一種疫苗保護(hù)劑預(yù)混輔料及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種疫苗保護(hù)劑預(yù)混輔料及其制備方法，它包括如下重量配比的成分：海藻糖：50-100份、蔗糖：5-50份、乳糖：5-40份、氯化鈉：8.5份、十二水合磷酸氫二鈉：3.5份、二水合磷酸二氫鈉：0.25份。該預(yù)混輔料不含明膠和人血白蛋白，組成成分之間不會(huì)發(fā)生相互反應(yīng)，使用方便，可直接用于疫苗的制備，在疫苗制備和貯存過程中能夠有效起到保護(hù)作用。
【專利說明】一種疫苗保護(hù)劑預(yù)混輔料及其制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種疫苗保護(hù)劑預(yù)混輔料及其制備方法，屬于疫苗生產(chǎn)工藝技術(shù)生物 醫(yī)藥領(lǐng)域。

【背景技術(shù)】
[0002] 為了便于活菌疫苗的運(yùn)輸和儲(chǔ)存，通常將其制成凍干制劑。為了確?；罹呙缭?凍干過程以及在運(yùn)輸和儲(chǔ)存過程中的活菌率，現(xiàn)有技術(shù)在制備活菌疫苗的過程中一般會(huì)使 用凍干保護(hù)劑。傳統(tǒng)的凍干保護(hù)劑配方中往往含有明膠或人血白蛋白，但是使用明膠和人 血白蛋白有一定的安全隱患，也受到一定的限制。
[0003] 明膠或明膠的衍生物能直接引起被接種者的變態(tài)反應(yīng)。明膠既可以引起細(xì)胞介導(dǎo) 免疫反應(yīng)，也可以引起非細(xì)胞介導(dǎo)免疫反應(yīng)；另外，明膠中細(xì)菌內(nèi)毒素含量很高，可導(dǎo)致人 體產(chǎn)生發(fā)熱反應(yīng)。國(guó)家藥典會(huì)病毒類制品專業(yè)委員會(huì)也在2007年7月17日至7月19日 北京會(huì)議紀(jì)要中明確要求，"作為穩(wěn)定劑成分的明膠注射到人體后可發(fā)生過敏反應(yīng)，生產(chǎn)企 業(yè)應(yīng)進(jìn)行取代明膠成分的相關(guān)研究工作，以進(jìn)一步提高制品的安全性"。而且明膠批間質(zhì)量 差異較大，不利于制得均一穩(wěn)定的產(chǎn)品。人血白蛋白雖然源于檢測(cè)合格的健康人血，但是受 到現(xiàn)在檢測(cè)技術(shù)水平的限制，可影響某些病原體的檢測(cè)如肝炎方面等，由此可能對(duì)疫苗造 成隱性污染，最終對(duì)被接種者造成潛在的危害。人血白蛋白來源于健康人血，其來源有限。 因此必須開發(fā)無明膠、人血白蛋白的凍干保護(hù)劑。
[0004] 目前，已有報(bào)道利用其它合適的物質(zhì)替代明膠和人血白蛋白作為疫苗的保護(hù)劑， 如專利CN 102228687B報(bào)道了一種不含明膠、不含人血白蛋白的冷凍干燥甲型肝炎減毒活 疫苗保護(hù)劑及其制備方法。該保護(hù)劑含有海藻糖、右旋糖酐40、L-半胱氨酸、精氨酸、谷氨 酸、甘氨酸、氯化鎂、硫酸鎂、山梨醇、甘露醇、三羥甲基氨基甲烷。專利CN 102921002 A公 開了一種乙型腦炎減毒活疫苗凍干保護(hù)劑，該凍干保護(hù)劑以Earl's液為溶劑，各成分的濃 度為：蔗糖 6 - 28g/100ml、海藻糖 3 -12g/100ml、右旋糖酐 5 - 24g/100ml。
[0005] 以上報(bào)道雖然解決了明膠和人血白蛋白引起的問題，但是在制備疫苗的過程中， 需臨時(shí)選擇各種成分配置穩(wěn)定劑，而且要花費(fèi)大量的時(shí)間研究所配置的穩(wěn)定劑對(duì)活菌疫苗 的穩(wěn)定性能，以及各添加成分之間是否會(huì)發(fā)生相互作用，這不利于新型疫苗的研制和快速 投產(chǎn)。
