一種具有一氧化氮(no)催化活性的材料的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其中將具有一氧化氮催化活性的含硒化合物、含硫化合物、可溶性銅鹽與具有鄰酚結(jié)構(gòu)的化合物、黃酮類化合物、黃酮醇類化合物或雙氫黃酮化合物共混于緩沖溶液中聚合。該NO催化活性材料不僅可以應(yīng)用于不同材質(zhì)、不同幾何形狀和不同拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)材料的表面改性，同時(shí)可以作為控釋系統(tǒng)的裝填材料。制備的具有一氧化氮(NO)催化活性材料中所含有的雙硒鍵、雙硫鍵、銅離子和酚羥基具有優(yōu)異的自由基清除功能；材料中含有的硒鍵、硫鍵以及螯合的銅離子同時(shí)還具有還原性谷胱甘肽(GSH)響應(yīng)功能；此外，材料中含有的銅離子還具有抗菌功能；該材料除了用于催化NO釋放之外，還能應(yīng)用于自由基清除和GSH響應(yīng)功能相關(guān)的所有領(lǐng)域。
【專利說(shuō)明】一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種制備具有一氧化氮催化活性材料制備的技術(shù)。

【背景技術(shù)】
[0002]諾貝爾獎(jiǎng)獲得者M(jìn)urad和Ignarro等人早在30多年前就發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞信號(hào)因子NO是維持心血管系統(tǒng)平衡的關(guān)鍵因素。NO主要是由內(nèi)皮細(xì)胞通過(guò)其分泌的一氧化氮合酶與精氨酸作用產(chǎn)生，持續(xù)釋放的NO是維持心血管體內(nèi)平衡和調(diào)節(jié)血管舒張的重要因素。除此之外，研究者還發(fā)現(xiàn)NO具有許多重要的生物學(xué)效應(yīng)，如:抑制血小板激活、平滑肌增殖和白血球激活。在免疫反應(yīng)、抗癌、抗菌和動(dòng)脈粥樣硬化治療方面也有著重要的生物學(xué)功能。值得一提的是，研究發(fā)現(xiàn)，NO在內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs)動(dòng)員、分化和功能中同樣有著重要的作用。NO在心血管系統(tǒng)中特有的優(yōu)點(diǎn)使其成為設(shè)計(jì)心血管疾病治療藥物、心血管器械(如:血管支架、下腔靜脈濾器、血液透析袋、體外循環(huán)導(dǎo)管、封堵器等)、抗菌材料、血液診斷材料以及抗癌材料的理想分子；
[0003]在過(guò)去的20多年里，基于NO設(shè)計(jì)的材料主要?dú)w納為NO-釋放型和NO-催化型兩大類。對(duì)于NO-釋放型材料，其缺點(diǎn)主要在于:用于產(chǎn)生NO的供體(RSNO)半衰期短；N0釋放不穩(wěn)定，存在突釋現(xiàn)象，體內(nèi)應(yīng)用局部釋放大量的NO易引起細(xì)胞或組織毒性，成為限制其商業(yè)化使用的主要因素。此外，NO釋放周期短，不能滿足血管支架長(zhǎng)期治療心血管等疾病的需求。谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GPx)是機(jī)體內(nèi)廣泛存在的一種重要的過(guò)氧化物分解酶。GPx的活性中心是硒半胱氨酸，血液中硫醇存在的條件下，它能催化內(nèi)源性NO供體S-亞硝基硫醇(RSNO)如:S-亞硝基谷胱甘肽(GSNO)、S-亞硝基半胱氨酸(CysNO)、S-亞硝基白蛋白(AlbSNO)和S-亞硝基乙酰青霉胺(SNAP)分解。有機(jī)硒化合物如硒代胱胺(SeCA)、3，3’ - 二硒代二丙酸(SeDPA)，有機(jī)硫化物如胱胺、半胱氨酸和二價(jià)銅鹽等具有類GPx的催化活性，可通過(guò)特定的催化反應(yīng)分解RSNO產(chǎn)生NO，這為設(shè)計(jì)具有NO催化活性材料提供可能。然而，目前報(bào)道的NO催化活性材料在應(yīng)用上存在著許多缺點(diǎn)如:(I)具有類GPx的催化活性物質(zhì)通常采用表面接枝的方式，其接枝量受限，導(dǎo)致其催化釋放的NO量小，難以應(yīng)用于大劑量NO需求的環(huán)境；(2)由于合成的NO催化活性材料與材料基底無(wú)牢固的結(jié)合位點(diǎn)，導(dǎo)致其穩(wěn)定性差，進(jìn)而難以維持長(zhǎng)期的NO催化釋放。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]為了實(shí)現(xiàn)具有與塊材表面牢固結(jié)合強(qiáng)度且具有可調(diào)具有類GPx的催化活性物質(zhì)量的NO催化活性材料，我們提出鄰酚結(jié)構(gòu)的化合物、黃酮類化合物、黃酮醇類化合物或雙氫黃酮化合物等粘附分子與有機(jī)硒化合物、有機(jī)硫化物或二價(jià)銅鹽等具有類GPx的催化活性作為原材料，通過(guò)調(diào)控反應(yīng)物質(zhì)的摩爾比，合成具有可調(diào)控、長(zhǎng)期的NO催化能力的粘附聚合物。本發(fā)明的目的是通過(guò)如下的手段實(shí)現(xiàn)的。
[0005]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，依賴于鄰酚結(jié)構(gòu)的化合物與有機(jī)硒或有機(jī)硫化物和銅離子的化學(xué)偶聯(lián)、配位反應(yīng)和自組裝聚合形成一種復(fù)合材料，由如下步驟獲得:
[0006]A、制備pH = 2-14的緩沖溶液，然后向緩沖體系中加入濃度為0.1ng/mL-lOOmg/mL的具有鄰酚結(jié)構(gòu)的化合物、黃酮類化合物、黃酮醇類化合物或雙氫黃酮化合物中的一種和濃度為0.1ng/mL-lOOmg/mL的具有類谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的NO催化活性的二硫鍵、二硒鍵、單硫鍵和單硒鍵化合物當(dāng)中的一種或一種以上以及濃度為0mg/mL-100mg/mL的可溶性銅鹽于0-200°C下反應(yīng)I秒-10天。
[0007]B、將A步驟所得的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0008]所述鄰酚結(jié)構(gòu)的化合物包括但不限于黃酮類化合物、黃酮醇類化合物、雙氫黃酮化合物。
[0009]所述銅離子為二價(jià)銅離子、一價(jià)銅離子或銅納米/微米顆粒。
[0010]所述具有鄰酚結(jié)構(gòu)的化合物為鄰苯二酚、焦掊酸(PG)、表兒茶素(EC)、表兒茶素沒(méi)食子酸酯(ECG)、表沒(méi)食子兒茶素(EGC)、表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(EGCG)、多巴胺、去甲腎上腺素、左旋多巴、右旋多巴、沒(méi)食子酸(GA)及其衍生物、單寧酸(TA)當(dāng)中的一種或一種以上；所述具有黃酮類化合物為白楊素、楊芽黃素、刺槐素、芹菜素、柳穿錢素當(dāng)中的一種或一種以上；所述具有黃酮醇類化合物為良姜素、高良姜素、鼠李素、異鼠李素、鼠李檸檬素、山奈素、岳樺素、槲皮素及其衍生物等一種；所述具有雙氫黃酮類為喬松素、松球素、櫻花素、異櫻花素、柚皮素當(dāng)中的一種或一種以上。
[0011]所述二硫鍵或二硒鍵或單硫鍵或單硒鍵化合物為依布硒啉、胱胺、硒代胱胺、硒代胱氨酸、胱氨酸、L-硒代胱胺基乙酸、半胱氨酸、硒代半胱氨酸、乙酰半胱氨酸、L-硒代蛋氨酸、硒代甲硫氨酸等物質(zhì)當(dāng)中的一種或一種以上。
