一種用于抗偏二甲肼的應(yīng)激食品添加劑及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種用于抗偏二甲肼的應(yīng)激食品添加劑及其制備方法，涉及抗應(yīng)激食品領(lǐng)域，包括γ-氨基丁酸、粒徑為110～160nm姜黃素納米脂質(zhì)顆粒、粒徑為120～170nm維生素B6微膠囊和絲蛋白肽，所述γ-氨基丁酸、姜黃素納米脂質(zhì)顆粒、維生素B6微膠囊、絲蛋白肽的質(zhì)量比為1.5～3：2.4～4：7.1～9：0.1～2。本發(fā)明的絲蛋白肽能夠分解產(chǎn)生丙氨酸，丙氨酸能夠異生成糖并進入血漿，肝臟從血漿中獲得大量的糖后，能夠加快分解偏二甲肼的速率，該添加劑的生物安全性好，能夠有效提高腦細(xì)胞中γ-氨基丁酸的含量，降低谷氨酸的含量。
【專利說明】-種用于抗偏二甲肼的應(yīng)激食品添加劑及其制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及抗應(yīng)激食品領(lǐng)域，具體涉及一種用于抗偏二甲肼的應(yīng)激食品添加劑及 其制備方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 偏二甲肼，又稱1，1-二甲基聯(lián)氨，是導(dǎo)彈、衛(wèi)星、飛船等發(fā)射試驗和運載火箭的主 體燃料，在軍事和航天領(lǐng)域應(yīng)用比較廣泛。
[0003] 偏二甲肼能夠通過皮膚和呼吸道滲入人體內(nèi)，偏二甲肼進入人體后，能夠與人體 內(nèi)的5-磷酸吡哆醛發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，生成腙和水。
[0004] 5-磷酸吡哆醛是人體內(nèi)谷氨酸脫羧酶和Y -氨基丁酸轉(zhuǎn)氨酶的輔酶，谷氨酸脫羧 酶和氨基丁酸轉(zhuǎn)氨酶能夠調(diào)節(jié)人體內(nèi)氨基丁酸的含量，進而調(diào)節(jié)人體的中樞神經(jīng)。
[0005] 當(dāng)5-磷酸吡哆醛含量降低時，會導(dǎo)致谷氨酸脫羧酶和Y -氨基丁酸轉(zhuǎn)氨酶的反應(yīng) 活性降低，進而引起人體內(nèi)氨基丁酸的含量急劇降低，導(dǎo)致神經(jīng)傳導(dǎo)的抑制因素減弱 或消失，繼而造成神經(jīng)中樞過度興奮，引發(fā)痙攣癥狀。
[0006] 5-磷酸吡哆醛還是維生素 B6的組成成分之一，5-磷酸吡哆醛與偏二甲肼反應(yīng)后， 會導(dǎo)致維生素 B6的大量流失，進而引發(fā)人體產(chǎn)生維生素 B6缺乏癥，導(dǎo)致人體的皮膚、中樞 神經(jīng)系統(tǒng)和造血功能受到損害。
[0007] 現(xiàn)有的流行病學(xué)調(diào)查表明：偏二甲肼為一種神經(jīng)毒素，能夠引起輕度脂肪肝和血 清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性升高，長期接觸偏二甲肼的工作人員，其神經(jīng)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)和消化系 統(tǒng)均受到一定程度的損傷。
[0008] 對小鼠進行偏二甲肼灌胃后，其腦組織中氨基丁酸的含量顯著降低，隨著偏 二甲肼服用量的增加，氨基丁酸逐漸減少。
[0009] 氨基丁酸是脊椎動物的樞神經(jīng)系統(tǒng)中特有的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)，介導(dǎo)了 40%上 抑制性神經(jīng)傳導(dǎo)。神經(jīng)細(xì)胞突觸間隙中氨基丁酸含量降低后，會導(dǎo)致神經(jīng)傳導(dǎo)的抑制 因素減弱或消失，繼而造成神經(jīng)中樞過度興奮，引發(fā)痙攣等神經(jīng)癥狀。
[0010]目前，為了防止長期接觸偏二甲肼的工作人員受到傷害，通常在工作人員的飲食 中添加富含維生素 B6的食品牛奶和啤酒、或者直接添加維生素 B6。
[0011] 但是現(xiàn)有的預(yù)防偏二甲肼慢性損傷的方法存在以下缺陷：
[0012] 工作人員服用富含維生素 B6的食品牛奶和啤酒、或者直接服用維生素 B6,維生素 B6在人體內(nèi)先轉(zhuǎn)化為磷酸鶼哆醛與磷酸吡哆胺，磷酸鶼哆醛與磷酸吡哆胺在人體內(nèi)進行氨 基傳遞，由于偏二甲肼主要與5-磷酸吡哆醛，導(dǎo)致人體腦細(xì)胞中的γ -氨基丁酸含量降低。 維生素 B6不能及時轉(zhuǎn)化成谷氨酸脫羧酶和γ -氨基丁酸轉(zhuǎn)氨酶，難以達到提高人體腦細(xì)胞 中的氨基丁酸含量的功能。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0013] 針對現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺陷，本發(fā)明的目的在于提供一種用于抗偏二甲肼的應(yīng)激 食品添加劑及其制備方法，能夠提高人體腦細(xì)胞中的γ -氨基丁酸含量。
