一種具有抗皮膚癌活性的中藥組合物及其用途
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種具有抗皮膚癌活性的中藥組合物及其用途，所述中藥組合物按質(zhì)量百分?jǐn)?shù)計(jì)，落地生根提取物含量為50～80%，冰片含量為1～10%，丹參總酚酸含量為5～20%，赤芍總苷含量為5～20%，余量為藥學(xué)上可接受的載體和/或賦形劑，以上四種成分總含量為60～99%。本發(fā)明中藥組合物作為抗皮膚癌藥物有顯著的治療效果，且適用于各種類型的皮膚癌，質(zhì)量可控度高，藥效良好。
【專利說明】一種具有抗皮膚癌活性的中藥組合物及其用途

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及藥物領(lǐng)域，具體是指一種具有抗皮膚癌活性的中藥組合物及其用途。

【背景技術(shù)】
[0002] 目前我國(guó)腫瘤引起的死亡約為所有病因引起死亡總數(shù)的17. 9%，每年癌癥的發(fā)病 人數(shù)約為200萬，死于癌癥的人數(shù)超過140萬，發(fā)病率逐年呈上升趨勢(shì)。目前在我國(guó)皮膚癌 的發(fā)病率不高，其中在白種人群中最為常見的，發(fā)病率至少達(dá)〇. 65%。
[0003] 目前對(duì)皮膚癌治療主要采用手術(shù)治療、放射治療及化學(xué)治療等方法，其中，臨床治 療方案中，手術(shù)治療為首選方式，治愈率較高，但為防止轉(zhuǎn)移，需進(jìn)行深度切除，進(jìn)而影響美 觀；采用放射治療及化學(xué)治療的毒副作用較大。因此，尋求一種非手術(shù)方式且毒副作用小、 確有療效的治療皮膚癌藥物成為藥物研究開發(fā)的必然發(fā)展趨勢(shì)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于：提供一種具有抗皮膚癌活性的中藥組合物；另一目的在于： 提供一種本發(fā)明中藥組合物作為抗皮膚癌藥物的用途。
[0005] 本發(fā)明通過下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：所述中藥組合物按質(zhì)量百分?jǐn)?shù)計(jì)，落地生根提取 物含量為50?80%，冰片含量為1?10%，丹參總酚酸含量為5?20%，赤芍總苷含量為5? 20%，余量為藥學(xué)上可接受的載體和/或賦形劑，以上四種成分總含量為60?99%。
[0006] 進(jìn)一步地，優(yōu)選所述中藥組合物包括落地生根提取物70%，冰片4%，丹參總酚酸 20%、赤芍總苷5%。
[0007] 進(jìn)一步地，優(yōu)選所述中藥組合物包括落地生根提取物50%，冰片9%，丹參總酚酸 20%，赤芍總苷20%。
[0008] 進(jìn)一步地，所述落地生根提取物制備方法：取落地生根植物全株或根、莖、葉任一 部位的鮮品、冷凍干燥品，加入有機(jī)溶媒進(jìn)行萃取或回流提取，收集提取液，干燥，即得。通 過有機(jī)溶媒預(yù)處理樣品，確保有效成分在提取前的穩(wěn)定性，提取溶媒包括但不限于甲醇、乙 醇、乙酸乙酯、石油醚或類似溶媒，提取方法包括但不限于浸漬法、回流法、滲漉法，干燥包 括但不限于減壓干燥、冷凍干燥、噴霧干燥、微波干燥。
[0009] 中藥組合物中落地生根提取物為通過乙醇、甲醇、乙酸乙酯、石油醚等任意一種有 機(jī)溶媒提取制備。
[0010] 1、落地生根乙醇提取物制備方法如下： 1)取落地生根植物根、莖、葉任一部位鮮品1 kg，加入95%乙醇浸泡1?2天，粉碎，然 后用95%乙醇提取浸漬3天，收集提取液，減壓回收乙醇，濃縮液冷凍干燥即得落地生根乙 醇提取物。
[0011] 2)取落地生根全株植物鮮品1 kg，粉碎，加入95%乙醇回流提取3次，收集提取液， 減壓回收乙醇，濃縮液冷凍干燥即得落地生根乙醇提取物。