[0012]所述可溶性銅鹽為氯化銅(CuCl2)、氯化亞銅(CuCl)、溴化銅(CuBr)、溴化亞銅(CuBr2)、碘化銅(CuI)、碘化亞銅(CuI2)、硫酸銅(CuSO4)、硫酸亞銅(Cu2SO4)、硝酸銅(CuNO4)、碳酸銅(CuCO3)、檸檬酸銅(C6H6CuO7)、酒石酸銅(C4H4CuO6.3H20)、丙酸銅(Cu(CO2CH3CH2)2)和醋酸銅(Cu(CO2CH3)2)當(dāng)中的一種或一種以上。
[0013]本發(fā)明方法制備的NO催化活性材料具有可調(diào)控和長(zhǎng)期NO催化功能，能廣泛用于控釋系統(tǒng)的裝填材料。該技術(shù)制備的NO催化活性材料能廣泛應(yīng)用于各類與血液接觸的植入/介入器械、磁性納米粒子和介孔納米材料表面改性，用于提高其抗凝血、促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞粘附、抑制平滑肌細(xì)胞增殖、治療動(dòng)脈粥樣硬化、疾病診斷和藥物控釋。此外，因其具有優(yōu)異的抗菌、抗癌和骨誘導(dǎo)形成作用，也適用于牙種植體材料、靶向抗癌材料、骨誘導(dǎo)材料的表面改性。該類NO催化活性材料的廣譜適用性，顯示其在生物醫(yī)療領(lǐng)域特別是在心血管支架、人工血管、牙種植體材料、靶向抗癌材料和骨誘導(dǎo)材料上的巨大應(yīng)用前景。
[0014]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于:
[0015]1、本發(fā)明所選用的配位體多酚化合物不僅無(wú)生物毒性，而且具有多酚化合物所具備的特異性生物學(xué)功能如:保護(hù)心血管系統(tǒng)、抑制動(dòng)脈粥樣硬化、抗癌、抗菌、抗炎癥等。
[0016]2、選用的鄰酚結(jié)構(gòu)的化合物(或黃酮類化合物、黃酮醇類化合物或雙氫黃酮化合物)，通過(guò)靜電自組裝、共價(jià)反應(yīng)(邁克爾加成和西佛堿反應(yīng))和配位反應(yīng)能有效且牢固的螯合含胺基/巰基的有機(jī)硒化合物/有機(jī)硫化物以及銅離子，形成一個(gè)穩(wěn)定的復(fù)合聚合物。
[0017]3、NO催化活性材料的制備，其原材料鄰酚結(jié)構(gòu)的化合物(或黃酮類化合物、黃酮醇類化合物或雙氫黃酮化合物)、含胺基/巰基的有機(jī)硒化合物/有機(jī)硫化合物以及銅鹽的投料比可以調(diào)控，從而可以實(shí)現(xiàn)NO催化釋放速率的調(diào)控；材料中含有的雙硒鍵、雙硫鍵和酚羥基的引入使得NO催化活性材料同時(shí)還具有優(yōu)異的自由基清除功能；材料中含有的硒鍵、硫鍵以及螯合的銅離子同時(shí)還具有還原性谷胱甘肽(GSH)響應(yīng)功能；此外，材料中含有的銅離子還具有抗菌功能。
[0018]4、NO催化活性材料的合成步驟簡(jiǎn)單，僅僅涉及到一步反應(yīng)，且反應(yīng)只需在溫和的緩沖液中進(jìn)行。合成的原材料來(lái)源豐富，價(jià)格低廉，且實(shí)驗(yàn)無(wú)需昂貴的專用設(shè)備，制備成本低、
[0019]5、NO催化活性材料應(yīng)用范圍廣泛，可用作各類控釋體系的裝填材料。由于鄰酚結(jié)構(gòu)的化合物所具備的粘附特性，使其用做控釋系統(tǒng)的裝填材料具有更好的分散性和融合度。
[0020]6、N0催化活性材料中銅離子的引入，使其不僅僅可用于NO催化釋放，同時(shí)也可作為抗癌材料、抗凝血材料、抗菌材料、抗炎癥反應(yīng)、抗免疫原性和骨誘導(dǎo)材料的廣泛使用。

【具體實(shí)施方式】
[0021]實(shí)施例1
[0022]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0023]A、將濃度為lmg/mL的多巴(Dopa), lmg/mL的硒代胱胺和濃度為lmg/mL的氯化銅溶解于PH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0024]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料
[0025]實(shí)施例2
[0026]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0027]A、將濃度為2mg/mL的多巴胺(Dopamine), 2mg/mL的硒代胱胺和濃度為2mg/mL的氯化銅溶解于PH = 5-14的Tris緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)24小時(shí)。
[0028]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料
[0029]實(shí)施例3
[0030]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0031]A、將濃度為10mg/mL的去甲腎上腺素，10mg/mL的硒代胱胺和濃度為10mg/mL的氯化銅溶解于PH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0032]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料
[0033]實(shí)施例4
[0034]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0035]A、將濃度為0.lmg/mL的表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(EGCG)，0.lmg/mL的硒代胱胺和濃度為0.lmg/mL的氯化銅溶解于pH = 5-14的Tris緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)24小時(shí)。
[0036]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料
[0037]實(shí)施例5
[0038]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0039]A、將濃度為lmg/mL的鄰苯二酹,lmg/mL的硒代胱胺和濃度為lmg/mL的氯化銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0040]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料
[0041]實(shí)施例6
[0042]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0043]A、將濃度為2mg/mL的焦掊酸(PG)，2mg/mL的硒代胱胺和濃度為2mg/mL的氯化銅溶解于PH = 5-14的Tris緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)24小時(shí)。
[0044]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料
[0045]實(shí)施例7
[0046]—種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0047]A、將濃度為5mg/mL的表兒茶素(EC), 5mg/mL的硒代胱胺和濃度為5mg/mL的氯化銅溶解于PH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0048]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料
[0049]實(shí)施例8