[0014] 為達到以上目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案是：一種用于抗偏二甲肼的應(yīng)激食品添 加劑的制備方法，包括以下步驟：
[0015] Α、制備純度為75 %?85 %的絲蛋白肽，制備粒徑為110?160nm、姜黃素質(zhì)量分?jǐn)?shù) 為3. 5%?4. 5%的姜黃素納米脂質(zhì)顆粒；制備粒徑為120?170nm、維生素 B6的質(zhì)量分?jǐn)?shù) 為75 %?85 %的維生素 B6微膠囊；
[0016] B、按質(zhì)量份將2. 4?4份姜黃素納米脂質(zhì)顆粒，7. 1?9份維生素 B6微膠囊， 0. 1?2絲蛋白肽和1. 5?3份純度為95%?99%的γ-氨基丁酸混合均勻，得到抗偏二 甲肼應(yīng)激食品添加劑。
[0017] 在上述技術(shù)方案的基礎(chǔ)上，步驟A中所述制備純度為75%?85%的絲蛋白肽，包 括以下步驟：
[0018] 將蠶絲加入質(zhì)量濃度為0.5%、溫度為1001：的似2〇)3溶液中，保溫301^11，得絲膠 水溶液和內(nèi)層絲心；將絲膠水溶液透析、并濃縮，得到濃度為5. 8%的絲膠蛋白溶液；
[0019] 將內(nèi)層絲心放入濃度為40%、溫度為80°C的氯化鈣溶液中，保溫30min、得到絲 心粗溶液，將絲心粗溶液透析并濃縮，得到濃度為5. 8 %的絲心溶液；按摩爾份將1份復(fù)合 風(fēng)味蛋白酶、1份木瓜蛋白酶和1份堿性蛋白酶混合，得到復(fù)合酶，將復(fù)合酶配置成濃度為 5. 8 %的復(fù)合酶溶液；
[0020] 按體積份將1份絲膠蛋白溶液和2份絲心溶液混合，得到混合液；向混合液中體積 份為0. 005份的復(fù)合酶溶液后，攪拌反應(yīng)3h后進行滅酶處理，得到絲肽蛋白粗溶液；將絲肽 蛋白粗溶液濃縮、得到濃縮液；向濃縮液中加入無水乙醇，直至濃縮液的濃度為75%后進 行離心，得到酶解液；將酶解液透析、濃縮、干燥，得到純度為75%?85%的絲蛋白肽。
[0021] 在上述技術(shù)方案的基礎(chǔ)上，步驟B所述制備粒徑為150?200nm、姜黃素質(zhì)量分?jǐn)?shù) 為3. 5%?4. 5%的姜黃素納米脂質(zhì)顆粒包括以下步驟：
[0022] 按質(zhì)量份將5份卵磷脂與1份植物留醇混合均勻，得到脂質(zhì)，按質(zhì)量份將1份姜黃 素、16份脂質(zhì)、4份脫氧膽酸鈉和1份聚氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯混合均勻，得到復(fù)配溶 液；
[0023] 按體積份將1份復(fù)配溶液與1. 5?4份濃度為30 %?60 %的甘露醇溶液混合 均勻后、并乳化，得到乳化溶液，將乳化溶液制備成粒徑為150?200nm、姜黃素質(zhì)量份為 3. 5 %?4. 5 %的姜黃素納米脂質(zhì)顆粒。
[0024] 在上述技術(shù)方案的基礎(chǔ)上，所述步驟B還包括以下步驟：按質(zhì)量份將3份姜黃素 納米脂質(zhì)顆粒，8份的維生素 B6微膠囊，1份絲蛋白肽和1. 5?2份純度為95%?99%的 Y -氨基丁酸，混合均勻，得到抗偏二甲肼應(yīng)激食品添加劑。
[0025] 在上述技術(shù)方案的基礎(chǔ)上，所述步驟B之后還包括以下步驟：
[0026] 按質(zhì)量份，將1份抗偏二甲肼應(yīng)激食品添加劑與1份淀粉混合均勻，得到藥粉，在 符合GMP的清潔條件下，將藥粉造粒，得到抗偏二甲肼?lián)p傷的應(yīng)激藥片。
[0027] -種基于所述的制備方法得到的抗偏二甲肼的應(yīng)激食品添加劑，包括氨基丁 酸、粒徑為110?160nm姜黃素納米脂質(zhì)顆粒、粒徑為120?170nm維生素 B6微膠囊和絲 蛋白肽，所述Y -氨基丁酸、姜黃素納米脂質(zhì)顆粒、維生素 B6微膠囊、絲蛋白肽的質(zhì)量比為 1. 5 ?3 :2· 4 ?4 :7. 1 ?9 :0· 1 ?2。
[0028] 在上述技術(shù)方案的基礎(chǔ)上，所述氨基丁酸、姜黃素納米脂質(zhì)顆粒、維生素 B6微 膠囊、絲蛋白肽的質(zhì)量比為2 :3 :8 :1。
[0029] 在上述技術(shù)方案的基礎(chǔ)上，所述Υ -氨基丁酸的純度為99%、維生素 Β6微膠囊中 維生素 Β6的含量為80%、絲蛋白肽的純度為83%。