[0012] 3)取落地生根全株植物鮮品1 kg，冷凍干燥后粉碎，加入95%乙醇回流提取3次， 收集提取液，減壓回收乙醇，濃縮液冷凍干燥即得落地生根乙醇提取物。
[0013] 2、落地生根甲醇提取物制備方法：取落地生根植物根、莖、葉任一部位鮮品1 kg， 粉碎，加入甲醇回流提取3次，收集提取液，減壓回收乙醇，濃縮液冷凍干燥即得落地生根 甲醇提取物。
[0014] 3、落地生根石油醚提取物制備方法如下： 1)取上述落地生根乙醇提取物制備方法獲得的落地生根乙醇提取物濃縮溶液，用石油 醚萃取，回收石油醚，干燥即得。
[0015] 2 )取上述落地生根甲醇提取物制備方法獲得的落地生根甲醇提取物干燥樣品，力口 4~20倍水混懸，用石油醚萃取，回收石油醚，干燥即得。
[0016] 3)取上述落地生根乙醇提取物制備方法獲得的落地生根乙醇提取物干燥樣品，用 石油醚回流提取，回收石油醚，干燥即得。
[0017] 4、落地生根乙酸乙酯提取物的制備方法如下： 1)取上述落地生根乙醇提取物制備方法獲得的落地生根乙醇提取物濃縮溶液，依次用 石油醚、乙酸乙酯萃取，回收乙酸乙酯，干燥即得。
[0018] 2)取上述落地生根甲醇提取物制備方法獲得的落地生根甲醇提物干燥樣品，力口 Γ20倍水混懸，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，回收乙酸乙酯，干燥即得。
[0019] 3)取上述落地生根乙醇提取物制備方法獲得的落地生根乙醇提取物干燥樣品，用 乙酸乙酯回流提取，回收乙酸乙酯，干燥即得。
[0020] 中藥組合物中冰片通過粉碎至預(yù)定的顆粒細(xì)度得冰片極細(xì)粉。
[0021] 進(jìn)一步地,所述丹參總酚酸的制備方法：取丹參藥材，粉碎，加入0. lmol/1鹽酸溶 液，浸泡，將丹參藥材浸泡液裝柱，以14倍柱體積PH=2的鹽酸溶液滲漉，合并滲漉液，上樣 量按25mg丹參總酚酸/lml樹脂的上AB-8型大孔樹脂柱，以3ml/min洗脫，至吸附平衡，依 次用水以5倍柱體積，20%乙醇6倍柱體積淋洗，最后用40%乙醇以4倍柱體積洗脫，合并洗 脫液，70°C，減壓脫醇濃縮，凍干，即得。
[0022] 其中，丹參總酚酸制備方法中，丹參藥材可為丹參生藥、丹參飲片或丹參炮制品中 任意一種。
[0023] 進(jìn)一步地，所述赤芍總苷制備方法：取赤芍藥材，以藥材重量8倍量的70%乙醇回 流提取3次，每次1. 5小時(shí)，濾過，合并提取液，濃縮至無醇味，溶解，離心，取上清液，調(diào)節(jié)其 濃度為〇. lg赤芍總苷/lml，對(duì)D101型大孔吸附樹脂柱裝柱，上樣量為48.67mg芍藥苷/g 樹脂，以3ml/min洗脫，回收乙醇，濃縮，干燥，即得。
[0024] 進(jìn)一步地，所述中藥組合物，可通過藥劑學(xué)已知方法，與載體或賦形劑結(jié)合制備藥 物制劑，如外用制劑搽劑、膏劑、凝膠劑等，如體內(nèi)給藥制劑片劑、膠囊劑、顆粒劑、微丸、微 球、滴丸、控釋制劑、緩釋制劑、注射劑等。
[0025] 中藥組合物藥物制劑的制備方法如下： 片劑的制備：取落地生根乙醇提取物300 g，加入200目的冰片極細(xì)粉6g，丹參總酚酸 9〇g，赤巧總苷30g，加入輔料，微晶纖維素20g，乳糖17. 5g，交聯(lián)羧甲基纖維素鈉5 g，壓片 制成片劑； 膠囊劑的制備：取落地生根乙酸乙酯提取物300g，加入200目的冰片極細(xì)粉6g，丹參 總酚酸90g，赤巧總苷25g，加入輔料，乳糖10g、可壓性淀粉5g、羧甲基淀粉5g、微晶纖維素 log制成膠囊劑； 顆粒劑的制備：取落地生根甲醇提取物300g，加入200目的冰片極細(xì)粉6g，丹參總酚酸 9〇g，赤巧總苷25g，加入輔料，乳糖10g、淀粉5g、甲基纖維素5g、輕甲基纖維素10g、輕丙基 甲基纖維素12g、聚乙烯吡咯烷酮4g、微粉硅膠3g制成顆粒劑。