[0006] 在片劑制備領(lǐng)域，近年來出現(xiàn)了一種新型的藥用輔料一預(yù)混輔料，它并不是對(duì)幾 種單一的藥用輔料簡(jiǎn)單的相互混合，而是通過大量的試驗(yàn)，將多種具備特定功能的單一輔 料通過優(yōu)選配比以及特殊工藝，制成一種整體發(fā)揮要求性能的輔料。預(yù)混輔料僅進(jìn)行物理 形態(tài)的改變，并未產(chǎn)生化學(xué)性質(zhì)的變化。因此，預(yù)混輔料保留原來各個(gè)成分的輔料性質(zhì)，是 一種多功能的混合體。
[0007] 目前，未見疫苗保護(hù)劑預(yù)混輔料的相關(guān)報(bào)道。本發(fā)明提供了一種疫苗保護(hù)劑預(yù)混 輔料及其制備方法，該預(yù)混輔料不含明膠和人血白蛋白，組成成分之間不會(huì)發(fā)生相互反應(yīng)， 實(shí)際使用方便，而且該預(yù)混輔料較各輔料單一混合具有更優(yōu)的凍干保護(hù)效果。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明提供了一種疫苗保護(hù)劑預(yù)混輔料及其制備方法，該預(yù)混輔料組成簡(jiǎn)單，使 用方便，可直接用于疫苗的制備，在疫苗制備和貯存過程中能夠有效起到保護(hù)作用。
[0009] 本發(fā)明的有益之處是通過以下步驟實(shí)現(xiàn)的： 一種疫苗保護(hù)劑預(yù)混輔料包括如下重量配比的成分：海藻糖：50-100份、鹿糖：5-50 份、乳糖：5-40份、氯化鈉：8. 5份、十二水合磷酸氫二鈉：3. 5份、二水合磷酸二氫鈉：0. 25 份。
[0010] 一種疫苗保護(hù)劑預(yù)混輔料的制備方法，包括以下步驟制成： a、糖液制備：分別稱取海藻糖、蔗糖、乳糖，加入純化水溶解，再加入活性炭，攪拌 30min，再通過0. 22 μ m的過濾膜過濾，濾液再經(jīng)裝有中空纖維超濾膜的超濾器超濾； 步驟a海藻糖、蔗糖、乳糖的添加量為：海藻糖50-100份、蔗糖5-50份、乳糖5-40份。 [0011] b、鹽溶液制備：分別稱取氯化鈉、十二水合磷酸氫二鈉、二水合磷酸二氫鈉，加入 純化水溶解，再加入活性炭，攪拌30min，再通過0. 22 μ m的過濾膜過濾，濾液再經(jīng)裝有中空 纖維超濾膜的超濾器超濾； 步驟b氯化鈉、十二水合磷酸氫二鈉、二水合磷酸二氫鈉的添加量為：氯化鈉8. 5份、 十二水合磷酸氫二鈉3. 5份、二水合磷酸二氫鈉0. 25份。
[0012] 步驟a和步驟b的目的是除去各原料有色雜質(zhì)以及內(nèi)毒素，其中所述的中空纖維 超濾膜的分子截留范圍為5000 - 10000 ;所述的活性炭，其用量一般為溶液中含有成分質(zhì) 量的0. 5%。
[0013] C、將步驟a所得糖液和步驟b所得鹽溶液分別在真空壓為-0. 085Mpa，溫度為 50°C的條件下，濃縮結(jié)晶得混合糖晶和混合鹽。
[0014] 將混合糖晶是3中糖共結(jié)晶生成，混合鹽是三種鹽共結(jié)晶生成，共結(jié)晶的有益之 處在于使各單一物料能夠成分混合。
[0015] d、將步驟c所得的混合鹽加純化水溶解后，再加入步驟c所得的混合糖晶，溶解后 經(jīng)噴霧干燥既得。
[0016] 步驟d中混合鹽和混合糖分的添加質(zhì)量比為1:4. 5~8。
[0017] 按上述組成和方法制得的疫苗保護(hù)劑預(yù)混輔料在使用時(shí)，只需加入預(yù)混輔料8-14 倍重量的注射用水，再加入一定量的疫苗，即可制成相應(yīng)的疫苗制劑。