[0030] 在上述技術(shù)方案的基礎(chǔ)上，所述姜黃素納米脂質(zhì)顆粒包括姜黃素、脂質(zhì)、脫氧膽 酸鈉和聚氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯，所述姜黃素、脂質(zhì)、脫氧膽酸鈉、聚氧乙烯脫水山梨 醇單油酸酯的質(zhì)量比為1:16:4:1 ;所述脂質(zhì)包括卵磷脂和留醇，卵磷脂與留醇的質(zhì)量比為 5:1。
[0031] 在上述技術(shù)方案的基礎(chǔ)上，所述姜黃素納米脂質(zhì)顆粒中，姜黃素的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 3. 5%?4. 5%。
[0032] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點在于：
[0033] (1)本發(fā)明的抗偏二甲肼的應(yīng)激食品添加劑，包括氨基丁酸、姜黃素納米脂質(zhì) 顆粒、維生素 Β6微膠囊和絲蛋白肽，絲蛋白肽在人體內(nèi)能夠分解為丙氨酸和甘氨酸，丙氨 酸能夠異生成糖并進入血漿，肝臟從血漿中獲得大量的糖后，能夠加快分解偏二甲肼；丙氨 酸能夠促進TCA循環(huán)（tricarboxylicacidcycle，三羧酸循環(huán)）、活化蘋果酸穿梭系統(tǒng)，加快 分解抗偏二甲肼，甘氨酸能夠增加丙氨酸的活性，促進抗偏二甲肼的分解。
[0034] 部分氨基丁酸能夠通過血液循環(huán)進入腦細(xì)胞中，防止氨基丁酸缺失引起 的疾??；粒徑為120?170nm的維生素 B6微膠囊具有緩釋功能，與現(xiàn)有技術(shù)中直接服用維 生素 B6相比，能夠提高維生素 B6的吸收效果，能夠有效降低染毒小鼠體內(nèi)谷氨酸的含量， 提高染毒小鼠海馬中氨基丁酸的含量。
[0035] (2)本發(fā)明的抗偏二甲肼的應(yīng)激食品添加劑，包括粒徑為110?160nm的姜黃素納 米脂質(zhì)顆粒，姜黃素納米脂質(zhì)顆粒能夠與細(xì)胞膜融合，將姜黃素送入細(xì)胞內(nèi)部，與現(xiàn)有技術(shù) 中直接使用姜黃素相比，能夠更好地降低染毒小鼠體內(nèi)谷氨酸的含量，提高染毒小鼠海馬 中氨基丁酸的含量。
[0036] (3)本發(fā)明的抗偏二甲肼的應(yīng)激食品添加劑，氨基丁酸、姜黃素納米脂質(zhì)顆 粒、維生素 B6微膠囊、絲蛋白肽的質(zhì)量比為1. 5?3 :2. 4?4 :7. 1?9 :0. 1?2,該添加劑 的生物安全性好，能夠有效提高腦細(xì)胞中Y -氨基丁酸的含量，降低谷氨酸的含量，有效防 治了抗偏二甲肼帶來的疾病。

【具體實施方式】
[0037] 以下結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步詳細(xì)說明。
[0038] 本發(fā)明的一種用于抗偏二甲肼的應(yīng)激食品添加劑的制備方法，包括以下步驟：
[0039] 步驟一、將蠶絲加入質(zhì)量濃度為0.5%、溫度為1001：的似2〇)3溶液中，保溫20? 40min，得絲膠水溶液和內(nèi)層絲心。
[0040] 步驟二、將絲膠水溶液透析并濃縮至4%?7%，得到絲膠蛋白溶液。
[0041] 步驟三、將內(nèi)層絲心放入濃度為30%?50%、溫度為80°C的氯化鈣溶液中，保溫 30min、得到絲心粗溶液，將絲心粗溶液透析并濃縮，得到濃度為4%?8%的絲心溶液。
[0042] 步驟四、按摩爾份將1份復(fù)合風(fēng)味蛋白酶、1份木瓜蛋白酶和1份堿性蛋白酶混合， 得到復(fù)合酶，將復(fù)合酶配置成濃度為5. 8%的復(fù)合酶溶液。
[0043] 步驟五、按體積份將1份絲膠蛋白溶液和2份絲心溶液混合，得到混合液，向混合 液中加入體積份為〇. 005份的復(fù)合酶溶液，攪拌反應(yīng)3h后，進行滅酶處理，得到絲肽蛋白 粗溶液，將絲肽蛋白粗溶液濃縮、得到濃縮液；向濃縮液中加入無水乙醇至濃度為60%? 80%后、離心，得到酶解液，將酶解液透析濃縮后，進行噴霧干燥，得到絲蛋白肽粉，采用色 譜儀對絲蛋白肽粉進行檢測，得到絲蛋白肽的濃度為75%?85%。
[0044] 步驟六、按質(zhì)量份將5份卵磷脂與1份植物留醇混合均勻，得到脂質(zhì)，按質(zhì)量份將 1份姜黃素、16份脂質(zhì)、4份脫氧膽酸鈉和1份吐溫80 (聚氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯）混 合均勻，得到復(fù)配溶液。
[0045] 步驟七、按體積份將1份復(fù)配溶液與1. 5?4份濃度為30 %?60%的甘露醇溶液 混合均勻后，加入超聲儀乳化，得到乳化溶液，將乳化溶液制備成粒徑為110?160nm、姜黃 素質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3. 5 %?4. 5 %的姜黃素納米脂質(zhì)顆粒。