[0026] 軟膏劑的制備：取落地生根乙醇提取物或乙酸乙酯提取物300g，加入200目的冰 片極細(xì)粉6g，丹參總酚酸30g，赤芍總苷30g，加入輔料，十八醇25g、單硬脂酸甘油脂10g、 甘油15g、硬脂酸15g制成軟膏劑。
[0027] 栓劑的制備：取落地生根乙醇提取物300g，加入200目的冰片極細(xì)粉10g，丹參總 酚酸40g，赤巧總苷40g，加入輔料，混合脂肪酸甘油酯10g、聚乙二醇PEG4g、蜂錯(cuò)5g制成栓 劑。
[0028] 進(jìn)一步地，所述中藥組合物作為制備治療皮膚癌藥物的用途。
[0029] 中藥組合物中落地生根提取物為對(duì)落地生根植物處理所得，落地生根 (Bryophyllum pinnatum (L. f.) Oken)為景天科落地生根屬植物，具有清熱解毒、涼血止血 的功效，也可用于治療皮膚創(chuàng)傷、蚊蟲叮咬及瘡瘍等，其毒性甚微，安全性高，具有抗炎、免 疫抑制、抗菌等藥效。
[0030] 中藥組合物中丹參總酚酸為對(duì)丹參藥材處理所得，丹參（Salvia miltiorrhiza Bunge)又名赤參，為雙子葉植物唇形科鼠尾草屬植物，性味苦，微寒。歸心、肝經(jīng)。有祛瘀止 痛，活血通經(jīng)，清心除煩的功效，用于月經(jīng)不調(diào)，經(jīng)閉痛經(jīng)，癥瘕積聚，胸腹刺痛，熱痹疼痛， 瘡瘍腫痛，心煩不眠；肝脾腫大，心絞痛。
[0031] 中藥組合物中赤芍總苷為對(duì)赤芍藥材處理所得，赤芍（Paeonia veitchii)為毛茛 科芍藥屬植物，味苦，性微寒，歸肝經(jīng)，主治清熱止血、活血祛瘀。
[0032] 本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下優(yōu)點(diǎn)及有益效果： 本發(fā)明提供一種新的中藥組合物及中藥組合物在制備抗皮膚癌藥物的醫(yī)藥用途，經(jīng)藥 效學(xué)實(shí)驗(yàn)證明，該中藥組合物表現(xiàn)出了優(yōu)異的抗皮膚癌活性，適用于各種類型的皮膚癌，且 具有安全性高，藥效明確的特點(diǎn)。
[0033] 以下通過實(shí)驗(yàn)說明本發(fā)明中的中藥組合物在制備抗皮膚癌藥物的醫(yī)藥用途。
[0034] 1、中藥組合物體外抗腫瘤活性 實(shí)驗(yàn)對(duì)象：處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的四種腫瘤細(xì)胞：人黑素癌細(xì)胞株A375 ;人黑素癌細(xì)胞株 A875 ;人基底細(xì)胞癌細(xì)胞株A431 ;人皮膚鱗狀細(xì)胞癌SCL-1。
[0035] 中藥組合物：包括70%落地生根提取物、4%冰片、20%丹參總酚酸和5%赤芍總苷。
[0036] 實(shí)驗(yàn)條件：分別取處于對(duì)數(shù)期的細(xì)胞，2000 rpm離心5 min，取含有10%牛胎血清 的培養(yǎng)液將沉淀細(xì)胞濃度調(diào)為1X 105個(gè)/ml，將細(xì)胞懸液按200 μ 1/孔接種于96孔培養(yǎng) 板中，然后分別加入一定濃度無菌的中藥組合物溶液，使每孔內(nèi)的提取物濃度為〇. 02、0. 1、 0.2、0.4、0.5、0.8、1.0、2.011^/1111，混勻，置37 1：、5%〇)2孵箱，培養(yǎng)24 11，析出培養(yǎng)液，用 PBS溶液洗滌兩次，再向每孔加入5 mg/ml的ΜΤΤ磷酸緩沖液20 μ 1以及150 μ 1RPMI1640 培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)4h后停止培養(yǎng)，以2000rpm離心5min，然后棄去培養(yǎng)板孔內(nèi)的培養(yǎng)液，每 孔加入150 μ 1 DMS0,震動(dòng)10 min，使形成的甲臜顆粒充分溶解，采用酶標(biāo)儀檢測(cè)吸光值。選 擇測(cè)定波長(zhǎng)為570 nm。計(jì)算中藥組合物對(duì)腫瘤細(xì)胞的IC50,詳見表1。