[0050]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0051 ] A、將濃度為0.5mg/mL的表兒茶素沒(méi)食子酸酯(ECG)，0.5mg/mL的硒代胱胺和濃度為0.5mg/mL的氯化銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0052]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料
[0053]實(shí)施例9
[0054]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0055]A、將濃度為0.01mg/mL的表沒(méi)食子兒茶素(EGC)，0.01mg/mL的硒代胱胺和濃度為0.01mg/mL的氯化銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0056]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料
[0057]實(shí)施例10
[0058]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0059]A、將濃度為lmg/mL的多巴(Dopa), lmg/mL的胱胺和濃度為lmg/mL的氯化銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0060]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料
[0061]實(shí)施例11
[0062]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0063]A、將濃度為2mg/mL的多巴胺(Dopamine), 2mg/mL的胱胺和濃度為2mg/mL的氯化銅溶解于PH = 5-14的Tris緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)24小時(shí)。
[0064]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料
[0065]實(shí)施例12
[0066]—種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0067]A、將濃度為10mg/mL的去甲腎上腺素，10mg/mL的胱胺和濃度為10mg/mL的氯化銅溶解于PH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0068]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料
[0069]實(shí)施例13
[0070]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0071]A、將濃度為0.lmg/mL的表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(EGCG)，0.lmg/mL的胱胺和濃度為0.lmg/mL的氯化銅溶解于pH = 5-14的Tris緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)24小時(shí)。
[0072]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料
[0073]實(shí)施例14
[0074]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0075]A、將濃度為lmg/mL的鄰苯二酹,lmg/mL的胱胺和濃度為lmg/mL的氯化銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0076]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料
[0077]實(shí)施例15
[0078]—種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0079]A、將濃度為2mg/mL的焦掊酸(PG), 2mg/mL的胱胺和濃度為2mg/mL的氯化銅溶解于pH = 5-14的Tris緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)24小時(shí)。
[0080]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料
[0081]實(shí)施例16
[0082]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0083]A、將濃度為5mg/mL的表兒茶素(EC), 5mg/mL的胱胺和濃度為5mg/mL的氯化銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0084]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料
[0085]實(shí)施例17
[0086]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0087]A、將濃度為0.5mg/mL的表兒茶素沒(méi)食子酸酯(ECG)，0.5mg/mL的胱胺和濃度為0.5mg/mL的氯化銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0088]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料
[0089]實(shí)施例18
[0090]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0091]A、將濃度為0.01mg/mL的表沒(méi)食子兒茶素(EGC)，0.01mg/mL的胱胺和濃度為0.01mg/mL的氯化銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0092]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料
[0093]實(shí)施例19
[0094]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0095]A、將濃度為lmg/mL的多巴(Dopa), lmg/mL的硒代胱胺和濃度為lmg/mL的氯化銅溶解于PH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0096]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料
[0097]實(shí)施例20
[0098]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0099]A、將濃度為2mg/mL的多巴胺(Dopamine), 2mg/mL的硒代胱胺和濃度為2mg/mL的氯化銅溶解于PH = 5-14的Tris緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)24小時(shí)。
[0100]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料
[0101]實(shí)施例21
[0102]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0103]A、將濃度為10mg/mL的去甲腎上腺素，10mg/mL的硒代胱胺和濃度為10mg/mL的氯化銅溶解于PH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0104]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料