[0046] 步驟八、將維生素 B6制備成粒徑為120?170nm的維生素 B6微膠囊，維生素 B6 微膠囊中，維生素 B6的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為75 %?85%。
[0047] 步驟九、按質(zhì)量份將1.5?3份濃度為95%?99%的氨基丁酸，2. 4?4份姜 黃素納米脂質(zhì)顆粒，7. 1?9份維生素 B6微膠囊，0. 1?2份絲蛋白肽混合均勻，得到抗偏 二甲肼應(yīng)激食品添加劑，按質(zhì)量份將1份抗偏二甲肼應(yīng)激食品添加劑與1份淀粉混合均勻， 得到藥粉，在符合GMP的清潔條件下，將藥粉造粒，得到抗偏二甲肼?lián)p傷的應(yīng)激藥片。
[0048] 一種抗偏二甲肼?lián)p傷的應(yīng)激藥物，包括氨基丁酸、姜黃素納米脂質(zhì)顆粒、維生 素 B6微膠囊和絲蛋白肽，γ-氨基丁酸、姜黃素納米脂質(zhì)顆粒、維生素 B6、絲蛋白肽之間的 質(zhì)量比為1. 5?3 :2· 4?4 :7. 1?9 :0· 1?2。
[0049] 氨基丁酸的純度為99%、維生素 B6微膠囊的純度為80%、絲蛋白肽的純度為 83%，維生素 B6微膠囊的直徑為120?170nm。姜黃素納米脂質(zhì)顆粒包括姜黃素、脂質(zhì)、脫 氧膽酸鈉和聚氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯，脂質(zhì)包括卵磷脂和留醇，卵磷脂與留醇的質(zhì)量 比為5:1。
[0050] 在實際使用中，氨基丁酸、姜黃素納米脂質(zhì)顆粒、維生素 B6、絲蛋白肽之間的 質(zhì)量比可以根據(jù)具體情況進行調(diào)節(jié)，在本發(fā)明實施例中，Y -氨基丁酸、姜黃素納米脂質(zhì)顆 粒、維生素 B6、絲蛋白肽之間的質(zhì)量比為2 :3 :8 :1。
[0051] 下面，通過3個實施例對本發(fā)明進行進一步的說明
[0052] 實施例1
[0053] 5101:將蠶絲加入質(zhì)量濃度為0.5%、溫度為1001：的似2〇)3溶液中，保溫201^11， 得絲膠水溶液和內(nèi)層絲心.
[0054] S102 :將絲膠水溶液透析并濃縮至4%，得到絲膠蛋白溶液。
[0055] S103 :將內(nèi)層絲心放入濃度為30%、溫度為80°C的氯化鈣溶液中，保溫30min、得 到絲心粗溶液，將絲心粗溶液透析并濃縮，得到濃度為4%的絲心溶液。
[0056] S104 :按摩爾份將1份復(fù)合風(fēng)味蛋白酶、1份木瓜蛋白酶和1份堿性蛋白酶混合， 得到復(fù)合酶。
[0057] S105 :按體積份將1份絲膠蛋白溶液和2份絲心溶液混合，得到混合液，按質(zhì)量 份向混合液中加入〇. 005份復(fù)合酶溶液，攪拌反應(yīng)3h后，進行滅酶處理，得到絲肽蛋白粗 溶液，將絲肽蛋白粗溶液濃縮、得到濃縮液；向濃縮液中加入無水乙醇至濃度為60%后、離 心，得到酶解液，將酶解液透析濃縮后，進行噴霧干燥，得到絲蛋白肽粉，采用色譜儀對絲蛋 白肽粉進行檢測，得到絲蛋白肽的濃度為75%。
[0058] S106 :按質(zhì)量份將5份卵磷脂與1份植物甾醇混合均勻，得到脂質(zhì)，按質(zhì)量份將1 份姜黃素、16份脂質(zhì)、4份脫氧膽酸鈉和1份吐溫80混合均勻，得到復(fù)配溶液。
[0059] S107 :按體積份將1份復(fù)配溶液與1. 5份濃度為30%的甘露醇溶液混合均勻 后，加入超聲儀乳化，得到乳化溶液，將乳化溶液制備成粒徑為ll〇nm、姜黃素質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 3. 5 %的姜黃素納米脂質(zhì)顆粒。
[0060] S108 :將維生素 B6制備成粒徑為120nm的維生素 B6微膠囊，維生素 B6微膠囊中， 維生素 B6的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為75%。
[0061] S109 :按質(zhì)量份將1. 5份濃度為95%的氨基丁酸，2. 4份姜黃素納米脂質(zhì)顆 粒，7. 1份維生素 B6微膠囊，0. 1份絲蛋白肽混合均勻，得到抗偏二甲肼應(yīng)激食品添加劑，按 質(zhì)量份將1份抗偏二甲肼應(yīng)激食品添加劑與1份淀粉混合均勻，得到藥粉，在符合GMP的清 潔條件下，將藥粉造粒，得到抗偏二甲肼?lián)p傷的應(yīng)激藥片。
[0062] 一種抗偏二甲肼?lián)p傷的應(yīng)激藥物，包括氨基丁酸、姜黃素納米脂質(zhì)顆粒、維生 素 B6微膠囊和絲蛋白肽，γ-氨基丁酸、姜黃素納米脂質(zhì)顆粒、維生素 B6、絲蛋白肽之間的 質(zhì)量比為 1. 5 :2. 4 :7. 1 :0· 1。
[0063] 實施例2
[0064] 5201:將蠶絲加入質(zhì)量濃度為0.5%、溫度為1001：的似2〇)3溶液中，保溫401^11， 得絲膠水溶液和內(nèi)層絲心.