[0037] 表1組合物對(duì)不同腫瘤細(xì)胞的抑制作用

【權(quán)利要求】
1. 一種具有抗皮膚癌活性的中藥組合物，其特征在于，所述中藥組合物按質(zhì)量百分?jǐn)?shù) 計(jì)，落地生根提取物含量為50?80%，冰片含量為1?10%，丹參總酚酸含量為5?20%，赤 芍總苷含量為5?20%，余量為藥學(xué)上可接受的載體和/或賦形劑，以上四種成分總含量為 60 ?99%〇
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種具有抗皮膚癌活性的中藥組合物，其特征在于，所述中 藥組合物包括落地生根提取物70%，冰片4%，丹參總酚酸20%、赤芍總苷5%。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種具有抗皮膚癌活性的中藥組合物，其特征在于，所述中 藥組合物包括落地生根提取物50%，冰片9%，丹參總酚酸20%，赤芍總苷20%。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1至3任意一項(xiàng)所述的一種具有抗皮膚癌活性的中藥組合物，其特征 在于，所述落地生根提取物制備方法：取落地生根植物全株或根、莖、葉任一部位的鮮品或 冷凍干燥品，加入有機(jī)溶媒進(jìn)行萃取或回流提取，收集提取液，干燥，即得。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種具有抗皮膚癌活性的中藥組合物，其特征在于，所述丹 參總酚酸制備方法：取丹參藥材，粉碎，加入〇. lmol/1鹽酸溶液，浸泡，將丹參藥材浸泡液 裝柱，以14倍柱體積PH=2的鹽酸溶液滲漉，合并滲漉液，按25mg丹參總酚酸/lml樹脂上 樣量，上AB-8型大孔樹脂柱，以3ml/min洗脫，至吸附平衡，依次用水以5倍柱體積，20%乙 醇6倍柱體積淋洗，最后用40%乙醇以4倍柱體積洗脫，合并洗脫液，70°C，減壓脫醇濃縮， 凍干，即得。
6. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種具有抗皮膚癌活性的中藥組合物，其特征在于，所述赤 芍總苷制備方法：取赤芍藥材，以赤芍藥材重量8倍量70%乙醇回流提取3次，每次1. 5小 時(shí)，濾過，合并提取液，濃縮至無醇味，溶解，離心，取上清液，調(diào)節(jié)其濃度為0. lg赤芍總苷 /lml，對(duì)D101型大孔吸附樹脂柱裝柱，上樣量為48. 67mg芍藥苷/g樹脂，以3ml/min洗脫， 回收乙醇，濃縮，干燥，即得。
7. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種具有抗皮膚癌活性的中藥組合物，其特征在于，所述中 藥組合物為搽劑、膏劑、凝膠劑、片劑、膠囊劑、顆粒劑、微丸、微球、滴丸、控釋制劑、緩釋制 齊U、注射劑。
8. -種根據(jù)權(quán)利要求4所述中藥的組合物在制備治療皮膚癌藥物的用途。
【文檔編號(hào)】A61P35/00GK104116795SQ201410375408
【公開日】2014年10月29日 申請(qǐng)日期:2014年8月1日 優(yōu)先權(quán)日:2014年8月1日
【發(fā)明者】張磊, 楊薇, 白筱璐, 余悅, 雷玲, 田興軍, 胡竟一, 吳瑕, 周靜, 李興平, 曾軍秀, 唐麗燕, 李東曉 申請(qǐng)人:四川省中醫(yī)藥科學(xué)院