[0105]實(shí)施例22
[0106]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0107]A、將濃度為0.lmg/mL的表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(EGCG)，0.lmg/mL的硒代胱胺和濃度為0.lmg/mL的氯化銅溶解于pH = 5-14的Tris緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)24小時(shí)。
[0108]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料
[0109]實(shí)施例23
[0110]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0111]A、將濃度為lmg/mL的鄰苯二酹,lmg/mL的硒代胱胺和濃度為lmg/mL的氯化銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0112]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料
[0113]實(shí)施例24
[0114]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0115]A、將濃度為2mg/mL的焦掊酸(PG), 2mg/mL的硒代胱胺和濃度為2mg/mL的氯化銅溶解于PH = 5-14的Tris緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)24小時(shí)。
[0116]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料
[0117]實(shí)施例25
[0118]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0119]A、將濃度為5mg/mL的表兒茶素(EC), 5mg/mL的硒代胱胺和濃度為5mg/mL的氯化銅溶解于PH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0120]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料
[0121]實(shí)施例26
[0122]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0123]A、將濃度為0.5mg/mL的表兒茶素沒(méi)食子酸酯(ECG)，0.5mg/mL的硒代胱胺和濃度為0.5mg/mL的氯化銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0124]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料
[0125]實(shí)施例27
[0126]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0127]A、將濃度為0.01mg/mL的表沒(méi)食子兒茶素(EGC)，0.01mg/mL的硒代胱胺和濃度為0.01mg/mL的氯化銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0128]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料
[0129]實(shí)施例28
[0130]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0131]A、將濃度為lmg/mL的多巴(Dopa), lmg/mL的胱胺和濃度為lmg/mL的氯化銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0132]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0133]實(shí)施例29
[0134]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0135]A、將濃度為2mg/mL的多巴胺(Dopamine), 2mg/mL的胱胺和濃度為2mg/mL的氯化銅溶解于PH = 5-14的Tris緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)24小時(shí)。
[0136]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0137]實(shí)施例30
[0138]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0139]A、將濃度為10mg/mL的去甲腎上腺素，10mg/mL的胱胺和濃度為10mg/mL的氯化銅溶解于PH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0140]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0141]實(shí)施例31
[0142]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0143]A、將濃度為0.lmg/mL的表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(EGCG)，0.lmg/mL的胱胺和濃度為0.lmg/mL的氯化銅溶解于pH = 5-14的Tris緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)24小時(shí)。
[0144]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0145]實(shí)施例32
[0146]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0147]A、將濃度為lmg/mL的鄰苯二酹,lmg/mL的胱胺和濃度為lmg/mL的氯化銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0148]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0149]實(shí)施例33
[0150]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0151]A、將濃度為2mg/mL的焦掊酸(PG), 2mg/mL的胱胺和濃度為2mg/mL的氯化銅溶解于pH = 5-14的Tris緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)24小時(shí)。
[0152]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0153]實(shí)施例34
[0154]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0155]A、將濃度為5mg/mL的表兒茶素(EC), 5mg/mL的胱胺和濃度為5mg/mL的氯化銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0156]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0157]實(shí)施例35