[0065] S202 :將絲膠水溶液透析并濃縮至7%，得到絲膠蛋白溶液。
[0066] S203 :將內(nèi)層絲心放入濃度為50%、溫度為80°C的氯化鈣溶液中，保溫30min、得 到絲心粗溶液，將絲心粗溶液透析并濃縮，得到濃度為8%的絲心溶液。
[0067] S204 :按摩爾份將1份復(fù)合風(fēng)味蛋白酶、1份木瓜蛋白酶和1份堿性蛋白酶混合， 得到復(fù)合酶。
[0068] S205 :按體積份將1份絲膠蛋白溶液和2份絲心溶液混合，得到混合液，按質(zhì)量 份向混合液中加入〇. 005份復(fù)合酶溶液，攪拌反應(yīng)3h后，進行滅酶處理，得到絲肽蛋白粗 溶液，將絲肽蛋白粗溶液濃縮、得到濃縮液；向濃縮液中加入無水乙醇至濃度為80%后、離 心，得到酶解液，將酶解液透析濃縮后，進行噴霧干燥，得到絲蛋白肽粉，采用色譜儀對絲蛋 白肽粉進行檢測，得到絲蛋白肽的濃度為85%。
[0069] S206 :按質(zhì)量份將5份卵磷脂與1份植物留醇混合均勻，得到脂質(zhì)，按質(zhì)量份將1 份姜黃素、16份脂質(zhì)、4份脫氧膽酸鈉和1份吐溫80混合均勻，得到復(fù)配溶液。
[0070] S207 :按體積份將1份復(fù)配溶液與4份濃度為60 %的甘露醇溶液混合均勻后，力口 入超聲儀乳化，得到乳化溶液，將乳化溶液制備成粒徑為160nm、姜黃素質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4. 5% 的姜黃素納米脂質(zhì)顆粒。
[0071] S208 :將維生素 B6制備成粒徑為170nm的維生素 B6微膠囊，維生素 B6微膠囊中， 維生素 B6的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為85 %。
[0072] S209 :按質(zhì)量份將3份濃度為97%的氨基丁酸，4份姜黃素納米脂質(zhì)顆粒，9份 維生素 B6微膠囊，2份絲蛋白肽混合均勻，得到抗偏二甲肼應(yīng)激食品添加劑，按質(zhì)量份將1 份抗偏二甲肼應(yīng)激食品添加劑與1份淀粉混合均勻，得到藥粉，在符合GMP的清潔條件下， 將藥粉造粒，得到抗偏二甲肼?lián)p傷的應(yīng)激藥片。
[0073] -種抗偏二甲肼?lián)p傷的應(yīng)激藥物，包括氨基丁酸、姜黃素納米脂質(zhì)顆粒、維生 素 B6微膠囊和絲蛋白肽，氨基丁酸、姜黃素納米脂質(zhì)顆粒、維生素 B6、絲蛋白肽之間的 質(zhì)量比為3 :4 :9 :2。
[0074] 實施例3
[0075] 5301:將蠶絲加入質(zhì)量濃度為0.5%、溫度為1001：的似2〇)3溶液中，保溫301^11， 得絲膠水溶液和內(nèi)層絲心.