[0018] 本發(fā)明提供了一種疫苗保護(hù)劑預(yù)混輔料及其制備方法，其特點(diǎn)在于： (1)本發(fā)明提供的疫苗保護(hù)劑預(yù)混輔料包含明膠、人血白蛋白成分，而且預(yù)混輔料中各 組成成分均無毒，使用更加安全； (2 )預(yù)混輔料可直接用于制備疫苗，疫苗生產(chǎn)企業(yè)和研制單位使用更加方便。
[0019] (3)本發(fā)明提供的預(yù)混輔料經(jīng)共結(jié)晶、噴霧干燥制得，使用時(shí)較單一輔料簡(jiǎn)單混合 具有更優(yōu)的效果。
[0020] 具體實(shí)施實(shí)例 以下結(jié)合數(shù)個(gè)實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明以及創(chuàng)新之處。應(yīng)當(dāng)理解，所列出的實(shí)施例僅 用于具體說明本發(fā)明而非對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步限定，本領(lǐng)域技術(shù)人員在充分理解之后可以對(duì) 實(shí)施例進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整，這些仍然在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
[0021] 實(shí)施例1 糖液準(zhǔn)備：分別稱取海藻糖60g、蔗糖10g、乳糖10g，加入200ml純化水溶解，再加入 活性炭〇. 4g，攪拌30min，再通過0. 22 μ m的過濾膜過濾，濾液再經(jīng)裝有分子截留范圍為 5000-10000d的中空纖維超濾膜的超濾器超濾。
[0022] 鹽溶液制備：分別稱取氯化鈉8. 5g、十二水合磷酸氫二鈉3. 5g、二水合磷酸二氫 鈉0. 25g，加入50ml純化水溶解，再加入活性炭0. lg，攪拌30min，再通過0. 22 μ m的過濾膜 過濾，濾液再經(jīng)裝有分子截留范圍為5000 - 10000d的中空纖維超濾膜的超濾器超濾。
[0023] 將以上所得糖液和所得鹽溶液分別在真空壓為_0.085Mpa，溫度為50°C的條件 下，濃縮結(jié)晶得混合糖晶和混合鹽。
[0024] 將以上所得的混合鹽10g加50ml純化水溶解后，再加入所得的混合糖晶70g，加適 量水完全溶解后，經(jīng)過噴霧裝置進(jìn)行霧化，霧化裝置可以采用壓力式噴霧器、氣流式噴霧器 和尚心式噴霧器。霧化后的料液再干燥塔中進(jìn)行干燥，干燥溫度為60_80°C，干燥后的粉末 收集到專用容器中既得預(yù)混輔料。
[0025] 實(shí)施例2 取實(shí)施例1疫苗保護(hù)劑預(yù)混輔料l〇g，加入l〇〇ml注射用水，0. lum過濾除菌，4°C備 用。再按每人份裝量〇. 6ml，內(nèi)含病毒量7. 00-7. 38 lgCCID5(l/ml，加入甲型肝炎病毒活病毒 原液，攪拌混勻后所得到疫苗混合物于-20°C- -50°C的溫度預(yù)冷3-5小時(shí)，凍干箱擱板溫 度-35°C- -50°C，開真空、升華，二次凍干箱擱板溫度15°C- 30°C，即制成冷凍干燥甲型肝 炎減毒活疫苗。
[0026] 實(shí)施例3 取與實(shí)施例1疫苗保護(hù)劑預(yù)混輔料等組成等量的各輔料混合后，加入l〇〇ml注射用水， 按實(shí)施例2的方法制得冷凍干燥甲型肝炎減毒活疫苗。