[0158]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0159]A、將濃度為0.5mg/mL的表兒茶素沒(méi)食子酸酯(ECG)，0.5mg/mL的胱胺和濃度為0.5mg/mL的氯化銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0160]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0161]實(shí)施例36
[0162]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0163]A、將濃度為0.01mg/mL的表沒(méi)食子兒茶素(EGC)，0.01mg/mL的胱胺和濃度為0.01mg/mL的氯化銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0164]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0165]實(shí)施例37
[0166]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0167]A、將濃度為lmg/mL的多巴(Dopa), lmg/mL的硒代胱胺和濃度為lmg/mL的硫酸銅溶解于PH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0168]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0169]實(shí)施例38
[0170]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0171]A、將濃度為2mg/mL的多巴胺(Dopamine), 2mg/mL的硒代胱胺和濃度為2mg/mL的硫酸銅溶解于PH = 5-14的Tris緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)24小時(shí)。
[0172]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0173]實(shí)施例39
[0174]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0175]A、將濃度為10mg/mL的去甲腎上腺素，10mg/mL的硒代胱胺和濃度為10mg/mL的硫酸銅溶解于PH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0176]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0177]實(shí)施例40
[0178]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0179]A、將濃度為0.lmg/mL的表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(EGCG)，0.lmg/mL的硒代胱胺和濃度為0.lmg/mL的硫酸銅溶解于pH = 5-14的Tris緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)24小時(shí)。
[0180]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0181]實(shí)施例41
[0182]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0183]A、將濃度為lmg/mL的鄰苯二酹,lmg/mL的硒代胱胺和濃度為lmg/mL的硫酸銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0184]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0185]實(shí)施例42
[0186]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0187]A、將濃度為2mg/mL的焦掊酸(PG), 2mg/mL的硒代胱胺和濃度為2mg/mL的硫酸銅溶解于PH = 5-14的Tris緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)24小時(shí)。
[0188]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0189]實(shí)施例43
[0190]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0191]A、將濃度為5mg/mL的表兒茶素(EC), 5mg/mL的硒代胱胺和濃度為5mg/mL的硫酸銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0192]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0193]實(shí)施例44
[0194]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0195]A、將濃度為0.5mg/mL的表兒茶素沒(méi)食子酸酯(ECG)，0.5mg/mL的硒代胱胺和濃度為0.5mg/mL的硫酸銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0196]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0197]實(shí)施例45
[0198]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0199]A、將濃度為0.01mg/mL的表沒(méi)食子兒茶素(EGC)，0.01mg/mL的硒代胱胺和濃度為0.01 mg/mL的硫酸銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0200]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0201]實(shí)施例46
[0202]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0203]A、將濃度為lmg/mL的多巴(Dopa), lmg/mL的胱胺和濃度為lmg/mL的硫酸銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0204]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0205]實(shí)施例47
[0206]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0207]A、將濃度為2mg/mL的多巴胺(Dopamine), 2mg/mL的胱胺和濃度為2mg/mL的硫酸銅溶解于PH = 5-14的Tris緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)24小時(shí)。
[0208]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0209]實(shí)施例48