[0076] S302 :將絲膠水溶液透析并濃縮至5. 8%，得到絲膠蛋白溶液。
[0077] S303 :將內(nèi)層絲心放入濃度為40%、溫度為80°C的氯化鈣溶液中，保溫30min、得 到絲心粗溶液，將絲心粗溶液透析并濃縮，得到濃度為5. 8%的絲心溶液。
[0078] S304 :按摩爾份將1份復(fù)合風(fēng)味蛋白酶、1份木瓜蛋白酶和1份堿性蛋白酶混合， 得到復(fù)合酶。
[0079] S305 :按體積份將1份絲膠蛋白溶液和2份絲心溶液混合，得到混合液，按質(zhì)量 份向混合液中加入〇. 005份復(fù)合酶溶液，攪拌反應(yīng)3h后，進行滅酶處理，得到絲肽蛋白粗 溶液，將絲肽蛋白粗溶液濃縮、得到濃縮液；向濃縮液中加入無水乙醇至濃度為75%后、離 心，得到酶解液，將酶解液透析濃縮后，進行噴霧干燥，得到絲蛋白肽粉，采用色譜儀對絲蛋 白肽粉進行檢測，得到絲蛋白肽的濃度為83%。
[0080] S306 :按質(zhì)量份將5份卵磷脂與1份植物留醇混合均勻，得到脂質(zhì)，按質(zhì)量份將1 份姜黃素、16份脂質(zhì)、4份脫氧膽酸鈉和1份吐溫80混合均勻，得到復(fù)配溶液。
[0081] S307 :按體積份將1份復(fù)配溶液與2. 5份濃度為45%的甘露醇溶液混合均勻 后，加入超聲儀乳化，得到乳化溶液，將乳化溶液制備成粒徑為130nm、姜黃素質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 4. 3 %的姜黃素納米脂質(zhì)顆粒。
[0082] S308 :將維生素 B6制備成粒徑為150nm的維生素 B6微膠囊，維生素 B6微膠囊中， 維生素 B6的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為80%。
[0083] S309 :按質(zhì)量份將2份濃度為99%的氨基丁酸，3份姜黃素納米脂質(zhì)顆粒，8份 維生素 B6微膠囊，1份絲蛋白肽混合均勻，得到抗偏二甲肼應(yīng)激食品添加劑，按質(zhì)量份將1 份抗偏二甲肼應(yīng)激食品添加劑與1份淀粉混合均勻，得到藥粉，在符合GMP的清潔條件下， 將藥粉造粒，得到抗偏二甲肼?lián)p傷的應(yīng)激藥片。
[0084] 一種抗偏二甲肼?lián)p傷的應(yīng)激藥物，包括氨基丁酸、姜黃素納米脂質(zhì)顆粒、維生 素 B6微膠囊和絲蛋白肽，γ-氨基丁酸、姜黃素納米脂質(zhì)顆粒、維生素 B6、絲蛋白肽之間的 質(zhì)量比為2 :3 :8 :1。
[0085] 下面為本發(fā)明的抗偏二甲肼?lián)p傷的應(yīng)激藥物的驗證過程。
[0086] 按質(zhì)量份，將0.2?1.4份氨基丁酸、0. 1?2.0份絲蛋白肽、2. 4?4.0份姜 黃素脂質(zhì)體和〇. 1?2. 0份微膠囊維生素 B6作為第一添加劑A1。
[0087] 按質(zhì)量份，將0.2?1.4份氨基丁酸、2. 4?4.0份絲蛋白肽、4.0?7.0份姜 黃素脂質(zhì)體和2. 1?4. 0份微膠囊維生素 B6配制為第二添加劑A2。
[0088] 按質(zhì)量份，將0. 2?1. 4份氨基丁酸、4. 1?6. 0的絲蛋白肽、7. 1?9. 0的姜 黃素脂質(zhì)體、4. 1?6. 0份微膠囊維生素 B6配制為第三添加劑A3。
[0089] 按質(zhì)量份，將1. 5?3. 0份γ -氨基丁酸、0. 1?2. 0的絲蛋白肽、4. 0?7. 0份姜 黃素脂質(zhì)體、4. 1?6. 0份微膠囊維生素 B6配制為第四添加劑A4。
[0090] 按質(zhì)量份，將1. 5?3. 0份γ -氨基丁酸、2. 4?4. 0的絲蛋白肽、7. 1?9. 0份姜 黃素脂質(zhì)體、〇. 1?2. 0份微膠囊維生素 Β6配制為第五添加劑Α5。
[0091] 按質(zhì)量份，將1. 5?3. 0份γ -氨基丁酸、4. 1?6. 0的絲蛋白肽、7. 1?9. 0份姜 黃素脂質(zhì)體、2. 1?4. 0份微膠囊維生素 Β6配制為第六添加劑Α6。
[0092] 按質(zhì)量份，將3. 1?5.0份氨基丁酸、0. 1?2.0的絲蛋白肽、7. 1?9.0份姜 黃素脂質(zhì)體、2. 1?4. 0份微膠囊維生素 Β6配制為第七添加劑Α7。
[0093] 按質(zhì)量份，將3. 1?5.0份氨基丁酸、2. 4?4.0的絲蛋白肽、2. 4?4.0份姜 黃素脂質(zhì)體、2. 1?4. 0份微膠囊維生素 Β6配制為第八添加劑Α8。
[0094] 按質(zhì)量份，將3. 1?5. 0份γ -氨基丁酸、4. 1?6. 0的絲蛋白肽、4. 0?7. 0份姜 黃素脂質(zhì)體、〇. 1?2. 0份微膠囊維生素 Β6配制為第九添加劑Α9。
[0095] 選擇由北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實驗動物科學(xué)部提供，來自ICR(Institute of Cancer Research,美國癌癥研究所）的SPF級（Specific pathogen Free,無特定病原體）小鼠作為 實驗對象，每只小鼠的重量均為18?22g。
