量測定按如下方 法進(jìn)行: 液相色譜條件:采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱,流動相為甲醇與水 (60 : 40),檢測波長為254nm,流速為lmL/min,溫度為30°C,進(jìn)樣量為10 μ L。 對照品溶液的制備:精密稱取補骨脂素對照品2. Omg至10mL容量瓶中,加甲醇約5mL, 微熱溶解,冷卻室溫,加甲醇稀釋刻度,搖勻。精密吸取濃儲備液2mL至10mL容量瓶中,力口 甲醇稀釋刻度,搖勻加甲醇稀釋刻度,搖勻,用〇. 22 μ m微孔濾膜過濾,即得對照品溶液(濃 度:40 μ g/mL)。 樣品溶液的制備:如權(quán)利要求4所制備的提取物稠膏,精密稱取稠膏0. 5g,精密稱定, 置具塞錐形瓶中,精密加甲醇l〇〇mL,精密稱定重量,超聲提取40min,放冷,再稱定重量,用 甲醇補足減失的重量,搖勻,濾過,棄去初濾液,取續(xù)濾液,用〇. 22 μ m微孔濾膜過濾,作為 樣品溶液備用。
11. 如權(quán)利要求1所述的中藥組合物具有益氣、補血、利濕的功效,用于氣血不足、脾失 健運所致的病癥,具有抗氧化、延緩衰老的作用。
【文檔編號】A61P39/06GK104116963SQ201410291143
【公開日】2014年10月29日 申請日期:2014年6月18日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月18日
【發(fā)明者】鄧亞利, 崔明漢 申請人:華南農(nóng)業(yè)大學(xué)