[0210]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0211]A、將濃度為10mg/mL的去甲腎上腺素，10mg/mL的胱胺和濃度為10mg/mL的硫酸銅溶解于PH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0212]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0213]實(shí)施例49
[0214]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0215]A、將濃度為0.lmg/mL的表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(EGCG)，0.lmg/mL的胱胺和濃度為0.lmg/mL的硫酸銅溶解于pH = 5-14的Tris緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)24小時(shí)。
[0216]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0217]實(shí)施例50
[0218]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0219]A、將濃度為lmg/mL的鄰苯二酹，lmg/mL的胱胺和濃度為lmg/mL的硫酸銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0220]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0221]實(shí)施例51
[0222]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0223]A、將濃度為2mg/mL的焦掊酸(PG), 2mg/mL的胱胺和濃度為2mg/mL的硫酸銅溶解于pH = 5-14的Tris緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)24小時(shí)。
[0224]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0225]實(shí)施例52
[0226]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0227]A、將濃度為5mg/mL的表兒茶素(EC), 5mg/mL的胱胺和濃度為5mg/mL的硫酸銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0228]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0229]實(shí)施例53
[0230]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0231]A、將濃度為0.5mg/mL的表兒茶素沒(méi)食子酸酯(ECG)，0.5mg/mL的胱胺和濃度為0.5mg/mL的硫酸銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0232]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0233]實(shí)施例54
[0234]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0235]A、將濃度為0.01mg/mL的表沒(méi)食子兒茶素(EGC)，0.01mg/mL的胱胺和濃度為0.01mg/mL的硫酸銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0236]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0237]實(shí)施例55
[0238]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0239]A、將濃度為lmg/mL的多巴(Dopa), lmg/mL的硒代胱胺和濃度為lmg/mL的硫酸銅溶解于PH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0240]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0241]實(shí)施例56
[0242]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0243]A、將濃度為2mg/mL的多巴胺(Dopamine), 2mg/mL的硒代胱胺和濃度為2mg/mL的硫酸銅溶解于pH = 5-14的Tris緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)24小時(shí)。
[0244]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0245]實(shí)施例57
[0246]—種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0247]A、將濃度為10mg/mL的去甲腎上腺素，10mg/mL的硒代胱胺和濃度為10mg/mL的硫酸銅溶解于PH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0248]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0249]實(shí)施例58
[0250]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0251]A、將濃度為0.lmg/mL的表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(EGCG)，0.lmg/mL的硒代胱胺和濃度為0.lmg/mL的硫酸銅溶解于pH = 5-14的Tris緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)24小時(shí)。
[0252]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0253]實(shí)施例59
[0254]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0255]A、將濃度為lmg/mL的鄰苯二酹,lmg/mL的硒代胱胺和濃度為lmg/mL的硫酸銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0256]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0257]實(shí)施例60
[0258]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0259]A、將濃度為2mg/mL的焦掊酸(PG), 2mg/mL的硒代胱胺和濃度為2mg/mL的硫酸銅溶解于PH = 5-14的Tris緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)24小時(shí)。
[0260]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0261]實(shí)施例61
[0262]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0263]A、將濃度為5mg/mL的表兒茶素(EC), 5mg/mL的硒代胱胺和濃度為5mg/mL的硫酸銅溶解于PH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0264]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0265]實(shí)施例62