[0096] 在溫度為22?23°C，濕度為60 %?70 %的條件下開展實驗。
[0097] 按照78. 873mg/kg的標(biāo)準(zhǔn)向若干實驗小鼠腹腔內(nèi)注射偏二甲肼，作為染毒小鼠， 將所有染毒小鼠分配為維生素 B6測試組、微膠囊維生素 B6測試組、姜黃素測試組、姜黃素 脂質(zhì)體測試組和添加劑測試組。
[0098] 所有測試組均設(shè)置相應(yīng)的正常組和單純?nèi)径窘M，用于驗證對應(yīng)測試組的使用效 果。
[0099] 將維生素 B6測試組的染毒小鼠分為兩組，對兩組分別進行7天灌胃干預(yù)，一組每 次均灌入濃度為l〇〇mg/kg的維生素 B6,另一組每次均灌入濃度為200mg/kg的維生素 B6。 [0100] 將微膠囊維生素 B6測試組的染毒小鼠分為兩組，對兩組染毒小鼠分別進行7天 灌胃干預(yù)，一組每次均灌入濃度為l〇〇mg/kg的微膠囊維生素 B6,另一組每次均灌入濃度為 200mg/kg的微膠囊維生素 B6。
[0101] 7天后，取維生素 B6測試組、微膠囊維生素 B6測試組的所有染毒小鼠的海馬，將所 有染毒小鼠的海馬均制備成勻漿，測定所有染毒小鼠海馬中谷氨酸、氨基丁酸的含量。
[0102] 參見表1所示，正常小鼠海馬中谷氨酸的含量為2148±21ng/mg，γ-氨基丁酸的 含量為326. 7±7.4ng/mg ;染毒小鼠海馬中谷氨酸的含量為2671±53ng/mg，γ-氨基丁酸 的含量為264. 2±13. 7ng/mg ;由此可知，偏二甲肼能夠提高小鼠海馬中谷氨酸的含量，降 低小鼠海馬中氨基丁酸的含量。
[0103] 維生素 B6測試組中，當(dāng)維生素 B6的用量為100mg/kg時，對應(yīng)的小鼠海馬中的谷 氨酸的含量為2593±44ng/mg，γ -氨基丁酸的含量為282. 8±9. 6ng/mg ;當(dāng)維生素 B6的用 量為200mg/kg時，對應(yīng)的小鼠海馬中的谷氨酸的含量為2467±31ng/mg，其P值（P-Value， Probability,可能性）< 0. 05,準(zhǔn)確性顯著，γ-氨基丁酸的含量為293. 5±6. 4ng/mg，其P 值< 0.05,準(zhǔn)確性非常顯著。
[0104] 微膠囊維生素 B6測試組中，當(dāng)微膠囊維生素 B6的用量為100mg/kg時，對應(yīng)的海 馬中的谷氨酸的含量為2482±29ng/mg其P值< 0. 05,準(zhǔn)確性顯著，γ-氨基丁酸的含量為 301.5±10. lng/mg，其P值<0. 01，準(zhǔn)確性非常顯著；當(dāng)微膠囊維生素 B6的用量為200mg/ kg時，對應(yīng)的小鼠海馬中的谷氨酸的含量為2368±37ng/mg，其P值< 0. 01，準(zhǔn)確性顯著， Y -氨基丁酸的含量為310. 9 ±5. 6ng/mg，其P值< 0. 01，準(zhǔn)確性非常顯著。
[0105] 由上述數(shù)據(jù)可知，維生素 B6、微膠囊維生素 B6均能降低染毒小鼠體內(nèi)谷氨酸的含 量，提高染毒小鼠海馬中Y -氨基丁酸的含量，高濃度的維生素 B6、微膠囊維生素 B6效果優(yōu) 于低濃度的維生素 B6、微膠囊維生素 B6。
[0106] 微膠囊維生素 B6在降低染毒小鼠體內(nèi)谷氨酸的含量，提高染毒小鼠海馬中氨 基丁酸的含量時，效果優(yōu)于維生素 B6。
[0107] 表1維生素 B6、微膠囊維生素 B6對UDMH染毒小鼠海馬組織中Glu、GABA含量的 影響比較
[0108]

【權(quán)利要求】
1. 一種用于抗偏二甲肼的應(yīng)激食品添加劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟： A、 制備純度為75%?85%的絲蛋白肽，制備粒徑為110?160nm、姜黃素質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 3. 5%?4. 5%的姜黃素納米脂質(zhì)顆粒；制備粒徑為120?170nm、維生素 B6的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 75 %?85 %的維生素 B6微膠囊； B、 按質(zhì)量份將2. 4?4份姜黃素納米脂質(zhì)顆粒，7. 1?9份維生素 B6微膠囊，0. 1?2 絲蛋白肽和1. 5?3份純度為95 %?99 %的γ -氨基丁酸混合均勻，得到抗偏二甲肼應(yīng)激 食品添加劑。