[0027] 實(shí)施例4 按本發(fā)明方法冷凍干燥制成的凍干甲型肝炎減毒活疫苗，感染性滴度檢測(cè)證明，冷凍 干燥后與凍前相比較，疫苗的病毒感染性滴度沒有明顯下降，預(yù)混輔料配方制得疫苗的病 毒感染性滴度下降幅度明顯低于原含明膠的生產(chǎn)配方，表明本發(fā)明提供的疫苗保護(hù)劑在凍 干過程中的保護(hù)效果較好。同時(shí)，預(yù)混輔料病毒感染性滴度下降幅度明顯低于單一輔料簡(jiǎn) 單混合，對(duì)比結(jié)果表明本發(fā)明提供的預(yù)混輔料使用時(shí)較單一輔料簡(jiǎn)單混合具有更優(yōu)的效 果。見表1。
[0028] 表1.實(shí)施例2、3與原含明膠的生產(chǎn)配方的比較

【權(quán)利要求】
1. 一種疫苗保護(hù)劑預(yù)混輔料，其特征在于，它包括如下重量配比的成分：海藻糖： 50-100份、蔗糖：5-50份、乳糖：5-40份、氯化鈉：8. 5份、十二水合磷酸氫二鈉：3. 5份、二水 合磷酸二氫鈉：〇. 25份。
2. -種疫苗保護(hù)劑預(yù)混輔料的制備方法，其特征在于，它包括以下步驟制成： a、 糖液制備：分別稱取海藻糖、蔗糖、乳糖，加入純化水溶解，再加入活性炭，攪拌 30min，再通過0. 22 μ m的過濾膜過濾，濾液再經(jīng)裝有中空纖維超濾膜的超濾器超濾； b、 鹽溶液制備：分別稱取氯化鈉、十二水合磷酸氫二鈉、二水合磷酸二氫鈉，加入純化 水溶解，再加入活性炭，攪拌30min，再通過0. 22 μ m的過濾膜過濾，濾液再經(jīng)裝有中空纖維 超濾膜的超濾器超濾； c、 將步驟a所得糖液和步驟b所得鹽溶液分別在真空壓為-0. 085Mpa，溫度為50°C的 條件下，濃縮結(jié)晶得混合糖晶和混合鹽； d、 將步驟c所得的混合鹽加純化水溶解后，再加入步驟c所得的混合糖晶，溶解后經(jīng)噴 霧干燥既得。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種疫苗保護(hù)劑預(yù)混輔料的制備方法，其特征在于，步驟a海 藻糖、蔗糖、乳糖的添加量為：海藻糖50-100份、蔗糖5-50份、乳糖5-40份。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種疫苗保護(hù)劑預(yù)混輔料的制備方法，其特征在于，步驟b氯 化鈉、十二水合磷酸氫二鈉、二水合磷酸二氫鈉的添加量為：氯化鈉8. 5份、十二水合磷酸 氫二鈉3. 5份、二水合磷酸二氫鈉0. 25份。
5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種疫苗保護(hù)劑預(yù)混輔料的制備方法，其特征在于，步驟a和 步驟b所述的中空纖維超濾膜的分子截留范圍為5000 - 10000。
6. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種疫苗保護(hù)劑預(yù)混輔料的制備方法，其特征在于，步驟d中 混合鹽和混合糖分的添加質(zhì)量比為1:4. 5~8,噴霧干燥溫度為60-80°C。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1或2其中之一，其特征在于，所述的一種疫苗保護(hù)劑預(yù)混輔料在使用 時(shí)，只需加入預(yù)混輔料8-14倍重量的注射用水，再加入一定量的疫苗，即可制成相應(yīng)的疫 苗制劑。
【文檔編號(hào)】A61P31/22GK104083767SQ201410309647
【公開日】2014年10月8日 申請(qǐng)日期:2014年7月2日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月2日
【發(fā)明者】帥放文, 王向峰, 章家偉, 曾三平 申請(qǐng)人:湖南爾康制藥股份有限公司