[0266]—種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0267]A、將濃度為0.5mg/mL的表兒茶素沒(méi)食子酸酯(ECG)，0.5mg/mL的硒代胱胺和濃度為0.5mg/mL的硫酸銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0268]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0269]實(shí)施例63
[0270]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0271]A、將濃度為0.01mg/mL的表沒(méi)食子兒茶素(EGC)，0.01mg/mL的硒代胱胺和濃度為0.01mg/mL的硫酸銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0272]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0273]實(shí)施例64
[0274]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0275]A、將濃度為lmg/mL的多巴(Dopa), lmg/mL的胱胺和濃度為lmg/mL的硫酸銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0276]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0277]實(shí)施例65
[0278]—種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0279]A、將濃度為2mg/mL的多巴胺(Dopamine), 2mg/mL的胱胺和濃度為2mg/mL的硫酸銅溶解于PH = 5-14的Tris緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)24小時(shí)。
[0280]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0281]實(shí)施例66
[0282]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0283]A、將濃度為10mg/mL的去甲腎上腺素，10mg/mL的胱胺和濃度為10mg/mL的硫酸銅溶解于PH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0284]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0285]實(shí)施例67
[0286]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0287]A、將濃度為0.lmg/mL的表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(EGCG)，0.lmg/mL的胱胺和濃度為0.lmg/mL的硫酸銅溶解于pH = 5-14的Tris緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)24小時(shí)。
[0288]B、A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0289]實(shí)施例68
[0290]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0291]A、度為lmg/mL的鄰苯二酹，lmg/mL的胱胺和濃度為lmg/mL的硫酸銅溶解于pH =5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0292]B、A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0293]實(shí)施例69
[0294]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0295]A、將濃度為2mg/mL的焦掊酸(PG)，2mg/mL的胱胺和濃度為2mg/mL的硫酸銅溶解于pH = 5-14的Tris緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)24小時(shí)。
[0296]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0297]實(shí)施例70
[0298]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0299]A、將濃度為5mg/mL的表兒茶素(EC), 5mg/mL的胱胺和濃度為5mg/mL的硫酸銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0300]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0301]實(shí)施例71
[0302]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0303]A、將濃度為0.5mg/mL的表兒茶素沒(méi)食子酸酯(ECG)，0.5mg/mL的胱胺和濃度為
0.5mg/mL的硫酸銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0304]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0305]實(shí)施例72
[0306]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0307]A、將濃度為0.01mg/mL的表沒(méi)食子兒茶素(EGC)，0.01mg/mL的胱胺和濃度為
0.01mg/mL的硫酸銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0308]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0309]實(shí)施例73
[0310]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0311 ] A、將濃度為lmg/mL的沒(méi)食子酸(GA)，lmg/mL的硒代胱胺和濃度為lmg/mL的氯化銅溶解于PH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0312]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0313]實(shí)施例74
[0314]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0315]A、將濃度為lmg/mL的沒(méi)食子酸(GA), lmg/mL的胱胺和濃度為lmg/mL的氯化銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0316]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0317]實(shí)施例75