2. 如權(quán)利要求1所述的用于抗偏二甲肼的應(yīng)激食品添加劑的制備方法，其特征在于： 步驟A中所述制備純度為75 %?85%的絲蛋白肽，包括以下步驟： 將蠶絲加入質(zhì)量濃度為0. 5%、溫度為100°C的Na2C03溶液中，保溫30min，得絲膠水溶 液和內(nèi)層絲心；將絲膠水溶液透析、并濃縮，得到濃度為5. 8%的絲膠蛋白溶液； 將內(nèi)層絲心放入濃度為40%、溫度為80°C的氯化鈣溶液中，保溫30min、得到絲心粗溶 液，將絲心粗溶液透析并濃縮，得到濃度為5. 8 %的絲心溶液；按摩爾份將1份復(fù)合風(fēng)味蛋 白酶、1份木瓜蛋白酶和1份堿性蛋白酶混合，得到復(fù)合酶，將復(fù)合酶配置成濃度為5. 8%的 復(fù)合酶溶液； 按體積份將1份絲膠蛋白溶液和2份絲心溶液混合，得到混合液；向混合液中體積份為 〇. 005份的復(fù)合酶溶液后，攪拌反應(yīng)3h后進行滅酶處理，得到絲肽蛋白粗溶液；將絲肽蛋白 粗溶液濃縮、得到濃縮液；向濃縮液中加入無水乙醇，直至濃縮液的濃度為75%后進行離 心，得到酶解液；將酶解液透析、濃縮、干燥，得到純度為75%?85%的絲蛋白肽。
3. 如權(quán)利要求1所述的用于抗偏二甲肼的應(yīng)激食品添加劑的制備方法，其特征在于： 步驟B中所述制備粒徑為150?200nm、姜黃素質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3. 5%?4. 5%的姜黃素納米脂 質(zhì)顆粒包括以下步驟： 按質(zhì)量份將5份卵磷脂與1份植物留醇混合均勻，得到脂質(zhì)，按質(zhì)量份將1份姜黃素、 16份脂質(zhì)、4份脫氧膽酸鈉和1份聚氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯混合均勻，得到復(fù)配溶液； 按體積份將1份復(fù)配溶液與1. 5?4份濃度為30 %?60%的甘露醇溶液混合均勻后、 并乳化，得到乳化溶液，將乳化溶液制備成粒徑為150?200nm、姜黃素質(zhì)量份為3. 5%? 4. 5 %的姜黃素納米脂質(zhì)顆粒。
4. 如權(quán)利要求1所述的用于抗偏二甲肼的應(yīng)激食品添加劑的制備方法，其特征在于， 所述步驟B還包括以下步驟：按質(zhì)量份將3份姜黃素納米脂質(zhì)顆粒，8份的維生素 B6微膠 囊，1份絲蛋白肽和1. 5?2份純度為95%?99%的γ -氨基丁酸，混合均勻，得到抗偏二 甲肼應(yīng)激食品添加劑。
5. 如權(quán)利要求1所述的用于抗偏二甲肼的應(yīng)激食品添加劑的制備方法，其特征在于， 所述步驟B之后還包括以下步驟： 按質(zhì)量份，將1份抗偏二甲肼應(yīng)激食品添加劑與1份淀粉混合均勻，得到藥粉，在符合 GMP的清潔條件下，將藥粉造粒，得到抗偏二甲肼?lián)p傷的應(yīng)激藥片。
6. -種基于權(quán)利要求1?5中任一項所述的制備方法得到的抗偏二甲肼的應(yīng)激食品 添加劑，其特征在于：包括氨基丁酸、粒徑為110?160nm姜黃素納米脂質(zhì)顆粒、粒徑為 120?170nm維生素 B6微膠囊和絲蛋白肽，所述γ -氨基丁酸、姜黃素納米脂質(zhì)顆粒、維生 素 B6微膠囊、絲蛋白肽的質(zhì)量比為1. 5?3 :2. 4?4 :7. 1?9 :0. 1?2。
7. 如權(quán)利要求6所述的抗偏二甲肼的應(yīng)激食品添加劑，其特征在于：所述γ-氨基丁 酸、姜黃素納米脂質(zhì)顆粒、維生素 Β6微膠囊、絲蛋白肽的質(zhì)量比為2 :3 :8 :1。
8. 如權(quán)利要求6所述的抗偏二甲肼的應(yīng)激食品添加劑，其特征在于：所述γ-氨基丁 酸的純度為99 %，所述維生素 Β6微膠囊中維生素 Β6的含量為80%，所述絲蛋白肽的純度 為 83%。
9. 如權(quán)利要求6所述的抗偏二甲肼的應(yīng)激食品添加劑，其特征在于：所述姜黃素納米 脂質(zhì)顆粒包括姜黃素、脂質(zhì)、脫氧膽酸鈉和聚氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯，所述姜黃素、月旨 質(zhì)、脫氧膽酸鈉、聚氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯的質(zhì)量比為1:16:4:1 ;所述脂質(zhì)包括卵磷 脂和甾醇，卵磷脂與甾醇的質(zhì)量比為5:1。
10. 如權(quán)利要求6所述的抗偏二甲肼的應(yīng)激食品添加劑，其特征在于：所述姜黃素納米 脂質(zhì)顆粒中，姜黃素的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3. 5%?4. 5%。
【文檔編號】A61P39/00GK104146269SQ201410362732
【公開日】2014年11月19日 申請日期:2014年7月28日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月28日
【發(fā)明者】蘇喜生, 李德遠, 李瑋, 鐘飛, 徐祖武, 胡杰, 鄭哲君 申請人:蘇喜生, 李德遠, 李瑋, 鐘飛, 徐祖武, 胡杰, 鄭哲君