[0318]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0319]A、將濃度為lmg/mL的沒(méi)食子酸(GA)，lmg/mL的硒代胱胺和濃度為lmg/mL的氯化銅溶解于PH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0320]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0321]實(shí)施例76
[0322]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0323]A、將濃度為lmg/mL的沒(méi)食子酸(GA)，lmg/mL的胱胺和濃度為lmg/mL的氯化銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0324]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0325]實(shí)施例77
[0326]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0327]A、將濃度為lmg/mL的沒(méi)食子酸(GA)，lmg/mL的硒代胱胺和濃度為lmg/mL的硫酸銅溶解于PH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0328]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0329]實(shí)施例78
[0330]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0331]A、將濃度為lmg/mL的沒(méi)食子酸(GA), lmg/mL的胱胺和濃度為lmg/mL的硫酸銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0332]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0333]實(shí)施例79
[0334]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0335]A、將濃度為lmg/mL的沒(méi)食子酸(GA), lmg/mL的硒代胱胺和濃度為lmg/mL的硫酸銅溶解于PH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0336]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
[0337]實(shí)施例80
[0338]一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其步驟為:
[0339]A、將濃度為lmg/mL的沒(méi)食子酸(GA), lmg/mL的胱胺和濃度為lmg/mL的硫酸銅溶解于pH = 5-12的PBS緩沖溶液中，于室溫下反應(yīng)12小時(shí)。
[0340]B、將A步驟中的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
【權(quán)利要求】
1.一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，依賴于鄰酚結(jié)構(gòu)的化合物與有機(jī)硒或有機(jī)硫化物和銅離子的化學(xué)偶聯(lián)、配位反應(yīng)和自組裝聚合形成一種復(fù)合材料，由如下步驟獲得: A、制備pH= 2-14的緩沖溶液，然后向緩沖體系中加入濃度為0.1ng/mL-lOOmg/mL的具有鄰酚結(jié)構(gòu)的化合物、黃酮類化合物、黃酮醇類化合物或雙氫黃酮化合物中的一種和濃度為0.1ng/mL-lOOmg/mL的具有類谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的NO催化活性的二硫鍵、二硒鍵、單硫鍵和單硒鍵化合物當(dāng)中的一種或一種以上以及濃度為Omg/mL-lOOmg/mL的可溶性銅鹽于0-200°C下反應(yīng)I秒-10天。 B、將A步驟所得的反應(yīng)溶液經(jīng)過(guò)離心、清洗、透析和冷凍干燥，即得目標(biāo)一氧化氮(NO)催化活性材料。
2.如權(quán)利要求1所述之具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其特征在于，所述鄰酚結(jié)構(gòu)的化合物包括但不限于黃酮類化合物、黃酮醇類化合物、雙氫黃酮化合物。
3.如權(quán)利要求1所述之具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其特征在于，所述銅離子為二價(jià)銅離子、一價(jià)銅離子或銅納米/微米顆粒。
4.如權(quán)利要求1所述的一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其特征在于，所述具有鄰酚結(jié)構(gòu)的化合物為鄰苯二酚、焦掊酸(PG)、表兒茶素(EC)、表兒茶素沒(méi)食子酸酯(ECG)、表沒(méi)食子兒茶素(EGC)、表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(EGCG)、多巴胺、去甲腎上腺素、左旋多巴、右旋多巴、沒(méi)食子酸(GA)及其衍生物、單寧酸(TA)當(dāng)中的一種或一種以上；所述具有黃酮類化合物為白楊素、楊芽黃素、刺槐素、芹菜素、柳穿錢素當(dāng)中的一種或一種以上；所述具有黃酮醇類化合物為良姜素、高良姜素、鼠李素、異鼠李素、鼠李檸檬素、山奈素、岳樺素、槲皮素及其衍生物等一種；所述具有雙氫黃酮類為喬松素、松球素、櫻花素、異櫻花素、柚皮素當(dāng)中的一種或一種以上。
5.如權(quán)利要求1所述的一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其特征在于，所述二硫鍵或二硒鍵或單硫鍵或單硒鍵化合物為依布硒啉、胱胺、硒代胱胺、硒代胱氨酸、胱氨酸、L-硒代胱胺基乙酸、半胱氨酸、硒代半胱氨酸、乙酰半胱氨酸、L-硒代蛋氨酸、硒代甲硫氨酸等物質(zhì)當(dāng)中的一種或一種以上。
6.如權(quán)利要求1所述的一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其特征在于，所述可溶性銅鹽為氯化銅(CuCl2)、氯化亞銅(CuCl)、溴化銅(CuBr)、溴化亞銅(CuBr2)、碘化銅(CuI)、碘化亞銅(CuI2)、硫酸銅(CuSO4)、硫酸亞銅(Cu2SO4)、硝酸銅(CuNO4)、碳酸銅(CuCO3)、檸檬酸銅(C6H6CuO7)、酒石酸銅(C4H4CuO6.3H20)、丙酸銅(Cu(CO2CH3CH2)2)和醋酸銅(Cu(CO2CH3)2)當(dāng)中的一種或一種以上。
7.如權(quán)利要求1所述的一種具有一氧化氮(NO)催化活性的材料的制備方法，其特征在于，制備的具有一氧化氮(NO)催化活性材料材料中所含有的雙硒鍵、雙硫鍵、銅離子和酚羥基具有優(yōu)異的自由基清除功能；材料中含有的硒鍵、硫鍵以及螯合的銅離子同時(shí)還具有還原性谷胱甘肽(GSH)響應(yīng)功能；此外，材料中含有的銅離子還具有抗菌功能；該材料除了用于催化NO釋放之外，還能應(yīng)用于自由基清除和GSH響應(yīng)功能相關(guān)的所有領(lǐng)域。
【文檔編號(hào)】A61L27/14GK104225675SQ201410394884
【公開(kāi)日】2014年12月24日 申請(qǐng)日期:2014年8月12日 優(yōu)先權(quán)日:2014年8月12日
【發(fā)明者】黃楠, 楊志祿, 王進(jìn), 齊鵬凱, 涂秋芬, 楊瑩, 熊開(kāi)琴, 翁亞軍, 李龍, 李亞龍 申請(qǐng)人:西南交通大學(xué)